蜥蜴胃康方及其拆方含药SD大鼠血清对人胃癌细胞BCG-823影响的研究

目的:研究蜥蜴胃康方及其拆方含药SD大鼠血清对人胃癌细胞BCG-823增殖凋亡,以及细胞E-钙黏素(E-cad)、整合素(Integrin)、基质金属蛋白酶(MMP9)蛋白表达水平的影响,阐明蜥蜴胃康方干预胃癌细胞的作用及其机制。方法:70只SPF级雄性SD大鼠,随机分为7组:生理盐水对照组A,蜥蜴胃康方组B、拆方补气组C、养阴组D、解毒通络组E、华蟾素片对照组F、5-FU对照组G,每组10只。各组分别用相应浓度药物灌胃1周后处死,于腹主动脉处取血、离心,制备含药血清,加于人胃癌细胞BCG-823培养48h,MTT法检测含药血清对胃癌细胞增殖凋亡的影响;WesternBlot检测胃癌细胞Integrin、E-cad、MMP-9蛋白表达的变化。结果:各含药大鼠血清干预组OD均值小于生理盐水对照组;蜥蜴胃康方组B及其拆方C、E组与对照组F、G比较,P﹤0.05;蜥蜴胃康方组B与拆方组C、D、E比较,P﹤0.05;拆方组C、D、E组之间比较,P0.05,以补气组C作用较佳,其次为解毒通络组;Integrin、E-cad蛋白表达与生理盐水组比较,呈显著升高趋势;MMP-9蛋白表达与生理盐水组比较则显著降低,均以蜥蜴胃康方组为著。结论:蜥蜴胃康方可通过影响Integrin、E-cad及MMP-9蛋白表达,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,具有较好的抗癌作用。     

复方蜥蜴散及其拆方SD大鼠含药血清对人BCG-823胃癌细胞P53、bax的影响

目的:研究复方蜥蜴散及其拆方含药SD大鼠血清对人胃癌细胞BCG-823凋亡及P53、bax表达水平的影响,探索复方蜥蜴散干预胃癌细胞作用机制。方法:70只SPF级雄性SD大鼠随机分为7组:生理盐水对照组、复方蜥蜴散组、补气组、养阴组、解毒通络组、华蟾素片对照组、5-FU对照组,每组10只。各组分别给予相应药物灌胃或注射1周后处死,于腹主动脉处取血,离心,制备含药血清。将含药血清加于人胃癌细胞BCG-823培养48h,MTT法检测人胃癌细胞株的吸光度(OD值)观察含药血清对胃癌细胞凋亡的影响,Western-Blot检测胃癌细胞P53、Bax表达变化。结果:经复方蜥蜴散组、补气组、养阴组、解毒通络组、华蟾素片对照组、5-FU对照组含药血清干预后人胃癌细胞株的吸光度(OD值)均值明显小于生理盐水对照组(P0.05),复方蜥蜴散组及补气组、解毒通络组OD值均值明显小于华蟾素片对照组和5-FU对照组(P0.05),复方蜥蜴散组OD值明显小于补气组、养阴组、解毒通络组(P0.05);补气组、养阴组、解毒通络组之间OD值比较差异亦有统计学意义(P0.05),其中以补气组OD值最低,其次为解毒通络组。与生理盐水对照组比较,复方蜥蜴散组及补气组、养阴组、解毒通络组、华蟾素片对照组、5-FU对照组P53表达明显降低,bax表达明显增加(P0.05),各给药组中以复方蜥蜴散组改变最为明显,各拆方组中以补气组作用最强。结论:复方蜥蜴散可通过降低P53、增加Bax表达水平,抑制肿瘤细胞增殖,促进凋亡,各拆方中以补气组作用最佳,说明扶正益气治法具有较好的抗癌作用。     

蜥蜴胃康方含药大鼠血清对人MKN-45胃癌细胞增殖及HHIP、Patched表达的影响

目的 研究蜥蜴胃康方含药SD大鼠血清对人MKN-45胃癌细胞增殖及HHIP、Patched表达水平的影响,探讨该方抑制胃癌细胞增殖的作用及机制.方法 75只SPF级雄性SD大鼠随机分5组:生理盐水阴性对照组、蜥蜴胃康方高剂量组、中剂量组、低剂量组、华蟾素片阳性对照组,每组15只.各组分别予相应药物干预1周后,于腹主动脉...     

复方蜥蜴散含药大鼠血清对人MGC-803胃癌细胞TGF-β及PI3K/AKT的影响

目的研究复方蜥蜴散含药大鼠血清对人MGC-803胃癌细胞TGF-β及PI3K/AKT通路蛋白表达的影响,探讨其对人MGC-803胃癌细胞凋亡的作用及机制。方法 160只SPF级雄性SD大鼠随机分为8组:生理盐水阴性对照组(A组)、5-FU阳性对照组(B组),华蟾素阳性对照组(C组)、复方蜥蜴散80目组(D组)、复方蜥蜴散100目组(E组),80和100目混合低剂量组(F组)、中剂量组(G组)及高剂量组(H组),每组20只。各组灌胃或尾静脉注射,qd,连续1周。于末次给药后1h,腹腔麻醉,无菌条件下腹主动脉取血、离心,制备各组含药血清分别干预人胃癌细胞MGC-803培养24h,Western-Blot检测胃癌细胞AKT、p-AKT、TGF-β蛋白表达水平。结果①与A组相比,各处理组p-AKT及TGF-β蛋白表达水平均有下降,P0.05,表明阳性对照B、C组及各中药组对人胃癌细胞株凋亡有促进作用;②复方蜥蜴散各组和B、C阳性对照组比较,蛋白表达水平都有下降,P0.05;③F、G、H组与D、E组比较,蛋白表达水平均有下降,P0.05;④F、G、H组比较,以H组P-AKT及TGF-β蛋白水平下降最明显,P0.05,但整体AKT未见明显变化。结论复方蜥蜴散能够通过抑制TGF-β及PI3K/AKT信号通路进而阻断癌变,发挥抑制肿瘤增长的作用。其机制可能与其下调磷酸化PI3K/AKT信号通路以及TGF-β蛋白表达有关。     

金龙蛇颗粒对缺氧环境下胃癌BGC-823细胞上皮间质转化的影响

目的探讨金龙蛇颗粒对缺氧状态下胃癌BGC-823细胞上皮间质转化(EMT)的影响并初步研究该过程的相关机理。方法将胃癌BGC-823细胞分成3组:常氧对照组、缺氧对照组(加入150μmol/L的Co Cl2)、金龙蛇颗粒含药血清组。观察3组细胞形态变化;RT-PCR检测3组细胞E-cad、N-cad、Vimentin mRNA表达变化。结果常氧对照组的胃癌BGC-823细胞排列较致密,为上皮样表现;缺氧对照组大部分细胞排列较前松散,形态较前拉长,呈间质样表现;金龙蛇颗粒含药血清组介于二者之间。金龙蛇颗粒含药血清组与缺氧对照组相比,E-cad mRNA表达升高,N-cad、Vimentin mRNA表达降低,差异有显著统计学意义(P0.01)。结论金龙蛇颗粒可抑制缺氧环境中胃癌BGC-823细胞的上皮间质转化,可能与其下调N-cad、Vimentin mRNA表达,升高E-cad mRNA表达相关。     

复方蜥蜴散含药大鼠血清对人胃癌细胞MGC-803增殖、凋亡及周期的影响

目的研究复方蜥蜴散含药大鼠血清对人胃癌细胞MGC-803增殖、凋亡及周期的影响,探讨其对胃癌的干预作用。方法 160只SPF级SD雄性大鼠随机分成8组:生理盐水组(A组)、5-FU组(B组),华蟾素组(C组)、复方蜥蜴散80目组(D组)、复方蜥蜴散100目组(E组),80与100目混合低剂量组(F组)、中剂量组(G组)和高剂量组(H组),每组共20只。各组给予相应干预,1次/d,持续1周。末次给药后1 h,腹腔麻醉,无菌条件下腹主动脉取血、离心,制备各组含药血清,分别干预人胃癌MGC-803细胞24 h,采用MTT法检测细胞的增殖变化; TUNEL检测细胞凋亡情况;流式细胞法检测细胞的周期变化。结果 (1)与A组相比,各处理组含药大鼠血清均能抑制人胃癌细胞MGC-803的增殖、诱导其凋亡,并且将细胞阻滞于G1期,P <0. 05。(2)复方蜥蜴散各组OD均值小于B、C组,P <0. 05;复方蜥蜴散各组细胞总凋亡率大于B、C组,P <0. 05;复方蜥蜴散各组G1期细胞比例大于B、C组,P <0. 05。(3)F、G、H各组OD均值小于D、E组,P <0. 05; F、G、H各组细胞总凋亡率大于D、E组,P <0. 05; F、G、H各组G1期细胞比例大于D、E组,P <0. 05。(4)F、G、H组比较,以H组对人胃癌细胞MGC-803的影响最为明显P <0. 05;其中F、G、H组呈浓度-效应依赖性。结论复方蜥蜴散含药大鼠血清对体外培养MGC-803细胞有抑制增殖、诱导凋亡、使其发生周期阻滞的作用,表现出对胃癌较好的干预作用。     

活血益气方及其拆方药物血清对VEGF165转染 脐静脉内皮细胞分泌MMP-9,MMP-2的影响

目的:探讨活血益气方及其拆方含药血清对含有血管内皮生长因子(VEGF) 165的重组质粒pcDNA3.1-VEGF165转染人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分泌基质金属蛋白酶(MMP)2,9的影响.方法:构建pcDNA3.1-VEGF165重组质粒,采用Fugene HD将质粒瞬时转染至HUVEC中.制备活血益气方及其拆方含药大鼠血清、生理盐水正常血清,以5％药物血清作用于转染后的HUVEC,Western blot法检测VEGF的表达,ELISA法测定MMP-2,MMP-9的表达.结果:(1)活血益气方组VEGF蛋白表达高于生理盐水组,与之比较有统计学差异(P＜0.01).拆方各组则低于活血益气方组,与之比较有统计学差异(P＜0.01).(2)活血益气方组、活血方组MMP-2含量高于生理盐水组,与之比较有统计学差异(P＜0.05,P＜0.01).拆方各组中仅益气方组MMP-2含量低于活血益气方组,与之比较有统计学差异(P＜0.01).(3)活血益气方及其拆方各组MMP-9含量均高于生理盐水组,仅活血益气方组、活血方组与之比较有统计学差异(P<0.01,P＜0.05).拆方各组MMP-9含量均低于活血益气方组,与之比较具有统计学差异(P＜0.01).结论:活血益气方可以促进转染后HUVEC表达VEGF及分泌MMP-2,MMP-9,活血方药在这方面起主要作用.推测其治疗性血管生成作用机制可能与促进内皮细胞分泌MMP,从而促进内皮细胞迁移,提高血管通透性有关.     

复方蜥蜴散不同微粒组合剂含药大鼠血清对人SGC-7901胃癌细胞SIRT1、P53的影响

目的:研究复方蜥蜴散不同微粒组合剂含药SD大鼠血清对人SGC-7901胃癌细胞SITR1、P53表达水平的影响及机制。方法:160只SPF级雄性SD大鼠随机分8组,每组20只。各组分别予相应药物干预1周后,于腹主动脉处取血,离心,制备含药血清,加于人SGC-7901胃癌细胞培养24h,Western-Blot检测人SGC-7901胃癌细胞SIRT1、P53表达水平。结果:(1) 80目+100目高剂量组表达低于其他药物组(P0.05)。(2) P53蛋白表达比较:复方蜥蜴散各组表达均低于华蟾素片阳性对照组、5-Fu阳性对照组(P0.05);80目+100目混合组表达低于80目组、100目组(P0.05);80目+100目高剂量组的表达低于80目+100目中、低剂量组(P0.05)。结论:复方蜥蜴散可通过干预SIRT1、P53蛋白表达,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。     

益气化瘀清热方及拆方对脂多糖诱导的大鼠系膜细胞凋亡及其调控基因Bax和Bcl-2蛋白表达的影响

目的探讨益气化瘀清热方及其拆方对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的大鼠肾系膜细胞(mesangial cell,Ms C)凋亡及其调控基因Bax和Bcl-2蛋白表达的影响,比较不同类药物的作用强度。方法通过TUNEL法检测各类含药血清对Ms C凋亡的影响;Western Blot法检测各类含药血清对Bax和Bcl-2的蛋白的表达。结果各含药血清组与对照组比较凋亡细胞增多(P0.01),其中TW组作用最强,复方组次之(P0.05),化瘀组、清热组作用优于益气组(P0.01),然两组之间无明显差异;各含药血清组Bax较Bcl-2表达过量,其中TW组及复方组作用最强,然组间比较无明显差异,化瘀组作用强于清热组,清热组作用强于益气组(P0.01)。结论益气化瘀清热方及其拆方可通过调控Bax、Bcl-2的表达诱导LPS作用后Ms C发生凋亡,其中化瘀、清热类药物作用优于益气类药物。     

金龙胶囊对胃癌细胞MGC-803和BGC-823侵袭转移能力的影响

目的:探讨金龙胶囊对人胃癌MGC-803,BGC-823细胞侵袭和迁移能力的影响并对其具体机制进行探讨。方法:体外培养胃癌MGC-803,BGC-823细胞,分为金龙胶囊组(0.1,0.2,0.4,0.8 g·L~(-1)),空白组和5-氟尿嘧啶(5-FU)组,采用噻唑蓝(MTT)比色法分别检测金龙胶囊对MGC-803,BGC-823细胞增殖的抑制作用,计算半数抑制率(IC50);采用细胞侵袭(transwell)小室法和划痕实验检测金龙胶囊处理MGC-803和BGC-823细胞24 h后,细胞侵袭和迁移能力发生改变;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测金龙胶囊处理MGC-803,BGC-823细胞24 h后E-钙黏素(E-cadherin),基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达情况。结果:金龙胶囊能明显抑制MGC-803,BGC-823细胞的增殖,呈一定的浓度及时间依赖性;与空白组比较,金龙胶囊能明细减少MGC-803,BGC-823细胞的穿膜细胞数目,可明显影响2种胃癌细胞的侵袭与迁移能力,并呈明显浓度依赖性(P0.05);金龙胶囊组的划痕距离较空白组明显降低,影响MGC-803,BGC-823细胞迁移,并呈浓度依赖性(P0.05);与空白组比较,金龙胶囊组能够提高MGC-803和BGC-823细胞中E-cadherin蛋白表达,降低MMP-2,MMP-9蛋白表达水平,且呈一定的量效关系(P0.05)。结论:金龙胶囊能够抑制人胃癌MGC-803,BGC-823细胞的侵袭和迁移能力,其作用机制可能与上调E-cadherin表达,抑制MMP-2,MMP-9表达水平有关。本研究证实了金龙胶囊对胃癌MGC-803,BGC-823细胞抗侵袭转移的部分机制。     

化瘀祛痰方药及其拆方对H_2O_2诱导EA.hy926细胞凋亡的影响及机制研究

目的探讨化瘀祛痰方药及其拆方含药血清对过氧化氢(H2O2)诱导人脐静脉内皮细胞EA.hy926凋亡的影响及其机制。方法 40只SD大鼠随机分为5组,即全方组、补气组、化瘀组、祛痰组、空白血清对照组。各组大鼠分别以相应中药煎剂或生理盐水连续灌胃9 d,末次灌胃给药2 h后,腹主动脉采血,离心后分离血清。体外培养EA.hy926细胞,随机分为7组,即①正常对照组、②H2O2刺激组、③全方组、④补气组、⑤化瘀组、⑥祛痰组、⑦空白血清对照组。其中②组加入终浓度为300μmol.L-1H2O2,③～⑦组用各组含药血清(浓度为10%)预处理24 h后加入终浓度为300μmol.L-1H2O2,各组细胞培养24 h后进行各项指标测定。采用流式细胞术检测EA.hy926细胞凋亡;实时定量反转录—聚合酶链反应(Real-time PCR)定量分析bcl-2、bax、caspase-3 mRNA表达;比色法检测caspase-3活性;蛋白质免疫印记技术(Western-blot)检测bcl-2、bax蛋白表达。结果与正常对照组相比,H2O2刺激后EA.hy926细胞凋亡率、bax、caspase-3表达显著增加,而bcl-2表达显著减少。全方组细胞凋亡率、bax、caspase-3水平较H2O2刺激组相比显著降低,而bcl-2水平显著升高,且全方组干预作用强于各拆方组。拆方各组中,化瘀组、祛痰组细胞凋亡率显著降低,化瘀组bax、cas-pase-3表达显著减少,而bcl-2表达显著增加。结论化瘀祛痰方药全方及化瘀拆方可显著抑制内皮细胞凋亡,影响凋亡相关基因bcl-2、bax、caspase-3的表达,这可能是其抗AS的作用机制之一。     

安胃汤含药血清通过调节PI3K/Akt信号通路促进MC细胞凋亡的研究

目的:探讨安胃汤含药血清对MC细胞(MNNG诱导人胃黏膜上皮细胞系(GES-1)恶性转化)PI3K/Akt信号通路相关因子及细胞凋亡影响。方法:根据中药复方血清药理学实验方法,以MC细胞为研究对象,设立空白组(A组)、安胃汤组(B组)、安胃汤+阻断剂组(C组)、阻断剂组(D组)。含药血清处理12、24、48 h后的各组细胞采用流式细胞术检测细胞凋亡率;Western Blot和Real-time PCR检测PI3Kα、AKT、XIAP蛋白及mRNA的表达。结果:A组细胞凋亡率比较低,B、C、D组细胞凋亡率有所增加,C组细胞凋亡率增加最为明显;与A组相比,B、C、D 3组细胞内PI3Kα、AKT、XIAP基因及蛋白表达有所降低(P0.01或P0.05)。结论:安胃汤能促进MC细胞细胞凋亡,可能与其通过调控PI3K/Akt通路,下调XIAP基因及蛋白有关。     

胃安宁颗粒对人胃癌MGC-803细胞bcl-2基因表达的影响

目的:通过体外实验,观察胃安宁颗粒含药血清对MGC-803细胞中Bcl-2蛋白表达量的影响,初步探讨其可能的抗癌分子生物学机制。方法:采用免疫印迹法检测凋亡相关基因Bcl-2蛋白表达情况。结果:与空白血清对照组比较,胃安宁含药血清干预MGC-803细胞24h后,大、中剂量含药血清组中Bcl-2蛋白表达量明显降低;48h后3个剂量含药血清组中Bcl-2蛋白表达量均明显降低。结论:胃安宁颗粒治疗胃癌的机制可能与同时抑制MGC-803细胞中Bcl-2蛋白表达相关。     

大建中汤介导ERK1/2信号通路调控脾阳虚胃癌动物模型MMP-9的表达

目的:探讨大建中汤对SD大鼠脾阳虚胃癌模型胃癌组织中细胞外调节蛋白激酶1、2(ERK1、ERK2)、基质金属蛋白酶-明胶酶(MMP-9)mRNA的影响。方法:将健康SD大鼠随机分为正常组(A)、模型组(B)、大建中汤高、低剂量组(C、D组,给药剂量为生药10.8、5.4 g/kg)、西药对照组(E组,给药剂量为0.019g/kg)。A组予生理盐水,1次/d;B、C、D、E组予番泻叶水浸液灌胃、N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)储存液自由饮用,并使其饮食失节、疲劳过度复制脾阳虚胃癌动物模型。5个月后,B组予生理盐水,1次/d;C、D组予大建中汤,1次/d;E组予环磷酰胺,1次/d。15d后,处死大鼠。应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法,检测大鼠ERK1、ERK2、MMP-9mRNA的表达量。结果:模型组ERK1、ERK2、MMP-9mRNA的表达量明显高于正常组,差异有统计学意义(P0.05);大建中汤高、低剂量组、西药组ERK1、ERK2、MMP-9mRNA的量明显低于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:大建中汤可通过调节ERK1/2信号通路调控MMP-9的表达。     

蜥蜴胃康基本方及其拆方对胃癌前病变模型大鼠HIF-1α、VEGF表达影响的实验研究

目的研究蜥蜴胃康基本方对胃癌前病变(PLGC)模型大鼠缺氧诱导因子HIF-1α和血管内皮生长因子VEGF表达的影响,探讨蜥蜴胃康基本方对PLGC的调控机制。方法将70只SD雄性大鼠随机分成空白对照组、胃癌前病变模型组、蜥蜴胃康基本方全方组、补气组、养阴组、解毒通络组、维酶素对照组。除空白对照组外,余组均采用浓度0.02mmol/L的N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)灌胃及自由饮用、40%乙醇灌胃、饥饱失常综合因素,共24周来制备胃癌前病变大鼠模型。分别用蜥蜴胃康基本方、补气药、解毒通络药、养阴药、维酶素连续治疗12周,观察大鼠胃黏膜病理组织学变化,应用免疫组化法检测胃体组织HIF-1α和VEGF因子表达情况。结果通过Image-Pro Plus6.0图像分析系统对免疫组化图像进行光密度的测算,各组与模型组比较P0.05;各治疗组与空白对照组比较P0.05;蜥蜴胃康基本方全方及补气、解毒通络治疗组HIF-1α、VEGF因子阳性表达率低于维酶素治疗组(P0.05),其中以全方组AOD值最小;三组拆方比较P0.05,其中补气组AOD值最小,解毒通络组次之,养阴组表达较高。结论蜥蜴胃康基本方及其拆方能部分逆转PLGC模型大鼠胃黏膜病理变化,降低HIF-1α、VEGF阳性表达,可促进细胞凋亡,抑制细胞过度增殖,这可能是蜥蜴胃康基本方干预PLGC的分子生物学机制。     

基于Wnt/β-catenin通路研究三物白散对胃癌AGS细胞凋亡的影响

目的 研究三物白散对胃癌AGS细胞增殖和凋亡的影响并基于Wnt/β-catenin通路探讨其机制。方法 SPF级雄性SD大鼠28只,随机分为对照组及三物白散高、中、低剂量组,每组7只。三物白散高、中、低剂量组分别按0.125、0.0625、0.03125g·kg^-1·d^-1剂量灌胃,对照组以等剂量生理盐水灌胃。每日灌胃1次,连续7d。末次给药后45min经腹主动脉取含药血清。CCK-8法检测三物白散含药血清对胃癌AGS细胞活性的影响;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测细胞Wnt1、β-catenin、Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3 mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测细胞Wnt1、β-catenin、Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3蛋白的表达。结果 与对照组相比,5%、10%、15%、20%高浓度组含药血清可呈浓度—时间依赖性抑制AGS细胞活性。细胞凋亡检测结果显示高浓度组AGS细胞凋亡率显著高于对照组(P<0....     

海藻玉壶汤及其拆方对大鼠碘缺乏致甲状腺肿的干预作用

目的 从抗氧化应激角度比较海藻玉壶汤及其拆方对碘缺乏甲状腺肿的干预机制.方法 选4周龄Wistar大鼠150只,随机选取30只为正常对照组,其余120只建立碘缺乏动物甲状腺肿模型后随机分为模型对照组和海藻玉壶汤原方组(原方组)、拆方1组、拆方2组,每组30只.在造模成功0周和8周后处死大鼠.测定各组大鼠尿碘含量(MUI);甲状腺功能[包括血清促甲状腺激素(TSH)、血清总三碘甲状腺原氨酸(TT3)、总四碘甲状腺原氨酸(TT4)]及相对重量;光镜下定量观察甲状腺形态及电镜下观察甲状腺细胞超微结构;测定血清谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)、黄嘌呤氧化酶(XOD)和超氧化物歧化酶(SOD)的活力及丙二醛(MDA)和过氧化氢(H2O2)的含量;检测大鼠甲状腺4-羟基壬烯醛(4-HNE)、过氧化物氧化还原酶5( PRDX5)及其蛋白的表达.结果 给药8周后,模型对照组和拆方1组MUI减低,原方组和拆方2组MUI增高.3个给药组TSH值较模型对照组显著下降(P＜0.05).TT3值原方组较正常对照组显著减低(P＜0.01),拆方1组较模型对照组和原方组均显著增高(P＜0.05).TT4值原方组和拆方2组显著高于正常对照组和模型对照组(P＜0.05或P＜0.01),拆方1组明显低于原方组(P＜0.05).甲状腺相对重量原方组和拆方2组明显较模型对照组减低(P＜0.01),拆方1组显著高于正常对照组(P＜0.05).原方组SOD活力较正常对照组和拆方2组明显增高(P＜0.05).GSH-Px活力原方和拆方1组较拆方2组明显增高(P＜0.05).原方组H2O2含量较正常对照组明显增高(P＜0.05).MDA含量拆方1组显著高于正常对照组(P＜0.05).各给药组XOD活力较正常对照组和模型对照组均明显增高(P＜0.01),其中拆方1组明显高于原方和拆方2组(P＜0.01).甲状腺4-HNE表达原方组明显低于其他各组(P＜0.05).原方组甲状腺PRDX5蛋白较正常对照组有明显增高(P＜0.01).结论 海藻玉壶汤原方较其拆方抗氧化能力更强,可使甲状腺肿恢复完全,并未造成甲状腺细胞损伤.     

青龙衣含药血清抑制胃癌SGC-7901细胞生长和诱导凋亡

目的:探讨青龙衣含药血清对胃癌SGC-7901细胞增殖及凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:Wistar大鼠随机分为空白组、青龙衣低剂量(25 g·kg~(-1)·d~(-1)),中剂量(50 g·kg~(-1)·d~(-1)),高剂量(100 g·kg~(-1)·d~(-1))组及顺铂(5 g·kg·d~(-1))组,连续灌胃给药7 d,空白组灌胃给予等体积生理盐水;末次给药2 h后,颈动脉采血,制备青龙衣含药血清;分别采用噻唑蓝(MTT)比色法、流式细胞术、烟酸己可碱(Hoechst)染色、实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测青龙衣含药血清对SGC-7901细胞增殖、凋亡率、凋亡指数、凋亡相关基因及凋亡信号通路蛋白表达的影响。结果:与空白组比较,青龙衣含药血清对SGC-7901细胞的增殖具有明显抑制作用(P0.05),青龙衣含药血清处理48 h后的早期、晚期凋亡率,凋亡指数及促凋亡基因Bcl-2相关X蛋白(Bax),Bcl-2相关K蛋白(Bak)mRNA表达均升高,抗凋亡基因B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)mRNA表达降低(P0.05);青龙衣含药血清组β-链蛋白(β-catenin),细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)及原癌基因(C-myc)蛋白表达均明显降低(P0.05)。结论:青龙衣含药血清对胃癌SGC-7901细胞的增殖具有抑制作用,该作用可能与诱导凋亡及抑制分泌型糖蛋白(Wnt)/β-catenin通路的活化有关。     

中药胃康宁对胃癌细胞周期因子Cyclin E、CDK2和p27表达的影响

目的:观察中药胃康宁含药血清对胃癌细胞Cyc lin E、CDK2(Cyc lin dependant k inase 2,CDK2)和p27mRNA及其蛋白表达的作用。方法:分别以高、中、低不同剂量的胃康宁制剂对W istar雄性大鼠进行灌胃,制备含药血清,然后分别用不同剂量组含药血清培养胃癌细胞,采用免疫组织化学SABC法检测各组胃癌细胞中Cyc linE、CDK2和p27蛋白的表达,RT-PCR法检测各组胃癌细胞中Cyc lin E、CDK2和p27 mRNA的表达。结果:免疫组化法结果显示,胃康宁高、中、低剂量组Cyc lin E和CDK2灰度值均有明显升高,与空白对照组比较,P<0.05~0.01,而p27灰度值则显著降低(P<0.05~0.01);RT-PCR结果显示,与空白对照组比较,胃康宁低、中、高剂量组均能明显降低Cyc lin E和CDK2 OPTD I值(P<0.05~0.01)。同时,还能升高p27 OPTD I值(P<0.05~0.01)。结论:中药胃康宁可抑制胃癌细胞周期因子Cyc lin E、CDK2及其mRNA的表达,促进细胞周期抑制因子p27及其mRNA的表达,这可能是胃康宁抑制胃癌细胞生长的机制之一。     

善胃I号方对胃癌前病变大鼠胃粘膜Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的：通过观察善胃Ⅰ号方对胃癌前病变模型大鼠胃粘膜Bcl-2和Bax蛋白表达的影响,从细胞凋亡角度探讨该方干预胃癌前病变的作用机制。方法：将80只健康Wistar大鼠随机分为4组,即空白对照组、模型对照组、阳性药物组和善胃Ⅰ号方组,每组20只,造模24周后开始给予药物干预,给药6周后,采用免疫组化法检测大鼠胃粘膜Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。结果：善胃Ⅰ号方组Bcl-2蛋白的阳性表达率较模型对照组及阳性药物组均明显降低（P〈0．05）,而其Bax蛋白的阳性表达率较模型对照组及阳性药物组明显增高（P〈0．05）。结论：善胃Ⅰ号方可能通过抑制胃癌前病变模型大鼠胃粘膜Bcl-2蛋白的表达,且促进Bax蛋白的表达,从而促进癌前病变细胞的凋亡,对胃癌前病变的发生、发展进行干预。