不同加工方式的丹参药材在不同储存期的质量研究

目的通过对鲜丹参采用不同加工方法处理,然后对不同储存期的样品检测水分、水溶性浸出物、醇溶性浸出物、丹参酮ⅡA和丹酚酸B,以期确定鲜丹参适宜的加工方法。方法将鲜丹参分4个处理,1.鲜切;2.半干切;3干切;4.全根;储存期为两年,每3个月取样测定水分,水溶性浸出物,醇溶性浸出物,丹参酮ⅡA及丹酚酸B含量。结果鲜切丹参中丹参酮ⅡA、丹酚酸B含量总体比其它处理高;丹参药材所含丹参酮ⅡA、丹酚酸B随着储存期时间的延长均显下降趋势,到9个月时几乎达到最低值。结论鲜丹参切段晒干后储存更能有效的减少丹参药效成分的损耗及分解,且晒干后9个月前使用最佳。     

不同加工方法对丹参中丹酚酸B和醇溶性浸出物的影响

目的:更好地控制丹参药材的质量,提高丹参药材中丹酚酸B和醇溶性浸出物含量。方法:采用阴干、晒干、烘干、鲜切、发汗法加工处理丹参药材,用HPLC测定丹酚酸B,热浸法测定醇溶性浸出物,考察不同加工方法对丹参中丹酚酸B和醇溶性浸出物的影响。结果:不同加工方法的丹酚酸B和醇溶性浸出物的含量差异较大,丹酚酸B含量以丹参洗后晒干最高;40℃烘发汗后60℃烘干最低;醇溶性浸出物含量以洗后鲜切40℃烘干最高;洗后100℃烘干最低。相对于晾晒、发汗、晒干法,洗后晒干法处理的丹参中丹酚酸B含量升高4.7倍,洗后鲜切40℃烘干法处理的丹参中醇溶性浸出物含量升高3倍。结论:该方法重复性好、精密度高,可用于控制丹参药材的丹酚酸B和醇溶性浸出物含量,提高丹参药材质量。     

丹参醇提工艺研究及对丹参中水溶性成分的影响

目的优化丹参提取工艺,探讨乙醇提取工艺对丹参水溶性成分的影响。方法采用正交试验法,以丹参酮ⅡA、醇提干浸膏得率及丹参素、丹酚酸B为考察指标,对丹参醇提工艺进行优化。结果优选的最佳工艺为6倍量95%乙醇提取3次,每次60min。结论优选工艺合理、稳定、可行,既能充分提取丹参中醇溶性成分,也可使丹参中水溶性成分得到最大程度保留,有利于对丹参中有效成分的充分利用。     

不同产地丹参指标性成分和浸出物的含量测定

目的：测定并比较不同产地丹参中指标性成分和浸出物的含量,为丹参药材的质量控制提供理论依据。方法：用HPLC测定了10批不同产地、不同加工方法的丹参药材中丹参酮ⅡA和丹酚酸B的含量,并采用水溶性浸出物测定法（冷浸法）和醇溶性浸出物测定法（热浸法）测定了其浸出物含量。结果：指标性成分丹参酮ⅡA和丹酚酸B的含量、水溶性浸出物含量均高于《中国药典》规定的标准,醇溶性浸出物的含量大多低于《中国药典》规定的标准。结论：不同产地丹参的指标性成分含量和浸出物含量存在差异,且不同加工方法对指标成分含量有较大影响。     

三七配伍丹参对丹参中成分提取溶出的影响

目的研究三七与丹参配伍对丹参中成分提取溶出的影响。方法采用单因素实验和正交试验,以隐丹参酮、丹参酮IIA、迷迭香酸、丹酚酸B、固含物为考察指标,优选丹参醇提及水提最佳工艺条件。在最佳提取工艺条件下,将三七与丹参配伍,采用HPLC法检测丹参中成分提取溶出情况,并进行统计分析。结果丹参醇提最佳工艺为浸泡0 h、10倍量75%乙醇提取2次,每次1.5 h。丹参水提最佳工艺为8倍量水提取3次,每次2 h。三七对丹参中主要成分丹参酮IIA和丹酚酸B的提取溶出无显著性影响,且三七对丹参中其他醇溶性成分和水溶性成分的提取溶出也无显著性影响。结论三七对丹参中成分提取溶出无明显影响。     

孟河医派特色炮制猪心血拌丹参及其他炮制品活性成分与抗脑缺血氧化损伤相关性分析

目的 分析猪心血拌丹参及其他丹参炮制品中11个小分子活性成分及1个蛋白成分与抗脑缺血氧化损伤的相关性,明确猪心血拌丹参抗脑缺血氧化损伤的关键成分标志物。方法 采用高效液相色谱法（HPLC）同时测定丹参、猪心血拌丹参、猪血拌丹参、酒拌丹参、猪血清转铁蛋白（Tf）拌丹参5种饮片中11种活性成分含量;采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测丹参不同炮制品中Tf的含量。构建斑马鱼缺血性脑卒中模型,考察丹参不同炮制品对脑缺血斑马鱼行为轨迹、转基因斑马鱼Tg（elavl3：eGFP）脑神经元损伤及脑组织中丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）水平的影响;构建糖氧剥夺/复氧（OGD/R）诱导的小鼠海马神经细胞缺血缺氧模型,以乳酸脱氢酶（LDH）、活性氧（ROS）、MDA和SOD为评价指标,考察丹参不同炮制品对神经细胞氧化损伤的影响;通过主成分分析（PCA）、偏最小二乘判别法-判别分析（PLS-DA）及Spearman相关性分析对11个小分子活性成分及1个蛋白成分与药效指标进行分析,筛选猪心血拌丹参抗脑缺血氧化损伤的关键成分标志物。结果 与丹参比较,丹参各炮制品中水溶性、脂溶性成分含量均呈不同程度的升高,而丹酚酸A成分含量降低;与酒拌丹参比较,猪心血拌丹参、猪血拌丹参及Tf拌丹参中丹酚酸B、丹参素、迷迭香酸等成分含量均升高,而丹酚酸A含量降低。ELISA结果显示,猪心血拌丹参、猪血拌丹参及Tf拌丹参中均含有Tf蛋白,且三者含量差异无统计学意义。药效结果显示,丹参不同炮制品均能改善斑马鱼缺血性脑卒中后出现的行为缺陷、脑神经元损伤及氧化应激,且猪心血拌丹参组作用最明显。PCA结果显示,丹酚酸B、丹酚酸A、迷迭香酸、紫草酸、丹参素、咖啡酸、丹参酮Ⅱ_A、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ为丹参及其炮制品中的主要贡献成分。相关性分析结果显示,隐丹参酮、迷迭香酸、咖啡酸、二氢丹参酮Ⅰ、丹酚酸B、丹参酮Ⅱ_A、丹参酮Ⅰ与斑马鱼脑组织中MDA水平呈负相关,紫草酸、原儿茶醛、迷迭香酸、二氢丹参酮Ⅰ、丹酚酸B、Tf与SOD水平呈正相关,迷迭香酸、咖啡酸、二氢丹参酮Ⅰ、丹酚酸B、丹参酮Ⅱ_A、丹参酮Ⅰ、丹参素、Tf与斑马鱼脑神经元荧光强度呈正相关;紫草酸、原儿茶醛、迷迭香酸、二氢丹参酮Ⅰ、丹酚酸B、丹参素、Tf与HT22细胞中LDH、ROS、MDA水平呈负相关,与SOD水平呈正相关。结论 丹参及其不同炮制品抗脑缺血氧化损伤作用存在差异,其中以猪心血拌丹参改善氧化损伤作用最强,这可能与丹酚酸B、丹参素、迷迭香酸等成分的含量变化有关,可为明确该孟河医派特色炮制品抗脑缺血质量标志物及阐明其炮制机制提供依据。     

丹参双相载药乳剂的研制及其质量评价

探讨以乳剂同时载药丹参脂溶性与水溶性成分的可行性,为从制剂学方面综合利用丹参药效成分提供新思路。以丹参酮ⅡA,丹酚酸B为原料,大豆磷脂与帕洛沙姆188为混合乳化剂,甘油为等渗调节剂,采用星点设计-效应面法优选处方,高速剪切法制备初乳,续以高压均质机进行匀化,制备丹参双相载药静脉乳剂,进而考察其药剂学特性与稳定性。所制得产品外观为橙黄色乳状液,平均粒径241 nm,Zeta电位-35.3 m V,其中丹参酮ⅡA载药量为0.5 g·L-1,丹酚酸B载药量为1g·L-1,长期留样稳定性良好。结果表明研制的乳剂可同时载药脂溶性成分丹参酮ⅡA,水溶性成分丹酚酸B,可为充分发挥丹参的药效奠定制剂学基础。     

健脾益肾丸的工艺研究初探

目的:对丹参的分步提取测定丹参的酯溶性成分和水溶性成分的含量,确定健脾益肾丸的制作工艺。方法:对本方丹参的酯溶性成分和水溶性成分分步提取,薄层扫描法测定丹参酮ⅡA和丹酚酸B的含量。结果:用分步提取法制成的健脾益肾丸(浓缩丸)丹参酮ⅡA和丹酚酸B的含量均符合2005年版《中国药典》一部的要求。结论:用分步提取法提取本方中丹参的酯溶性成分和水溶性成分达到了质量要求,可以作为本方的质量控制标准,工艺合理。     

白花丹参提取工艺优选

目的:优选白花丹参提取工艺.方法:以丹酚酸B、总丹酚酸、丹参酮ⅡA及总丹参酮含量为指标,采用高效液相色谱法、紫外-可见分光法及比色法测定指标成分含量,选取乙醇体积分数、提取时间、加醇量、药材粒度和提取次数等为考察因素,采用正交试验法优选白花丹参乙醇回流提取工艺.结果:最佳提取工艺为白花丹参切段后用10倍量60％乙醇提取3次,每次2h.结论:优选工艺对白花丹参药材中的脂溶性成分和水溶性成分均有较高提取率,且稳定、节能.     

星点设计-效应面法优选丹参提取工艺

目的:星点设计-效应面法优选丹参的提取工艺。方法:以丹参酮ⅡA和丹酚酸B提取率,收膏率为考察指标,采用星点设计考察提取乙醇用量、提取时间以及乙醇浓度对提取工艺的影响,对结果进行多元线性回归和二项式拟合,用效应面法选择较佳工艺条件,并进行预测分析。结果:复相关系数上看,各项指标二项式拟合方程均优于多元线性回归方程,确定最优提取工艺为加9倍量60%乙醇提取3次,每次1.5 h,提取量预测值与理论值偏差小于3%。结论:星点设计-效应面法优选丹参的提取工艺,方法简便,预测性良好。     

国产丹参药材质量评价研究

 目的综合考察国产丹参药材质量。方法用HPLC测定了21批产地样品、9批市售样品丹参药材中丹酚酸B、丹参酮ⅡA等7种指标成分含量,并考察了水溶性浸出物、醇溶性浸出物、醚溶性浸出物、总灰分、酸不溶性灰分及水分等药材常规理化实验项目。结果丹参药材中丹酚酸B为水溶性成分的主体,丹参酮Ⅱ_A为脂溶性成分的主体,丹参药材指标成分含量和常规实验项目测定结果显示:不同产地丹参药材间品质差异较大,且不同干燥法对丹参7种指标成分含量有较大影响。结论本研究为国产丹参药材综合质量评价提供理论和实验依据。     

正交试验优选丹川胶囊的醇提工艺

目的:优选丹川胶囊的醇提工艺条件。方法:以丹参酮ⅡA、丹酚酸B以及醇浸出物为评价指标,采用L9(34)正交试验,筛选丹川胶囊的最佳醇提取工艺。结果:最佳的醇提取工艺为:药材加8倍量70%乙醇提取3次,每次1.5h。结论:优选得到的提取工艺合理,操作可行,质量可控。     

星点设计-效应面法优化炒茺蔚子炮制工艺

目的:利用星点设计-效应面法对炒茺蔚子的炮制工艺进行优化,为炒茺蔚子的规范化生产提供依据。方法:采用清炒法,以炮制温度、炮制时间、炒药机转速为自变量,总生物碱、盐酸水苏碱、水溶性浸出物、醇溶性浸出物质量分数为评价指标,对自变量各水平进行多元回归拟合,利用效应面法筛选最佳炮制工艺并进行预测分析。采用UV测定总生物碱的含量,检测波长520 nm;采用高效液相色谱仪-蒸发光散射法测定盐酸水苏碱的含量,流动相乙腈-水(60∶40),流速0.5 m L·min~(-1),漂移管温度70℃。结果:三项式拟合复合相关系数较高。最佳炮制工艺为炮制温度219℃,炮制时间2 min,炒药机转速14 r·min~(-1)。总生物碱、盐酸水苏碱、水溶性浸出物、醇溶性浸出物质量分数的平均值分别为9.82,2.50,86.16,193.28 mg·g~(-1),综合评分与三项式拟合方程预测值偏差0.87%。结论:利用星点设计-效应面法优化炒茺蔚子炮制工艺的方法简便且预测性良好,适用于炒茺蔚子的规范化生产。     

猪心血炒酸枣仁的炮制工艺优选

目的:优选猪心血炒酸枣仁的炮制工艺,为地方特色炮制工艺的传承和发展提供参考。方法:以炒制时间、炒制温度、猪心血用量为考察因素,斯皮诺素和酸枣仁皂苷A含量的总评"归一值"(overall desirability,OD)为评价指标,采用星点设计-效应面法优选猪心血炒酸枣仁的炮制工艺并进行预测分析。结果:最佳炮制工艺为炒制时间6.1 min,炒制温度131℃,猪心血用量10%(酸枣仁药材每100 g拌入猪心血10 g);在此条件下,OD预测值0.830,预测值与真实值的偏差1.4%。结论:采用星点设计-效应面法优选的猪心血炒酸枣仁炮制工艺稳定可行、预测性良好,炮制工艺参数准确,为规范地方饮片特色炮制工艺及质量标准提供参考。     

贵州引种丹参质量动态变化研究

目的:研究贵州引种丹参生长期间质量的动态变化,为丹参药材合理采收期提供实验依据。方法:在贵州引种丹参种植基地随机选择试验田进行试验,每月定期对实验田内实验样本进行采集,依法加工后,测定其浸出物和丹参酮类、丹酚酸B的含量。结果:丹参醇溶性浸出物5~7月份为第一增长高峰,最高达到13.3%,10~11月为第二增长高峰,最高达到18.2%;丹参水溶性浸出物在整个生长期基本呈持续增长,10月中旬达到最大,为58.4%,12月份以后稍有下降。丹酚酸B含量的增长高峰期在10月中旬,含量达到6.7%;丹参酮类的增长高峰期在11中旬,其中隐丹参酮含量为0.16%、丹参酮Ⅰ含量为0.08%、丹参酮Ⅱ含量为0.43%。结论:贵州修文引种丹参药材质量在10~11月品质佳,含量最高,并均高于《中华人民共和国药典》(2015版)有关规定。     

正交试验法优选丹参的提取新工艺

目的:研究丹参的提取新工艺.方法:以丹参酮ⅡA和丹酚酸B的含量为指标,采用正交试验法进行丹参提取工艺全面优选,并用HPLC法测定其含量.结果:醇提与水提方法相结合,可同时对丹参的脂溶性及水溶性有效成分进行全面提取.在本试验条件下,其中丹参醇提最佳工艺为:丹参加6倍量90%乙醇,回流提取两次,每次1h;丹参水提最佳工艺为:丹参醇提后药渣加7倍量水煎煮两次,每次1 h.结论:丹参提取新工艺可兼顾丹参的脂溶性和水溶性活性成分,使丹参的提取工艺合理可行.     

滇丹参质量标准研究

本研究为建立滇丹参的质量标准控制方法,考察滇丹参的显微特征,通过薄层色谱法能清晰鉴别滇丹参对照药材和丹酚酸B对照品特征斑点,10批样品中水分、总灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物、醇溶性浸出物含有量分别不超过14.7％、9.4％、1.6％,以及不低于26.2％、9.4％.采用高效液相色谱法检测丹参酮ⅡA和丹酚酸B含量,丹参酮ⅡA在0.0528～0.5280μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9997),平均加样回收率为99.47％,RSD为1.11％.丹酚酸B在0.324～3.240μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9999),平均加样回收率为99.65％,RSD为1.06％.本方法专属性好,稳定可靠,可用于滇丹参的质量控制.     

多指标综合评分法优选丹参炮制工艺△

目的：用多指标综合评分法优选丹参炮制工艺,探讨不同炮制方法对丹参中各成分的影响,以期得到酒炙丹参的最佳炮制工艺。方法：按《中国药典》法,紫外分光光度法,高效液相色谱法,测定各炮制品的水浸出物、醇浸出物、总丹参酮和丹参酮Ⅱ。的含量,并采用正交试验设计多指标测试,综合评分优选炮制工艺条件。结果：经测定数据分析,筛选出酒炙丹参的最佳炮制工艺条件为加酒量20％质量分数,加热温度160℃,炒5min。结论：用综合评分法优选出的炮制工艺能较好地保证炮制品的质量。     

用梯度渗漉法比较丹参有效成分的提取工艺研究

目的：优选丹参中脂溶性成分和水溶性成分的提取工艺。方法：比较多种提取工艺，如回流法、一般渗漉法和梯度渗漉法，应用正交设计和单因素考察法对提取工艺进行筛选，采用高效液相色谱法测定丹参酮ⅡA和丹酚酸B的含量及干膏收率作为评价指标。结果：最佳工艺为梯度渗漉法，最佳工艺条件是：取丹参药材粗粉，用适量95％乙醇溶胀2h，装筒，用95％乙醇浸渍24h后，以4mL／min的速度开始渗漉，收集10倍药材量的渗漉液，提取丹参酮类脂溶性成分；再用50％乙醇，以4mL／min的速度渗漉，收集12倍药材量的渗漉液，提取丹参酚酸类水溶性成分。丹参酮ⅡA和丹酚酸B的提取率都较高。结论：优选得到的工艺条件简便易行，稳定性好。     

响应面法优化丹参有效成分的提取工艺及其体外抗氧化活性研究

目的应用响应面法优化丹参中丹参酮ⅡA和丹酚酸B两类有效成分的集成提取工艺,并对其体外抗氧化活性进行研究。方法应用高效液相色谱法同时检测丹参酮ⅡA和丹酚酸B的含量,并以此为评价指标,应用响应面法优化丹参中丹参酮ⅡA和丹酚酸B的集成提取工艺条件。此外,测定提取样品对DPPH和ABTS自由基的清除活性。结果响应面法得到的最优提取工艺条件为:12倍量67%乙醇,提取2次,每次48 min。体外抗氧化实验表明,应用此工艺提取得到的丹参提取物可剂量依赖性地清除DPPH和ABTS自由基,其清除能力优于Vc。结论响应面法用于丹参中丹参酮ⅡA和丹酚酸B的集成提取工艺优化,预测性良好,此工艺得到的丹参提取物具有较好的抗氧化活性,在氧化应激相关疾病的防治中值得进一步的研究开发。