清肾颗粒对慢性肾功能衰竭湿热证患者NF-κB信号通路的干预作用

目的观察清肾颗粒对慢性肾功能衰竭(chronic renal failure,CRF)湿热证患者核转录因子(NF-κB)信号转导通路中NF-κB p65、磷酸化NF-κB抑制蛋白(p-IκBα)表达的影响,探讨清肾颗粒治疗CRF患者的作用机制。方法 68例CRF湿热证患者,按随机数字表法分为对照组和治疗组,每组34例,实际完成63例,治疗组32例,对照组31例,并设正常组20名。治疗组与对照组均给予西医基础治疗及中药保留灌肠,治疗组加服清肾颗粒,每日3次,每次1袋,疗程均为8周。观察患者临床疗效、治疗前后血肌酐(SCr)、肾小球滤过率估算值(e GFR)以及外周血中NF-κB p65、p-IκBα的水平变化及其与正常组比较。结果治疗组临床疗效和中医证候疗效总有效率为84.38%(27/32)和81.25%(26/32),优于对照组的54.84%(17/31)和51.61%(16/31),差异有统计学意义(P0.01)。与本组治疗前比较,治疗后治疗组SCr水平明显下降(P0.01),e GFR水平明显升高(P0.01),且优于对照组同期(P0.05)。与正常组比较,治疗组和对照组治疗前NF-κB p65、p-IκBα水平升高(P0.01);与本组治疗前比较,治疗后治疗组NF-κB p65、p-IκBα水平均明显降低(P0.01),且均优于对照组同期(P0.01)。结论清肾颗粒能改善CRF湿热证患者的临床症状,降低SCr、升高e GFR水平,具有保护肾功能的作用,其作用机制可能与降低外周血中NF-κB p65、p-IκBα水平有关。     

苓桂术甘汤含药血清对脂多糖诱导大鼠心肌细胞IKK/IκB/NF-κB信号通路蛋白表达的影响

目的观察苓桂术甘汤含药血清对脂多糖诱导的大鼠原代心肌细胞IKK/IκB/NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响,探讨其保护心肌细胞的分子机制。方法采用差速贴壁法和化学抑制法分离大鼠原代心肌细胞,分别设正常对照组、模型组、正常血清对照组、苓桂术甘汤含药血清(5%、10%、20%)组。通过脂多糖诱导复制心肌细胞损伤模型,检测含药血清预处理后心肌细胞NF-κBp65、IKK-β、IκB-α和p-IκBα蛋白表达,NF-κBp65核移位情况,TNF-α、IL-1β和IL-6的含量变化。结果与正常对照组比较,模型组和正常血清对照组心肌细胞NF-κBp65、p-IκBα和心肌细胞核内NF-κBp65蛋白表达增加(P0.01),心肌细胞IKK-β、IκB-α蛋白表达降低(P0.01),细胞上清液IL-1β、IL-6和TNF-α含量升高(P0.01);与模型组比较,苓桂术甘汤5%、10%、20%浓度含药血清组心肌细胞NF-κBp65、p-IκBα和心肌细胞核内NF-κBp65蛋白表达降低(P0.05),心肌细胞IKK-β、IκB-α蛋白表达增加(P0.05),细胞上清液IL-1β、IL-6和TNF-α含量降低(P0.05),且干预效应与苓桂术甘汤含药血清呈浓度依赖趋势。结论苓桂术甘汤可调节IKK/IκB/NF-κB信号通路相关蛋白表达,干预下游靶分子的转录调控,有效抑制细胞因子的过度激活。     

温病湿热证动物模型中炎症因子与水通道蛋白表达的实验研究

目的:采用复合多因素造模法,给予小鼠肥甘饮食、酒伤、劳役等方法并加以湿热外环境以建立湿热证小鼠模型,探讨湿热证中炎症反应与AQP之间的关系。方法:将40只雄性BALB/c小鼠随机分为正常对照组、脂多糖(LPS)组、湿热组、脾虚组,观察小鼠日常活动以及体征,测量小鼠每周体质量变化,采用HE染色检测舌部病理形态学变化。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中LPS和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的浓度;免疫组化法检测结肠组织中核转录因子κBp65(NF-κBp65)、Toll样受体4(TLR4)、水通道蛋白质(AQP)3和水通道蛋白质(AQP)4的阳性表达。结果:与正常组相比,LPS组、湿热组、脾虚组中LPS、TNF-α、NF-κBp65、TLR4、AQP3的表达升高(P0.001),AQP4的表达下降(P0.001);与LPS组相比,湿热组、脾虚组LPS、TNF-α的含量下降(P0.001),湿热组NF-κBp65、AQP4的表达升高(P0.05),脾虚组TLR4、AQP3、AQP4的表达升高。结论:湿热证小鼠LPS、TNF-α、NF-κBp65、TLR4的水平增高与水通道蛋白AQP3、AQP4关系密切,而LPS的在其中的机制有待进一步深入研究。     

三七对酒精性肝病大鼠肝组织NF-κB、c-Jun表达的影响

 目的 观察三七对酒精性肝病大鼠肝组织NF-κB、c-Jun表达的影响。方法 SD雄性大鼠连续14周给予酒精建立酒精性肝病模型,随机分为模型对照组,三七高、低剂量组和硫普罗宁组,在模型制备同时,每天下午分别灌服给药,连续14周。同时设立正常对照组,连续14周灌胃给水。免疫组化法检测肝组织中NF-κBp65/IκBα、p-IκBα、p-JNK、c-Jun蛋白的表达。结果 模型对照组大鼠肝组织NF-κBp65/IκBα、p-IκBα、p-JNK/c-Jun均较正常对照组明显升高（P<0.01）;三七高、低剂量组大鼠肝组织NF-κBp65/IκBα、p-IκBα、p-JNK/c-Jun表达较模型对照组明显降低（P<0.01,P<0.05）。结论 三七能显著抑制肝组织中NF-κBp65/IκBα、p-JNK/c-Jun的过度表达,这可能是其有效防治酒精性肝病发生发展的重要机制之一。     

苓桂术甘汤调节心室重构模型大鼠心肌组织NF-κB信号通路的分子机制研究

目的:观察苓桂术甘汤对心室重构大鼠心肌组织NF-κB信号通路相关分子表达的影响,探讨其抑制心室重构的分子机制。方法:采用冠脉结扎复制心梗后心室重构大鼠模型,造模2 w后,药物连续干预4 w,采用Western blot法检测模型大鼠心肌组织NF-κBp65、IKK-β、IκB-α及p-IκBα的蛋白表达,采用ELISA法检测大鼠血清中TNF-α、IL-1β及IL-6的含量,采用HE及Masson染色观察大鼠心肌组织病理学变化。结果:心室重构模型大鼠出现明显的心肌细胞损伤及间质纤维化等病理变化,与假手术组比较,心肌组织NF-κBp65、p-IκBα蛋白表达显著升高,IKK-β、IκB-α蛋白表达显著降低,血清TNF-α、IL-1β、IL-6含量显著升高(P0.01)。与模型组比较,苓桂术甘汤各剂量干预4 w后,可显著改善模型大鼠心肌组织损伤,抑制NF-κBp65、p-IκBα蛋白表达、上调IKK-β、IκB-α蛋白表达,降低血清TNF-α、IL-1β及IL-6含量(P0.05或P0.01)。结论:苓桂术甘汤改善心肌组织损伤、抵制心室重构的作用机制与抑制心肌组织NF-κB信号通路过度激活有关。     

益母草水苏碱对肥大心肌细胞活性氧信号的影响

目的:观察益母草水苏碱对心肌细胞肥大的作用,探讨其对活性氧(ROS)及其下游NF-κB信号的影响。方法:原代培养乳鼠的心肌细胞,用血管紧张素Ⅱ建立细胞肥大模型,观察10-7～10-4mol/L浓度的益母草水苏碱对细胞肥大的影响(测定细胞体表面积及Protein/DNA比值),同时利用流式细胞仪检测ROS阳性细胞比例,West-ern Blot法测定细胞浆内p-IκBα(ser32)及核内NF-κB(p65)蛋白表达。结果:一定浓度的益母草水苏碱可以降低肥大心肌细胞的体表面积、Protein/DNA比值以及ROS阳性细胞比例(P0.05);益母草水苏碱干预降低了肥大心肌细胞浆内p-IκBα(ser32)及核内NF-κB(p65)蛋白的表达水平(P0.05)。结论:对ROS及其下游NF-κB信号的抑制可能涉及益母草水苏碱对抗心肌细胞肥大的作用机制。     

电针对肥胖大鼠肠道Toll样受体4和核转录因子κB的影响

目的:观察电针对肥胖大鼠肠道组织Toll样受体4(TLR4)和核转录因子κB(NF-κB)的影响,探讨针灸减肥的作用机制。方法:Wistar雄性大鼠随机分为正常组和模型组,高脂饲料喂养建立肥胖大鼠模型,造模成功的24只大鼠随机分为模型组、抑制剂组和电针组,每组8只。电针治疗选取"关元""中脘""足三里"和"丰隆",每次治疗10 min,抑制剂组采用TAK-242腹腔注射,每周3次,共干预8周。每2周测量1次体质量和血糖,免疫共沉淀法测定肠道组织TLR4和NF-κB p65相互作用,凝胶迁移实验法测定肠道组织NF-κB p65活性,Western blot法测定肠道组织TLR4、NF-κB p65和p-IκBα蛋白表达,实时荧光定量PCR测定肠道组织TLR4、NF-κB p65和IκBαmRNA表达。结果:与对照组比较,模型组体质量、血糖水平、TLR4、NF-κB p65、p-IκBα的蛋白和mRNA水平均显著升高(P0.01,P0.05),TLR4与NF-κB p65结合能力及NF-κB p65活性显著增强(P0.05,P0.01)。与模型组比较,电针组大鼠体质量显著降低(P0.05),电针组和抑制剂组干预后餐后血糖水平、TLR4、NF-κB p65、p-IκBα的蛋白和mRNA水平显著降低(P0.05,P0.01),NF-κB p65活性显著减弱(P0.01)。结论:电针能够有效调控肠道TLR4,抑制其与NF-κB p65相互作用,降低NF-κB p65活性,这可能是电针降低肥胖大鼠体质量和血糖水平,从而改善其肥胖状态的潜在机制之一。     

慢性肾功能衰竭微炎症状态、HSP70、AQP2与中医证型关系研究

目的:探讨慢性肾衰竭(CRF)微炎症状态、热休克蛋白70(HSP70)、水通道蛋白2(AQP2)的表达及其与中医证型的关系。方法:选择CRF2、3期患者60例,按辨证标准分为脾肾阳虚证26例,气阴两虚证19例,湿热证15例。另设健康对照组15例。测定外周血单个核细胞NF-κB活性、血清HSP70、IL-6、尿AQP2含量,分析其与中医证型的相关性。结果:①CRF患者NF-κB、IL-6、HSP70、AQP2含量均较对照组显著升高(P<0.05或P<0.01);②3个证型组中,湿热证组NF-κB显著高于其它两组(P<0.01或P<0.05);HSP70含量呈湿热证组>气阴两虚证组>脾肾阳虚证组(P<0.05或P<0.01);尿AQP2含量为脾肾阳虚证组>湿热证组>气阴两虚证组(P<0.05或P<0.01)。结论:①CRF患者普遍存在微炎症状态及水代谢紊乱,但湿热证者微炎症状态最明显,NF-κB、IL-6与CRF浊毒内盛有关;AQP2与CRF水湿相关。②CRF患者机体肾保护机制已启动,HSP70与CRF患者正气盛衰相关。     

独活寄生汤对腰椎间盘突出症患者核转录因子κBp65及蛋白聚糖酶-4mRNA表达的影响

目的:基于腰椎间盘突出症患者治疗前后核转录因子-kappa Bp56(NF-κBp65)、蛋白聚糖酶-4(ADAMTS-4)m RNA表达及中医证候变化,探讨独活寄生汤防治腰椎间盘突出症可能机制研究。方法:采用简单随机对照设计,将50例符合纳入标准的腰椎间盘突出症患者分为对照组与治疗组各25例。对照组予双氯芬酸钠,治疗组再加用独活寄生汤治疗,疗程2周。采用模糊视觉疼痛评分(VAS)对疼痛程度进行评估,应用实时荧光定量PCR技术检测血清NF-κBp65、ADAMTS-4m RNA变化。结果:治疗组总有效率为84%;对照组总有效率为80%,两组差异无统计学意义(P0.05)。治疗前,两组NF-κBp65、ADAMTS-4m RNA表达均呈上升趋势;治疗后治疗组NF-κBp65、ADAMTS-4m RNA表达呈明显下降(P0.05)。结论:独活寄生汤可能通过下调NF-κBp65、ADAMTS-4m RNA表达,发挥缓解腰椎间盘突出症临床症状的效用。     

利湿化瘀法对湿瘀型慢性盆腔炎大鼠子宫组织NF-κBp65、IκKα蛋白表达影响的研究

目的:通过观察利湿化瘀法对湿瘀型慢性盆腔炎大鼠子宫组织NF-κBp65(核因子蛋白)、IκK(IκB激酶α)蛋白表达的影响,探讨该法的临床作用机理,为临床研究及新药研发提供更深层次的理论依据。方法:用苯酚胶浆注入大鼠两侧子宫造模,成功后,随机分成模型组,中药高、低剂量组和妇乐颗粒对照组。除模型组给予生理盐水灌胃外,其余各组分别给以相应剂量的利湿化瘀中药和妇乐颗粒灌胃,每天1次。21d后,处死大鼠,取材,采用Western Blot法检测大鼠子宫组织NF-κBp65、IκKα蛋白表达。结果:与模型组比较,中药高、低剂量组及妇乐组大鼠子宫组织NF-κBp65表达均减弱,IκKα表达增强,差异有显著性(P0.05),中药高剂量组效果优于妇乐组,但两组比较,无显著性差异(P0.05)。结论:利湿化瘀法通过调节大鼠子宫组织NF-κBp65、IκKα蛋白的表达,促进细胞凋亡,减轻盆腔炎症反应。     

参地颗粒对慢性肾炎脾肾亏虚证患者NF-κB信号通路的干预作用

目的探讨氧化应激介导的NF-κB信号通路对慢性肾炎脾肾亏虚证患者的影响及参地颗粒(茯苓、熟地、五味子、桑螵蛸、川芎)对其的干预作用。方法 50例慢性肾炎脾肾亏虚证患者随机分为贝那普利片组(对照组)和参地颗粒组(治疗组),实际完成对照组24例,治疗组22例,并选取20名健康体检者作为正常组,疗程12周。检测两组临床疗效、治疗前后24 h尿蛋白定量及血清活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平和核因子-κB p65(NF-κB p65)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、纤维连接蛋白(FN)的变化情况。结果治疗组临床疾病总有效率和中医证候疗效总有效率分别为81.82%和77.27%,优于对照组的66.67%和37.50%(P0.05或P0.01)。治疗组和对照组治疗后,24 h尿蛋白定量较治疗前降低,且治疗组的下降幅度大于对照组(P0.05)。两组患者治疗前血清ROS、MDA水平和NF-κB p65、MCP-1水平高于正常组,血清SOD水平和FN水平低于正常组(P0.05);治疗后两组血清ROS、MDA水平和NF-κB p65、MCP-1水平均较治疗前降低,血清SOD水平和FN水平较治疗前升高,治疗组优于对照组(P0.05)。结论参地颗粒能改善患者临床症状,降低24 h尿蛋白定量,其机理与通过抑制CGN脾肾亏虚证患者的氧化应激,增强机体的抗氧化能力,抑制NF-κB信号活化,下调MCP-1表达有关。     

甘露消毒丹干预小鼠病毒性肝炎湿热证Toll受体通路的实验研究

目的 使用清热祛湿类代表方甘露消毒丹干预病毒性肝炎湿热证小鼠,通过研究Toll受体通路中TLR2、TLR4、NF-κBp65的表达变化,探讨清热祛湿法干预温病湿热证的药效机制及可能作用靶点.方法 将小鼠随机分为正常组、模型组(肥甘饮食+湿热环境+病毒MHV-A59感染造模)、治疗组(模型组使用甘露消毒丹干预)、安慰剂组(模型组使用生理盐水干预).采用免疫组化法检测各组小鼠肝脏TLR2、TLR4、NF-κBp65蛋白阳性表达,实时荧光定量PCR检测各组小鼠肝组织中TLR2、TLR4、NF-κBp65基因的mRNA含量.结果 甘露消毒丹能降低湿热证小鼠体温,增加小鼠耗食量、饮水量,对TLR2、TLR4、NF-κBp65蛋白及mRNA表达均有抑制作用.结论 清热化湿法能够抑制TLR2、TLR4、NF-κBp65的表达,通过保护细胞膜,减轻炎症反应而发挥治疗温病湿热证的效应.     

基于清热利湿益气补肾法的中西医结合治疗糖尿病肾病患者的疗效研究

目的：研究基于清热利湿益气补肾法的中西医结合治疗糖尿病肾病(DN)患者的疗效。方法：选取2019年5月至2022年5月诊治的122例DN患者作为研究对象，按照随机数字表法分为观察组(予以尿毒清颗粒联合达格列净治疗)与对照组(予以达格列净治疗),各61例，对比2组中医证候积分、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、估算肾小球滤过率(eGFR)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)、miR-21、TLR4、NF-κB mRNA。结果：治疗前，2组肢体浮肿、神疲乏力、口渴多饮等中医证候积分、Scr、BUN、eGFR、SOD、ROS、MDA、miR-21、TLR4、NF-κB mRNA比较，差异无统计学意义(P>0.05);治疗后，观察组的中医证候积分、Scr、BUN、ROS、MDA、miR-21、TLR4、NF-κB mRNA低于对照组，而eGFR、SOD高于对照组(P<0.05)。结论：基于清热利湿益气补肾法的中西医结合治疗DN患者的疗效较好，尿毒清颗粒联合达格列净治疗DN不仅能降低氧化应激及miR-21、TLR4/NF-κB,并且能改善肾功能。     

土茯苓萆薢方联合美洛昔康片对急性痛风性关节炎患者IL-1β及NF-κBp65表达的影响

目的:观察土茯苓萆薢方联合美洛昔康片对急性痛风性关节炎患者白细胞介素-1β(IL-1β)和核转录因子-κBp65(NF-κBp65)表达的影响。方法:选取80例急性痛风性关节炎患者作为研究对象,随机分为观察组和对照组各40例。对照组给予美洛昔康片治疗,观察组在对照组用药基础上加用土茯苓萆薢方治疗,观察2组临床疗效及治疗前后IL-1β和NF-κBp65的表达情况。结果:总有效率观察组为97.50%,高于对照组的85.00%,2组比较,差异有统计学意义(P0.05)。治疗前,2组IL-1β和NF-κBp65值比较,差异均无统计学意义(P0.05)。治疗后,2组IL-1β和NF-κBp65值均较治疗前降低(P0.05),观察组的IL-1β和NF-κBp65值均低于对照组(P0.05)。结论:土茯苓萆薢方联合美洛昔康片治疗急性痛风性关节炎疗效显著,能显著抑制IL-1β、NK-κBp65表达。     

肾衰Ⅱ号方对慢性肾功能衰竭大鼠肾组织NF-κB/TNF-α信号通路表达的影响

目的观察肾衰Ⅱ号方对慢性肾功能衰竭大鼠肾组织NF-κB/TNF-α信号通路表达的影响,探讨其改善慢性肾功能衰竭微炎症状态、延缓慢性肾脏病进展的作用机制。方法采用5/6(ablation/infarction,A/I)肾切除法制作慢性肾功能衰竭动物模型。实验大鼠随机分为模型组、西药对照组、肾衰Ⅱ号方组,每组14只,另设假手术组14只,各给药组给予相应药物。测定大鼠血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、内生肌酐清除率(CCr),采用Western blot测定磷酸化核因子-κB(p-NF-κB)p65、NF-κB p65、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达,RT-PCR测定TNF-αm RNA表达。结果与假手术组比较,模型组SCr、BUN水平明显升高,CCr明显降低(P0.01),左肾质量/体质量明显增加(P0.05),肾脏皮质、髓质p-NF-κB p65、NF-κB p65及TNF-α表达均明显升高(P0.01);与模型组比较,肾衰Ⅱ号方组、西药对照组SCr、BUN水平明显降低(P0.05,P0.01),CCr明显升高(P0.01),左肾质量/体质量明显降低(P0.05),肾衰Ⅱ号方组在改善肾功能方面优于西药对照组(P0.05);肾衰Ⅱ号方组、西药对照组肾脏皮质、髓质p-NF-κB p65、NF-κB p65及TNF-α表达均明显降低(P0.01),肾衰Ⅱ号方组下调NF-κB/TNF-α信号通路表达作用优于西药对照组(P0.01)。结论肾衰Ⅱ号方可能通过下调NF-κB/TNF-α信号通路的表达,改善慢性肾功能衰竭微炎症状态,减轻肾间质纤维化,达到延缓肾功能减退的作用。     

肠炎清对ICUC大鼠结肠组织TLR4、NF-κB蛋白表达、TLR4mRNA的影响

目的通过观察肠炎清对免疫复合溃疡型结肠炎模型(ICUC)大鼠结肠组织Toll样受体4(TLR 4)和核因子-κB(NF-κB)表达的影响,探讨肠炎清治疗IBD的作用机制。方法采用三硝基苯磺酸(TNBS)加免疫复合法造模。将大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、肠炎清低、中、高剂量组(8.33、16.67、33.33m L/kg)、柳氮磺吡啶(SASP)组(0.5g/kg)。造模后第2 d,用药组分别给予相应药物灌胃7d,给药7天后麻醉处死大鼠,取新鲜结肠标本,采用免疫组化法检测TLR 4、NF-κBp65的表达,实时定量PCR法(qRT-PCR)检测TLR 4mRNA的表达。结果免疫组化结果:NF-κBp65和TLR4在各组各只动物均可见阳性表达,其中肠炎清高剂量组及SASP组可显著下调NF-κBp65的表达,有统计学差异(P0.05)。TLR4在各给药组与模型组比较未见显著差异(P0.05)。PCR结果:与模型对照组相比,各给药组大鼠结肠组织TLR4表达均为阳性,但未见统计学差异(P0.05)。结论下调TLR4、NF-κBp65的表达,是肠炎清治疗IBD的作用机制之一。     

安胰颗粒对重症急性胰腺炎大鼠NF-κB活化及细胞因子的影响

目的:观察安胰颗粒对重症胰腺炎大鼠NF-κB的影响及其与细胞因子的关系,探讨其对SAP的治疗作用机制。方法:将120只大鼠分为正常组(N组)、模型组(SAP组)、安胰颗粒组(A组)和IL-10组(I组)共4组,各组又分为3小时、6小时、12小时三个亚组。予腹腔内注射6%的左旋精氨酸(L-Arginine)溶液建立SAP大鼠模型。I组予腹腔注射10000U人重组白介素-10(rhIL-10)预处理后诱导SAP。A组连续3天予安胰颗粒4g/kg灌胃后诱导SAP。观察胰腺组织病理学变化,免疫组化检测胰腺组织NF-κBp65的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清TNF-α、IL-1β水平。结果 (1)A组及I组病理学评分较SAP组明显下降(P0.05)。(2)SAP组胰腺组织NF-κBp65各时点表达显著高于N组(P0.01);A组NF-κBp65各时点表达较SAP组明显下降(P0.05),12小时时点表达明显低于I组(P0.05)。(3)与SAP组相比,A组和I组TNF-α及IL-1β浓度明显下降(P0.05或P0.01)。(4)胰腺组织NF-κB p65的表达量与血清TNF-α、IL-1β浓度呈明显正相关关系(P0.05或P0.01)。结论:安胰颗粒通过抑制NF-κB活化,减少细胞因子的产生和释放,进而改善胰腺损伤,减轻SAP的炎症反应,有效治疗SAP。     

生血合剂干预下免疫介导再障小鼠骨髓核因子κB表达变化

目的:进一步探讨获得性再生障碍性贫血(AA)发病机制及健脾补肾活血方生血合剂治疗AA的疗效机制。方法:以环孢素为对照,免疫介导AA小鼠为研究对象,采用定量PCR(Q-PCR)、免疫组织化学等方法分析生血合剂干预前后AA小鼠骨髓核因子κB(NF-κB)mRNA水平、蛋白表达及活性变化。结果:AA小鼠骨髓单个核细胞NF-κBmRNA水平未见明显改变,与正常对照比无显著差异(P>0.05);骨髓细胞NF-κB/p65蛋白表达较正常组增加,p-IκBα表达明显下降,生血合剂干预后NF-κB/p65蛋白表达减少,而p-IκBα表达明显提高;与之相比,环孢素作用后NF-κB/p65蛋白及p-IκBα均急剧下降。结论:NF-κB蛋白表达异常及活性改变可能参与了免疫介导AA小鼠模型的形成;生血合剂可能通过调节NF-κB的表达及活性发挥改善免疫介导AA小鼠造血功能的作用。     

清肾颗粒对慢性肾衰竭湿热证患者免疫炎症的干预作用

目的观察清肾颗粒对慢性肾衰竭湿热证患者免疫功能的影响,探讨其作用机制。方法将162例患者按随机数字表法分为试验组和对照组,每组81例,两组均采用西医基础治疗,试验组加服清肾颗粒,每次1袋(10g),每日3次口服,疗程均为12周。观察两组临床疗效,并采用流式细胞仪检测外周血CD4~+T细胞、CD8~+T细胞、Th17细胞含量和核因子-κB p65(nuclear factor-κB p65,NF-κB p65)的活性;采用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测血清IL-17、肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制物-1(matrix metalloproteinase inhibitor-1,TIMP-1)、Ⅳ型胶原(Ⅳcollagen,Col-Ⅳ)表达。结果最后完成156例(试验组77例,对照组79例);试验组临床疾病总有效率为80.52%(62/77),优于对照组的68.35%(54/79),差异有统计学意义(χ~2=54.849,P0.05);与本组治疗前比较,治疗后试验组CD4~+/CD8~+T细胞比值、Th17细胞含量、NF-κB p65活性及血清IL-17、TRAF6、TIMP-1、TIMP-1/MMP-9比值、Col-Ⅳ水平均降低(P0.05),对照组MMP-9水平降低(P0.05),TIMP-1/MMP-9比值升高(P0.05);与对照组治疗后比较,试验组CD4~+/CD8~+T细胞比值、Th17细胞含量和NF-κB p65活性降低更明显(P0.05),试验组血清IL-17、TRAF6、TIMP-1、TIMP-1/MMP-9比值、Col-Ⅳ水平降低(P0.05),MMP-9水平升高(P0.05)。结论清肾颗粒能够调节慢性肾衰竭湿热证患者机体的免疫功能紊乱及其介导的炎症反应,减轻肾脏纤维化进程。     

基于P2Y6受体探讨复方七芍降压片作用机制

目的:探究复方七芍降压片降压作用机制。方法:SHR随机分为高血压对照组、抑制剂组、复方七芍组、抑制剂复方七芍组、厄贝沙坦组、抑制剂厄贝沙坦组,另取Wistar-Kyoto正常大鼠为正常对照组,采用免疫组化检测血管壁P2Y6、P65蛋白表达。大鼠血管平滑肌细胞随机分为空白对照组、抑制剂组、炎症组、抑制剂炎症组、含药血清组、抑制剂含药血清组,qPCR检测P65、P2Y6、IκBα基因表达,Western blotting检测P65、P2Y6、IκBα、p-IκBα蛋白表达。结果:动物实验结果显示,MRS2578对P2Y6表达无影响,使P65表达降低;复方七芍降压片使P2Y6和P65表达降低,与MRS2578联用可使P65表达更低;厄贝沙坦使P2Y6和P65表达均降低,与MRS2578联用可使P65表达更低。细胞实验结果显示,与空白对照组比较,TNF-α使P2Y6、P65、p-IκBα表达升高(P0.05)。与TNF-α组比较,MRS2578对P2Y6无影响(P0.05),使P65、p-IκBα表达降低(P0.05);复方七芍降压片含药血清使P2Y6、P65、p-IκBα表达降低(P0.05),与MRS2578联用可使P65、p-IκBα表达更低(P0.05)。所有分组对IκBα表达无影响(P0.05)。结论:复方七芍降压片可能通过抑制P2Y6的表达发挥降压功能,而机制可能是P2Y6表达降低抑制了NFκB信号通路的激活。