猪皮胶原肽的抗氧化活性研究

目的:研究不同分子量猪皮胶原肽的抗氧化特性,筛选出抗氧化活性较强的组分。方法:采用仿生酶解技术酶解新鲜猪皮得到酶解原液,酶解原液经超滤得到M1 k Da、1 k DaM3 k Da、M3 k Da 3个不同分子量肽段,猪皮经水提取得到猪皮水提液,上述5组分分别冻干,得到冻干粉。对不同分子量范围的猪皮胶原肽5组分进行肽含量测定和抗氧化性研究,包括对DPPH·自由基、O2-·自由基及·OH自由基的清除实验。结果:各组分的肽含量分别为酶解原液组分64.62%、1~3 k Da组分62.63%、大于3 k Da组分62.13%、水提液组分60.57%、小于1 k Da组分59.75%。各组分清除DPPH·自由基能力顺序为:小于1 k Da组分1~3k Da组分酶解原液组分水提液组分大于3 k Da组分;各组分清除O2-·自由基能力顺序为:小于1 k Da组分酶解原液组分1~3 k Da组分大于3 k Da组分水提液组分;各组分清除·OH自由基能力顺序为:小于1 k Da组分1~3 k Da组分酶解原液组分大于3 k Da组分水提液组分。结论:不同分子量的猪皮胶原肽组分均有一定的抗氧化活性,其中M1 k Da组分具有较强的自由基清除能力。     

桑叶多糖超声-微波协同提取工艺优化及其抗氧化活性

目的优化桑叶多糖超声-微波协同提取工艺,并评价其抗氧化活性。方法在单因素试验基础上,以液料比、超声功率、微波功率、协同时间为影响因素,多糖得率为评价指标,响应面法优化提取工艺。考察多糖对DPPH自由基的清除作用。结果最佳条件为液料比25∶1,超声功率139 W,微波功率250 W,协同时间14 min,多糖得率为5.19%。多糖对DPPH自由基具有一定清除能力,IC_(50)为0.513 2 mg/mL。结论该方法稳定可靠,可用于超声-微波协同提取抗氧化活性较强的桑叶多糖。     

牛大力多糖酶法提取工艺优化及其抗氧化活性

目的:研究纤维素酶提取牛大力多糖成分的最佳工艺条件,并探讨其体外抗氧化活性。方法:以牛大力多糖得率为响应值,在单因素试验基础上,以酶解时间、液料比、酶解pH值、酶添加量为影响因素,采用响应面法建立数学模型,筛选最佳提取工艺条件;使用DPPH和·OH自由基清除能力试剂盒检测其抗氧化活性。结果:纤维素酶酶解法提取牛大力多糖最佳条件为:酶解时间:76.0 min,液料比:14∶1(mL/g),酶解pH值:5.4,酶添加量:9.5 mg/mL,酶解温度:45℃,在此条件下牛大力多糖得率为(4.43±0.67)%,与预测值4.48%的相对误差小于5%。液料比对多糖得率影响最显著,酶添加量、酶解时间次之,酶解pH值影响最小。牛大力多糖具有较强的抗氧化活性,对DPPH和·OH自由基清除的半数抑制浓度IC_(50)分别为0.974、1.894 mg/mL,但与维生素C比较,其抗氧化活性较弱。结论:优化的工艺条件方便可行,提取到的多糖具有一定的自由基清除能力。     

酶法提取桂花多糖工艺的优化及其抗氧化活性研究

目的:优化桂花多糖的酶法提取工艺,并评价桂花多糖的抗氧化活性。方法:以液料比、酶解温度、酶解时间、酶添加量为试验因素,以桂花多糖得率为考察指标,筛选酶法提取最佳工艺条件;采用自由基清除能力体系评价桂花多糖的抗氧化活性。结果:确定纤维素酶酶解桂花多糖的工艺条件为酶添加量12.0 mg/L、液料比12:1(m L/g)、酶解温度55℃、酶解时间60分钟,在此条件下桂花多糖得率为13.21%。桂花多糖具有较强的抗氧化活性,对DPPH和O-2·自由基的半数抑制浓度分别为0.812 g/L、1.364 g/L,但与维生素C比较,抗氧化活性较弱。结论:桂花多糖提取工艺方便可行,得到的多糖具有较强的抗氧化活性。     

响应面法优化金果榄多糖提取工艺及抗氧化活性研究

目的研究复合酶提取金果榄多糖的最佳条件,并探讨其体外抗氧化活性。方法复合酶种类及配比为纤维素酶∶果胶酶∶木瓜蛋白酶=1∶1∶1,液料比固定为20 mL/g,以金果榄多糖得率为响应值,在单因素试验基础上,以酶解pH值、酶解时间、复合酶添加量、酶解温度为自变量,采用响应面法建立数学模型,筛选最佳提取工艺;采用DPPH自由基、羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O_2~-·)清除能力体系评价金果榄多糖体外抗氧化活性。结果金果榄多糖最佳提取条件为:酶解pH值5.1,酶解时间56 min,复合酶添加量2.0%,酶解温度52℃。在此条件下多糖得率为14.03%,与理论值14.12%的相对误差5%。酶解温度对多糖得率影响最显著,酶解时间、酶解pH值次之,酶添加量影响最小。金果榄多糖对DPPH、·OH、O2_~-·清除的半数抑制浓度分别为1.358、0.927、1.096 mg/mL,与维生素C比较,抗氧化活性较弱。结论本研究优选的金果榄多糖复合酶法提取工艺方便可行,酶解得到的多糖具有较强的体外抗氧化活性。     

酶法提取滁菊多糖的工艺优化

目的:考察了果胶酶用量、酶解时间、酶解温度、提取温度、提取时间、醇沉浓度等因素对滁菊多糖提取效果的影响,确定了酶法提取滁菊中多糖的最佳工艺条件。方法:以滁菊多糖得率为指标通过正交实验设计研究多糖提取的最佳工艺条件。结果:在酶用量2%、酶解时间1.5 h、酶解温度50℃、提取时间2.5 h、提取温度100℃、醇沉浓度80%的条件下滁菊多糖的得率较高。结论:酶法提取滁菊多糖有较高的多糖得率,与水提醇沉法比较能明显提高多糖的得率。     

地黄多糖超声提取工艺优化及其抗氧化活性

目的优化地黄多糖超声提取工艺,并评价其抗氧化活性。方法在单因素试验基础上,以料液比、提取时间、提取温度、醇沉浓度为影响因素,多糖得率为评价指标,正交试验优化超声提取工艺。然后,考察分步醇沉(50%、70%、80%、90%乙醇,相应部位分别命名为RGPS50、RGPS70、RGPS80、RGPS90)对6个品种中多糖含有量的影响,以及多糖对DPPH自由基的清除作用。结果最佳条件为料液比1∶30,提取时间100 min,提取温度50℃,醇沉浓度90%,多糖得率7. 75%。各品种中多糖含有量依次为85-5星科金九沁怀北京3号怀丰。RGPS90中多糖含有量最高,抗氧化活性最弱; RGPS80中多糖含有量相对较低,抗氧化活性最强。结论该方法稳定可靠,可用于超声提取地黄多糖。不同品种、醇沉部位地黄中多糖含有量和抗氧化活性差异明显。     

不同分子量硫酸软骨素的制备和抗氧化活性探讨

目的:探讨不同提取工艺硫酸软骨素体外抗氧化活性。方法:分别采用木瓜蛋白酶、NaOH-胰酶提取高/低分子量硫酸软骨素(ChS),比较DEAE-52和DEAE-SepharoseFF分离纯化多糖的效果。结果:木瓜蛋白酶、NaOH-胰酶提取率为别为(29.51±0.89)和(21.23±1.65),DEAE-SepharoseFF分离纯化效果好于DEAE-52,DEAE-52纯化两种方式提取的粗多糖得到两种组分,而DEAE-SepharoseFF分离纯化木瓜蛋白酶提取的多糖得到4种组分,NaOH-胰酶提取的多糖得到3种组分,HPGPC显示木瓜蛋白酶、NaOH-胰酶提取的硫酸软骨素相对分子量分别为43569Da,25773Da,前者糖链分子量完整,其DPPH.、.OH和O2-.清除活性优于后者。结论:硫酸软骨素抗氧化活性可能与提取方式、分子量,分子构成及构型等相关。     

基于Plackett-Burman和响应面中心组合设计优选夏枯草多糖制备工艺及其活性研究

目的研究夏枯草多糖制备工艺,初步探讨其体外抗氧化、抗炎活性。方法利用超声波辅助酶法提取技术,以夏枯草多糖得率为指标,采用Plackett-Burman试验、爬坡试验和响应面分析法筛选最优提取组合。通过ABTS~+自由基、DPPH自由基清除能力及Fe~(2+)还原能力研究夏枯草多糖抗氧化能力;检测夏枯草多糖对脂多糖诱导的巨噬细胞RAW264.7模型炎症因子的影响。结果夏枯草多糖的最佳制备工艺为:纤维素酶浓度为5.0%,酶解时间为150min,酶解温度为60℃,液料比为45∶1。验证试验最优值为5.48%,与预测值(5.36%)非常接近。夏枯草多糖具有显著的DPPH自由基、ABTS~+自由基清除作用及Fe~(2+)还原能力;对脂多糖诱导的巨噬细胞RAW246.7炎症因子分泌具有一定的抑制作用。结论超声波辅助酶法提取夏枯草多糖得率较高,纯度较好;夏枯草多糖具有明显的抗氧化、抗炎活性。     

海蜇酶解多肽分离纯化及其抗氧化活性研究

目的 研究海蜇酶解多肽的抗氧化活性.方法 采用碱性蛋白酶酶解提取海蜇多肽,用超滤方法获得不同分子量的酶解液,从还原体系、羟自由基清除体系和DPPH自由基清除体系3方面,研究海蜇酶解液抗氧化肽的活性.结果 不同分子量的海蜇酶解物具有较强还原性,对羟自由基、DPPH自由基清除作用均较强,且抗氧化活性随着浓度的增加而明显增加.从分子量来看,小于3KDa组分抗氧化活性最强,当浓度为15 mg/ml时,其对羟自由基和DPPH自由基的清除率分别为62.27％和78.25％.结论 海蜇酶解物具有抗氧化活性,且小分子肽的抗氧化活性最强.     

超声波—生物酶协同萃取柿叶黄酮类化合物工艺研究

目的用超声波与生物酶酶解协同萃取法提取柿叶黄酮类化合物,并优化工艺参数。方法以柿叶总黄酮得率为指标,通过考察超声功率、超声时间、纤维素酶质量浓度、酶解时间、pH值、酶解温度和料液比7个单因素的影响,采用正交试验法确定优化提取工艺条件。结果最佳工艺条件为超声功率为60W,提取时间40 min,酶解质量浓度0.3 mg/mL,酶解时间2.0 h,pH值4.5,酶解温度50℃,溶剂量50 mL,总黄酮的得率为5.45%。结论此方法比酶解萃取法得率提高了2.56%,且操作简便,萃取条件温和。     

不同提取方法对玄参多糖单糖组分和抗氧化活性的影响

目的研究不同提取方法对玄参多糖的提取率、纯度、单糖组分和体外抗氧化活性的影响,为玄参多糖的提取方法及多糖活性差异提供必要的参考。方法传统水提法、稀碱浸渍法、微波辅助法、酶辅助提取法、超声辅助法被用来提取玄参多糖;采用苯酚硫酸法测定多糖的提取率和纯度;采用高效液相色谱法检测多糖完全水解后单糖的组成;DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基和总还原力为指标评价玄参多糖的体外抗氧化能力。结果酶辅助提取法获得多糖提取率为7.35±0.43,多糖纯度为54.43%±3.43%,其单糖质量摩尔比例中葡萄糖醛酸和半乳糖酸含量最高,分别为12.1%和8.8%;多糖体外抗氧化活性研究发现,酶辅助法获得多糖清除DPPH自由基能力和超氧阴离子自由基清除能力最高,玄参多糖对羟基自由基的清除不太稳定,其与多糖浓度并不成正相关,还原能力比较发现酶辅助法多糖还原能力最强。结论不同方法提取中酶辅助提取法获得多糖的纯度最高,体外抗氧化活性最强,推测其抗氧化活性和单糖组分比例有关。     

北苍术多糖的酶法辅助超声提取工艺的优化及其体外抗肿瘤活性研究

目的通过生物酶解技术优化北苍术多糖的酶辅助超声提取方法,并考察其体外抗肿瘤活性。方法选用纤维素酶和果胶酶水解北苍术药材,酶解后采用超声法提取北苍术药材中多糖。以多糖得率为指标,在单因素试验的基础上采用4个因素（酶用量、酶解时间、酶解pH值、酶解温度）3个水平L9（34）正交设计法对酶解条件进行优选,并选用苯酚–浓硫酸法测定多糖,采用MTS、台盼蓝法对北苍术粗多糖体外抗肿瘤活性进行初探。结果最佳酶解条件为酶用量为药材1.2%、在60℃、pH 5条件下酶解50 min,再以超声提取40 min,北苍术多糖的得率为32.29%,所提粗多糖对HeLa细胞增殖的抑制率为64.42%。结论酶解辅助超声提取北苍术中多糖简便易行,可以提高多糖得率,多糖活性较好。     

发酵全蝎粉酶解前后水提超滤液蛋白含量比较

目的 :比较发酵及发酵后酶解全蝎粉水提液超滤后各部位蛋白含量。方法 :利用白僵菌采用传统发酵方法对全蝎粉进行发酵处理,并利用胃蛋白酶和胰蛋白酶对发酵全蝎粉进行酶解,酶解与未酶解水提液经超滤后用改良Lowry法测定蛋白质含量。结果:酶解后发酵全蝎粉水提液中分子量8 k Da蛋白质浓度较未酶解水提液中分子量8 k Da蛋白质浓度明显提高,且所占总蛋白比例也明显提高,分子量8 k Da蛋白质浓度也有提高,但所占总蛋白比例降低,酶解后发酵全蝎粉蛋白质总浓度较未酶解发酵全蝎粉总浓度提高。     

青蒿渣中总多糖提取工艺及其抗氧化活性

目的:优选青蒿渣中总多糖的提取工艺参数并探究其抗氧化能力。方法:以液料比、提取温度、提取时间为自变量,总多糖得率为因变量,利用响应面法优选青蒿渣总多糖的超声提取工艺。通过清除1,1-二苯基-2-苦基肼自由基、清除羟自由基及油脂抗氧化试验,与抗坏血酸的抗氧化能力进行比较,评价青蒿渣总多糖的抗氧化能力。结果:最佳提取工艺条件为液料比30∶1,提取时间30 min,提取温度70℃;青蒿渣总多糖提取率1.773 3%。青蒿渣总多糖的抗氧化能力随质量浓度的增大而增强,其清除羟自由基的能力较抗坏血酸强,两者的半抑制浓度分别为(164.26±0.84),(214.89±0.18)mg·L-1。结论:优选的提取工艺稳定可靠,青蒿渣总多糖具有一定抗氧化能力,为青蒿资源的综合利用提供参考。     

石榴皮多糖的不同制备工艺及其生物活性比较

目的通过正交试验优化不同方法制备石榴皮多糖的工艺,并研究石榴皮多糖的体外生物活性,为石榴皮药材资源开发提供依据。方法分别以热水浸提法、超声波辅助水浸法和复合酶法提取石榴皮多糖,利用正交试验法优化石榴皮多糖提取工艺,采用不同的体外抗氧化和抑菌实验探索石榴皮多糖的生物活性。结果石榴皮多糖的最适提取条件分别为:料液比1∶35,提取温度为95℃,时间为1h,超声时间60min,超声温度55℃,料液比为1∶25,超声波功率140W;料液比1∶55、酶解温度60℃、酶解时间2h,复合酶浓度为1%,在此最佳条件下石榴皮多糖得率分别8.6%、8.2%和11.9%。其中热水浸提和超声波辅助提取的多糖都具有抑菌性,而且对大肠杆菌和谷草芽孢杆菌的抑菌性强于酵母菌。结论优化的石榴皮多糖提取工艺中,复合酶法制备的石榴皮多糖得率最高,三种不同方法制备的石榴皮多糖具有很强的超氧阴离子自由基和羟基自由基清除活性,适度的抗菌活性。     

半夏多糖提取工艺优化及其抗氧作用研究

目的:通过响应面法优化复合酶提取半夏多糖的工艺,并评价其抗氧化活性。方法:以半夏多糖得率为响应值,以液料比、酶解温度、酶解时间、复合酶(木瓜蛋白酶、纤维素酶、果胶酶的质量比为2∶2∶1)添加量为试验因素,采用响应面法建立数学模型,优化提取条件;体外抗氧化活性考察半夏多糖对DPPH和O_2~-·自由基的清除能力。结果:通过二次回归模型响应面分析,酶解温度、时间、复合酶添加量、液料比4因素对半夏多糖得率的影响依次减弱;酶解温度与时间优化为54℃和57分钟,复合酶添加量为7.2 mg/mL,液料比例为27∶1 mL/g,在此最佳工艺条件下半夏多糖得率为27.98%,模型方程理论预测值为28.32%,两者相对误差小于5%。半夏多糖具有较强的抗氧化活性,对DPPH和O_2~-·自由基的半数抑制浓度分别为0.987 mg/m L、1.309mg/m L,但与维生素C比较,抗氧化活性较弱。结论:采用响应面法优化得到了半夏多糖的最佳复合酶提取条件,且半夏多糖有一定的体外抗氧化作用。     

复合酶提取金樱子根多糖工艺的优化及其抗氧化活性

目的优化复合酶提取金樱子根多糖工艺,并评价其抗氧化活性。方法在单因素试验基础上,以酶添加量、酶解pH、酶解时间、液料比为影响因素,多糖得率为评价指标,响应面法优化提取工艺。再测定多糖对DPPH、·OH、O-2·自由基的清除作用。结果最佳条件为酶添加量2. 1%,酶解pH 4. 4,酶解时间49 min,液料比16∶1,酶解温度45℃,多糖得率141. 59 mg/g。3. 0 mg/m L多糖对DPPH、·OH、O-2·自由基的清除率分别为87. 81%、86. 14%、86. 37%,IC50分别为0. 935、1. 274、1. 521 mg/m L。结论该方法简便可行,可用于复合酶提取抗氧化活性较强的金樱子根多糖。     

响应面优化酶法提取石榴皮多糖及其抗氧化活性研究

目的 采用响应面法优化石榴皮多糖的酶法提取工艺,并对石榴皮多糖体外抗氧化活性进行研究,为药物制剂和功能性食品寻找新的生物成分。方法 采用RSM Box-Behnken设计法,考察酶解时间、液料比、加酶量对石榴皮多糖提取率的影响。用酶标仪测定DPPH自由基清除作用、羟自由基清除作用、超氧阴离子自由基清除活性和还原力测定。结果 最佳提取条件为：酶解温度为55℃,pH为5,酶解时间为88 min,液料比为22:1mL/g,加酶量为0.93%。在最佳提取条件下,石榴皮多糖得率为（22.31±0.07）%,与Box-Behnken设计模型的预测值22.35%很好地吻合。石榴皮多糖对DPPH（1,1-二苯基-2-吡啶基肼）自由基清除、羟自由基清除、超氧阴离子自由基清除和还原能力有明显的抗氧化作用。结论 建议采用优化的酶解辅助方法提取石榴皮多糖,该法制得的石榴皮多糖可作为一种良好的抗氧化剂。     

红芪多糖的复合酶联合超声提取工艺、理化特性及抗氧化活性的研究

利用复合酶联合超声波提取技术(MC),以红芪多糖得率和含量为综合指标,通过单因素和正交试验,筛选最优提取组合,并分析了复合酶联合超声提取多糖(HPS-MC)的不同组分和热水浸提多糖(HPS-R)的物理化学特性及体外抗氧化活性。结果表明,复合酶配比对红芪多糖得率和含量影响均达到显著效应,而超声功率能显著提高红芪多糖含量;最佳工艺参数为复合酶配比1∶1、超声功率105 W、超声时间60 min、酶解p H 5,多糖得率和质量分数分别为(14.01±0.64)%,(92.45±1.47)%;与HPS-R相比,HPS-MC的相对分子质量、绝对黏度和蛋白质含量均降低,而糖醛酸含量增加;抗氧化体系中,多糖质量浓度在1~7 g·L~(-1)时,HPS-MC比HPS-R的抗氧化活性高,且相对分子质量最低的HPS-MC(80%)随试验浓度的增大呈显著量效关系。综上所述,MC是一种简单方便、经济环保的提取技术,该法提取的HPS具有明显的抗氧化活性。