自拟黄芪通络强心汤对冠心病血瘀证再灌注损伤模型大鼠实验研究

目的:分析自拟黄芪通络强心汤对冠心病血瘀证再灌注损伤模型大鼠心肌保护作用及相关机制。方法:选取SPF级Wistar雄性大鼠60只,随机数字表法将大鼠分成4组,分别是模型组、正常组、阳性对照组与自拟黄芪通络强心汤组,每组各15只,除正常组外,其他3组大鼠制备心肌缺血血瘀证再灌注损伤模型,成功造模后阳性对照组大鼠灌胃0.10g/kg的复发丹参滴丸,自拟黄芪通络强心汤组灌胃6.8g/kg的自拟黄芪通络强心汤药液,模型组和正常组大鼠灌胃等剂量生理盐水,1次/d,持续给药14d。观察各组大鼠心律失常出现情况,检测心脏组织缝隙连接蛋白(Cx43)、血管紧张素Ⅱ1型受体(AT-1R)及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ) mRNA相对表达量和心肌组织Cx43、AT-1R蛋白表达状况。结果:和模型组相比,阳性对照组、自拟黄芪通络强心汤组大鼠心律率降低,差异有统计学意义(P0.05);和正常组相比,模型组大鼠心脏组织内AT-1R、AngⅡmRNA相对表达量升高,Cx43mRNA相对表达量降低;和模型组相比,阳性对照组、自拟黄芪通络强心汤组大鼠心脏组织内AT-1R、AngⅡmRNA相对表达量降低,Cx43mRNA相对表达量升高,差异均有统计学意义(P0.05);和正常组相比,模型组大鼠心肌组织内Cx43蛋白表达升高,AT-1R蛋白表达降低;和模型组相比,阳性对照组、自拟黄芪通络强心汤组大鼠心肌组织内Cx43蛋白表达降低,AT-1R蛋白表达升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论:自拟黄芪通络强心汤可经过提高大鼠心肌细胞内Cx43含量,降低AT-1R、AngⅡ含量,降低心律失常发生率,起到保护心肌作用。     

复心合剂对心衰大鼠信号通路Raf-MEK-ERK的影响

目的:初步探索复心合剂对信号通路Raf-MEK-ERK的影响。方法:75只Wistar雄性大鼠,随机分为5组,对照组、卡托普利组、复心合剂低剂量组、复心合剂高剂量组均为15只。实验过程中阿霉素干预4周后测定大鼠心功能;6周后应用Western blot法检测大鼠心肌组织中Raf、MEK、ERK蛋白表达情况。结果:(1)与正常对照组比较,模型组大鼠BNP值显著升高(P0.01),心衰模型成功建立。(2)与正常对照组相比,模型组大鼠心肌组织Raf水平显著升高(P0.01),复心合剂高剂量组、卡托普利组大鼠心肌组织Raf水平显著降低(P0.01),与卡托普利组相比,复心汤高剂量组大鼠心肌组织Raf无统计学意义(P0.05)。(3)与正常对照组相比,模型组大鼠心肌组织MEK水平显著升高(P0.01),复心合剂高剂量组、卡托普利组大鼠心肌组织MEK水平显著降低(P0.01)。(4)与正常对照组相比,模型组大鼠心肌ERK蛋白表达明显升高(P0.01),卡托普利组及复心合剂高剂量组ERK蛋白表达无显著差异性(P0.05),与模型组相比,复心合剂高剂量组、卡托普利组大鼠心肌组织ERK水平显著降低(P0.01)。结论:复心合剂对心衰大鼠信号通路Raf-MEK-ERK的蛋白激活具有一定的抑制作用,延缓心衰进程。     

颗粒剂四君子膏对脾气虚证模型大鼠心功能的影响＊

目的 探讨颗粒剂四君子膏对脾气虚证模型大鼠心功能的影响。方法 将60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、四君子汤组、颗粒剂四君子膏高组、颗粒剂四君子膏中组及颗粒剂四君子膏低组。采用隔日饮食加力竭游泳及大黄水灌胃法制备脾气虚证大鼠模型。超声诊断仪测定大鼠的心功能变化，ELISA法测定大鼠血清与心肌组织中脑钠肽（BNP）、环磷酸腺苷（cAMP）的含量，Western blot法及免疫组化法测定心肌组织中BNP的蛋白表达情况。结果 脾气虚证模型大鼠心功能下降，血清及心肌组织中BNP、cAMP的含量增多，心肌组织中BNP蛋白表达增加（P < 0.05），给予四君子汤及不同浓度颗粒剂四君子膏后大鼠脾气虚症状及心功能情况得到改善，体内BNP及cAMP水平均有所下降，BNP蛋白表达下调（P < 0.05）。结论 颗粒剂四君子膏的功效较为理想，可以改善脾气虚证大鼠的心功能，颗粒剂膏亦可运用于临床。     

脾气虚证大鼠与鱼藤酮损伤大鼠之间下丘脑cAMP/PKA信号通路变化的研究

目的:探讨脾气虚证大鼠与鱼藤酮损伤大鼠之间下丘脑c AMP/PKA信号通路变化。方法:30只SPF级雄性大鼠,随机分为正常组,脾气虚组,鱼藤酮高剂量组(2.0 m L/kg),中剂量组(1.5 m L/kg),低剂量组(1.0 m L/kg),每组6只。采用ELISA法检测各组大鼠下丘脑组织c AMP活性,Real Time PCR法和Westernblot法检测蛋白激酶(cyclic-AMP-dependent protein kinase,PKA)、糖原磷酸化酶(glyeogenphospholase,Gp)、磷酸化酶激酶(phosphorylase kinase,PHK)的mRNA及其表达量。结果:与正常组大鼠比较,脾气虚证组及鱼藤酮3组大鼠的下丘脑组织c AMP活性及PKA、Gp、PHK mRNA和蛋白的表达均有不同程度的减弱,鱼藤酮中剂量组的结果与脾气虚证组最为相似。结论:脾气虚证大鼠与鱼藤酮损伤大鼠之间下丘脑c AMP/PKA信号通路的变化存在相关性,其中c AMP-PKA信号通路可能参与调控。     

电针双侧“足三里”穴对脾气虚模型大鼠小肠及下丘脑组织胃促生长素和血管活性肠肽表达影响的研究

目的:观察电针双侧"足三里"穴对实验性脾气虚大鼠小肠及下丘脑组织胃促生长素(Ghrelin)和血管活性肠肽(VIP)表达的影响,探讨对脾气虚证大鼠的治疗机制。方法:选用健康雄性SD大鼠40只,随机分为4组。其中正常对照组10只,气虚模型组10只,针刺治疗组10只,非经非穴组10只。除正常对照组外,其余3组均采用游泳力竭和饮食不节的复合因素建立脾气虚证模型。电针双侧"足三里"穴治疗6 d后,用10%水合氯醛腹腔麻醉(3 mL/kg体质量)。开腹,取小肠、下丘脑组织,液氮浸泡后冻存于-80℃冰箱待用;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠小肠组织Ghrelin和VIP蛋白含量变化,荧光定量PCR法检测大鼠小肠及下丘脑组织Ghrelin、VIP及其受体mRNA表达的变化。结果:与正常对照组比较,气虚模型组、非经非穴组大鼠下丘脑和小肠组织中Ghrelin及其受体mRNA、VIP及其受体mRNA、Ghrelin和VIP蛋白表达均明显降低(P0.05);与气虚模型组相比,针刺治疗组下丘脑和小肠组织Ghrelin及其受体mRNA、VIP及其受体mRNA、Ghrelin和VIP蛋白表达明显上调(P0.05),非经非穴组未见显著性差异(P0.05)。结论:针刺"足三里"穴通过调节脾气虚大鼠脑肠肽Ghrelin及VIP的表达水平,从能量代谢角度发挥对脾气虚大鼠的调控作用。     

电针“足三里”穴对脾气虚模型大鼠肌肉组织COX4表达的影响

目的:观察电针双侧"足三里"穴对脾气虚模型大鼠肌肉组织COX4表达的影响。方法:将32只SD雄性大鼠随机分为空白组、脾气虚组、足三里组、非经非穴组。除空白组外,其余3组均采用劳倦过度和不规则饮食复合法建立脾气虚证大鼠模型。造模成功后,足三里组给予电针双侧"足三里"穴治疗,非经非穴组予以电针双侧非经非穴点治疗,每日1次,每次20 min,共治疗7 d。采用荧光定量PCR法检测大鼠心肌、胃肌和骨骼肌组织COX4的mRNA表达水平;采用Western Blot检测大鼠心肌、胃肌和骨骼肌组织COX4蛋白表达水平。结果:与空白组相比,脾气虚组和非经非穴组大鼠心肌、胃肌和骨骼肌组织COX4的mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P0.05);与模型组相比,足三里组大鼠心肌、胃肌和骨骼肌组织COX4的mRNA和蛋白表达水平有所升高(P0.05),非经非穴组未见显著性差异(P0.05)。结论:电针"足三里"穴可以上调脾气虚大鼠心肌、胃肌和骨骼肌组织COX4的基因和蛋白的表达水平,参与线粒体能量代谢而发挥健脾益气作用。     

纳葛胶囊对冠心病心肌缺血大鼠心肌组织MMP-9、IL-6蛋白表达的影响

目的:通过观察纳葛胶囊对冠心病心肌缺血大鼠心肌组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、白细胞介素-6(IL-6)表达的影响探讨该药物治疗冠心病的作用机制。方法:Wistar大鼠90只,随机分为正常对照组、模型组、心通口服液阳性对照组组及纳葛胶囊高、中、低剂量组,每组15只;采用高脂饲料联合异丙肾上腺素注射的方法制备冠心病心肌缺血大鼠模型,运用免疫组织化学技术检测大鼠心肌组织MMP-9、IL-6的蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠心肌组织MMP-9、IL-6蛋白表达显著增强,差异具有统计学意义(P0.01);与模型组比较,纳葛胶囊各剂量组及心通口服液组大鼠心肌组织MMP-9、IL-6蛋白表达水平明显降低,差异均具有统计学意义(P0.05,P0.01);与心通口服液组比较,纳葛胶囊高剂量组心肌组织MMP-9表达减弱,有极显著差异(P0.01),中剂量组表达降低,有显著差异(P0.05),低剂量组表达差异不明显;与心通口服液组比较,纳葛胶囊高剂量组心肌组织IL-6表达降低,有极显著差异(P0.01),纳葛胶囊中、低剂量组IL-6含量降低,有显著差异(P0.05)。结论:降低MMP-9和IL-6的表达水平、调节内皮损伤所介导的炎症反应是纳葛胶囊治疗冠心病的部分作用机制。     

心衰宁合剂对慢性心力衰竭大鼠心肌AMPK和PPARα的影响

目的探讨心衰宁合剂对慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)大鼠心肌组织腺苷酸活化蛋白激酶(adenylate-activated protein kinase,AMPK)及过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator-activated receptorα,PPARα)表达的影响。方法将SD大鼠随机分为正常组,模型组,卡托普利组(10 mg·kg^-1),心衰宁合剂高、中、低剂量组(62.4、31.2、15.6 g·kg^-1)。正常组注射等量生理盐水,余组采用阿霉素(2.5 mg·kg^-1)腹腔注射制备慢性心力衰竭大鼠模型,每周1次。造模6周结束后,正常组及模型组给予生理盐水,余各组分别给予药物干预,干预4周。干预结束后,以HE染色观察心肌细胞形态学变化;Masson染色明确心肌纤维化程度;ELISA法检测大鼠血清B型钠尿肽(BNP)水平;比色法检测大鼠血清和心肌游离脂肪酸(FFA)水平;qRT-PCR、Western Blot法检测大鼠心肌AMPK、PPARα基因及蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组血清BNP水平明显升高(P<0.01),血清和心肌FFA水平明显升高(P<0.01),AMPK基因及蛋白表达明显升高(P<0.01),PPARα基因及蛋白表达明显降低(P<0.01);与模型组比较,心衰宁合剂各剂量组均降低血清BNP水平(P<0.01)及血清和心肌FFA水平(P<0.01,P<0.05),心衰宁合剂中、高剂量组可降低AMPK基因及蛋白表达水平(P<0.01,P<0.05),还可升高PPARα基因及蛋白表达水平(P<0.01)。结论心衰宁合剂可以减轻心力衰竭大鼠BNP含量,降低心衰大鼠心肌能量代谢底物FFA水平,其机制可能与调节PPARα、AMPK的蛋白与基因表达水平有关。     

电针“足三里”穴对脾气虚大鼠心肌PGC-1α/NRFs/TFAM信号通路表达的影响

目的:观察电针"足三里"穴对脾气虚模型大鼠心肌PGC-1α/NRFs/TFAM信号通路相关分子表达的影响。方法:将32只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、针刺组、非经非穴组。除正常组外,其余3组均采用劳倦过度和不规则饮食复合法建立脾气虚证大鼠模型。造模成功后,针刺组给予电针双侧"足三里"穴治疗,非经非穴组予以电针双侧非经非穴点治疗,每日1次,每次20 min,共治疗7 d。采用荧光定量PCR法检测大鼠心肌组织PGC-1α、NRF1、NRF2、TFAM的mRNA表达水平。采用Western Blot检测大鼠心肌组织PGC-1α及NRF1的蛋白表达水平。结果:与正常组相比,模型组和非经非穴组大鼠心肌组织PGC-1α、NRF1、NRF2、TFAM的mRNA表达以及PGC-1α和NRF1的蛋白表达水平均明显降低(P0.05);与模型组相比,针刺组大鼠心肌组织PGC-1α、NRF1、NRF2、TFAM的mRNA表达以及PGC-1α和NRF1的蛋白表达水平有所升高(P0.05),非经非穴组未见显著性差异(P0.5)。结论:电针"足三里"穴可以上调脾气虚大鼠心肌组织PGC-1α、NRF1、NRF2、TFAM基因以及PGC-1α和NRF1蛋白的表达水平,可以通过促进线粒体生物合成,提高线粒体呼吸功能,进而调控能量代谢而发挥健脾益气作用。     

金匮肾气丸对肾阳虚证COPD大鼠瘦素水平影响的实验研究

目的根据肾阳虚COPD大鼠发病机制,研究瘦素与COPD肾阳虚证的发生相关性,论证金匮肾气丸治疗COPD肾阳虚证治疗作用。方法采用运用烟雾联合脂多糖及注射氢化可的松进行肾阳虚证COPD大鼠造模。将大鼠分为空白组,模型组,中药中剂量组、高剂量组。中药高、中剂量组灌服金匮肾气丸混悬液。光镜下检测大鼠肺叶肺组织病理变化;血清瘦素表达水平;RT-PCR法检测脂肪组织瘦素受体mRNA表达及Western Blot法检测肺组织瘦素受体蛋白表达。结果模型组大鼠肺组织可见大量淋巴细胞、浆细胞、中性粒细胞等炎症细胞浸润,支气管柱状上皮细胞剥脱,纤毛倒伏、粘连,支气管壁,部分肺泡壁破坏、融合,肺大泡架构消失;与模型组比较,金贵肾气丸中、高剂量组大鼠肺组织病理损伤有所减轻。血清瘦素水平,模型组大鼠血清瘦素含量升高(P0.01),给予金贵肾气丸高、中剂量治疗后血清瘦素含量有明显降中(P0.01)。Western印迹检测肺组织瘦素受体蛋白表达,模型组大鼠平均灰度值显著降中(P0.01),金贵肾气丸干预后,高剂量组平均灰度值显著升高(P0.05)。大鼠肺瘦素受体mRNA含量检测,模型组大鼠肺瘦素受体mRNA表达明显增高(P0.01),干预组中瘦素受体mRNA表达强度明显降中(P0.05)。结论瘦素水平与COPD肾阳虚证的发生负相关;采用金匮肾气丸,温补肾阳,对实验模型大鼠进行干预血清瘦素、脂肪组织瘦素受体蛋白含量均有所下降,对瘦素蛋白进一步的研究将为COPD的发病机制阐明和防治提供新研究方向。     

姜黄素对糖尿病大鼠心肌纤维化的影响及机制研究

目的研究姜黄素对糖尿病大鼠心肌纤维化的影响及机制。方法将35只雄性SD大鼠以1%链脲佐菌素(STZ)溶液45 mg/kg一次性尾静脉注射制备糖尿病模型后,随机分为模型组、姜黄素低剂量组及姜黄素高剂量组,每组各10只,另取10只大鼠为正常对照组。姜黄素低剂量组及姜黄素高剂量组大鼠分别予姜黄素溶液15、30 mg/(kg·d)腹腔注射,正常对照组及模型组大鼠予等容积6%乙醇和6%聚乙二醇混合液腹腔注射,连续用药8周。最后一次给药后采集各组大鼠心肌组织标本,以实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测miR-130b表达,Western-blot法检测TGF-β1、Ⅰ型胶原蛋白表达。结果与正常对照组相比,模型组大鼠心肌miR-130b表达明显降低(P0.05),TGF-β1蛋白及Ⅰ型胶原蛋白表达水平明显升高(P0.05);与模型组相比,姜黄素低、高剂量组大鼠心肌miR-130b表达明显升高(P0.05),TGF-β1蛋白及Ⅰ型胶原蛋白表达水平降低(P0.05),且姜黄素高剂量组与姜黄素低剂量组比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论姜黄素可通过miR-130b介导,抑制TGF-β1表达,对糖尿病大鼠心肌有保护作用。     

电针“足三里”穴对脾气虚大鼠小肽转运体表达的影响

目的:探讨电针"足三里"穴对脾气虚模型大鼠小肠黏膜组织内的小肽转运体(PepT1)的蛋白及基因表达的影响。方法:将40只SD雄性大鼠按照随机数字表法随机分为正常组、脾气虚组、足三里组、非经非穴组,每组10只。大鼠均统一饲养于SPF级动物实验中心。正常组给予正常饮食,其余3组均采用不规则饮食和劳倦过度复合法建立脾气虚证大鼠模型。造模成功之后,对足三里组进行电针"足三里"穴、非经非穴组大鼠电针非经非穴点干预处理7 d。观察各组大鼠免疫器官胸腺指数及脾脏指数的变化;观测各组大鼠小肠推进率;采用HE染色法观察各组大鼠小肠黏膜组织形态的变化;采用蛋白质免疫印迹法检测大鼠小肠黏膜组织内的PepT1的蛋白含量变化;采用荧光定量PCR法检测大鼠小肠黏膜组织的PepT1的mRNA表达水平。结果:脾虚组大鼠的胸腺和脾脏质量以及小肠推进率都明显低于正常组,足三里组相比于脾虚组有所升高;HE染色结果示:与正常组相比,脾气虚组大鼠小肠黏膜组织有萎缩、糜烂等改变,足三里组的组织形态较脾气虚组大鼠相比有所恢复;WB及PCR结果示:与正常组相比,脾气虚组大鼠小肠黏膜组织内的PepT1蛋白和基因表达水平均明显低于正常组(P0.05);与脾气虚组相比,足三里组大鼠小肠黏膜组织内的PepT1蛋白和基因表达水平有所升高(P0.05),非经非穴组未见显著性差异(P0.05)。结论:电针"足三里"穴可以调控脾气虚大鼠小肠黏膜组织内的PepT1蛋白及基因的异常表达,参与小肠对蛋白质的吸收作用,进而改善脾气虚证。     

参桂保心浓煎剂对心衰大鼠NT-pro BNP及Caspase-3的影响

目的:探讨参桂保心浓煎剂对异丙肾上腺素(Isoproterenol,ISO)诱导左心室功能不全大鼠血清N-端脑钠肽前体(NT-pro BNP)和心肌半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的影响。方法:将50只雄性Wistar大鼠随机分模型组,低、中、高剂量组和空白组,每组10只。模型组予致心力衰竭剂量(85 mg/kg)ISO后给予等容量的生理盐水,空白组不予任何干预,余各组ISO给药后予低、中、高剂量的参桂保心浓煎剂治疗,8周后采用ELISA法测NT-pro BNP含量,HE染色观察心肌组织形态学,免疫组化检测Caspase-3蛋白表达。结果:1)与模型组相比,各药物组均可降低NT-pro BNP水平(P0.01),但仍高于空白组(P0.01),与中剂量相比,低剂量组无明显差别(P0.05),高剂量组显著下降(P0.01)。2)与模型组相比,各药物组均能抑制Caspase-3表达(P0.01),但仍高于空白组(P0.01),其抑制作用高剂量组强于中剂量组(P0.01),中剂量组强于低剂量组(P0.05)。结论:参桂保心浓煎剂能降低ISO诱导的左心室功能不全大鼠NT-pro BNP水平,改善心功能,可能机制是抑制Caspase-3过度表达,阻断细胞凋亡。     

温阳振衰颗粒对慢性心衰模型大鼠心肌CREB表达的影响

目的观察温阳振衰颗粒(附子、干姜、甘草等)对慢性心衰模型大鼠心肌反应元件结合蛋白(CREB)表达的影响。方法健康SD大鼠60只,随机抽取10只为正常对照组,其余50只大鼠建立慢性心衰模型后随机分为模型对照组,温阳振衰颗粒低、中、高剂量组和阳性对照组。各组连续用药干预4周。检测实验末各组大鼠心肌p-CREB、CREB mRNA及蛋白的表达水平。结果与正常对照组相比,药物干预各组p-CREB表达明显上调,差异具有统计学意义(P0.05);与模型组比较,温阳振衰颗粒中、高剂量组较其余各组上调相对缓慢(P0.05)。各组大鼠心肌CREB蛋白及mRNA的表达无明显差异(P0.05)。结论温阳振衰颗粒能抑制CREB蛋白的过度磷酸化,这可能是其治疗慢性心衰的重要机制之一。     

补中益气汤治疗脾气虚证大鼠肌无力的机制研究

目的:研究脾气虚证大鼠体重、肛温、耐寒冷存活百分率、游泳时间和骨骼肌磷酸化肌球蛋白轻链表达变化,明确补中益气汤治疗脾气虚证大鼠肌无力的可能机制。方法:清洁级Wistar大鼠,采用饮食不节和劳倦过度结合法建立脾气虚证模型,单日喂食甘蓝15~20 g/只,双日胃饲猪油脂3 m L/只,共15 d。造模成功后,实验分为正常组、脾气虚组和补中益气汤组(高、中、低3个剂量组,剂量分别为7.10,3.55,1.78 g·kg-1),灌胃给药10 d。分别检测大鼠体重、肛温、耐寒冷存活率、游泳时间,Western blot检测骨骼肌中磷酸化肌球蛋白轻链的表达,比较实验结束前后数值变化。结果:与正常组相比,脾气虚组大鼠的体重、肛温、耐寒冷存活率、游泳时间及磷酸化肌球蛋白轻链表达均显著下降(P0.05);与脾气虚组相比,中、高剂量补中益气汤组的体重、肛温、耐寒冷存活率、游泳时间及磷酸化肌球蛋白轻链表达均显著上升(P0.05)。结论:补中益气汤使磷酸化肌球蛋白轻链均表达升高可能是其治疗脾气虚大鼠肌无力的一个重要机制。     

脾气虚证和脾不统血证模型大鼠脾主肌肉实质的探讨

目的研究脾气虚证和脾不统血证模型大鼠骨骼肌组织线粒体能量代谢变化,探讨中医脾主肌肉理论的内涵实质。方法将48只SD雄性大鼠按随机数表法分为正常对照组、低分子肝素钠组、脾气虚组和脾不统血组,每组12只。复制脾气虚证和脾不统血证大鼠模型,测定各组大鼠骨骼肌ATP含量、线粒体呼吸链复合物(ComplexⅠ、ComplexⅡ、ComplexⅢ、ComplexⅣ)活性、柠檬酸合酶(CS)活性、mt DNA拷贝数、COXⅣ蛋白和Cyt-C蛋白及其mRNA表达量变化。结果与正常对照组比较,中期和末期脾气虚组和脾不统血组大鼠骨骼肌的ATP含量、线粒体复合物活性、CS活性、mt DNA拷贝数、COXⅣ蛋白及其mRNA表达量均降低,Cyt-C蛋白及其mRNA表达量均升高(P 0. 05,P 0. 01);与脾气虚组比较,中期和末期脾不统血组大鼠骨骼肌ATP含量、CS活性均降低(均P 0. 05);中期脾不统血组大鼠骨骼肌ComplexⅠ、ComplexⅡ、ComplexⅢ活性降低,末期脾不统血组大鼠骨骼肌ComplexⅠ、ComplexⅢ、ComplexⅣ活性降低(P 0. 05,P 0. 01);中期脾不统血组大鼠骨骼肌mt DNA拷贝数升高(P 0. 05);脾不统血组大鼠骨骼肌COXⅣ、Cyt-C蛋白及其mRNA表达量比较,差异无统计学意义(均P 0. 05)。结论脾气虚证大鼠和脾不统血证大鼠骨骼肌线粒体能量代谢障碍存在多方面的影响变化,且脾气虚证发展成为脾不统血证的过程中,大鼠骨骼肌能量代谢障碍逐渐加重。     

脾气虚大鼠小肠组织钙调蛋白信号通路中钙调蛋白、钙调素依赖蛋白激酶Ⅱ基因表达规律的研究

目的：观察脾气虚大鼠小肠组织钙调蛋白信号通路中钙调蛋白（CaM）、钙调素依赖蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）基因表达规律,揭示脾气虚证发生的内在机制。方法 ：将48只大鼠随机分为正常对照组和脾气虚7d、14d、21d组4组,每组12只。除正常对照组外,其余各组采用复合法（苦寒破气法、力竭法及饥饱失常法）建立脾气虚证大鼠模型,观测各组大鼠一般生存状态、脾虚证宏观证候积分、平均每日体质量增加量、负重游泳耐力时间和基础肛温;同时,采用实时荧光定量PCR技术检测小肠组织钙调蛋白信号通路中CaM、CaMKⅡ基因表达水平的变化。结果：与正常对照组对比,脾气虚模型7d、14d、21d组大鼠平均每日体质量增加量、负重游泳耐力和基础肛温降低,脾虚证宏观证候积分升高,小肠组织CaM、CaMKⅡ基因相对表达量显著升高,且以脾气虚模型21 d组变化显著（P〈0.05）。结论：脾气虚大鼠小肠组织钙调蛋白信号通路中CaM、CaMKⅡ基因表达水平异常增高。     

经前期综合征肝气逆证模型大鼠脑雌激素α受体蛋白水平的表达

目的研究经前期综合征(PMS)肝气逆证大鼠不同脑区雌激素α受体蛋白水平的表达差异,探讨PMS肝气逆证的发病机制。方法以电刺激法复制PMS肝气逆证大鼠模型,采用免疫荧光标记结合激光流式细胞仪、激光共聚焦显微镜检测大鼠下丘脑和顶区皮质中雌激素α受体的蛋白表达量及定位分布模式。结果模型组大鼠下丘脑和顶区皮质中雌激素α受体蛋白表达水平与正常组相比有明显降低(P0.01),经前平颗粒干预后大鼠下丘脑和顶区皮质中该受体表达水平较模型组明显升高(P0.01,P0.05)。结论 PMS肝气逆证模型大鼠会出现下丘脑和顶区皮质雌激素α受体蛋白表达下调,经前平颗粒干预后可改变异常下调状态。     

脓毒症大鼠心肌损伤及清毒提取液修复作用的实验研究

目的观察脓毒症大鼠模型心肌的损伤指标,主要是血清肌钙蛋白I(cTnI)、B型尿钠肽(BNP)及心肌组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)。检测应用清毒提取液后的变化,以验证清毒提取液对脓毒症大鼠心肌损伤的修复作用。方法 90只Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、乌斯他汀组各10只,清毒提取液低剂量组、清毒提取液中剂量组和清毒提取液高剂量组各20只。采用盲肠结扎穿孔法(CLP)诱导大鼠脓毒症,制作大鼠脓毒症模型,应用清毒提取液进行干预。测定血清cTnI、BNP及心肌组织MDA、SOD。结果清毒提取液低、中、高剂量组与模型组比较,使用清毒提取液治疗后cTnI水平均有降低(均P0.05);清毒提取液低、高剂量组与模型组比较,可降低BNP水平(均P0.05);清毒提取液中、高剂量组与乌斯他汀组比较,cTnI差异无统计学意义(均P0.05),清毒提取液低、高剂量组与乌斯他汀组比较,BNP差异无统计学意义(均P0.05)。清毒提取液中、高剂量组与模型组比较,MDA水平均有降低(均P0.05);清毒提取液高剂量组与模型组比较,可提高SOD水平(P0.05);清毒提取液中、高剂量组与乌斯他汀组比较,MDA差异无统计学意义(P0.05);清毒提取液高剂量组与乌斯他汀组比较,MDA差异无统计学意义(P0.05)。结论清毒提取液能够降低脓毒症大鼠血清cTnI、BNP及心肌MDA水平,提高心肌SOD水平,对脓毒症心肌损伤有一定改善作用。     

地龙耐热蛋白对自发性高血压大鼠心肌血管紧张素Ⅱ水平及血管紧张素Ⅱ-1型受体表达的影响

目的探讨地龙耐热蛋白对自发性高血压大鼠(SHR)心肌血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平及AngⅡ-1型(AT1)受体表达的影响。方法采用放射免疫法测定血浆和心肌AngⅡ水平。采用免疫荧光法测定心肌AT1受体表达水平。结果模型组血浆和心肌AngⅡ水平均显著高于对照组(P<0.01),地龙耐热蛋白高剂量组、低剂量组血浆和心肌AngⅡ水平均低于模型组(P<0.05)。对照组与模型组比较,心肌细胞膜和胞浆AT1受体表达减少;地龙耐热蛋白低剂量组和高剂量组与模型组比较,心肌细胞膜和胞浆AT1受体表达均显著减少。结论地龙耐热蛋白可降低血浆、心肌AngⅡ水平,下调心肌AT1受体的表达,且其下调机制可能与降低心肌AngⅡ水平有关。