神经生长因子对多巴胺能神经元凋亡的保护作用

目的：观察6-羟基多巴(6-OHDA)诱导PC12细胞凋亡的作用，探讨神经生长因子(NGF)对PC12细胞凋亡的保护作用。方法：将6孔培养板中的PC12细胞分别加入不同浓度的6-OHDA(0，25，50，100，150和200μmol／L)；同样6-OHDA各组，每孔均加入终浓度为100μg／L的NGF。分别干预24h后终止培养，观察PC12细胞凋亡的程度。用Hoechst33258细胞核染色法、凋亡细胞的DNA裂解分析一琼脂糖凝胶电泳、TUNEL原位凋亡检测和计算机自动图像分析等方法进行凋亡检测。结果：6-OHDA50，100，150和200μmol／L均不同程度地诱导了PC12细胞凋亡，表现剂量效应。NGF对6-OHDA诱导的PC12细胞凋亡具有保护作用[NGF组比8KNG组：细胞核面积：(56.48&;#177;3.06）比（36．19&;#177;2.15)μm^2，光密度：0.38&;#177;0．03比0．53&;#177;0.3，t=2．36、3.07、P&;lt;0．05。结论：支持6-OHDA在体外能够诱导PC12细胞凋亡的观点，并且有剂量效应。NGF对6-OHDA诱导的PC12细胞凋亡具有保护作用。     

神经生长因子对多巴胺能神经元凋亡的保护作用

目的观察 6-羟基多巴 (6- OHDA)诱导 PC12细胞凋亡的作用,探讨神经生长因子 (NGF)对 PC12细胞凋亡的保护作用. 方法将 6孔培养板中的 PC12细胞分别加入不同浓度的 6- OHDA(0 ,25,50,100,150和 200 μ mol/L);同样 6- OHDA各组,每孔均加入终浓度为 100 μ g/L的 NGF.分别干预 24 h后终止培养,观察 PC12细胞凋亡的程度.用 Hoechst 33258细胞核染色法、凋亡细胞的 DNA裂解分析-琼脂糖凝胶电泳、 TUNEL原位凋亡检测和计算机自动图像分析等方法进行凋亡检测. 结果 6- OHDA 50,100,150和 200 μ mol/L均不同程度地诱导了 PC12细胞凋亡,表现剂量效应. NGF对 6- OHDA诱导的 PC12细胞凋亡具有保护作用 [NGF组比 8 KNG组细胞核面积 (56.48± 3.06)比 (36.19± 2.15)μ m2,光密度 0.38± 0.03比 0.53± 0.3, t=2.36,3.07,P< 0.05. 结论支持 6- OHDA在体外能够诱导 PC12细胞凋亡的观点,并且有剂量效应. NGF对 6- OHDA诱导的 PC12细胞凋亡具有保护作用.     

促红细胞生成素对氯化钴诱导的PC12细胞凋亡的拮抗作用

目的 观察促红细胞生成素(EPO)对氯化钴(CoCl2)诱导的PC12细胞缺氧损伤凋亡的影响并探讨其作用机制.方法 将PC12细胞分为四组:空白对照组、CoCl2处理组、重组人促红细胞生成素(rhEPO)处理组、rhEPO+CoCl2处理组.应用MTT,乳酸脱氢酶(LDH),流式细胞术(FCM)及Hoechst33258染色法检测rhEPO对氯化钴诱导的细胞活性下降及凋亡的影响.通过逆转录PCR(RT-PCR)法检测Survivin表达情况.结果 MTT结果显示rhEPO预处理能够提高PC12细胞活力,0.6 mmol/L CoCl2单独处理组细胞存活率仅为(43.07±5.9)%,rhEPO处理24 h后细胞存活率上升明显至(77.89±3.4)%(P<0.01).LDH检测,FCM及Hoechst33258结果表明CoCl2处理能诱导PC12细胞损伤及凋亡,而预先采用2 U rhEPO处理PC12细胞可抑制CoCl2的细胞毒性作用,减少细胞缺氧性损伤及凋亡.RT-PCR显示rhEPO处理组PC12细胞Survivin表达较CoCl2处理组明显升高.结论 EPO处理能抑制CoCl2诱导的PC12细胞凋亡,其细胞保护作用的机制可能与上调PC12细胞的Survivin表达有关.     

醒脑启智胶囊药物血清对PC12细胞缺氧损伤的保护作用

背景血管性痴呆的发生与脑缺血缺氧河北省有关,前期的研究表明临床效方-醒脑启智胶囊可明显改善血管性痴呆小鼠的行为学障碍,但其作用途径是否为保护缺氧细胞从而改善血管性痴呆症状.目的采用血清药理学方法,体外培养嗜铬细胞瘤PC12细胞,用Na2S2O4产生缺氧损伤,观察醒脑启智药物血清是否对缺氧损伤的PC12细胞具有保护作用.设计随机对照实验.单位河北医科大学中医学院.对象实验于2003-06/12在河北医科大学动物实验室和细胞培养实验室进行.40只SD大鼠随机分成5组,即对照血清组(n=12)和醒脑启智药物血清25.42,12.71,6.35,3.18 g/kg组(n=7).PC12细胞株购自中国医学科学院细胞中心.方法①药物血清制备醒脑启智药物血清25.42,12.71,6.35,3.18 g/kg组按相应剂量以醒脑启智药物(枸杞子、石菖蒲、川芎、橘络等)灌胃给药,对照血清组以生理盐水10mL/kg灌胃,均为2次/d,每天灌胃间隔12 h,连续给药3 d,末次给药后1h麻醉状态下股动脉采血,分离血清.②PC12细胞分组培养将体外培养的PC12细胞分为6组对照组加入对照血清培养;模型组加对照血清培养1 h后加入Na2S2O4产生缺氧损伤;醒脑启智25.42,12.71,6.35,3.18 g/kg组分别加入5%不相应剂量的药物血清,培养1 h后加入Na2S2O4.③观察指标各组细胞加入Na2S2O4培养16 h后,倒置相差显微镜下观察PC12细胞形态变化;计算乳酸脱氢酶释放抑制率和PC12细胞损伤的抑制率(MTT法)来评估细胞活力.主要结局观察①各组PC12细胞的形态学观察.②各组PC12细胞的乳酸脱氢酶活性释放抑制率和PC12细胞损伤的抑制率.结果①细胞形态醒脑启智各剂量组PC12细胞折光性较好,细胞碎片形成减少.②乳酸脱氢酶活性释放抑制率醒脑启智25.42,12.71,6.35,3.18g/kg组分别为81.6%,69.6%,54.4%,27.8%.③PC12细胞损伤的抑制率醒脑启智25.42,12.71,6.35,3.18 g/kg组分别为82.9%,75.6%,65.9%,53.7%.结论醒脑启智药物血清能明显减轻PC12细胞的缺氧损伤,可增强细胞活力,降低乳酸脱氢酶活性,并呈现一定的剂量依赖关系.     

灵芝多糖肽对氧化应激损伤PC12细胞的保护作用与神经生长因子的比较

目的探讨灵芝的主要有效成分灵芝多糖肽对H2O2氧化应激损伤PC12细胞的保护作用,并以神经生长因子作为阳性对照.方法实验于2004-01/06在第二军医大学神经科学研究所进行.以H2O2损伤PC12细胞为氧化应激损伤神经元的模型,将培养的PC12细胞随机分成4组①正常对照组PC12细胞在无血清的DMEM培养基中培养.②H2O2作用组PC12细胞与终浓度为200 μmol/L的H2O2作用4 h.③灵芝多糖肽组PC12细胞预先用终浓度为10 mg/L的灵芝多糖肽预处理24 h后,加入终浓度为200μmol/L的H2O2共同作用4 h.④神经生长因子组PC12细胞预先用终浓度为0.1 mg/L的神经生长因子预处理24 h后,加入终浓度为200μmol/L的H2O2共同作用4 h.采用MTT法检测细胞的存活率以及Western blotting检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 P20活性片段.结果①细胞存活率H2O2作用组显著低于正常对照组[(38.6±7.1)%,(100±9.3)%,P＜0.01 ];灵芝多糖肽组和神经生长因子组显著高于H2O2作用组[(83.4±10.2)%,(75.9±7.4)%,P＜0.01],但两组间比较无差异(P＞0.05).②半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 P20活性片段Westernblotting检测结果提示灵芝多糖肽组和神经生长因子组较H2O2作用组明显减少.结论适量灵芝多糖肽灵芝多糖肽能促进氧化应激损伤PC12细胞的存活,抑制H2O2诱导的PC12细胞凋亡,对氧化应激损伤PC12细胞具有保护作用,其效果与神经生长因子相似.     

熊果酸对人卵巢癌 SKOV3细胞增殖与凋亡的影响

【目的】探讨熊果酸(Ursolic acid,UA)对人卵巢癌 SKOV3细胞增殖与凋亡的影响。【方法】常规培养人卵巢癌 SKOV3细胞,应用 UA 浓度为5、10、20、40和80μmol/L 分别干预12 h、24 h 和48 h,采用 MTT 法检测细胞增殖;采用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期变化,应用 Western blot 技术检测细胞周期相关蛋白 P21、CyclinD1的表达水平。【结果】与空白对照组(0μmol/L UA)比较,40和80μmol/L UA 分别作用 SKOV3细胞12 h、24 h 和48 h 后 OD 值均显著降低(P <0.05);10、20和40μmol/L UA 作用24 h 后 SKOV3细胞早期凋亡率、晚期凋亡率和 G0/G1期比率较对照组升高,20和40μmol/L UA 作用24 h 后 SKOV3细胞周期蛋白 Cyclin D1明显降低而 P21水平显著升高(P <0.05)。【结论】体外实验中,UA 可抑制人卵巢癌 SKOV3细胞增殖和促其凋亡,其机制可能与细胞周期蛋白 Cyclin D1表达降低和 P21表达升高有关。     

盐酸埃他卡林对帕金森病细胞模型谷氨酸摄取下降的影响

目的:研究多巴胺能神经毒素对PC12细胞谷氨酸摄取的影响;探讨新型三磷酸腺苷(ATP)敏感性钾通道(ATP-sensitivepotassiumchannel,K-ATPchannel)开放剂盐酸埃他卡林(Iptakalimhydrochloride,Ipt)对神经毒素诱导的谷氨酸转运体功能下降的作用及机制。方法:放射性核素标记法测定PC12细胞L-犤3H犦-Glutamate摄取能力,MTT法测定细胞活力。结果:多巴胺能神经毒素6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)、N-甲基,4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenyl-2,3-dihydropyridiniumion,MPP )和鱼藤酮浓度依赖性地降低PC12细胞谷氨酸摄取:与对照组2.0±0.2相比,6-OHDA(30,50,80和100μmol/L)使摄取量降至1.6±0.1,1.0±0.3,0.8±0.1和0.5±0.1(P<0.01);MPP (200,400,600和800μmol/L)诱导摄取量降为1.6±0.2,1.5±0.2,1.2±0.1和1.0±0.2(P<0.01);鱼藤酮(5,10,20和40nmol/L)诱发摄取量降至1.5±0.2,0.6±0.1,0.4±0.1和0.2±0.1(P<0.01)。Ipt(10μmol/L)预处理能够完全对抗6-OHDA和MPP 、部分改善鱼藤酮造成谷氨酸转运功能异常,这种保护作用可被格列苯脲(Glibenclamide,Glib)(20μmol/L)阻断。结论:谷氨酸转运体功能下降参与多巴胺能神经毒素的损伤作用;Ipt通过激活K-ATP通道促进谷氨酸摄取,对抗毒素引发的兴奋毒性,具有潜     

28醇对6-羟基多巴胺致帕金森病大鼠模型行为学的改善作用

目的 检测28醇对6-羟基多巴胺(6-OHDA)致帕金森病(PD)大鼠模型的作用.方法 将大鼠分为假手术组(n=1 5)、模型组(n=15)、低剂量组(n=12)、中剂量组(n=12)和高剂量组(n=12).将6-OHDA注人大鼠右侧纹状体制备PD模型,治疗组分别以28醇17.5 mg/kg、35 mg/kg、70 m...     

LPA2在PC12细胞缺血再灌注损伤致细胞凋亡中的作用

目的探讨溶血磷脂酸(LPA)2受体在PC12细胞缺血再灌注损伤致细胞凋亡中的作用。方法以实验方法完成研究,通过建立PC12细胞缺血再灌注受损细胞模型,分别于缺氧环境中培养0、3、6、9、12、15h以进行糖氧剥夺,之后再将其放入高糖培养基中再次复氧培养24h,然后利用MTT来检测细胞存活率,并对其进行分组,分为正常组、缺血再灌注组(A组)、缺血再灌注+溶剂对照组(B组)、缺血再灌注+LPA2激动剂组(C组)、缺血再灌注+LPA2抑制剂组(D组)。先进行缺氧培养一定时间后再复氧培养24h,并采用MTT检测细胞存活率,同时,检测LPA2受体与P-akt蛋白的表达情况。结果经糖氧剥夺培养6h后,缺血再灌注的细胞存活率较正常组明显下降,差异有统计学意义(P0.05),且缺血再灌注损伤糖氧剥脱处理最适时间为12h。A组LPA2表达水平明显低于B组;C组与B组相比较,LPA2表达水平显著增高,且P-akt表达水平显著增高,差异有统计学意义(P0.05)。结论 LPA2受体在PC12细胞缺血再灌注损伤致细胞凋亡中起着重要的保护作用,且升高LPA2受体表达水平有助于提高细胞生存率。     

MeCP2、TH蛋白在正常SH-SY5Y细胞和帕金森病细胞模型中的表达及其意义研究

目的探讨MeCP2、TH蛋白在正常SH-SY5Y细胞和帕金森病细胞模型中的表达及其意义。方法实验分为3组:空白对照组,未转染;模型对照组;pEGFP-N1-MeCP2组,转染液加入重组pEGFP-N1-MeCP2质粒。除空白对照组外,其余二组均加入6-羟多巴胺(6-OHDA)50.0μmol/L处理24h。用CCK-8法、流式细胞仪检测正常SH-SY5Y细胞、上调MeCP2表达的SH-SY5Y细胞在6-OHDA诱导下细胞活性及细胞凋亡的变化;免疫荧光技术和Western blot法检测各组SH-SY5Y细胞中MeCP2蛋白、TH蛋白表达的变化。结果 CCK-8法检测及流式细胞仪6-OHDA诱导的SH-SY5Y细胞、上调MeCP2的SH-SY5Y细胞中细胞存活和凋亡情况发现,模型对照组与pEGFP-N1-MeCP2组、空白对照组相比,差异具有统计学意义(P0.05)。双重免疫荧光检测6-OHDA诱导的SH-SY5Y细胞中的MeCP2、TH表达情况发现,模型对照组,6-OHDA(50.0μmol/L)诱导24h,MeCP2和TH的蛋白表达显著下降(P0.05)。Western blot检测上调MeCP2表达后,6-OHDA诱导的SH-SY5Y细胞中的MeCP2、TH表达情况发现,pEGFP-N1-MeCP2组上调组和空白对照组中MeCP2、TH蛋白表达与模型对照组相比,差异具有统计学意义(P0.01)。结论转染pEGFP-N1-MeCP2重组质粒可抑制6-OHDA诱导的SH-SY5Y细胞凋亡,提高TH的表达,提高细胞存活率。     

外源性硫化氢对高糖诱导人腹膜间皮细胞氧化应激损伤的保护作用

目的外源性硫化氢(H2S)对高糖诱导人腹膜间皮细胞损伤的保护作用及其机制。方法用4.25%D-葡萄糖(高糖)和5×10-5、10-4、5×10-4、10-3和5×10-3mol/L的外源性H2S供体硫化氢钠(NaHS)处理人腹膜间皮细胞株HMrSV5细胞24h,MTT比色法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞内的内活性氧(ROS)水平,检测细胞内丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果与对照组比较,高糖组HMrSV5细胞活力显著降低(t=3.67,P<0.05),细胞培养液中LDH水平显著增加(t=2.94,P<0.05),ROS水平显著增加(t=4.28,P<0.01),MDA含量显著增加(t=2.84,P<0.05)而SOD活性降低(t=3.57,P<0.01)。与高糖组比较,5×10-4、10-3和5×10-3mol/L的NaHS显著抑制了高糖诱导的HMrSV5细胞活力的降低(t1=2.43;t2=3.68;t3=3.12,均P<0.05)和细胞培养液中LDH水平的增加(t1=2.83;t2=3.71;t3=3.44,均P<0.05)。与高糖组比较,10-3mol/L的NaHS显著抑制了高糖诱导的细胞内ROS(t=3.12,P<0.05)和MDA水平的增加(t=2.59,P<0.05)和SOD活性降低(t=2.61,P<0.05)。结论外源性H2S抑制了高糖诱导的人腹膜间皮细胞损伤,其机制可能与外源性H2S抑制氧化应激有关。     

乌司他丁对大鼠肢体缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

目的探讨乌司他丁对大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法将72只SPF级大鼠随机分为3组:对照组、缺血再灌注组及缺血再灌注-乌司他丁组,每组24只。各组根据再灌注时间点不同分为0 h、2 h、4 h、8 h,各时间点6只大鼠。建立下肢缺血/再灌注模型:对照组、缺血再灌注组、缺血再灌注-乌司他丁组。同时,经股静脉采血备检;取骨骼肌组织分别固定,备电镜、光镜检验。分别测定各组动物骨骼肌在发生再灌注时间点0 h、2 h、4 h、8 h时血浆中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)的含量。同时检测各组不同时点大鼠后肢腓肠肌组织超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)的含量。光镜下观察骨骼肌细胞结构形态。结果缺血再灌注组血浆LDH、CK的含量4 h达高峰,之后开始下降,缺血再灌注组和乌司他丁组LDH、CK在各时间点的水平含量明显高于对照组(P0.05),但乌司他丁组各不同时点血浆LDH、CK的含量明显低于缺血再灌注组(P0.05);缺血再灌注组腓肠肌组织表现为SOD活性均低于对照组(P0.05),其中以4 h为最低;脂质过氧化产物MDA含量均高于对照组(P0.05),且以4 h为最高;缺血再灌注组各组动物血浆SOD含量均低于对照组(P0.05);乌司他丁组各时间点腓肠肌中MDA含量低于缺血再灌注组(P0.05),SOD含量高于缺血再灌注组。结论①乌司他丁可以减轻缺血再灌注损伤;②乌司他丁能有效抑制大鼠下肢缺血再灌注损伤时骨骼肌细胞破坏而引起的LDH和CK的释放,因此对大鼠肢体缺血再灌注骨骼肌的损伤有保护作用;③在缺血再灌注损伤时,乌司他丁组的SOD活性要高于单纯缺血再灌注组,而反映氧自由基对骨骼肌损害的MDA的含量却较单纯缺血再灌注低,提示乌司他丁在清除氧自由基及减轻后肢缺血再灌注损伤方面有明显保护作用。     

扇贝裙边糖胺聚糖对SH-SY5Y细胞氧化及凋亡影响

目的探讨扇贝裙边糖胺聚糖（SS-GAG）对6-羟基多巴胺（6-OHDA）诱导的SH-SY5Y细胞丙二醛（MDA）、乳酸脱氢酶（LDH）含量及凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Caspase-9表达的影响。方法体外培养SH-SY5Y细胞,随机分为对照组、6-OHDA损伤组和SS-GAG（200、400和800mg/L）处理组,测定各组细胞中MDA含量、LDH活性,实时荧光（real-time）PCR检测细胞Bcl-2、Bax mRNA表达的变化,流式细胞技术（FCM）检测活化Caspase-9蛋白表达。结果与对照组相比较,6-OHDA损伤组的MDA含量、LDH活性增加,Bcl-2mRNA表达降低,Bax mRNA表达升高,表达活化Caspase-9蛋白的细胞数增加,差异均有统计学意义（F=27.699-280.567,P〈0.01）。与6-OHDA损伤组比较,各浓度SS-GAG处理组SH-SY5Y细胞中MDA含量、LDH活性降低,Bcl-2mRNA表达升高,Bax mRNA表达降低,活化的Caspase-9蛋白表达量减少,并且呈剂量依赖性,差异均有显著意义（F=27.699-280.567,P〈0.01）。结论 SS-GAG能降低6-OHDA诱导的氧化应激水平,保护生物膜的完整性。SS-GAG通过上调Bcl-2基因的表达和下调Bax基因的表达,抑制Caspase-9蛋白的活化,从而抑制6-OHDA诱导的SH-SY5Y细胞凋亡。     

慢性阻塞性肺疾病患者血清晚期氧化蛋白产物水平变化的临床研究

目的 检测慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者血清晚期氧化蛋白产物（AOPP）的水平,探究AOPP与COPD的相关性及其临床意义.方法 纳入2011年4月至2013年11月来我院就诊的54例轻、中度COPD患者（COPD组）;同期收集30名健康志愿者作为健康对照组,两组一般情况相匹配.分别检测血清AOPP、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）的水平.结果 健康对照组血清AOPP为（45.78±12.54） μmol/L、MDA为（2.96±0.55） μmol/L、SOD为（78.40±8.37） kU/L,COPD组血清AOPP为（68.93±10.62） μmol/L、MDA为（6.07±2.44） μmol/L、SOD为（53.66 ±5.99） kU/L,两组比较差异均有统计学意义（t值分别为-8.57、-9.14、14.38,P均＜0.01）.轻度COPD组患者血清AOPP为（65.56±9.65） μmol/L、MDA为（4.21±1.83） μmol/L、SOD为（62.97 ±6.28） kU/L,中度COPD组血清AOPP为（71.79±11.37） μmol/L、MDA为（7.43 ±3.12） μmol/L、SOD为（41.25 ±5.89） kU/L,两组比较差异均有统计学意义（t值分别为-2.17、-4.80、13.00,P＜0.05或P＜0.01）.结论 血清AOPP水平增高是COPD患者的重要病理变化,可能参与COPD的发生及发展过程,是反映COPD患者氧化应激损伤的早期敏感指标.     

二苯乙烯苷对过氧化氢诱导的PC12细胞损伤的保护作用

目的探讨二苯乙烯苷(TSG)对过氧化氢(H₂O₂)所致PC12细胞损伤的保护作用。方法培养PC12细胞给予H₂O₂(100 μmol/L)诱导细胞凋亡,实验分为空白对照组、H₂O₂损伤组、高剂量组(TSG 120 μg/L+H₂O₂）、中剂量组(TSG 60 μg/L+H₂O₂)和低剂量组(TSG 30 μg/L+H₂O₂)。TSG处理2 h后,加入H₂O₂损伤细胞,4 h后取细胞测定乳酸脱氢酶(LDH)漏出量,采用硫代巴比妥酸比色法测定丙二醛(MDA),黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性,噻唑兰(MTT)法检测细胞活力,免疫组织化学方法检测bcl-2的蛋白表达。结果TSG能提高细胞活力,降低LDH漏出和细胞凋亡率(P<0-05)。0-1～1 μmol/L TSG处理后bcl-2的蛋白表达降低(P<0-05)。结论TSG能减少H₂O₂对PC12细胞的损伤。     

氧化应激对大鼠肾小管上皮细胞生物学行为的影响及L-EGCG的保护作用

[目的]探讨氧化应激对大鼠肾小管上皮细胞（NRK）生物学行为的影响及L -表没食子儿茶素没食子酸酯（L -EGCG）对NRK细胞氧化性损伤的保护作用.[方法]利用H2O2刺激离体培养的NRK细胞建立氧化损伤的模型,筛选H2O2对NRK细胞损伤研究的最适剂量与最佳时点.然后将培养细胞分EGCG正常对照组、H2O2组、不同浓度儿茶素组.MTT法检测细胞活力,流式细胞仪测定细胞凋亡,荧光探针JC-1测定线粒体膜电位.利用生物化学法检测各组NRK细胞培养上清中丙二醛（MDA）含量及乳酸脱氢酶（LDH）漏出量.[结果]①250 μmol/L H2O2作用6 h剂量组即可引起NRK细胞损伤;②L-EGCG能明显改善H2O2导致的细胞损伤,可使细胞存活率升高,LDH释放量降低,MDA生成减少,稳定了线粒体膜电位,减轻了细胞凋亡.[结论]氧化应激能导致大鼠肾小管上皮细胞活力下降,凋亡增加,L-EGCG可能是通过提高NRK细胞的抗氧化能力而提高其对H2O2损伤的保护及损伤修复能力.     

促红细胞生成素对MPP+致PC12细胞损伤的影响

目的:探讨促红细胞生成素(EPO)对1-甲基-4苯基吡啶离子(MPP~+)诱导的PC12损伤的保护作用及其机制。方法:将PC12细胞分为5组,即对照组(给予PBS)、MPP~-组(给予PBS、MPP~+)、EPO低浓度组(给予10 kIU/L EPO、MPP+)、EPO中浓度组(给予20 kIU/L EPO、MPP~+)和EPO高浓度组(给予40 kIU/L EPO、MPP~+)。用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞代谢活性,测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:MPP~+组细胞活性和SOD活性降低,而在不同浓度EPO组明显升高并随EPO浓度升高而升高;MPP~+组MDA含量和细胞凋亡率增高,而在不同浓度EPO组明显降低,并随EPO浓度升高而降低。结论:EPO对MPP~+诱导的细胞损伤有保护作用,其机制可能与抑制氧化反应、提高抗氧化酶活性、减少细胞凋亡有关。     

高同型半胱氨酸血症患者氧化应激指标的研究

目的观察高同型半胱氨酸血症(HHcy)患者氧化应激指标的水平,并对其临床价值做初步评价。方法检测108例HHcy患者、106名健康体检者(正常对照组)循环谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、对氧磷酯酶1(PON1)、一氧化氮合酶(NOS)活性及同型半胱氨酸(Hcy)、一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)水平。分析Hcy与GSH-Px、SOD、PON1、NOS、NO、MDA之间的相关性。结果 HHcy患者血浆MDA水平[(6.23±1.55)μmol/L]明显高于正常对照组[(4.14±1.13)μmol/L](P0.01),而GSH-Px[(189.3±25.1)U/L]、SOD[(77.3±20.5)NU/mL]、PON1[(133.6±23.9)kU/L]、NOS活性[(25.3±2.9)U/mL]及NO[(68.3±10.1)μmol/L]水平低于正常对照组[(240.3±78.1)U/L、(89.2±24.8)NU/mL、(168.2±26.0)kU/L、(30.0±3.3)U/mL、(92.1±12.1)μmol/L](P均0.01)。HHcy患者血浆Hcy与MDA呈正相关(r=0.72,P0.01),与GSH-Px、SOD、PON1、NOS、NO呈明显负相关(r值分别为-0.60、-0.49、-0.51、-0.43、-0.50,P均0.01)。结论 HHcy患者氧化应激增强可能与Hcy氧化过程中产生过多的过氧化物及活性氧、Hcy损伤NO/L-精氨酸系统及直接抵制抗氧化酶活性有关。Hcy可能通过增加氧化应激和降低抗氧化能力在动脉粥样硬化发生、发展中起重要的作用。     

白藜芦醇对异丙肾上腺素所致小鼠心肌肥厚的保护作用

目的观察白藜芦醇对小鼠心肌肥厚的保护作用。方法皮下注射异丙肾上腺素(Iso)1 mg/kg,bid,连续14 d,制备小鼠心肌肥厚模型,造模后第2天开始,各治疗组分别给予白藜芦醇混悬液(60、30 mg/kg)灌胃给药,空白对照组和模型组灌胃相同体积的生理盐水,每天1次,连续14 d。末次给药后12 h,取血,分离血清,测定血清超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)的活性及丙二醛(MDA)的含量;取心脏称重后计算全心重量指数及左心室重量指数;观察心肌组织病理形态学改变。结果与空白对照组相比,小鼠心肌肥厚模型组心脏重量指数及左心室重量指数明显提高,血清LDH、CK活性及MDA含量升高,SOD活性降低(P<0.05),病理切片可见心肌肥厚改变;与模型组相比,白藜芦醇治疗组左心室重量指数及心脏重量指数下降,血清SOD活性显著升高、MDA含量降低、LDH及CK活性降低(P<0.05),病理切片可见损害较模型组减轻。结论白藜芦醇对Iso所致小鼠心肌肥厚具有一定的保护作用,其机制可能与降低小鼠脂质过氧化损伤有关。     

脂微球前列腺素E1对大鼠离体心肌缺血／再灌注损伤的保护作用和机制

目的观察脂微球前列腺素E1（凯时）对大鼠离体心肌缺血/再灌注损伤的保护作用并探讨其可能机制。方法Wistar大鼠24只,随机分成正常对照组、缺血/再灌注损伤组和凯时保护组。利用Langendorff灌流装置复制大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型。观察指标：冠状动脉流出液中乳酸脱氢酶（LDH）活性,心肌匀浆中超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量,心肌超微结构,HE染色,TUNEL染色及免疫组化等。结果凯时（10μg/L）可使心肌缺血/再灌注损伤所致的LDH释放显著降低,心肌超微结构损伤减轻,SOD活性升高,MDA含量降低;同时使细胞凋亡减少,Bcl-2表达增加,Bax和Caspase-3表达减少。结论凯时能显著减轻大鼠心肌缺血/再灌注损伤,其机制可能与凯时具有抗氧化、清除自由基和抗细胞凋亡的作用有关。