蒺藜果皂苷对大鼠脑缺血后线粒体膜电位和Bcl-2、Bax mRNA表达的影响

目的 观察蒺藜果皂苷对大鼠脑缺血后线粒体膜电位和Bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达的影响,探讨蒺藜果皂苷对大鼠脑缺血的保护作用.方法 60只Wistar大鼠随机分成5组:空白对照组、模型对照组、阳性药物舒血宁组、蒺藜果皂苷低剂量组和蒺藜果皂苷高剂量组.线栓法阻断一侧大脑中动脉,缺血24 h制成脑缺血模型.流式细胞仪检测线粒体膜电位,实时荧光定量PCR检测Bcl-2、Bax mRNA表达.结果 模型组的线粒体膜电位和Bcl-2 mRNA表达水平显著低于空白对照组(P<0.05),而阳性药物组和蒺藜果皂苷高、低剂量组的线粒体膜电位和Bcl-2 mRNA表达水平明显高于模型组(P<0.01);与模型组相比,阳性药物组、蒺藜果皂苷高、低剂量组和空白对照组的Bax mRNA表达水平则明显下降,统计学上差异具有显著性(P<0.05).结论 蒺藜果皂苷能够保持线粒体膜电位,增加Bcl-2 mRNA的表达而降低Bax mRNA的表达水平.     

丙烯酰胺染毒对孕哺期大鼠胼胝体髓鞘碱性蛋白和髓鞘蛋白脂蛋白表达的影响

目的探究丙烯酰胺(ACR)染毒对孕哺期大鼠胼胝体髓鞘碱性蛋白(MBP)和髓鞘蛋白脂蛋白(MPLP)表达的影响。方法 32只SPF级SD大鼠随机分为对照组,4.5、9及18 mg/kg ACR染毒组,在大鼠妊娠第15天至分娩后第13天灌胃染毒。观测大鼠体重和步态的变化,通过免疫组化方法检测大鼠胼胝体MBP和MPLP的表达。结果随着ACR染毒剂量的增加,大鼠体重降低,呈剂量依赖性。与对照组和4.5 mg/kg ACR组相比较,9和18 mg/kg ACR组步态评分显著增加(P<0.01);胼胝体MBP和MPLP表达显著减少(P<0.05)。与对照组相比较,9 mg/kg组大鼠大脑MPLP明显减少(P<0.05),而18 mg/kg组MPLP和MBP的表达均显著减少(P<0.01)。结论 ACR染毒可能会通过减少孕哺期大鼠胼胝体MBP和MPLP的表达,损害其髓鞘的结构和功能,影响中枢神经系统信息的传导功能。     

大豆异黄酮对大鼠卵巢Bcl-2和Bax蛋白表达影响

目的 通过动物实验研究,观察B-cell lymphoma 2(Bcl-2)蛋白和Bcl-2-associated X protein(Bax蛋白)在大鼠卵巢组织中的表达情况.方法 选用2月龄Wistar雌性大鼠50只,按体重随机分成5组:空白对照组(基础饲料),大豆异黄酮低、中、高剂量组[含量分别为100、200、300 mg/(kg·bw)]、雌激素组(EC)(己烯雌酚0.5mg/kg),实验周期为7周;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定各组大鼠卵巢组织中Bcl-2蛋白和Bax蛋白水平.结果 空白对照组、大豆异黄酮低、中、高剂量组、雌激素组Bcl-2蛋白浓度分别为(1.41±0.19)、(1.43±0.20)、(2.07±0.58)、(2.42±0.32)、(2.95±0.78)pg/mL,组间差异均无统计学意义;Bax蛋白浓度分别为(33.64±5.83)、(30.02±9.44)、(17.33±4.21)、(9.67±1.95)、(10.69±4.95)pg/mL,其中大豆异黄酮高剂量组与空白对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 大豆异黄酮可抑制大鼠Bax蛋白表达,对Bcl-2蛋白表达无影响.     

芹菜对雌性小鼠卵巢组织Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

[目的]观察芹菜对小鼠卵巢组织Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。[方法]给予实验组动物芹菜汁灌胃,分别于灌胃7d、14d时分批处死动物,免疫组化方法观察Bcl-2和Bax表达情况。[结果]灌胃7d高剂量组与对照组比较Bcl-2和Bax蛋白表达差异均有统计学意义。灌胃14d中、高剂量组与对照组比较Bcl-2和Bax蛋白表达差异均有统计学意义。[结论]芹菜能诱导颗粒细胞的凋亡。     

FK506对脊髓背横断导致脊髓损伤的改善作用及可能机制探讨

目的探讨他克莫司(FK506)对脊髓背横断导致脊髓损伤的改善作用及可能机制。方法采用小鼠下胸段脊髓背横断机械损伤模型诱导脊髓损伤,并根据处理情况分为4组:假手术组、损伤模型组、假手术+FK506组和损伤模型+FK506组,其中假手术+FK506组和损伤模型+FK506组于术后给予2 mg/kg FK506腹腔注射,1次/d,连续2周,其余两组均给予等体积的生理盐水。采用BMS开场运动测试和横梁跑动实验分别检测后肢运动功能的恢复程度和运动协调能力;辐射热痛觉阈值检测检测对伤害刺激的反应速率;甲苯胺蓝染色检测脊髓的损伤面积;特异性荧光探针DHE染色观察病变局部脊髓的超氧阴离子水平;ELISA法检测病变局部脊髓的MDA、TNF-α水平和SOD活性;Western blot法检测病变局部脊髓的Lingo-1、GAP-43、Bcl-2及Bax水平。结果相比于假手术组,损伤模型组的BMS主要评分、次级评分、横梁跑动得分、病变局部脊髓的SOD活性、GAP-43和Bcl-2水平均降低,后爪回缩时间、病变局部脊髓的损伤面积、超氧阴离子、MDA和TNF-α水平及Lingo-1和Bax水平均升高,差异有统计学意义(P0.05);而FK506处理可改善脊髓背横断导致病变局部脊髓的以上异常症状,但仍与假手术组有差异;FK506处理对假手术组的以上指标均无影响。结论 FK506可改善脊髓背横断导致病变局部脊髓的损伤,降低炎症指标水平及氧化应激,可能与其抑制Lingo-1表达及降低凋亡水平有关。     

乙苯对大鼠尿中苯乙醇酸、苯乙醛酸水平、肾组织超微结构及线粒体凋亡相关蛋白表达的影响

目的 探讨亚慢性染毒乙苯对大鼠尿中苯乙醇酸、苯乙醛酸和肾组织超微结构及线粒体凋亡相关蛋白表达的影响.方法 SD大鼠雄性40只,随机分为对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组10只,分别染毒0、433.5、4335.0和6500.0 mg/m~3的乙苯,每天6 h,每周5 d,共13周,建立大鼠乙苯亚慢性染毒模型;高效液相色谱法测定染毒后大鼠尿中苯乙醇酸(MA)和苯乙醛酸(PGA)水平,电镜观察肾组织的超微结构,Western blot法检测肾组织B细胞淋巴瘤-2相关联X蛋白(Bcl-2associated X protein,Bax)、B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)、细胞色素C(cytochromeC,Cytc)、细胞凋亡蛋白酶(Caspase-3)、半胱天冬酶-9(Caspase-9)等线粒体凋亡相关蛋白的表达.结果 中、高剂量组大鼠尿中MA[(0.303±0.148)、(0.404±0.154)mg/L]和PGA[(0.168±0.104)、(0.174±0.092)mg/L]水平均明显高于对照组和低剂量组,差异有统计学意义(P<0.05),且MA、PGA均与乙苯外暴露剂鼍呈现一定的剂量-效应关系(r=0.827,r=0.720,P<0.05).高剂量组大鼠肾组织线粒体普遍肿胀,呈空泡状,部分线粒体嵴排列紊乱,线粒体嵴消失.中、高剂量组大鼠肾组织Bax表达水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);各剂苗组大鼠肾组织Cytc和Caspase-9表达水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);中、高剂量组大鼠肾组织Caspase-3表达水平均明显高于对照组和低剂量组,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,各剂量组大鼠肾组织Bcl-2表达水平均明显下降差异有统计学意义(P<0.05).结论 乙苯致大鼠肾组织细胞线粒体损伤可能是乙苯细胞毒作用机制之一,其机制可能与线粒体凋亡相关蛋白表达有关,大鼠尿中苯乙醇酸和苯乙醛酸可作为乙苯暴露后生物内剂量指标.     

原花青素对硫酸镍染毒大鼠肝脏细胞Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的观察原花青素对硫酸镍染毒大鼠肝脏细胞凋亡相关基因Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表达的影响,探讨原花青素在拮抗镍诱导肝细胞凋亡中发挥的作用及可能的调控机制。方法选择健康Wistar雄性大鼠40只,每组8只,硫酸镍模型组给予硫酸镍2.50mg/kg腹腔注射染毒及生理盐水灌胃处理,原花青素干预组在用硫酸镍2.50mg/kg腹腔注射染毒的同时,给予原花青素水溶液1.25、2.50、5.00mg/kg等容积灌胃处理,1次/d,连续30d。采用Western Blot技术检测各组大鼠肝脏细胞中Caspase-3、Bcl-2及Bax的蛋白表达水平。结果原花青素可拮抗硫酸镍染毒大鼠肝脏细胞中Caspase-3的活化,并引起Bcl-2蛋白表达量的增强及Bax蛋白表达量的减弱,且Bax/Bcl-2比值随着原花青素干预剂量的增加呈下降趋势,其中原花青素1.25mg/kg剂量组Pro-Caspase-3活性、5.00mg/kg剂量组Cleaved-Caspase-3活性与硫酸镍模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05);原花青素1.25mg/kg剂量组Bcl-2蛋白表达量、1.25和5.00mg/kg剂量组Bax/Bcl-2比值与硫酸镍模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论原花青素可拮抗硫酸镍诱导的大鼠肝脏细胞凋亡,其机制可能与拮抗Caspase-3蛋白活化、并抑制Bcl-2蛋白表达的下调和Bax蛋白表达上调有关。     

孕哺期及断乳后氯化镧暴露对大鼠大脑皮质神经细胞钙稳态及Bcl-2蛋白家族和caspase蛋白表达的影响

目的研究氯化镧对大鼠大脑皮质神经细胞钙稳态、Bcl-2和caspase蛋白表达的影响。方法 32只雌性成年Wistar大鼠随机分成对照和低、中、高剂量氯化镧组,与雄性成年Wistar大鼠按1∶1比例同笼交配。对照和低、中、高剂量氯化镧组雌性大鼠自受孕起分别饮用以蒸馏水配制的0、2.5、5和10 g/L氯化镧溶液,并哺育其子代大鼠。对照和低、中、高剂量氯化镧组子代大鼠断乳后分别饮用以蒸馏水配制的0、2.5、5和10 g/L氯化镧溶液1个月。采用Fura 2荧光探针法测定子代大鼠大脑皮质神经细胞内Ca~(2+)浓度,以流式细胞仪法测定子代大鼠大脑皮质细胞凋亡率,采用Western blotting法测定子代大鼠大脑皮质Bcl-2、Bax、caspase 3、caspase 8、caspase 9和caspase 12蛋白水平。结果各氯化镧组子代大鼠大脑皮质神经细胞内Ca~(2+)浓度和细胞凋亡率均显著高于对照组(P0.05),且随氯化镧染毒剂量增加而升高。低、中剂量氯化镧组子代大鼠大脑皮质Bcl-2蛋白水平低于对照组(P0.05),而Bax、caspase 3、caspase 9和caspase 12蛋白水平高于对照组(P0.05);高剂量氯化镧组子代大鼠大脑皮质Bcl-2蛋白水平低于对照组和低、中剂量氯化镧组(P0.05),Bax、caspase 3、caspase 9和caspase 12蛋白水平高于对照组和低、中剂量氯化镧组(P0.05)。然而各氯化镧组caspase 8蛋白水平与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论氯化镧导致大鼠大脑皮质神经细胞过度凋亡可能与神经细胞钙稳态失衡、Bcl-2表达下降和Bax、caspase 3、caspase 9、caspase 12表达升高有关。     

蒺藜果皂苷对大鼠脑缺血后神经细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

目的观察蒺藜果皂苷对大鼠脑缺血后的细胞凋亡率和相关蛋白（Bcl-2、Bax）的表达,探讨蒺藜果皂苷对大鼠脑缺血损伤的保护作用。方法60只Wistar大鼠随机分成5组：空白对照组、模型对照组、阳性药物舒血宁组、蒺藜果皂苷高剂量组和蒺藜果皂苷低剂量组。线栓法阻断一侧大脑中动脉,缺血24h制成脑缺血模型。流式细胞仪检测细胞凋亡率和蛋白的表达水平。结果模型组的细胞凋亡率和Bax蛋白表达明显高于阳性药物组和蒺藜果皂苷高、低剂量组,而模型组的Bcl-2蛋白表达明显低于阳性药物组和蒺藜果皂苷高、低剂量组（P〈0.05）。结论蒺藜果皂苷能够抑制细胞凋亡,增加Bcl-2蛋白的表达而降低Bax蛋白的表达水平。     

苯并[a]芘对大鼠脑组织中神经细胞凋亡及Bcl-2和Bax基因表达的影响

目的 观察苯并[a]芘(B[a]P)染毒大鼠神经细胞凋亡及凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白的表达,以探讨B[a]P对大鼠神经毒性及其作用机制.方法 32只SD大鼠,按体重随机分为4组,每组8只,染毒组分为高、中、低3个剂量组(126.2、63.1、31.5 μg/kg的B[a]P溶液),并设溶剂对照组(50 μl/kg橄榄油),均采用侧脑室微量注射染毒处理,每周1次,连续3周;在染毒3周后采用原位末端缺口标记(TUNEL)法和免疫组织化学法分别对各组大鼠脑组织凋亡细胞的分布及Bcl-2、Bax免疫反应阳性细胞进行观察和检测.结果 TUNEL染色结果显示,在大鼠大脑皮质及海马区的细胞核中可以见到棕黄色的凋亡小体,而且随着染毒剂量的增高,出现凋亡小体的细胞数逐渐增多.与溶剂对照组相比,高剂量组大鼠大脑皮质及海马神经细胞凋亡指数(AI)均明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05).免疫组化染色结果显示,与溶剂对照组相比,中、高剂量染毒组大鼠大脑皮质及各剂量组海马区神经细胞的Bcl-2蛋白表达均明显下降,Bax蛋白表达均明显升高,各组大鼠皮质及海马神经细胞的Bcl-2/Bax比值均下降,差异均有统计学意义(P＜0.05或(P＜0.01).大鼠大脑皮质及海马区神经细胞AI与Bel-2呈负相关(r=-0.927,P＜0.01;r=-0.934,P＜0.01),AI与Bax呈正相关(r=0.858,P＜0.01;r=0.874,P＜0.01),AI与Bcl-2/Bax比值呈负相关(r=-0.939,P＜0.01;r=-0.942,P＜0.01).结论 B[a]P可引起大鼠大脑皮质及海马区神经元细胞的凋亡,且调控凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白的表达,在B[a]P致神经细胞凋亡的过程中发挥了重要的作用.     

大蒜油拮抗2,5-己二酮对大鼠神经组织的氧化损伤的效果

目的 探讨大蒜油对2,5-己二酮(2,5-hexanedione,2,5-HD)导致的大鼠神经组织氧化损伤的拮抗作用和对周围运动神经毒性的影响.方法 Wistar雄性大鼠40只,随机分为正常对照组、模型组、人蒜油低、高剂量组,每组10只.模型组及大蒜油低、高剂量组分别给予2,5-HD 300ms/ks腹腔注射,正常对照组给予生理盐水,5次/周,持续6周.大蒜油低、高剂量组提前1周分别给予40和80mg/kg大蒜油灌胃,持续至实验结束.测定后肢撑力指数和平衡指数等神经行为学指标,实验结束取脑、脊髓和坐骨神经分别测定丙二醛(MDA)、还原型谷胱廿肽(CSH)含量、总抗氧化能力(T-AOC)和抑制羟自由基能力.结果 与第0周比较,后肢撑力指数第4周模型组升高44%,大蒜油低剂量组升高50%,大蒜油高剂量组升高49%,但3组间差异无统计学意义(P>0.05);第4周模型组平衡指数降低30%,大蒜油低剂量组降低45%,大蒜油高剂量组降低68%,与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.01).大蒜油低、高剂基组大鼠在第4周即出现运动异常,较模型组人鼠提前1周;各组步态评分,模型组,大蒜油低、高剂量组均明显高于对照组,且大蒜油高剂量组高于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05).在大脑、脊髓和坐骨神经中,与正常对照组相比,模型组人鼠MDA含量升高,抑制羟自由基能力降低,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,大蒜油低、高剂量组在各神经组织中MDA含量均明显降低,抑制羟自由基能力明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 大蒜油可拮抗2,5-HD所致的大鼠神经组织氧化损伤,但并末改善2,5-HD导致的周围运动神经损伤,提示氧化-抗氧化损伤不是2,5-HD中毒性神经病的主要机制.     

二硫化碳对大鼠神经组织氧化-抗氧化系统的影响

目的探讨二硫化碳亚慢性染毒对大鼠神经组织氧化-抗氧化系统的影响。方法雄性Wistar大鼠30只，随机分为对照组和低、高剂量染毒组，每组10只。利用300和500mg·k^-1·d^-1二硫化碳灌胃染毒，每周5次，连续12周，建立大鼠中毒性神经病模型，测定大鼠大脑、脊髓和坐骨神经中丙二醛（MDA）、活性氧（ROS）、谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPx）、过氧化氢酶（CAT）和总抗氧化能力（T-AOC）等指标的变化。结果与对照组相比，染毒大鼠神经组织中MDA和ROS含量明显增加。其中，低、高剂量组大脑MDA含量分别增加20．7％、33．6％，脊髓MDA含量增加18．5％、23.3％，坐骨神经MDA含量增加23.1％、53．0％；低、高剂量组大脑ROS含量分别升高20．1％、34．9％，高剂量组脊髓、坐骨神经ROS含量分别升高14．1％、15．4％，差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0，01）。与对照组相比，染毒大鼠神经组织中GSH含量、SOD、GSH—Px、CAT活力和T—AOC明显降低，其中，低、高剂量组大脑GSH含量分别降低17．2％、26，5％，脊髓GSH含量降低26．4％、31．2％，坐骨神经GSH含量降低15．1％、20．0％；低、高剂量组大脑T—AOC分别降低11．1％、26．4％，脊髓T．AOC降低15．1％、38．4％，坐骨神经T—AOC降低35．6％、42．3％；低、高剂量组脊髓SOD活力分别降低12．1％、25．4％，坐骨神经SOD活力降低16．4％、30-3％；低、高剂量组脊髓GSH—Px活力分别降低17．3％、32．5％，坐骨神经GSH．Px活力降低17．1％、21．5％；高剂量组大脑GSH—Px、SOD活力分别降低12．6％、30．1％；低、高剂量组大脑CAT活力分别降低17．5％、39．4％，脊髓CAT活力降低25．2％、31．3％，坐骨神经CAT活力降低17．1％、36．9％，上述差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论二硫化碳损伤了大鼠神经组织的氧化-抗氧化系统，可能与二硫化碳中毒性神经病的发生机制有关。     

细胞周期依赖性蛋白激酶5/p35在2,5-己二酮中毒大鼠神经组织中的表达

目的 探讨细胞周期依赖性蛋白激酶5(CDK5)在2,5-己二酮(HD)中毒性周围神经病发病过程中的作用.方法 30只雄性Wistar大鼠,随即分为对照组、200mg/kg HD染毒组和400mg/kg HD染毒组,每组10只.染毒途径为腹腔注射,每周5次,连续8周,建立HD中毒性神经病模型.利用Western blotting方法检测大脑、脊髓和坐骨神经胞浆蛋白和膜蛋白中CDK5、p35和p25的相对含量.结果 与对照组相比,P35蛋白含量在200、400mg/kg HD染毒大鼠大脑和脊髓胞浆蛋白组分中明显降低,而在脊髓和坐骨神经膜蛋白组分中含量明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.01);p25变化趋势与p35基本一致.CDK5在200、400mg/kg HD染毒大鼠大脑胞浆和膜蛋白中均明显下降;除坐骨神经膜蛋白组分中未检出外,在脊髓和坐骨神经中CDK5含量明显升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 HD中毒后大鼠神经组织中CDK5及其激活因子p35和p25发生明显改变,这种改变可能与HD中毒性周围同神经病的发病机制有关.     

超微六味地黄汤对孕期被动吸烟胎鼠脑Bax、Bcl-2和Casepase-3的影响

目的研究六味地黄汤超微和传统饮片对胎鼠脑发育不全的干预作用，并从细胞凋亡角度探讨其机理。方法采用孕鼠被动吸烟造成胎鼠脑发育不全，分别给予六味地黄汤超微和传统饮片进行治疗。采用免疫组化法检测Bax、Bcl-2和Casepas’e-3。结果模型组三项指标均明显高于正常组（P〈0．01）；治疗组与模型组相比Bax和Caspase-3明显减少（P〈0．01）；但仍高于正常组（P〈0．01）；治疗组与模型组相比Bcl-2变化不大（P〉0．05）。超微全量组和1／3量组Caspase-3表达较传统组少（分别为P〈0．05和P〈0．01）；超微全量组Caspase-3的表达较超微1／3量组少（P〈0．01）。结论孕期被动吸烟可以导致胎鼠脑Bax、Bcl-2和Casepase-3表达水平升高，六味地黄汤能降低Bax和Casepase-3的表达水平。     

三邻甲苯基磷酸酯诱发的迟发性神经病动物模型的病理和微管相关蛋白的改变

目的 建立母鸡迟发性神经病(OPIDN)模型,观察其病理改变及微管相关蛋白2(MAP2)的改变.方法 选取12月龄的产卵母鸡48只,随机分为对照组和3个三邻甲苯基磷酸酯(TOCP)染毒组,每组12只.TOCP染毒组的动物经口一次性灌胃染毒,剂量分别为250、500、750 mg/kg,观察中毒症状,染毒后第21天处死动物,其中6只动物取脑、脊髓和坐骨神经,进行HE染色和髓鞘染色;另6只动物的脑组织匀浆后用免疫印迹(Western blot)法测定MAP2的蛋白表达.结果 500和750mg/kg剂量组动物出现不同程度共济失调症状,脊髓、坐骨神经出现神经胶质增生、髓鞘脱失及轴突变性.500和750 mg/kg剂量组MAP2蛋白表达明显升高,分别较对照组升高了25%和23%,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 TOCP引起各剂量组动物出现不同程度的OPIDN病理改变;TOCP可引起鸡神经组织中的MAP2含量发生改变,这种改变可能与TOCP引起的迟发性神经毒性有关.     

染锰鼠睾丸增殖细胞核抗原与热休克蛋白表达

目的研究锰对小鼠精子数量与睾丸增殖细胞核抗原(PCNA)和热休克蛋白70(HSP70)表达的影响。方法将小鼠随机分为3个不同剂量MnCl2(7.5,15,30 mg/kg)组和对照组,分别于染锰,3,7,14,28,56 d计数精子数量,用免疫组化S-P法结合图象分析技术测定睾丸PCNA和HSP70表达。结果随染锰剂量增加和时间延长精子数量减少、睾丸PCNA表达降低。3个不同剂量MnCl2组精子计数于染锰28 d明显低于对照组(P<0.05,P<0.01,P<0.01),睾丸PCNA表达于染锰14,28,56 d比对照组明显降低(P<0.05,P<0.01,P<0.01),直线相关分析各染锰组小鼠精子数量与睾丸PCNA表达呈正相关(r=0.794,P<0.01)。睾丸HSP70表达,15,30 mg/kg组染锰56 d明显低于染锰28 d(P<0.01)。结论锰对小鼠生精功能的损伤呈一定的剂量-效应和时间-效应关系。各染锰组小鼠精子数量与睾丸PCNA表达呈正相关(r=0.794,P<0.01)。锰可诱导小鼠睾丸HSP70表达,染锰28 d达高峰。     

叶酸与维生素B12对2型糖尿病大鼠心肌组织凋亡 相关蛋白表达的影响

摘要:目的　观察2型糖尿病大鼠心肌凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3的表达变化及叶酸、维生素B12的干预作用。方法　6周龄SD大鼠60只,糖尿病造模成功后,随机分为对照组（A组）、模型组（B组）、叶酸和维生素B12干预组（C组）。12周后取血检测各组同型半胱氨酸（Hcy）、叶酸、维生素B12的水平;取大鼠心肌组织,免疫组化法检测Bax,Bcl-2,Caspase-3的表达,并用计算机图像分析系统测平均灰密度值。结果　12周后B组Hcy明显增高,与A组和C组比较,差异均有统计学意义（P＜0.01）,C组叶酸、维生素B12与A组和B组比较,差异均有统计学意义（P＜0.01）;心肌组织中,B组Bax、Caspase-3的表达明显高于A组（P＜0.01）,Bcl-2的表达明显低于A组（P＜0.01）;C组Bax、Caspase-3的表达较B组明显下降（P＜0.01）,Bcl-2的表达明显高于B组（P＜0.01）;A组与C组Bax、Caspase-3、Bcl-2的表达差异无统计学意义（P＞0.05）。结论　2型糖尿病大鼠血液中Hcy的升高,可能在促进心肌细胞凋亡过程中发挥重要作用,而叶酸、维生素B12的干预可以有效缓解病变进程。     

参附注射液对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠海马神经元Bax、Bcl-2表达的影响

目的:探讨参附注射液对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后海马神经元Bax、Bcl-2蛋白表达的影响及其治疗作用。方法:建立新生大鼠HIBD模型,把实验分成两部分:①观察缺氧缺血后3、7、14、28天各组的体重变化以及各组28天内生存率;②观察缺氧缺血前2h,缺氧缺血后2、12、24h,3、7、14、28天各时间点新生大鼠海马CA1区神经元Bax、Bcl-2蛋白的表达。每组实验随机分为4组:假手术组(S组)、生理盐水对照组(C组)、参附预处理组(P组)、参附治疗组(SF组)。结果:SF组和P组较C组Bax表达明显下调(P<0.05,P<0.01),而Bcl-2表达显著上调(P<0.05,P<0.01),生长发育和生存情况明显好于C组。结论:参附改善了新生大鼠HIBD后的生长发育,提高了其生存率;可明显下调新生大鼠HIBD后海马神经元Bax蛋白表达及上调Bcl-2蛋白的表达。     

大剂量甲基强的松龙对大鼠急性脊髓损伤后Caspase-9mRNA及HSP27mRNA表达的影响

目的通过对大剂量甲基强的松龙（MP）对大鼠急性脊髓损伤（ASCI）后Caspase-9mRNA及热休克蛋白27（HSP27）mRNA表达影响的观察,探讨MP治疗ASCI的作用机制。方法选用72只大鼠,建立ASCI模型,应用原位杂交技术研究MP组和生理盐水（NS）组在伤后1、3、6h和1、2、3d脊髓组织中Caspase-9 mRNA、HSP27mRNA的动态变化。结果MP组与Ns组脊髓损伤组织中存在Caspase-9 mRNA、HSP27mRNA的阳性表达。ASCI后Caspase-9 mRNA表达增加,6h最为显著（12．26±2．09）,MP组除1h组外（P〉0．05）,在伤后各时间点的表达明显低于Ns组（P〈0．01）;ASCI后HSP27 mRNA表达增加,1d最为显著（11．40±1．52）,MP组除1h组外（P〉0．05）,在伤后各时间点的表达明显高于Ns组（P〈0．01）。结论MP对ASCI的治疗有效,其机制可能是通过促进HSP27合成从而抑制Caspase-9的合成实现的。     

磷酸三邻甲苯酯对母鸡神经组织线粒体膜通透性的影响

目的 研究磷酸三邻甲苯酯(tri-ortho-cresyl phosphate,TOCP)对母鸡神经组织线粒体膜通透性的影响,探讨有机磷诱导迟发性神经毒性的机制.方法 成年罗曼母鸡随机分为4组,每组24只,TOCP溶解于玉米油中,染毒组分别按185、375、750 mg/kg经灌胃一次性染毒,灌胃量为0.65 ml/kg,对照组给予等体积玉米油.分别于染毒后第1、5、15、21天处死动物,迅速剥离母鸡大脑、小脑、脊髓组织,分离其线粒体,测定线粒体膜通透性和跨膜电位的改变.结果 染毒组与对照组相比,大脑中线粒体膜通透性改变不明显;小脑375、750 mg/kg组在染毒第1、5天时通透性有明显增加(P＜0.05);染毒第1天时3个染毒组脊髓中线粒体膜通透性均明显增加(P＜0.05),染毒第5、15天时375、750mg/kg组膜通透性明显增加(P＜0.05).各剂量组间及各时间点之间跨膜电位均未观察到明显改变.结论 TOCP能明显增加母鸡小脑及脊髓中线粒体膜通透性.