CD133 在骨髓增生异常综合征患者中的表达及临床意义

摘要：目的探讨骨髓增生异常综合征（MDS）患者骨髓中CD133的表达及其临床意义。方法应用流式细胞仪采用直接
免疫荧光标记法,分别测定31例难治性贫血伴幼稚细胞增多（RAEB）、10例难治性血细胞减少伴多系发育异常（RCMD）
以及11例再生障碍性贫血患者骨髓中CD133+细胞和CD34+/CD38-细胞比例,对比分析CD133及CD34/CD38在不同亚型
MDS中的表达及临床意义。结果在RAEB型MDS患者骨髓有核细胞中,CD133阳性细胞平均占6.75%,RCMD患者平
均占1.41%,而再生障碍性贫血对照组占2.70%,RAEB组显著高于其他两组（P<0.05）;再障对照组与RCMD组之间无显
著性差异（P>0.05）;CD34+/CD38-细胞比例在3组中均小于1%,统计学上无显著性差异（P>0.05）。结论CD133在MDS
的进展类型RAEB患者骨髓细胞中高表达,CD133有助于RAEB分型诊断;而CD34+/CD38-标记在MDS分型诊断中并无
价值。     

骨髓增生异常综合征患者骨髓细胞的免疫表型分析

目的　了解骨髓增生异常综合征 (MDS)患者骨髓细胞的分化抗原的表达情况。方法　采用流式细胞术的CD45 -侧向散射光 (SS)设门的方法 ,检测 14例骨髓增生异常综合征患者 ,16例急性髓系白血病 (AML)和 5例骨髓形态学正常的非血液病患者的骨髓和干 /祖系分化抗原。结果　MDS患者原始细胞群所占比例为 (11 2± 7 3 ) % ,明显高于对照组而低于AML组。该群细胞的髓系和干 /祖系分化抗原 ,MDS及AML组均存在较高的阳性表达 ;71 4%的MDS患者低SS表达的粒细胞群明显增加 ;2 8 6%的MDS患者髓系细胞群的部分细胞表达淋系抗原CD7。结论　MDS患者骨髓细胞存在复杂异常的分化抗原表达 ,通过免疫表型分析有助于MDS的诊断。     

伴染色体结构异常的骨髓增生异常综合征

目的研究伴染色体结构异常的骨髓增生异常综合征（MDS）患者的临床和实验室特点。方法584例有可分析细胞遗传学资料的MDS患者,对其中有染色体结构异常患者按WHO标准重新进行诊断分型,对这些患者的临床和实验室特点进行回顾性分析。结果MDS患者染色体结构异常发生率为7．4％,常见染色体结构异常有i（17）（q10）、t（1;3）（p36;q21）、der（1;7）（q10;p10）和der（22）,另13例患者的染色体结构异常迄今尚无文献报道。i（17）（q10）患者表现中、重度贫血,骨髓易见粒系核左移,少颗粒,假Pelger—Hiiet异常及淋巴样小巨核,多为单纯核型异常,预后差。t（1;3）（p36;q21）患者表现大细胞性贫血,骨髓可见粒系成熟障碍,单核细胞比例高,巨核系病态增生,以MEL1基因表达为主或仅表达MEL1。der（1;7）（q10;p10）患者多以感染起病,大细胞或正细胞性贫血,骨髓三系病态造血,中位生存期短。der（22）患者表现贫血,血小板不低,骨髓可见粒系少颗粒,假Pelger-Hiiet异常及单元核、双元核巨核细胞,伴累及22q11的易位。结论伴i（17）（q10）、t（1;3）（p36;q21）和der（1;7）（q10;p10）的MDS可能为独立的临床病理遗传学病种,而der（22）尚有待更多的病例进一步证实。     

骨髓增生异常综合征患者Fas抗原的表达及临床意义

目的:探讨Fas(CD95)在骨髓增生异常综合征(MDS)发病机制中的作用及临床意义。方法:用酶联免疫夹心法检测25例MDS患者血浆可溶性Fas(sFas),用流式细胞术检测骨髓(BM)CD34+细胞、CD34-细胞、外周血单个核细胞(PBMNCs)Fas抗原的表达。结果:MDS难治性贫血伴有原始细胞增多(RAEB)/转变中的RAEB(RAEB-t)组患者骨髓CD34+细胞百分率显著高于对照组及难治性贫血(RA)组(均为P<0.01);RA组及RAEB/RAEB-t组骨髓CD34+细胞Fas表达显著高于对照组(分别为P<0.01,P<0.05),其中RA组高于RAEB/RAEB-t组,有统计学意义(P<0.05);RA组患者骨髓CD34-细胞Fas表达高于对照组及RAEB/RAEB-t组患者(均为P<0.05)。两患者组血浆sFas显著低于正常对照(均为P<0.01),sFas水平与患者血红蛋白(Hb)浓度呈正相关(r=0.67,P<0.01)。结论:MDS患者骨髓、外周血细胞Fas抗原广泛表达,Fas表达异常与MDS的发生、发展密切相关。     

Treg细胞在骨髓增生异常综合征中的变化及其意义

目的 研究CD4+Treg细胞在骨髓增生异常综合征(MDS)中的变化及其意义.并探讨CD4+Treg细胞在MDS低危组和MDS高危组中的变化和内在联系.方法 流式细胞仪检测MDS低危组(21例)、MDS高危组(15例)及正常对照组(22例)CD4+CD25+T细胞和CD4+FOXP3+T细胞分别占CD4+T细胞的比例,采用直接免疫荧光法标记T细胞特征抗原.结论 CD4+FOXP3+T细胞占CD4+T细胞的比例在各组中比较:MDS低危组与高危组均明显高于正常对照组,MDS高危组高于低危组,差异有统计学意义,CD4+CD25+T细胞占CD4+T的比例在各组中无明显差异.结论CD4+Treg细胞在MDS组较正常对照组明显升高,并且随着疾病的进展CD4+Treg细胞逐渐升高.     

骨髓增生异常综合征18例的转归

骨髓增生异常综合征１８例中，ＲＡ４例，ＣＭＭＬ１例，ＲＡＥＢ１２例，ＲＡＥＢ－Ｔ１例。经用维甲酸、康力龙或丙睾或甲基强的松龙，胎肝悬液输注、输血、中药及小剂量阿糖胞苷、阿克拉霉素或ＨＯＡＰ、ＨＡ方案等基本缓解２例，明显进步３例，无效１３例。６例ＲＡＥＢ演变为急非淋Ｍ２型，演变时间１￣７月，死亡，２例ＲＡ死亡。     

骨髓增生异常综合征的有关预后因素

骨髓增生异常综合征(MDS)依照FAB协作组可分为5种类型:a.难治性贫血(RA),b、难治性贫血伴环状铁粒幼细胞增多(RAS). c.难治性贫血伴原始细胞过多(RAEB).d。慢性粒单细胞白血病(CMML), e.转化期RAEB(RAEB-t)。Kerkhofs等报告,RA中位生存期(MST)50个月,RAS和CMML为60~+个月,而RAEB、RAEB-t患者的MST分别为9个月和6个月,预后不良。Mufti等认为MDS患者的预后差异极大,无论是否并发急性髓性白血病,长期血细胞减少者病死率高。但亦有患者可多年保持无病症,呈良性经过。现就有关预后因素简述如下:     

骨髓增生异常综合征患者免疫功能检测的临床意义

①目的探讨骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)患者免疫功能的变化及临床意义。②方法采用流式细胞术检测23例确诊但未治疗的MDS患者及20例健康志愿者的外周血淋巴细胞亚群,包括CD3+T淋巴细胞、CD3+CD4+T淋巴细胞、CD3+CD8+T淋巴细胞、CD4+/CD8+的比值、B淋巴细胞(CD3-CD19+)和NK细胞[CD3-(CD16+/CD56+)]亚群比例。③结果与健康对照组相比,MDS患者外周血T淋巴细胞计数明显减低,亚群比例失衡,以CD4+的T辅助细胞亚群减低为主,CD8+的抑制性T细胞阳性率增加,CD4+细胞与CD8+细胞比例倒置,具有杀伤肿瘤细胞作用的NK细胞和B细胞数量亦低于正常人。④结论 MDS患者的免疫功能降低,检测MDS患者外周血淋巴细胞亚群表达可用于MDS患者的免疫监测。     

骨髓增生异常综合征CD7抗原的表达

目的 ＣＤ７的测定在骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）的诊断及预后判断中的意义。方法 应用单克隆抗体采用间接免疫荧光法对３０例ＭＤＳ患者骨髓单个核细胞（ＭＮＣ）进行ＣＤ７的检测。结果 ＭＤＳ患者ＣＤ７抗原表达增高,而且随ＭＤＳ恶化,即由ＲＡ／ＲＡＳ向ＲＡＥＢ／ＲＡＥＢ－Ｔ转化,ＣＤ７抗原表达增高,易于转化为白血病。结论 ＭＤＳ患者ＭＮＣ表面ＣＤ７的检测有助于ＭＤＳ的诊断,也可协助预后判断。     

骨髓增生异常综合征患者的临床特点和预后分析

对91例骨髓增生异常综合患者进行回顾性分析,并进行分型和预后评估。发现骨髓原始细胞比例增高的患者生存时间短、急性白血病转化率高;FAB、WHO评分系统均能有效地评估患者的预后。     

流式细胞术分析骨髓增生异常综合征小巨核细胞的初步研究

目的：建立基于巨核细胞糖蛋白Ⅱb／Ⅲa（CD41a）和碘化丙啶（PI）双标记的流式细胞术（FCM ）分析骨髓小巨核细胞的方法,并研究其在骨髓增生异常综合征（MDS）诊断中的意义。方法采用异硫氰酸荧光素标记的单克隆抗体标记CD41a ,PI标记巨核细胞DNA ,用FCM分析巨核细胞倍体分布。结果42例MDS患者,FCM 检测小巨核细胞阳性率为90．5％,瑞氏‐姬姆萨染色和免疫组织化学方法检测阳性率分别为54．8％和64．3％,三者比较差异有统计学意义（χ2＝13．640,P＝0．001）;FCM检测MDS低危组和高危组小巨核细胞阳性率分别为81．8％和100％,差异有统计学意义（χ2＝4．019,P＝0．045）。结论 FCM检测M DS小巨核细胞检出率高,且高危患者小巨核细胞检出率更高,有助于M DS的早期诊断和预后评估。     

原发性肝癌患者外周血CD133CD105细胞水平及意义

目的 探讨原发性肝癌(HCC)患者外周血CD133+/CD105+细胞表达水平及其与临床预后的关系。方法用流式细胞仪检测80例原发性肝癌患者和20例健康者CD45-/CD133+/CD105+细胞比例,分析其与年龄、性别、临床分期、组织学分化程度、淋巴结转移及手术预后的关系,采用Kaplan-Meier方法进行生存率分析,应用Cox比例风险模型进行多因素分析。结果 原发性肝癌患者外周血CD45-/CD133+/CD105+细胞水平较术后及健康对照组升高,差异有统计学意义(P=0.003、P=0.000)。术后复发组术前外周血CD45-/CD133+/CD105+细胞水平高于术后未复发组,差异有统计学意义(P=0.015)。患者外周血CD45-/CD133+/CD105+细胞比例与临床分期、分化程度、有无淋巴结转移密切相关(均P<0.05),与年龄、性别无关。CD133与CD105的表达呈正相关(r=0.846,P<0.05)。患者外周血CD45-/CD133+/CD105+细胞比例>0.5%者术后生存率较细胞比例≤0.5%者下降(P<0.05),CD45-CD133+细胞比例>1.1%者术后生存率较细胞比例≤1.1%者降低(P<0.05),CD45-CD105+细胞比例>36%者术后生存率较细胞比例≤36%者降低(P<0.05),外周血CD45-/CD133+/CD105+细胞表达水平、分化程度、有无淋巴结转移是影响肝癌预后的独立因素。结论 肝癌患者外周血CD45-/CD133+/CD105+细胞表达水平明显升高并且与肝癌的恶性程度密切相关。外周血CD45-/CD133+/CD105+细胞表达水平降低是肝癌患者预后良好的独立因素,是潜在的抗癌靶标。     

骨髓增生异常综合征患者外周血细胞免疫表型分析

目的：探讨糖基磷脂配肌醇锚蛋白(GPI-AP)在骨髓增生异常综合征(MDS)患者外周血细胞上的表达情况。方法：利用免疫荧光标记技术和流式细胞仪的方法，对20名正常人、36例MDS、42例阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)和再障—PNH(AA—PNH)综合征患者的外周血细胞表面GPI-AP：退变加速因子(DAF，CD55)和反应性溶血膜抑制物(MIRL，CD59)表达情况进行分析。结果：部分MDS患者血细胞有GPI-AP的缺乏，缺陷红细胞、粒细胞异常率均明显低于PNH或AA—PNH综合征患者(P＜0．005)。结论：部分MDS患者血细胞有锚蛋白的表达缺陷，缺陷细胞的检出率较低且以Ⅱ型细胞为主。     

骨髓细胞DNA倍体及增殖周期的检测在骨髓增生异常综合诊断中的作用

目的 探讨DNA倍体及增殖周期在骨髓异常增生综合征（MDS）的变化及意义。方法 应用流式细胞仪（FCM）测定MDS组和良性血液病组骨髓细胞的DNA倍体及增殖周期。结果 良性血液病组无一例检出DNA非整倍体，MDS组DNA非整倍体检出率（25．7％）明显高于对照组。MDS组骨髓细胞G0／G1期百分比明显高于对照组（P＜0．05），S＋G2／M期百分比明显低于对照组（P＜0．05）。结论 流式细胞仪DNA倍体及周期分析是MDS一个重要的诊断指标，对于MDS的疗效，预后判断有重要的意义。     

骨髓细胞DNA倍体及增殖周期的检测在骨髓增生异常综合征诊断中的作用

[目的] 探讨DNA倍体及增殖周期在骨髓异常增生综合征(MDS)的变化及意义.[方法] 应用流式细胞仪(FCM)测定MDS组和良性血液病组骨髓细胞的DNA倍体及增殖周期.[结果] 良性血液病组无一例检出DNA非整倍体,MDS组DNA非整倍体检出率(25.7%)明显高于对照组.MDS组骨髓细胞G0/G1期百分比明显高于对照组(P<0.05),S+G2/M期百分比明显低于对照组(P<0.05).[结论]流式细胞仪DNA倍体及周期分析是MDS一个重要的诊断指标,对于MDS的疗效、预后判断有重要的意义.     

流式细胞术CD45/SSC设门在检测骨髓标本时的意义

目的:探讨用流式细胞术进行白血病免疫的最佳设门方法，以确保分析结果的准确性和可靠性。方法：根据骨髓中原始细胞的CD45表达强度较正常淋巴细胞及单核细胞低的特征，使用三色荧光标记骨髓细胞，采用CD45 PerCP/SSC（对数）进行分析。结果：正常骨髓细胞分为6群，原始细胞的CD45表达低且SSC较小。白血病骨髓中在原始细胞部位出现异常增高的原始细胞群，其位置与其他正常细胞几无重叠。结论：采用CD45 PerCP/SSC（对数）对白血病患骨髓细胞进行分类可以明显提高免疫分型结果的准确性和重复性，特别是对白血病残科病灶检测具有明显优势。     

骨髓增生异常综合征患者骨髓微小RNA-340-3p的表达情况及生物信息学分析

目的 探讨微小RNA(miR)-340-3p在骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓中的表达情况,并应用生物信息学技术分析其靶基因及功能.方法 利用基因表达谱芯片结合分层聚类在9例MDS患者和6例健康正常人骨髓中筛选出差异表达的miR-340-3p,并利用miRBase和Miranda软件预测其靶基因,并对预测的靶基因进行功能富集和信号通路分析.结果 与健康正常人比较,miR-340-3p在MDS患者骨髓中表达下调(P<0.05).获得共同76个潜在靶基因,包括BANP、KIF2C、DIDO1、GRM1等.基因本体(GO)分析显示靶基因主要富集于细胞生物学、分子功能、细胞组分,信号通路分析显示其主要富集于FoxO信号通路、NOD样受体信号通路、造血细胞系、Gap连接等信号转导通路等.结论 miR-340-3p在MDS患者骨髓中表达下调,其可能通过靶向负向调控下游的靶基因而参与MDS的发生发展.     

Expression of CD123 and CD114 on the bone marrow cells of patients with myelodysplastic syndrome

Background Recent studies have shown that interleukin-3 receptor α （CD123） is highly expressed on leukemia stem cells of patients with acute myeloid leukemia, and is correlated with tumor load and poor prognosis.The expression of CD123 may also be high in patients with myelodysplastic syndrome （MDS）.In this study, the expression and clinical significance of CD123 and granulocyte colony stimulating factor （G-CSF） receptor （CD114） on the bone marrow cells of patients with MDS were investigated to explore the molecular marker of the malignant clone of MDS.Methods Forty-two patients with MDS, who were diagnosed in the Hematological Department of General Hospital of Tianjin Medical University from 2008 to 2009, and twelve normal controls were enrolled in this study.Fluorescence activiated cell sorter （FACS） was used to measure the expression of CD123 on CD34＋CD38- cells and CD114 on CD34＋cells of the bone marrow of these patients and controls and the clinical significance was analyzed.The expression of CD114 on CD123＋CD34＋CD38- cells was further measured to explore the molecular marker of the malignant clone in MDS.Results MDS patients displayed significantly higher proportion of CD34＋CD38-/CD34＋ （（14.03±5.27）%） than normal controls （（7.70±4.36）%, P 〈0.05）.The expression rate of CD123＋CD34＋CD38-/CD34＋CD38- was significantly higher in MDS patients （（48.39±28.15）%） than that in normal controls （（8.75±11.71）%, P 〈0.01）.The expression level of CD123 was significantly correlated with the proportion of bone marrow blasts （r=0.457, P 〈0.05）.The expression rate of CD114＋CD34＋/CD34＋ was lower in MDS patients （（33.05±21.71）%） than that in normal controls （（38.99±19.07）%） but was not statistically significant （P 〉0.05）.The expression of CD114 on CD123＋CD34＋CD38- cells （（34.82±29.58）%） was significantly lower than that on CD123-CD34＋CD38- cells （（53.48±27.41）%） of M DS patients （P 〈0.05）.Conclusions MDS patients displayed higher proportion of CD34＋CD38-/CD34＋ than normal controls.CD123 was highly expressed in the bone marrow of the patients with MDS, significantly correlated with the proportion of bone marrow blasts, and thus might be the marker of MDS malignant clone.CD123＋CD34＋CD38- cells exhibited lower expression of G-CSF receptors, which might partly explain why MDS clone responds worse to G-CSF in vitro and in vivo.     

CD45作门的三色流式细胞术在白血病免疫分型中的应用

目的 介绍一种直接裂解骨髓样本进行急慢性白血病分型的三色流式细胞术。方法 将这种方法应用于115例急性白血病和10例慢性白血病的免疫分型。利用CD45和侧向散射将白血病细胞从正常的淋巴细胞，单核细胞，粒细胞和有核红细胞中区分出来后，用双参数流式细胞术进行分析。结果 流式细胞术测定得到的幼稚细胞比例在很大程度上与形态学计数相关，不同的FAB亚型白血病在CD45/SS图中的形式也不完全相同，当PC5标记的CD45与异硫氰酸荧光黄和藻红蛋白标记的其他抗体联合应用时，可以在对白血病细胞作门的基础上，同时进行白血病细胞表型表达的双参数分析。结论 在白血病免疫分型时，这种作门技术明显优于传统的前向散射对侧向散射作门方法。