人绒毛膜促性腺激素(HCG)的合成与降解

人绒毛膜促性腺激素 (humanchorionicgonadotropin ,HCG)是妊娠时正常胎盘滋养层细胞产生的一种激素糖蛋白。它还可由葡萄胎和绒毛膜癌 (滋养层细胞病 )以及生殖细胞肿瘤 (睾丸绒毛膜癌、胎盘位肿瘤和卵巢生殖细胞肿瘤 )和其他恶性肿瘤产生。少量的HCG还可由垂体腺产生。HCG由两个亚基α、β组成。它们通过离子键和疏水键结合在一起。α亚基是 92个氨基酸的糖肽 ,在 5 2和 78号残基上带有天冬酰胺链接 (N端连接 )的半糖 ,它靠 5个二硫键稳定。α亚基的氨基酸序列与某些垂体糖蛋白激素的亚基相同 ,如LH、FSH、TSH。β亚基是 14 5个氨…     

人绒毛膜促性腺激素第三次免疫测定用国家标准品候选品的建立

目的 建立人绒毛膜促性腺激素(HCG)第三次免疫测定用国家标准品候选品.方法 精确量取来源于妊娠妇女尿液的高纯HCG原料、人血白蛋白和海藻糖,加入至磷酸缓冲液(0.05mol/L,pH =7.4)内,充分混匀后置于2～8℃过夜,次日无菌过滤,0.5mL分装后,冻干制备成HCG国家标准品候选品.以HCG第五次国际标准品(07/364)为对照品,采用9个厂家10种HCG检测试剂盒进行协作标定.同时对候选品的瓶间精密度、稳定性进行分析.结果 HCG候选品免疫活性为14.8±2.5IU/支,瓶间精密度为2.38％,37℃放置16周后,HCG候选品的免疫活性下降在10％范围内.结论 候选品各项指标均符合要求,可作为HCG第三次免疫测定用国家标准品使用.本标准品的建立,将为HCG免疫测定用试剂盒的标准化提供定量基础.     

人绒毛膜促性腺素（HCG）高分子生物活性膜的研制及其在HCG…

本文对固定ＨＣＧ抗体的醋酸纤维素（ＣＡ）生物活性膜的制造和在ＨＣＧ测定中的应用进行了研究。采用乙二胺、丁二胺、乙二胺和癸二胺等烷基二胺与戊二醛的缩合产物作机械掺杂物，以引起可与蛋白质分子耦联的活性基因。掺入已二胺的缩合产物的ＣＡ生物活性膜具有稳定的物理性能、高的生物活性（５５％－６０％）和快的电化学响应速（２－５ｍｉｎ）。用此膜构成的酶免疫传感器与放射免疫法测定ＨＣＧ的结果相比，两者具有良好的相关     

人绒毛膜促性腺素（HCG）高分子生物活性膜的研制及其在HCG测定中的应用

本文对固定ＨＣＧ抗体的醋酸纤维素（ＣＡ）生物活性膜的制造和在ＨＣＧ测定中的应用进行了研究。采用乙二胺、丁二胺、己二胺和癸二胺等烷基二胺与戊二醛的缩合产物作机械掺杂物，以引进可与蛋白质分子耦联的活性基因。掺入己二胺的缩合产物的ＣＡ生物活性膜具有稳定的物理性能、高的生物活性（５５％—６０％）和快的电化学响应速度（２－５ｍｉｎ）。用此膜构成的酶免疫传感器与放射免疫法测定ＨＣＧ的结果相比，两者具有良好的相关性。     

DNA电化学传感器中电极修饰条件的探讨

目的 探讨ssDNA单层膜的制备的最佳条件.方法利用自组装单分子膜技术,将人工合成并修饰的含22个碱基的特异性单链DNA序列固定到金电极上制备成DNA修饰的金电极,通过控制DNA溶液的浓度、作用时间,以及改变修饰基团探讨最佳的修饰条件,并利用循环伏安法初步研究了该修饰电极的电化学行为.结果 通过对不同标记探针、不同探针浓度及不同标记时间的表征,结果显示巯基化ssDNA和二硫键修饰的ssDNA探针浓度为80 μmol/L,自组装固定时间为12 h时对DNA探针的固定效率最佳.结论 巯基化ssDNA和二硫键修饰的ssDNA通过自组装方法可在金电极表面形成稳定、有序的自组装单分子膜(self-assembled monolayer,SAM),可应用于SAM为基底的DNA传感器的设计与应用.     

妊娠高血压综合征患者血HCG的变化及意义

目的 :研究人绒毛膜促性腺激素 (humanChorionicGonadotropin ,HCG)在妊高征病理生理过程中的变化及意义。方法 :用磁性分离酶联免疫 (ImmunoenzymetricAssay ,IEMA)方法测定了 3 2例妊高征患者血HCG的水平 ,并与同期正常妊娠妇女作了比较分析。结果 :妊高征组HCG水平较对照组有非常明显升高 (P <0 .0 1)。结论 :动态测定妊娠晚期妇女血HCG水平可作为诊断妊高征的有价值指标 ,并对其预后有重要参考价值。     

测定人绒毛膜促性腺素(HCG)的酶免疫传感器的研制

本文研制了固定HCG抗体的醋酸纤维素生物活性膜。采用夹心法在膜上发生免疫化学反应,将形成夹心结构的膜,安装在氧电极上,构成酶免疫传感器。耦联过氧化物酶的膜,催化分解H_2C_2致使传感器的输出电流提高,表示为溶液O_2含量的增高。通过溶液中O_2含量的变化值ΔC_2,测定HCG的浓度。被测HCG的浓度范围为5～2500mIU/ml。酶免疫传感器与放射免疫测定相比较,两种方法具有高度相关性,相关系数r=0.998,P<0.001。     

化学发光和电化学发光免疫测定技术在孕妇妊娠中期血清筛查唐氏综合征的应用

唐氏综合征(Down’s syndrome,DS)又称21-三体综合征,在国内活产新生儿中的发生率为1/600～1/800[1],是最常见的一种染色体病。我国自2002年卫生部颁布《产前诊断技术管理办法》以来,全国各地的产前诊断中心如雨后春笋应运而生,唐氏综合征的产前筛查和产前诊断工作在国内广泛开展,大大提高了唐氏综合征患儿的检出率。河北省人     

人绒毛膜促性腺激素游离β亚单位磁分离酶联免疫方法的建立

目的建立一种新的测定人绒毛膜促性腺激素游离β亚单位(hCGβ)磁分离酶联免疫分析法(MEIA)。方法用识别不同表位的两株单克隆抗体(mAb),一株mAb用FITC标记,另一株用碱性磷酸酶(AP)标记;以偶联羊抗FITC抗体的磁珠作为固相,以酚酞单磷酸酯溶液为底物,建立测定hCGβ磁分离酶免疫测定法。结果本MEIA法的灵敏度为0.1IU/L,批内CV小于8.5%,批间CV小于14%,平均稀释回收率为92.5%;与促黄体生成激素(leuteinizinghormone,LH)、促甲状腺激素(thyroidstimulatinghormone,TSH)和促卵泡成熟激素(folliclestimulatinghormone,FSH)均无交叉反应,与完整的hCG(1000IU/L)的交叉反应为1.2%,有效期不低于14个月。结论本方法的性能优于现有的放射免疫(RIA)和ELISA试剂盒,接近进口同类试剂的水平,有助于为市场提供一种高质量而价廉的hCGβ测定试剂盒。     

形状记忆合金Ti50Ni50—xCux的生物相容性评价（Ⅰ）—耐腐…

采用电化学技术评价了ＴｉＮｉ基形状事金加铜前后的耐腐蚀性能，发现有Ｔｉ５０Ｎｉ５０－ｘＣｕｘ三元合金的再钝化电位（Ｅｒｅｐ）ｘｘ Ｔ５０Ｎｉ５０－ｘ二元形状记忆合金提高了２００ｍＶ，即Ｃｕ的加入提高了ＴｉＮｉ基形状记忆合金的再钝化电位，从而提高了其耐腐蚀性能。ＴｉＮｉＣｕ合金的点蚀电位随着介质的ＰＨ值升颃是提高，而再钝化电位不随Ｐ 改变，Ｃｕ的加入对ＴｉＮｉ基合点蚀电位Ｅｐｉｔ无明显影响，而且ＴＩ     

猴／人免疫缺陷嵌合病毒（SHIV）的研究进展

SHIV是SIV基因组框架的基础上利用基因重组技术以HIV部分基因片段来取代SIV相应基因而构建的一种重组病毒。SHIV与亲本株病毒有相似的生物学特性,能在CD46^ 细胞、PBMCs、巨噬细胞中复制,并能引起猴发生AIDS症状。另外SHIV能诱使机体产生中和抗体,可以作为侯选疫苗株,在AIDS预防中有广阔的前景。     

肺炎链球菌自溶酶（LytA）黏膜免疫小鼠的生物安全性评价

目的开展肺炎链球菌自溶酶（LvtA）生物安全性的动物实验研究,为其申报生物制品鉴定提供实验数据。方法制备纯化的重组表达LytA蛋白,以6．5μg、13．0μg和19．5μg3种剂量黏膜免疫BALB／c小鼠,根据《中华人民共和国国家标准食品安全性毒理学评价程序》（GB15193．1—1994）进行LytA的90d喂养试验、传统致畸试验及遗传毒性试验检测,以分析其生物安全性。结果90d喂养试验结果显示各实验组小鼠与对照组小鼠的体重增长趋势一致,且各时间点检测的小鼠体重均无显著性差异（P〉0．05）。传统致畸试验检测发现各实验组小鼠与对照组小鼠心脏、肺、肝脏、肾、脾、胃、子宫重量、红细胞和白细胞数目、谷丙转氨酶、尿素氮、总胆固醇、甘油三脂、血糖、总蛋白、自蛋白及球蛋白等指标均元明显差异（P〉0．05）。小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验结果显示LytA经鼻腔黏膜免疫小鼠无遗传毒性。结论利用90d喂养试验、传统致畸试验及遗传毒性试验证明LytA鼻腔黏膜免疫BALB／c小鼠安全、毒副作用不明显,有良好的生物安全性,值得进一步研究。     

罗氏Cobas e601检测人附睾蛋白4（HE4）残留试剂的性能评价

目的：评价罗氏Cobas e601全自动免疫分析仪检测人附睾蛋白4残留试剂的分析性能,探讨回收再利用的可行性。方法参考美国临床实验室标准化协会(CLSI)系列文件和相关文献,对血清人附睾蛋白4(HE4)回收试剂的精密度、准确度、分析测量范围、生物参考区间进行评价。结果罗氏Cobas e601检测HE4残留试剂批内、批间精密度符合厂商声明;准确度结果相对偏差为0~0.72%;分析测量范围在35.08~1416.50可接受;生物参考区间适用。结论罗氏Cobas e601电化学发光检测使用同批号HE4回收试剂的主要分析性能符合要求,一定时限内可回收利用。     

人乳头瘤病毒（地方株）16型E7蛋白的抗原性和免疫原性研究

以融合蛋白包含体形式在大肠杆菌中高效表达了人乳头瘤病毒１６型（湖北株）Ｅ７基因（ＨＰＶ１６Ｅ７－ＨＢ）。用蛋白质印迹技术对该基因表达产物ＨＢＥ７融合蛋白的性质进行了鉴定。发现ＨＢＥ７融合蛋白能与ＨＰＶ１６Ｅ７单克隆抗体结合，表明该融合蛋白至少部分保留了Ｅ７蛋白的抗原特性。因此，将该融合蛋白免疫小鼠。３ｗｋ后，在小鼠血清中既检测到了抗载体蛋白的抗体，又检测到了特异性抗ＨＢＥ７抗体。实验表明：ＨＢＥ７     

罗氏Cobas e601全自动免疫分析仪检测人附睾蛋白4（HE4）的性能验证

目的：验证和评价罗氏Cobas e601全自动免疫分析仪检测系统人附睾蛋白4项目的分析性能。方法参考美国临床实验室标准化协会(CLSI)系列文件和相关文献,对罗氏Cobas e601电化学发光免疫检测系统测定血清人附睾蛋白4(HE4)的精密度、准确度、分析灵敏度、分析测量范围、生物参考区间5大分析性能进行验证和评价,并将实验结果与厂商声明的性能或公认的质量标准进行比较。结果测定均值为100.66pmol/L的质控样本,验证后S批内为0.827,S总为1.679;测定均值为1296.60pmol/L的质控样本,验证后S批内为6.077,S总为5.596。S批内≤1/4TEa,S总≤1/3TEa(CLIA'88)。准确度在±1%以内,低于卫生部允许的偏差范围;分析灵敏度<5 pmol/L;线性范围为60.65pmol/L~1364.50 pmol/L;生物参考区间在0.00pmol/L~104.00 pmol/L,均与厂商提供的参数接近。结论罗氏Cobas e601电化学发光检测HE4的主要分析性能均与厂商声明一致。本系统检测性能符合CAP要求。