硒化壳聚糖对NB_4细胞的作用及其与NF-κB信号分子的关系

目的:研究硒化壳聚糖对人急性早幼粒细胞性白血病NB4细胞抗氧化指标的影响及其与核因子κB(NF-κB)信号分子的关系。方法:取NB4细胞加入不同浓度的硒化壳聚糖(50、100、200mg·L-1)作用24h后取上清检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、NF-κB蛋白含量或活性,并设培养液为对照组。结果:与对照组比较,硒化壳聚糖各浓度组GSH-px活性明显升高(P<0.01),SOD活性和MDA含量明显降低(P<0.01或P<0.05),NF-κB蛋白含量明显降低(P<0.01),并呈量效关系。结论:硒化壳聚糖可通过减少进入细胞核内NF-κB蛋白含量的方式下调其下游基因表达,以及增强细胞抗氧化能力的方式抑制NB4细胞增殖,诱导细胞凋亡。     

化学应激对大蒜培养细胞SOD的诱导

采用化学诱导剂对大蒜培养细胞的超氧化物歧物酶(SOD)进行了体外诱导,供试诱导剂均能使SOD活力显著升高,诱导能力的大小依次为甲基紫精>水杨酸>甲基萘醌.水杨酸与冷胁迫或热休克复合处理比冷胁迫或热休克单独处理的SOD活力分别提高了1.5～2倍和2～4倍.结果表明水杨酸诱导的SOD以Mn·SOD和Fe·SOD为主,仅有少量Cu/Zn·SOD.     

超氧化物歧化酶的测定及其临床意义

超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD.EC 1·15·1·1)广泛存在于生物体内,其作用是催化超氧阴离子自由基(O(?))歧化反应的酶类。这种反应是自氧化还原反应。O(?)+O(?)+2H~+SOD→O_2+H_2O_2超氧阴离子自由基是具有不成对电子的原子,原子团或分子,是机体氧代谢过程中接受电子不足所形成,对机体有毒性作用,而体内的 SOD 能将氧化能力强的嘌呤变成氧化能力较弱的 H_2O_2,不仅及时消除了 O(?),也防止了(羟自由基)·OH的产生,保证细胞结构的完整性。人体内的 SOD     

邻苯三酚自氧化法测定血浆超氧化物歧化酶的方法学评价及临床应用探讨

目的对邻苯三酚自氧化法测定血浆超氧化物歧化酶(SOD)的方法学进行评价,并探索其临床应用价值。方法根据美国临床和实验室标准协会(CLSI)的评价方法,应用邻苯三酚自氧化法检测血浆SOD,评价其精密度、准确度、线性和回收率;随机选取2014年健康体检者42例作为对照组,2014年3-12月我院住院氧化应激反应相关疾病患者1580例作为疾病组,测定血浆SOD的活性水平,进行临床应用评价。结果用邻苯三酚自氧化法测定SOD精密度试验中批内精密度为1.57%和4.8%,批间精密度为2.17和2.21%;准确性试验相对偏倚为:1.6%和2.4%;线性试验在0~250 U/ml内R2为0.9978;回收率为96.2%~103.4%;SOD在各疾病组与健康对照组差异均具有显著性(P<0.01)。结论邻苯三酚自氧化法测定SOD方法学评价符合要求,其精密度高、准确性好,线性范围宽,具有较高的临床应用价值。     

黑蒜提取液对胰腺癌Panc-1细胞生长与抗氧化分子机制的实验研究

目的探讨黑蒜提取液(aged black garlic extract,ABGE)对Panc-1细胞生长与抗氧化能力的影响。方法将不同浓度的ABGE(0.2、1.0、1.8 mg/ml)作用于Panc-1细胞,采用CCK-8法分别于24 h、48 h、72 h测定Panc-1细胞株的生长能力;RT-PCR检测ABGE干预后Panc-1细胞VEGFm RNA以及MMP-9m RNA表达变化;ELISA法检测Panc-1细胞上清液中相关蛋白VEGF、SOD的表达情况。结果 CCK-8结果显示,黑蒜提取液对Panc-1细胞株的生长活性具有明显的抑制作用,且具有时间剂量依赖关系;RT-PCR结果显示,黑蒜提取液能明显地上调VEGFm RNA以及下调MMP-9m RNA的表达;ELISA法结果显示,随黑蒜提取液浓度的增加,Panc-1细胞上清液中VEGF蛋白的表达水平下降、SOD蛋白表达增加。结论黑蒜提取液能显著抑制Panc-1细胞的生长能力,其抗氧化能力可能是与下调VEGF蛋白表达、MMP-9以及上调SOD表达有关。     

干细胞的研究及其临床应用进展

干细胞具有能够分化成不同的细胞类型，被认为是最佳的治疗各种退化性疾病或器官特异性疾病的方法，它给人类近代医学上带来革命性的改变。目前，干细胞疗法已用于临床上多种疾病的治疗，并进入临床实验和评价阶段。现就干细胞的研究及其临床应用进展简述如下。     

中药PT液对衰老模型小鼠脑部凋亡细胞、Bcl-2和SOD的影响

目的:研究中药PT液对衰老模型小鼠脑部凋亡细胞、Bcl-2和SOD的影响。方法:将昆明种雄性小白鼠40只随机分成4组:正常对照组、模型组、小剂量治疗组(PT1)和大剂量治疗组(PT2)。8周后,断头处死,冰上取鼠的脑部,制成石蜡切片,做凋亡细胞的表达、Bcl-2的免疫组化染色和全血SOD的检测,随后计算凋亡细胞指数(AI)、Bcl-2阳性细胞率和做Bcl-2的免疫图像分析。结果:模型组的AI、Bcl-2阳性细胞率和SOD与对照组比较有显著性差异(P<0.05);PT1组的AI、Bcl-2阳性细胞率和SOD与对照组比较有显著性差异(P<0.05),PT2组的AI、Bcl-2阳性细胞率和SOD与对照组比较都无显著性差异(P>0.05);PT1组的AI、Bcl-2阳性细胞率和SOD与模型组比较无显著性差异(P>0.05);PT2组的AI、Bcl-2阳性细胞率和SOD与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:PT液对治疗衰老具有较好疗效,可通过抗氧化和调节Bcl-2来治疗凋亡,为临床中草药治疗衰老疾病中的凋亡提供理论依据。     

刺梨中SOD药理作用的研究进展

目的 本文对刺梨中超氧化物歧化酶(SOD)参与的各种临床药理学的研究进行综述.方法 对近期国内外相关知名的文献导报进行检索,分析分类和归纳总结.结果 刺梨中含有丰富的SOD,临床上可用于治疗黄褐斑,睡眠障碍和复发性阿弗他溃疡等疾病,在心脑血管疾病,抗癌防癌领域,SOD可以清除自由基,可以达到标本兼治的功效.结论 刺梨富含SOD,在临床上有较好的应用前景.     

牛血铜锌超氧物岐化酶的提纯

超氧物岐化酶(Superoxide dismutase简称SOD)是一种新型的抗炎酶制剂,尤其对治疗关节炎和类风湿关节炎均有明显的效果,此外,在防辐射、防衰老、防肿瘤等方面的应用国外也已进入临床阶段。从SOD的作用机理和毒性试验来看,它对于治疗因超氧游离基O_2~(·-)引起的各种疾病会有一定效果,将成为一种很有前途的生化药物。 SOD广泛存在于各种生物体内,但作为药物大都是以血球为原料提取的铜-锌超氧物岐化     

铜螯合亲和层析对重组人铜锌超氧化物歧化酶的纯化

<正> 铜锌超氧化物歧化酶(Copper-Zinc Su-peroxide Dismutase,Cu/Zn SOD)是机体内超氧自由基的清除剂。大量实验巳证明SOD能防止脂质过氧化,对再灌流损伤,关节炎,自家免疫,放射病等均有明显的治疗效果。传统生化制药的材料来源受限而且价格昂贵,目前许多国家开展SOD基因工程研究。美国Chiron公司的重组SOD已进入临床第三期的开发阶段。基因工程生产大量廉价SOD对今后临床应用具有非常实际的意义。从红细胞中分离纯化Cu/Zn SOD的传统方法比较繁锁,而且是否适用于基因工程生产的重组人Cu/Zn SOD的分离纯化?近年来有     

二至丸对氧化性肝细胞损伤的保护作用研究

目的:研究二至丸对氧化性肝细胞损伤的保护作用。方法:采用过氧化氢体外诱导肝细胞氧化损伤,MTT法检测细胞活性,测定肝细胞上清总抗氧化能力(TAOC)、超氧化物歧化酶(SOD)的水平和丙二醛(MDA)的含量。结果:40、8μg·mL-1剂量的二至丸可显著提高肝细胞的TAOC和SOD水平,降低MDA含量,可明显抑制过氧化氢的氧化损伤,提高肝细胞总抗氧化能力。结论:二至丸可有效抑制肝细胞氧化损伤,该结论可为临床用药提供理论依据。     

鼻咽癌肿瘤干细胞高表达SOD2可对抗顺铂的杀伤作用

目的 探讨鼻咽癌(NPC)肿瘤干细胞对抗顺铂诱导氧化应激损伤的机制。方法 利用 CCK-8 法测定 顺铂对 NPC 细胞 CNE-2 与 NPC 肿瘤干细胞 CNE-2S 的半数抑制浓度。观察不同浓度(0.1、 0.5、 1.0 μmol·L-1)顺 铂作用后, 细胞内活性氧（ROS）、 总谷胱甘肽（GSH）的含量及总超氧化物歧化酶(SOD)的活性改变。实时定量 RT-PCR 测定 1 μmol·L-1顺铂作用于 2 组细胞 48 h 后, 谷胱甘肽合成酶 （GSS）、 γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚基（GCLC）、 γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶调节亚基（GCLM）、 SOD1 和 SOD2 mRNA 的表达情况, 免疫印迹法检测SOD2 蛋白的表达情况。利用小干扰 RNA 技术沉默 SOD2, 并与 1 μmol·L-1顺铂共处理 2 组细胞, 用台盼蓝染色观察细胞的存活情况。结果 顺铂对 CNE-2S 的半数抑制浓度显著高于 CNE-2（μmol·L-1： 9.8±1.1 vs 2.4±0.6,P＜0.05）。在不同浓度的顺铂处理后, 2 组细胞内 ROS 水平升高, 但 CNE-2S 在处理前后的 ROS 水平均低于CNE-2 （P < 0.05）。1 μmol·L-1顺铂刺激后, CNE-2S 与 CNE-2 细胞中 GSH 含量均上升, 但 2 组细胞间无明显差异 （P > 0.05）; 2 组细胞中 SOD 活性均上升, 且 CNE-2S 显著高于 CNE-2 （P < 0.05）。顺铂处理前后, 2 组细胞的GSS、 GCLC、 GCLM 和 SOD1 的 mRNA 水平无明显差异, 但 CNE-2S 中 SOD2 的 mRNA 及蛋白表达水平高于CNE-2 （P < 0.05）。沉默 SOD2 与顺铂共处理 2 组细胞, 能有效抑制其存活率。结论 NPC 肿瘤干细胞 CNE-2S高表达 SOD2 后, 抗氧化应激能力增强, 从而导致对顺铂的耐药。     

刺梨超氧物歧化酶的提纯

<正> 超氧物歧化酶(EC、1、15、1、1)(Supe-roxidedismutase)简称SOD,它能催化超氧阴离子自由基(_·O~-)的歧化作用成为分子氧和过氧化氢。从而减轻_·O~-对机体的损害,即凡是由超氧自由基引起的各类疾病原则上都可用SOD治疗。现已发现它对不少较为难治的疾病有一定的疗效,并且已证明它无毒、无抗原性,能抗炎,抗病毒感染。例如红斑狼疮、皮肌炎。类风湿性关节炎,均可获得缓解或治愈。同时SOD对自身免疫性疾病、放射病、肺炎等疾病的治疗均有效。自从美国巴尔的摩老年     

NO水平下降通过氧化应激引起人胎盘滋养细胞凋亡

目的探讨一氧化氮(NO)水平下降诱导人胎盘滋养细胞凋亡的可能机制。方法体外培养人胎盘滋养细胞株(HTR-8),分别加入10、100、500、1 000μmol·L-1L-NAME,并设置对照组(0μmol·L-1L-NAME),孵育48 h;四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测L-NAME对细胞存活率的影响;采用硝酸还原酶法测定细胞中NO的含量;利用透射电镜、流式细胞术和Annexin-V FITC染色检测L-NAME对HTR-8细胞凋亡的影响;Fe3+还原比色法检测总抗氧化能力(T-AOC)、黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性及硫代巴比妥酸比色法测定MDA含量。结果与对照组比较,100、500、1 000μmol·L-1L-NAME组细胞存活率及NO水平明显降低(P<0.05,P<0.01);Annexin-V FITC染色和流式分析均显示L-NAME能诱导细胞凋亡,并且呈剂量依赖性;NO水平与细胞凋亡数呈负相关(r=-0.5210);透射电镜结果显示:与对照组比较,实验组细胞核形态不规则,核膜固缩呈不规则状,染色质凝集或边集,线粒体肿胀或浓缩、嵴断裂或溶解,甚至消失,形成空泡,尤其在100μmol·L-1L-NAME组可见凋亡小体;同时,HTR-8细胞内T-AOC、SOD水平明显降低(P<0.05),MDA的含量明显升高(P<0.05);细胞凋亡数与T-AOC(r=-0.3212)、SOD(r=-0.2779)水平均呈负相关,与MDA(r=0.2807)含量呈正相关。结论氧化应激在NO水平降低引起的人胎盘滋养细胞凋亡中起重要作用。     

类叶升麻苷调控CREG表达对oxLDL诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用

摘要：目的:探讨类叶升麻苷对氧化型低密度脂蛋白（oxLDL）诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）损伤的影响及机制。方法:不同浓度(1,10,100μmol·L-1)的类叶升麻苷作用于oxLDL诱导的HUVEC细胞,酶联免疫吸附法检测细胞中丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽还原酶（GSH-Px）活力,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白印迹（Western blot）法检测B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白（Bax）和E1A激活基因阻遏子（CREG）蛋白表达水平,实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测CREG mRNA表达水平。转染CREG过表达载体或CREG小干扰RNA至HUVEC细胞,构建CREG过表达或CREG表达抑制的HUVEC细胞。oxLDL诱导CREG过表达的HUVEC细胞,或类叶升麻苷作用于oxLDL诱导的CREG表达抑制的HUVEC细胞,上述相同方法检测MDA含量、SOD和GSH-Px活力、细胞凋亡率、Bcl-2和Bax蛋白表达。结果:oxLDL诱导HUVEC细胞后,MDA含量、细胞凋亡率和Bax蛋白水平升高,SOD和GSH-Px活力、Bcl-2蛋白及CREG mRNA和蛋白水平降低（P<0.05）。类叶升麻苷或过表达CREG可降低oxLDL诱导的HUVEC细胞MDA含量、凋亡率和Bax蛋白表达,提高SOD和GSH-Px活力及Bcl-2蛋白表达（P<0.05）。类叶升麻苷可促进oxLDL诱导的HUVEC细胞CREG mRNA和蛋白表达（P<0.05）,抑制CREG表达降低了类叶升麻苷对oxLDL诱导的HUVEC细胞MDA含量、SOD和GSH-Px活力、细胞凋亡率及Bax和Bcl-2蛋白表达的影响（P<0.05）。结论:类叶升麻苷通过上调CREG表达降低oxLDL诱导的HUVEC细胞氧化应激和凋亡,减轻细胞损伤。     

猪血超氧物岐化酶的提取及纯化

<正> 超氧物歧化酶(Superoxide dismutase简称SOD)是一种新型酶制剂,它在生物界分布极广,几乎从人到细菌、从动物到植物都有它的存在。超氧物歧化酶近年来在国际上引起广泛重视,国外已从牛血中制得的SOD的商品名为Orgotein,从它作用机理和毒性试验来看,它对于治疗因超氧阴离子(O_2~(·-))引起的各种疾病均有一定的治疗效果,尤其对治疗类风湿关节灸、红斑狼疮,皮肌炎等均有明显效果,此外在防辐射、防衰老、抗肿瘤等方面也已进入临床。     

葛根总黄酮对高糖致血管内皮细胞损伤的保护作用及其机制

目的观察葛根总黄酮对高糖致脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖和细胞周期的影响,探讨葛根总黄酮保护高糖致HUVEC损伤的作用机制。方法采用MTT法观察不同浓度葡萄糖对HUVEC增殖的影响,并观察不同浓度葛根总黄酮对高糖环境下HUVEC增殖及用流式细胞仪检测细胞周期的变化,并测定细胞上清液中SOD活性、NO和ICAM-1的含量。结果30 mmol.L-1葡萄糖可明显抑制HUVEC的增殖反应;降低S期细胞的百分率,增加G0/G1期细胞百分率;并降低HUVEC上清液中SOD活性和NO的含量、升高ICAM-1的含量。葛根总黄酮干预后,随着药物浓度的增加,G0/G1期细胞百分率递减,而S期细胞百分率递增;并可提高细胞上清液中NO水平和SOD活性,降低ICAM-1水平,与30 mmol.L-1葡萄糖比较(P<0.05)。结论葛根总黄酮对高糖致HUVEC损伤具有一定的保护作用,该作用的产生可能与其抑制高浓度葡萄糖作用下HU-VEC的增殖,促使细胞由G0/G1进入S期,使DNA合成增加,使细胞上清液中SOD活性和NO含量增加,而ICAM-1的含量降低等有关。葛根总黄酮对防治糖尿病血管病变的发生发展具有积极的意义。     

正常人、高脂血症、心血管病血中过氧化脂质和超氧化物歧化酶的分析

<正> 过氧化脂质(LiPidPeroxides;LPO)是生物膜中的多价不饱和脂肪酸受氧自由基作用生成的脂质过氧化物。超氧化物歧化酶(Su-Peroxide dismutase;SOD)是体内清除氧自由基的重要酶类。自由基的过量生成或体内抗氧化酶如SOD活性降低,可能造成膜脂质的过氧化,使膜结构和功能受损膜老化,而导致衰老,引发多种疾病。为了研究体内LPO与SOD的关系,我们对100例正常成人和部份心血管病、高脂血症患者血清LPO和红细胞SOD进行了分析。     

线粒体治疗在线粒体相关疾病治疗中的应用及展望

线粒体是哺乳动物细胞中供应能量、维持胞内稳态等多种功能的细胞器。目前已知有上百种疾病与线粒体功能缺陷有关。研究表明,外源线粒体可直接进入哺乳动物细胞,并可通过局部注射或静脉注射快速转移到动物或人体细胞内。线粒体治疗(mitotherapy)是通过将正常有功能的线粒体移植到具有线粒体缺陷的细胞中,从而对相关疾病进行防治的新策略。移植的线粒体在受体细胞内可发挥能量生成、维持自由基平衡、恢复细胞活力等功能。由于目前对线粒体相关疾病尚缺乏有效的治疗方法,线粒体治疗将为其防治提供一个新的途径。     

咯利普兰对H_2O_2致PC12细胞氧化应激损伤的保护作用

目的探讨PDE4抑制剂咯利普兰(rolipram)对H2O2致PC12细胞氧化应激损伤的保护作用及其作用机制。方法以H2O2损伤PC12细胞为氧化应激损伤模型,MTT法检测细胞存活率;碘化丙啶(Propidium iodide,PI)染色流式细胞术检测细胞周期变化;化学比色法测定细胞清除羟自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O2·)的能力;以及培养上清液中的丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和一氧化氮(NO)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性。Western blot和Real-time RT-PCR检测细胞内硫氧还蛋白(Trx)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达。结果咯利普兰能明显提高H2O2损伤的PC12细胞存活率,恢复细胞增殖;提高细胞清除·OH和O2·的能力;降低MDA和NO含量,提高GSH含量和SOD活性;使Trx蛋白和mRNA表达增加,同时下调iNOS蛋白和mRNA表达。结论咯利普兰对H2O2致PC12细胞损伤具有保护作用,其作用机制可能与提高PC12细胞的抗氧化能力相关。