土荆皮酸对人肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响及其机制

目的探讨土荆皮酸对肺癌细胞系A549细胞增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法体外培养的A549细胞,用不同浓度的土荆皮酸(0、4、8、16、32μmol/L)处理24、48、72 h,MTT法测定其对A549细胞增殖的影响;土荆皮酸(0、4、8、16μmol/L)处理A549细胞48 h后,流式细胞仪检测细胞凋亡和周期,分光光度计检测Casepase-3相对活性,Western blot法检测PTEN、Akt、p-Akt的表达。结果土荆皮酸能有效抑制A549细胞增殖,且呈浓度和时间依赖性(P<0.05);土荆皮酸作用A549细胞48 h后,细胞凋亡率从14.8%上升至37.7%,显著高于对照组(土荆皮酸0μmol/L)(P<0.05);流式细胞仪检测结果显示,土荆皮酸能抑制细胞的G1期行进和G1/S转换;Casepase-3相对活性显著增加(P<0.05);土荆皮酸可上调PTEN表达并抑制p-Akt的表达(P<0.05)。结论土荆皮酸可抑制A549细胞增殖并促进其凋亡,其作用机制可能与上调PTEN并抑制Akt信号通路,继而阻滞细胞周期并激活线粒体凋亡途径相关。     

中药靛玉红衍生物E804对肺癌A549细胞增殖、凋亡和分化的影响及其作用机制

目的：探讨不同浓度靛玉红衍生物E804对非小细胞肺癌（NSCLC） A549细胞增殖、凋亡和分化的影响,阐明其可能的作用机制。方法：体外培养A549细胞,分为对照组（0μmol·L-1E804）和不同浓度（2.5、5.0和10.0μmol·L-1） E804组。采用MTT法检测各组细胞增殖率,细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力,软琼脂克隆实验观察各组细胞分化及克隆形成能力,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中凋亡相关蛋白和Janus激酶1 (JAK1)/信号转导与转录激因活子3 (STAT3)信号通路相关蛋白表达水平。结果：MTT法,与对照组比较,2.5、 5.0和10.0μmol·L-1E804组细胞增殖率明显降低（P<0.05或P<0.01）,并呈时间和浓度依赖性。细胞划痕和软琼脂克隆法,与对照组比较,2.5、5.0和10.0μmol·L-1E804组细胞迁移距离和克隆形成数减少（P<0.05或P<0.01）。流式细胞术检测,与对照组比较,2.5、5.0和10.0μmol·L-1E804组细胞凋亡率明显升高（P<...     

新藤黄酸体外抑制肺腺癌A549细胞增殖的作用

目的研究新藤黄酸（Gambogenic acid,GNA）抑制肺腺癌细胞株A549增殖的作用及其相关机制。方法不同浓度GNA分别作用A549细胞24、48和72 h,甲基噻唑基四唑（methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）比色法检测药物对A549细胞增殖的抑制率,吖啶橙/溴化乙啶（acridine orange/ethidium bromide,AO/EB）染色荧光显微镜检测细胞的凋亡;乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）法检测GNA对A549细胞损伤作用。结果 MTT法检测结果显示,GNA在0-8μmol/L浓度范围内、24-72 h时间范围内对A549的生长有明显抑制作用,且呈浓度和时间依赖关系;相差显微镜观察表明GNA作用A549细胞48 h后,细胞变圆,呈半贴壁状态;AO/EB染色荧光显微镜观察显示GNA作用48 h后,细胞出现典型的凋亡特征;LDH实验进一步证实GNA在0-4μmol/L浓度范围内对正常细胞未见明显毒性作用。与空白对照组比较,8μmol/L GNA显著降低LDH释放。结论 GNA具有体外抑制肺腺癌细胞株A549增殖的作用,在0-4μmol/L浓度范围内GNA可能是通过诱导细胞凋亡而发挥抑制A549细胞增殖的作用。     

EGCG对肺癌A549/DDP细胞药物敏感性的影响及机制

目的探讨EGCG对肺癌耐药细胞株A549/DDP对顺铂敏感性的影响及作用机制。方法MTT法检测EGCG对A549/DDP细胞药物敏感性的影响。AO/EB染色法检测EGCG联合顺铂处理A549/DDP细胞前后凋亡的形态学改变;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western Blot方法观察EGCG作用前后耐药蛋白GST-π、Survivin表达的变化。结果MTT比色法显示20、40、60μg/mL EGCG均可增加细胞对顺铂的敏感性;荧光显微镜下观察到EGCG处理后细胞体积缩小,核固缩,呈典型的凋亡形态学改变;Western Blot方法检测发现,不同浓度的EGCG处理细胞24 h后GST-π、Survivin蛋白表达均下调。流式细胞术显示,20、40、60μg/mL EGCG联合顺铂处理细胞24 h后,凋亡率逐渐增加,说明EGCG联合顺铂能够促进肺癌耐药细胞株A549/DDP凋亡。结论EGCG能够增加A549/DDP细胞对顺铂的敏感性,其机制可能与降低GST-π、Survivin蛋白表达从而诱导细胞凋亡有关。     

齐墩果酸诱导人肺腺癌细胞A549凋亡及其与细胞内钙离子的关系

目的通过检测齐墩果酸（oleanolic acid,OA）干预后的A549细胞的凋亡和其内钙离子浓度,探索OA对A549细胞的作用及其可能的机制。方法体外培养人肺腺癌细胞系A549。设0、10、20、40μg/ml的OA浓度干预组。选择对数生长期的细胞,在不同浓度OA干预24 h,采用Annexin V/PI流式细胞术（flowcytometry,FCM）检测各实验组细胞的凋亡情况,测定细胞的荧光强度值并计算出细胞内钙离子浓度;以曲线拟合描述细胞凋亡率与钙离子荧光强度之间的相关性。结果FCM检测显示10、20、40μg/ml OA可诱导A549细胞凋亡,凋亡率呈现浓度-效应关系;20、40μg/ml OA干预24 h,A549细胞凋亡率明显增加,与0μg/ml组比较,差异有显著性（P〈0.01）;10、20、40μg/mlOA组干预24 h,各药物干预组A549细胞内钙离子荧光强度均明显高于0μg/ml组,荧光强度随OA浓度的提高呈现增加趋势,差异有显著统计学意义（P〈0.01）;曲线拟合显示细胞凋亡率和细胞内钙离子浓度之间有明显相关性（R=0.981,P〈0.01）。结论OA具有浓度依赖地诱导人肺腺癌细胞凋亡的作用;OA诱导细胞凋亡可能与其导致细胞内钙超载有关。     

苯烯莫德抑制非小细胞肺癌细胞A549的增值并诱导其凋亡

目的：探究苯烯莫德抑制非小细胞肺癌细胞A549的增殖并促进其凋亡的作用机制。方法：通过克隆形成实验检测苯烯莫德对非小细胞肺癌细胞A549和H1299增殖能力的影响，并用CCK-8实验检测不同浓度苯烯莫德对非小细胞肺癌细胞A549细胞活力的影响；不同浓度的苯烯莫德（0,5,10,20）μmol/L处理A549细胞24 h，采用PI染色流式细胞仪检测苯烯莫德对A549细胞周期进程的影响，并采用Western Blot实验检测不同浓度苯烯莫德作用对周期相关蛋白P21和CDK2表达的影响；不同浓度的苯烯莫德（0,10,20,40）μmol/L处理A549细胞48 h,Annexin V-FITC和PI双染检测苯烯莫德对A549细胞凋亡的影响，并采用Western Blot实验检测不同浓度苯烯莫德作用对凋亡相关蛋白cleaved-caspase3,cleaved-PARP表达的影响；通过Western Blot实验检测A549细胞在不同浓度（0,5,10,20）μmol/L苯烯莫德用下p-AKT和FOXO1表达的变化。结果：克隆形成实验结果发现，40μmol/L的苯烯莫德会完全抑制A549和H1...     

AAVC-1诱导A549细胞凋亡的线粒体机制研究

目的:探讨皖南五步蛇蛇毒抑瘤组分Ⅰ(AAVC-1)诱导人非小细胞型肺癌A549细胞凋亡的作用,并分析其可能的线粒体机制。方法:以不同作用浓度的AAVC-1处理A549细胞,采用Annexin V/PI双染流式细胞仪分析法检测A549细胞凋亡百分率;JC-1检测细胞线粒体的膜电位变化,免疫组化检测细胞色素C在线粒体内的分布。结果:不同浓度梯度AAVC-1 1.0、3.0、9.0、20.0μg/m L处理24 h后,与对照组相比,A549细胞早期凋亡率明显增加(P<0.05);线粒体膜电位绿色荧光百分比由(23.01±6.07)%上升至(87.26±9.54)%(P<0.01),荧光显微镜观察到绿色荧光增强;免疫组化显示,随着AAVC-1浓度增加,胞质内细胞色素C平均光密度值明显增加(P<0.05)。结论:AAVC-1可以通过降低线粒体膜电位和促进细胞色素C的释放,激活线粒体通路诱导人非小细胞型肺癌A549的凋亡。     

槲皮素对人肺癌细胞株A-549细胞增殖的抑制作用

目的：观察槲皮素对人肺癌细胞株A-549细胞增殖和凋亡的影响。方法以不同浓度槲皮素培养人肺腺癌细胞株A-549细胞后,采用MTT法检测槲皮素对细胞增殖的影响;流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡变化;通过倒置显微镜、Heochst33258荧光染色、透射电镜观察凋亡细胞的形态学改变;Western blot方法检测凋亡抑制蛋白Survivin的表达情况。结果不同浓度槲皮素作用于人肺腺癌细胞株A-549细胞24h后,细胞存活率显著降低,且与剂量呈依赖关系。15、30、60μmol/L的槲皮素作用于人肺腺癌细胞株A-549细胞24h后,细胞阻滞发生在G2/M期;凋亡率分别为（7.24±1.73）%、（12.57±2.7）%和（26.02±1.67）%,与浓度为0的凋亡率[（2.67±2.32）%]比较,差异均有统计学意义（均P＜0.01）;从形态学上观察到肺癌细胞发生凋亡或坏死。通过Western blot检测发现,随着槲皮素作用浓度的增加Survivin蛋白的表达逐渐降低。结论槲皮素对人肺癌细胞株A-549细胞株有抑制其增殖及诱导凋亡的作用,其机制可能与细胞周期阻滞及抑制凋亡抑制蛋白Survivin的表达有关。     

蟛蜞菊内酯通过抑制JAK2/STAT3信号通路诱导人肺腺癌A549细胞凋亡

目的 探讨蟛蜞菊内酯对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响及作用机制.方法 不同浓度蟛蜞菊内酯(0、5、10、20、40μmol/L)作用于A549细胞12、24、48 h,M T T检测细胞的增殖情况.将细胞分为对照组,甲氨蝶呤组(2μg/mL甲氨蝶呤),蟛蜞菊内酯组(20μmol/L蟛蜞菊内酯).流式细胞术检测细胞凋亡和...     

芒柄花黄素对人肺癌细胞A549增殖与凋亡的影响及其机制

探讨芒柄花黄素对人肺癌细胞A549增殖和凋亡的影响及作用机制.方法:20,40,80 μmol/L的芒柄花黄素作用于人肺癌细胞A549后,采用MTT法分析芒柄花黄素对A549细胞增殖的影响;流式细胞术检测芒柄花黄素对A549细胞凋亡的影响,采用RT-PCR检测芒柄花黄素对A549细胞Bcl-2 mRNA的表达.结果:经芒柄花黄素作用后,MTT结果显示A549细胞的生长抑制率明显增加,流式细胞术检测显示A549细胞凋亡率升高,此外,RT-PCR检测A549细胞Bcl-2 mRNA表达水平明显降低.结论:芒柄花黄素诱导肺癌细胞A549凋亡,抑制其生长,这可能与其下调Bcl-2 mRNA表达有关.     

甲基化硒酸对人前列腺癌DU145细胞增殖与凋亡的影响

目的：观察甲基化硒酸（MSA）对DU145前列腺癌细胞增殖及凋亡的影响，并初步探讨其作用机制。方法:采用MTT比色法观察1.25、2.50和5.00 μmol•L^-1MSA对DU145细胞增殖活力的抑制作用；吖啶橙染色观察MSA诱导细胞凋亡情况；流式细胞术分析细胞周期及凋亡，并计算细胞平均凋亡指数；免疫细胞化学技术观察细胞内激活的caspase-3的表达情况。结果：经1.25、2.50和5.00　 μmol•L^-1MSA处理48　h后，DU145细胞生长抑制率分别为16.35%、38.10%和73.54%，3组间比较差异有显著性（P<0.01），随MSA浓度升高细胞生长抑制率增加，呈明显的剂量依赖性。吖啶橙荧光染色可见，经1.25、2.50和5.00　 μmol•L^-1MSA处理后的细胞呈明显凋亡形态，并随药物剂量增加凋亡细胞数增多；流式细胞术结果显示，经1.25、2.50和5.00　 μmol•L^-1MSA处理48 h后，细胞凋亡率分别为5.34%、8.71%和13.60%，3组间比较差异有显著性（P<0.05）,随MSA浓度升高细胞凋亡率升高，呈剂量依赖关系；免疫细胞化学染色结果显示，随着MSA剂量增加，细胞内激活的caspase-3表达上调。结论:MSA对DU145细胞具有明显的抗肿瘤作用，其机制可能与激活的caspase途径诱导细胞凋亡有关。     

4-羟苯基维胺脂对宫颈癌HeLa细胞系的放射增敏作用

目的探讨4-羟苯基维胺脂(4-HPR)对HeLa细胞生长抑制和凋亡的影响;研究小剂量4-HPR对HeLa细胞的放射增敏效应。方法用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)观察4-HPR对HeLa细胞的生长抑制情况;电镜观察4-HPR、放疗处理后HeLa细胞超微结构的改变;流式细胞仪检测单用4-HPR、γ-射线以及2者联合使用时HeLa细胞凋亡率和细胞周期变化。结果4-HPR和2 Gy60Co照射单独作用均可引起HeLa细胞超微结构改变,发生早期凋亡,4-HPR低剂量组(1μmol.L-1,2μmol.L-1)、单纯放射组与无药对照组凋亡率比较无统计学差异(P>0.05);4-HPR 4μmol.L-1组与无药对照组有显著性差异(P<0.01)。2 Gy60Co照射和4-HPR(2μmol.L-1,4μmol.L-1)联合使用细胞凋亡率较单纯放射组凋亡率有显著性差异(P<0.05,P<0.01);4-HPR作用后,HeLa细胞周期发生变化,表现为G1期减少,S期增加。结论4-HPR可诱导肿瘤细胞凋亡,小剂量4-HPR可增加HeLa细胞对放疗的敏感性。     

巨噬细胞刺激1受体抑制剂BMS777607对肺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨巨噬细胞刺激1受体（MST1R）抑制剂BMS777607对肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响,阐明其可能的机制。方法：选择人肺癌A549细胞,不同浓度（1、5、10、15和20μmol·L^-1） BMS777607处理细胞48 h,同时设对照组,采用MTT法检测各组细胞增殖率;不同浓度（1、5、10、15和20μmol·L^-1） BMS777607处理A549细胞14 d,同时设对照组,采用克隆形成实验观察各组细胞克隆形成情况并检测各组细胞增殖率;不同浓度（10和20μmol·L^-1） BMS777607处理A549细胞24h,同时设对照组,采用EdU掺入法检测各组细胞中EdU阳性细胞率;不同浓度（1、5、10、15和20μmol·L^-1） BMS777607处理A549细胞48h,同时设对照组,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率;应用Western blotting法检测各组细胞中蛋白激酶B（AKT）、磷酸化AKT（p-AKT）、细胞外调节蛋白激酶（ERK）、磷酸化ERK（p-ERK）、聚酰苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）、活化型PARP（Cleaved-PARP）、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9（Caspase 9）和活化型Caspase9（Cleaved-Caspase9）蛋白表达水平。结果：MTT实验,与对照组比较,不同浓度BMS777607组细胞增殖率明显降低（P<0.05或P<0.01）,且呈浓度和时间依赖性。克隆形成实验,与对照组比较,10μmol·L^-1BMS777607组细胞克隆形成数量明显减少,20μmol·L^-1BMS777607组细胞几乎无克隆形成;与对照组比较,不同浓度BMS777607组细胞增殖率明显降低（P<0.05或P<0.01）。EdU掺入法实验,与对照组比较,10和20μmol·L^-1BMS777607组细胞中EdU阳性细胞率均明显降低（P<0.05或P<0.01）。双染流式细胞术检测,与对照组比较,10、15和20μmol·L^-1 BMS777607组A549细胞凋亡率明显升高（P<0.05）。Western blotting法检测,与对照组比较,不同浓度BMS777607组细胞中p-AKT和p-ERK蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,Cleaved-PARP和Cleaved-Caspase9蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。结论：MST1R抑制剂BMS777607能够抑制肺癌A549细胞的增殖,并诱导其凋亡,其机制可能与其抑制p-AKT、p-ERK表达和促进PARP、Caspase9表达有关。     

乳胞素联合卡铂对卵巢癌SKOV3细胞的增殖抑制作用和促凋亡作用

目的：探讨蛋白酶体抑制剂乳胞素（LAC）对体外卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响,并阐明其作用机制。方法：体外培养卵巢癌SKOV3细胞,采用0、2.5、5.0、10.0和20.0μmol·L^-1 LAC干预SKOV3细胞48 h,5μmol·L^-1 LAC干预SKOV3细胞0、24、48和72 h;将细胞分为对照组（细胞不经药物干预）、LAC组（加入5μmol·L^-1 LAC）、卡铂组（加入10、20、40及80μmol·L^-1卡铂）和LAC联合卡铂组（加入5μmol·L^-1 LAC和10、20、40、80μmol·L^-1卡铂）。采用MTT法和流式细胞术（FCM）检测各组卵巢癌SKOV3细胞的增殖抑制率和凋亡率。结果：MTT检测,随着LAC作用时间的延长和浓度的升高,SKOV3细胞的增殖受到明显抑制,48 h时LAC的半数抑制浓度（IC₅₀）为5.36μmol·L^-1;LAC联合卡铂组细胞的增殖抑制率较相同浓度卡铂组明显升高（P<0.05）,卡铂的IC₅₀由58.08μmol·L^-1下降至18.37μmol·L^-1。FCM检测,随着LAC作用时间的延长,SKOV3细胞凋亡率呈升高趋势;与卡铂组和LAC组比较,LAC联合卡铂组SKOV3细胞凋亡率明显升高（P<0.05）。结论：LAC可有效抑制卵巢癌SKOV3细胞的体外增殖且能诱导其凋亡,并可以明显增强卡铂对卵巢癌SKOV3细胞株的增殖抑制作用。     

氟伐他汀对人早幼粒白血病HL-60细胞增殖和凋亡的影响

目的：观察氟伐他汀对人早幼粒白血病HL-60细胞增殖和诱导凋亡的影响,为其抗肿瘤研究提供理论依据。方法：将HL-60细胞分为不同浓度氟伐他汀处理组（终浓度分别为0、0.5、5.0、10.0和20.0 μmol•L^-1）,对照组不加氟伐他汀,阳性药对照组加入全反式维甲酸(ATRA,终浓度为10 μmol•L^-1）,计数活细胞数目检测细胞增殖情况;用CCK-8试剂盒检测HL-60细胞生长抑制率;用流式细胞术检测细胞周期分布和细胞凋亡率。结果：与对照组比较,氟伐他汀0.5、5.0、10.0和20.0 μmol•L^-1处理1~4 d 的HL-60细胞,活细胞数有不同程度减少(P<0.01),且随着氟伐他汀剂量的增加和作用时间的延长,活细胞数明显减少。用氟伐他汀处理HL-60细胞2~72 h后,细胞生长抑制率随着氟伐他汀剂量的增加和处理时间的延长逐渐升高,其中氟伐他汀10.0和20.0 μmol•L^-1处理48和72 h后,细胞生长抑制率明显高于同浓度氟伐他汀作用2 h后（P<0.01）。流式细胞仪分析结果表明,与对照组比较,氟伐他汀处理HL-60细胞48 h后,G₀/G₁期细胞百分比明显上升（P<0.05）,S期细胞百分比明显下降及细胞凋亡率增加（P<0.01）。当用甲羟戊酸和氟伐他汀共同处理HL-60细胞后,可逆转氟伐他汀的上述作用（G₀/G₁期细胞56.11% ,S期细胞37.12%）。结论：氟伐他汀能抑制HL-60细胞增殖并诱导其凋亡₀作用可能是通过甲羟戊酸途径介 导的。     

蛋白酶体抑制剂MG-132对体外C6胶质瘤细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用

目的：探讨蛋白酶体抑制剂MG-132对大鼠C6胶质瘤细胞体外增殖抑制和诱导凋亡作用。方法：分别以不同浓度（10、20和50 μmol•L^-1）的MG-132培养C6胶质瘤细胞,通过MTT法检测不同培养时间细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞凋亡率,HE染色、AO/EB染色以及透射电镜观察细胞形态学变化。结果：MTT法检测显示10 μmol•L^-1MG-132作用于C6胶质瘤细胞24、48和72 h后,细胞增殖A值(0.46±0.03、0.48±0.03和0.45±0.02)均显著低于正常对照组（P<0.01）,且随浓度增加其抑制作用逐渐增强;10μmol•L^-1 MG-132作用C6胶质瘤细胞12 h后即可经流式细胞仪检测到明显的凋亡亚二倍体峰,以不同药物浓度（10、20和50 μmol•L^-1）处理C6胶质瘤细胞12 、24 和48 h后其细胞凋亡率均显著高于正常对照组（P<0.01）;形态学检查呈现凋亡细胞的特征。结论：蛋白酶体抑制剂MG-132在体外可显著抑制大鼠C6胶质瘤细胞增殖并诱导其发生凋亡。     

胡桃醌对肝癌HepG2细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用

目的:探讨胡桃醌对肝癌HepG2细胞增殖的影响,阐明其可能的作用机制。方法:选取处于对数生长期的肝癌细胞株HepG2分为空白对照组和不同剂量(40、80、120、160和200μmol·L1)胡桃醌组。采用MTT法观察胡桃醌对HepG2细胞的抑制作用,并计算出半数抑制浓度(IC50),依据IC50确定胡桃醌的有效浓度;在光学显微镜下观察细胞形态学变化;免疫化学法检测HepG2细胞中Caspase-3蛋白的表达;流式细胞术测定120μmol·L1胡桃醌对HepG2细胞凋亡周期的影响。结果:胡桃醌的IC50为139.8881μmol·L1。与空白对照组比较,各剂量胡桃醌组HepG2细胞增殖抑制率明显升高(P<0.05或P<0.01),并呈剂量依赖性。形态学观察,胡桃醌组细胞体积缩小,连接消失。120μmol·L1胡桃醌组HepG2细胞的生长周期发生变化,出现明显的G2/M期阻滞。免疫细胞化学染色,与空白对照组比较,120μmol·L1胡桃醌组HepG2细胞中Caspase-3蛋白表达明显增加。结论:胡桃醌能诱导HepG2细胞发生凋亡,其机制可能与Caspase通路相关。     

细丝蛋白A对药物诱导的乳腺癌细胞凋亡的影响

目的:研究细丝蛋白A (FLNa)对药物诱导的乳腺癌细胞凋亡的影响,探讨其影响细胞凋亡的具体机制.方法:不同浓度(2.5、5.0、10.0和20.0μmol·L-1)的氯化甲基汞(MMC)、三氧化二砷(AS2 O3)及顺铂(DDP)分别作用MDA-MB-231/MB 231-KD(FLNa+/FLNa-)2种乳腺癌细胞...     

赖氨大黄酸和紫杉醇对肺癌细胞增殖的抑制作用和凋亡诱导作用

目的:研究赖氨大黄酸（RHL）、紫杉醇单独和两者联合对人肺癌H460细胞增殖和凋亡的影响,阐明其作用机制。方法:选取处于对数生长期肺癌细胞株H460,随机分为对照组(不加药物)、紫杉醇组(1 μmol•L^-1紫杉醇)、RHL组(100 μmol•L^-1 RHL)和紫杉醇联合RHL组,并设空白组。采用MTT法和流式细胞术分别检测各组处理后48 h的细胞增殖率和凋亡率;采用Western blotting 方法检测凋亡相关蛋白和MEK/ERK蛋白的表达水平。结果:细胞培养48 h后,联合用药组细胞增殖率显著低于对照组、紫杉醇组和RHL组 (P<0.05),联合用药组细胞凋亡率显著高于对照组、紫杉醇组和RHL组(P<0.05),联合用药组caspase-3和poly ADP-ribose polymerase (PARP)的切割片段蛋白表达强度明显高于对照组、紫杉醇组和RHL组,联合用药组Bcl-2和NF-κB蛋白表达强度明显低于对照组、紫杉醇组和RHL组,同时RHL组紫杉醇上调的MEK和ERK蛋白磷酸化强度降低。结论:紫杉醇和RHL均可抑制肺癌H460细胞增殖,诱导细胞凋亡;RHL通过降低ERK活性、上调caspase-3和PARP的切割片段蛋白表达,增强紫杉醇抑制肺癌细胞增殖和凋亡诱导作用。     

雷帕霉素联合多西紫杉醇对肺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路抑制剂雷帕霉素(RAPA)联合多西紫杉醇(DOC)对肺癌细胞系A549、SPC-A-1、95D和NCI-H446增殖抑制及凋亡的影响。方法甲基噻唑基四唑(MTT)法检测不同浓度RAPA组、DOC组及DOC联合20.0 nmol.L-1 RAPA组对肺癌细胞系增殖抑制作用;流式细胞仪法检测RAPA组、DOC组及DOC联合20.0 nmol.L-1 RAPA组对肺癌95D细胞凋亡的影响。结果 RAPA能抑制肺癌细胞的增殖,其作用呈剂量依赖性;单独应用DOC及DOC联合20.0 nmol.L-1 RAPA均可显著抑制肺癌细胞的增殖,且联合应用抑制率显著升高(P<0.05);流式细胞仪检测显示RAPA及DOC均可增加肺癌95D细胞的凋亡率(P<0.05),联合应用明显增加细胞的凋亡率(P<0.05)。结论 mTOR信号通路参与肺癌细胞的增殖与凋亡,mTOR信号通路抑制剂RAPA可增强DOC的抗肿瘤效应。