我国黄连(味连)质量评价研究

目的:探索黄连(味连)成分动态变化,对各主产地黄连作出质量评价。方法:对我国黄连(味连)药材主产地的重庆石柱县及巫溪县、四川洪雅县及大邑县、陕西镇坪县、湖北利川县的黄连样品(3～5年生)进行成分分析比较,以黄连主要生物活性成分小檗碱、黄连碱、药根碱、巴马汀及总生物碱为指标,分别采用HPLC和UV测定其含量。结果与结论:各地黄连(味连)所测指标性成分及总生物碱含量总体上以5年生为高,结合产量等因素考虑,黄连(味连)药材以5年生采挖为宜;各地黄连(味连)在所测指标成分含量上有一定差异,但均符合现行《中国药典》2000年版规定,总体质量情况良好。     

雅连和味连对内毒素致小鼠死亡率的影响

目的:研究雅连和味连对内毒素所致小鼠死亡率的影响。方法:采用小鼠尾静脉注射脂多糖的方法,连续48h观察小鼠死亡情况。结果:味连小剂量组能明显延长小鼠受脂多糖攻击后的存活时间(P<0.01),雅连小剂量组和味连小剂量组均能降低脂多糖致小鼠死亡率,与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.001)。结论:味连小剂量能够明显延长内毒素小鼠的生存时间,降低死亡率,其作用优于雅连。     

草连与味连的生物碱比较分析

目的：比较研究草连与味连药用部位的生物碱差异。方法：采用TLC法比较草连与味连中生物碱种类的差昔,UV法比较两者生物碱含量的差异。结果：草连根茎中几乎不含表小檗碱,草连叶与根茎中总生物碱含量均低于味连根茎中生物碱含量。结论：草连与味连生物碱种类与含量存在差异,草连的药用价值较低。     

味连生长土壤的研究

通过产地多点调查、结合室内分析对味连生长土壤的分布概况、土类、土壤剖面特征、理化性质、养分状况作了研究。     

基于外观性状和内在质量相关联的白术药材等级划分研究

目的 结合外观性状和内在质量,建立白术药材商品规格等级标准。方法 对收集到的白术药材进行外观性状和内在质量指标的测定。应用SPSS软件对测定结果进行统计和相关性分析,结合市场分等的实际情况,制定白术商品规格等级标准。结果 通过对白术的性状与质量测定结果进行相关性分析,发现白术长度和底部直径、单个重量呈极显著正相关(P<0.01);单个重量与长度和底部直径呈极显著正相关(P<0.01);白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ及其总量之间呈极显著正相关(P<0.01)。综上,以外观性状指标中的单个重量、长度及内在质量指标中的白术内酯总量作为白术内外质量综合评价指标,综合考虑市场实际情况,制定白术商品规格等级划分标准。结论 该研究建立的白术药材等级标准可作为市场商品规格的划分依据,为市场商品的流通提供保障。     

基于外观性状和内在指标划分没药药材商品规格等级研究

目的：制定没药药材商品规格等级标准。方法：收集来自主流药材市场和企业不同规格等级的没药药材样品,测定其性状、薄层色谱、杂质、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物、挥发油、指纹图谱等指标,通过统计学分析,结合文献考证和市场调研,根据规格等级与外观性状、内在指标成分的关系,提炼没药药材商品分级的核心要素和规律,建立新的没药药材商品规格等级标准,并探讨其科学性和实用性。结果：在符合《中华人民共和国药典》 2020年版质量标准的前提下,将性状、薄层色谱鉴别、黄棕色或棕红色没药块含量、浸出物、总灰分、杂质、挥发油作为规格等级划分的核心量化要素具有一定科学依据。建立的天然没药、胶质没药高效液相色谱特征图谱重复性好、专属性强,能清晰地鉴别天然没药和胶质没药2种规格。结论：制定了没药药材商品规格等级标准,能充分反映没药市场商品质量优劣情况。     

峨眉产味连指纹图谱研究

目的 建立道地药材峨眉产味连的指纹图谱,为峨眉产味连的品质评价提供新方法.方法 采用RP-HPLC(DAD)法,梯度洗脱测定峨眉产味连指纹图谱,并作相似度比较分析.结果 初步建立了峨眉产味连的指纹图谱,得到的指纹图谱显示9个特征峰,通过与对照品的保留时间比较,确定其中6,8,9号峰分别为药根碱、巴马汀和小檗碱.结论 RP-HPLC(DAD)法重复性好,可用于峨眉产味连的品质评价.     

环境胁迫对龙葵形态特征及内在品质影响

目的通过研究环境胁迫对龙葵形态特征及内在品质影响,探索出影响龙葵药材质量的因素。为龙葵规范化栽培提供参考。方法采用盆栽方式,利用不同浓度硝酸钾,PEG6000及氯化钠对龙葵进行生理胁迫试验。利用物理测量法对龙葵的形态特征进行测量,采用水分测定及浸出物测定法、UV及HPLC分别对龙葵的水分、醇溶性浸出物、可溶性糖、多糖及澳洲茄碱进行测定。用SPSS16.0统计软件对龙葵形态特征进行多元方差分析。结果龙葵在不同的胁迫处理下,植株形态特征表现出显著差异,水分、醇溶性浸出物、可溶性糖、多糖及澳洲茄碱的含量差异也较大。结论适当的干旱、高盐低氮有利于龙葵的种植开发。     

黄连（味连）“有限成分组合质量标准”的研究

目的:制定黄连（味连）“有限成分组合质量标准”;探索建立评价中药材质量的方法学体系及其在中成药质量评价中的应用可行性。方法:分析味连各主产地样品成分,比较各样品在成分组成和药效上的差异,确定质量评价指标,并测定其在以黄连为主药的中成药中的含量。结果:制定了以小檗碱、黄连碱、药根碱、巴马汀及总生物碱含量上下限为指标的味连“有限成分组合质量标准”;提出了制定中药材质量标准的方法及操作规程;该方法可间接应用于中成药的质量标准制定。     

百蕊草药材内在品质研究

目的:研究百蕊草药材内在品质.方法:以总黄酮、山柰酚、甘露醇、多糖等多种活性成分为评价指标,系统研究不同居群、不同生长期、不同储存时间百蕊草药材内在品质.结果:百蕊草药材总黄酮质量分数3.38%,山柰酚0.984 7 mg·g-1,甘露醇6.12%,多糖14.08%,水溶性浸出物30.28%.不同居群百蕊草主要化学成分相似,但含量存在差异或显著差异;除多糖外,不同生长期百蕊草各化学成分含量呈下降趋势;随储存时间的延长,百蕊草药材总黄酮、山柰酚、甘露醇、多糖及浸出物等成分含量呈下降趋势.结论:在制定百蕊草质量标准时,应以总黄酮、山柰酚、甘露醇、多糖和浸出物等含量为主要成分指标.     

黄连非生物碱类化学成分研究

目的:对黄连中非生物碱类化学成分进行分离和鉴定。方法:利用各种色谱方法进行分离纯化,根据理化性质和NMR,MS等波谱技术鉴定化合物的结构。结果:从黄连乙醇提取物中分离鉴定了13个化合物,包括7个木脂素,3个简单苯丙素,2个黄酮,1个酚酸,分别为erythro-guaiacylglycerol-8-O-4’-(coniferyl alcohol)ether(1),threo-guaiacylglycerol-8-O-4’-(coniferyl al-cohol)ether(2),(+)-松脂醇[(+)-pinoresinol,3],(+)-5’-甲氧基松脂素[(+)-medioresinol,4],(+)-落叶松树脂醇[(+)-lar-iciresinol,5],(+)-5’-甲氧基落叶松树脂醇[(+)-5’-methoxylariciresinol,6],(+)-异落叶松树脂醇[(+)-isolariciresinol,7],绿原酸(chlorogenic acid,8),阿魏酸(ferulic acid,9),Z-咖啡酸硬脂醇酯(Z-octadecyl caffeate,10),鼠李素(rhamnetin,11),汉黄芩素(wogonin,12),香草酸(vanillic acid,13)。结论:化合物1,2,4,6,10～13为首次从黄连属植物中分离得到。     

雅连、味连治疗复发性口疮疗效差异性——分层区组、随机双盲、平行对照、多中心临床试验报告

目的:比较不同基源黄连(雅连、味连)治疗复发性口疮疗效差异,确定最能代表黄连清热燥湿、泻火解毒功效的基源种。方法:复发性口疮(心胃热盛证)的患者,随机分为2组。雅连组口服雅连提取物3 g,每日3次,味连组口服味连提取物3 g,每日3次,疗程7 d。结果:①共有131例受试者入并完成试验,其中味连组65例、雅连组66例。②治疗7 d后比较,两组疾病疗效差异有统计学意义(P<0.05),雅连优于味连;③治疗7 d后比较,两组心胃热盛证疗效差异有统计学意义(P<0.05),雅连优于味连。④治疗7 d后比较,两组主证(口疮疼痛、口疮溃疡大小)改善程度差异有统计学意义(P<0.05),雅连优于味连。⑤味连组和雅连组均无不良事件发生。结论:雅连在口疮疗效、心胃热盛证疗效以及改善口疮疼痛、口疮溃疡大小症状方面优于味连。两种基源黄连中,雅连可能更能代表黄连清热燥湿、泻火解毒之功。     

黄连软化与切制工艺优选

目的:优化黄连的软化与切制工艺.方法:以盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱含量为指标,采用单因素试验和正交试验优选黄连的软化和切制工艺,HPLC测定指标成分含量.结果:黄连的最佳软化方法为淋法,一般在室温下,每100 kg药材用60 L水软化48 h.黄连的最佳切制工艺为切成1～2 mm的顶头片.结论:优选的软化和切制工艺切实可行,可推广使用.     

黄连须根浸提液对土壤微生物及酶活性的影响

黄连Coptis chinensis是大量使用的中药材,连作障碍严重。试验在供试土壤中加入不同浓度的黄连须根浸提液(REC),研究了它们对土壤微生物和酶活性的影响。结果表明,在加入REC的土壤中,微生物碳氮量显著降低,细菌和放线菌比对照降低约60%,但真菌增加3倍左右。自生固氮菌、磷细菌、钾细菌、硝化细菌和氨化细菌均显著减少,说明土壤固(供)氮、溶磷、解钾、促生等功能受到抑制。REC对土壤酶活性的影响表现出多样性,提高转化酶活性,降低脲酶活性,对脱氢酶活性无显著影响,妨碍了土壤生物化学反应的有序进行。此外,REC减少微生物标记性磷脂脂肪酸(PLFAs)种类,降低PLFAs总量,提高真菌/细菌PLFAs比值,说明REC在抑制细菌繁殖生长的同时,相对的增加了真菌数量,致使后续作物容易发生真菌病害。REC还显著降低土壤微生物群落的多样性和均匀度指数,说明加入REC恶化了土壤生态环境,使微生物种群减少,密度降低。因此,在黄连生长过程中,根系分泌的化感物质可能改变土壤微生物种群结构,造成连作障碍。     

增强UV-B对黄连代谢及小檗碱含量的影响

目的:测定黄连根中小檗碱含量对不同UV-B辐射强度的响应,为提高黄连小檗碱含量提供理论参考.方法:实验设置了CK(自然光),UL(0.05 W·m-2),UM(0.10 W·m-2),UH(0.20 W·m-2)4个处理组,探讨UV-B辐射下初生代谢中光合特性、PPP途径和次生代谢中酪氨酸酶及黄连根中的小檗碱含量的变化特性.结果:在UH辐射胁迫下,黄连叶片中光合色素、PSⅡ非光化学猝灭系数(qN),初始荧光(Fo),电子传递速率(ETR)以及6-磷酸葡萄糖脱氢酶活性、根中小檗碱含量均较其他组低.而处于UM辐射下的黄连,光合作用能力、PPP途径、酪氨酸酶活性以及小檗碱含量均高于对照组,产生了胁迫应激反应来抵御适度的UV-B辐射.结论:黄连处于UM辐射时,通过增强光合作用及PPP途径,能提供较多的次生代谢物前体物及次生代谢物所必需的NADPH,进而小檗碱的含量也相应提高,为黄连栽培种植中提高小檗碱含量提供参考.     

动态聚类法确定黄连种苗分级标准

目的:制定黄连种苗质量分级标准。方法:测量19个不同产地黄连种苗的株高、叶片数、叶长、叶宽、叶重及根重等指标,通过对各指标数据的相关性统计分析,并结合生产实际,确定黄连种苗质量分级的主要指标和参考指标。采用动态聚类确定黄连种苗的质量分级标准。结果:叶数是黄连种苗质量分级的主要指标,株高作为质量分级的低优指标。结论:黄连种苗分为3级,Ⅰ级种苗:叶数≥8片,14≥株高≥12 cm;Ⅱ级种苗:8≥叶数≥6,12 cm≥株高≥9 cm;Ⅲ级种苗:6≥叶数≥4,株高≥9 cm;达不到3级种苗标准的为不合格种苗。     

Inhibitory effect of Coptis chinensis on inflammation in LPS-induced endotoxemia

Ethnopharmacological relevance

Rhizoma coptidis (RC) has been used as a remedy for inflammation-related diseases in traditional medicine. Although it is known to have anti-inflammatory activities, its mechanism of action on lipopolysaccharide (LPS)-induced inflammation has not yet been identified in detail.

Aim of the study

This study was designed to assess the beneficial effects of pretreatment with RC in ameliorating LPS-induced liver inflammation.

Materials and methods

Mice were orally administered RC (500, 1000 mg/kg) for three days in a row. 1 h after the last RC administration, the mice were intraperitoneally injected with LPS (35 mg/kg). After treatment, histological alterations and inflammatory factor levels in the liver and proinflammatory cytokines in the serum associated with inflammation were examined.

Results

We found that pretreatment with RC (500 and 1000 mg/kg) exerted a significant protective effect by attenuating liver histopathological changes in endotoxemic mice. The results also demonstrated that RC suppressed secretion of LPS-stimulated pro-inflammatory cytokines, such as interleukin-6 (IL-6). Furthermore, RC inhibited LPS-mediated nuclear factor (NF)-κB activation via the prevention of IκB-α phosphorylation, as well as the phosphorylation of ERK1/2, JNK, and p38 MAPKs. These results were associated with decreases in the expression of cyclooxygenase-2 (COX-2) and inducible nitric oxide synthase (I-NOS).

Conclusions

The results presented here clearly demonstrate that RC could significantly protect mice against LPS-induced acute liver injury.     

黄连对乙酰苯肼所致小鼠红细胞氧化性溶血的影响及作用机制

目的:观察黄连对小鼠红细胞氧化性溶血的影响并探讨相关机制。方法:采用乙酰苯肼(APH)诱导小鼠红细胞氧化性溶血模型,以伯氨喹啉为对照药,观察不同浓度的黄连对血浆游离血红蛋白、血清间接胆红素、全血网织红细胞、红细胞内脂质过氧化产物和抗氧化系统相关酶和蛋白以及全血总抗氧化能力的影响。结果:0.03 g.kg-1APH能引起正常小鼠血浆游离血红蛋白和血清间接胆红素含量及外周血网织红细胞数量显著升高,也能明显提高红细胞丙二醛(MDA)含量和降低红细胞超氧化物歧化酶(SOD)、6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PD)活力、还原型谷胱甘肽(GSH)含量以及全血总抗氧化能力。0.058 g.kg-1伯氨喹啉能明显加重APH所引起的红细胞氧化性溶血和氧化系统破坏;0.6 g.kg-1黄连能明显降低血清间接胆红素含量,1.2 g.kg-1黄连尚能显著减少血浆游离血红蛋白量和全血网织红细胞数,同时明显降低红细胞MDA含量、增加SOD活力和GSH含量、提高全血总抗氧化能力。结论:黄连能一定程度减轻APH引起的小鼠红细胞氧化性溶血,其机制可能与降低脂质过氧化产物和提高红细胞抗氧化酶的量和能力有关。     

黄连吴茱萸药对水提物对大鼠结肠癌癌前病变的作用

目的:研究黄连吴茱萸药对对DMH诱导的大鼠结肠癌癌前病变以及结肠上皮增殖和凋亡的作用.方法:采用DMH制备大鼠结肠癌模型;应用形态学的方法测定经过细微分离获得的完整肠腺内细胞的增殖和凋亡变化;应用甲基绿染色和光学显微镜计数中、降结肠异变肠腺病灶数目.结果:黄连吴茱萸药对能够明显抑制模型组动物ACF的形成.模型组动物中、降结肠肠腺内细胞增殖显著增加,而黄连吴茱萸药对能够明显抑制中、降结肠肠腺内细胞的增殖;模型组动物降结肠肠腺内细胞凋亡明显增加.而中结肠肠腺内细胞凋亡较正常相比无明显差异,而黄连吴茱萸药对能够显著促进中、降结肠肠腺内细胞的凋亡.结论:黄连吴茱萸药对能够显著抑制结肠癌癌前病变ACF的形成,提示其对结肠癌可能具有抑制和临床治疗作用,其作用部分通过抑制细胞增殖和促进细胞凋亡实现.     

一测多评法优选黄连最佳提取工艺

目的:优选黄连的最佳提取工艺。方法:应用一测多评法测定黄连中表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱的含量,通过正交试验设计,以黄连中表小檗碱、黄连碱、巴马汀及小檗碱含量之和为指标优选黄连最佳提取工艺。结果:最佳工艺条件为10倍量70%乙醇提取3次,每次1.5 h。结论:该提取工艺可以有效提取黄连中小檗碱等多种生物碱。