胸腺部分切除对心脏手术患儿围手术期免疫功能的影响

胸腺在儿童时期开始退化,组织学上认为胸腺没有功能,因此在心胸外科手术时常实施胸腺切除以便于术野的暴露及手术操作.然而,近年来有研究[1-2]表明胸腺在儿童乃至成人仍然具有活性,负责正常T细胞的低水平产生,胸腺切除后将影响机体的免疫功能.作者观察了30例先天性心脏病手术中胸腺部分切除儿童围手术期免疫功能的变化,了解胸腺部分切除对机体免疫功能的影响.     

小鼠胎儿胸腺T细胞体外培养的分化和成熟

目的 :观察 BALB/ c小鼠胎儿胸腺 T细胞体外培养的分化和成熟。方法 :采用小鼠胎儿胸腺器官体外培养体系及流式细胞术测其 T细胞 CD4、CD8和 TCR的表达。结果 :受孕 15 d胎鼠胸腺 T细胞主要为 CD4 -CD8-细胞 (96 .0 % ) ;体外培养 3d后 ,大部分分化为 CD4 + CD8+ 细胞 (6 5 .4 % ) ,小部分成熟为 CD4 + CD8-(14.3% )和 CD4 -CD8+ (11.2 % )细胞 ;培养 5 d后 ,CD4 + CD8+ 细胞 (5 9.7% )减少 ,而CD4 + CD8-(14.3% )和 CD4 -CD8+ (15 .8% )增多 ;培养后 10 d,CD4 + CD8+细胞降低到 4 7.2 % ,CD4 + CD8-和 CD4 -CD8+ 细胞分别增加到 2 0 .0 %和 2 4 .9% ,同时 TCR明显表达。结论 :应用小鼠胎儿胸腺器官培养体系进一步通过胸腺细胞的阳性和阴性选择证实其 T细胞的分化和成熟过程。     

重症肌无力患者胸腺切除术前后细胞免疫功能变化的研究

目的　探讨重症肌无力 (MG)患者胸腺切除术后细胞免疫的改变与发病治疗的关系。方法　以同期非重症肌无力的手术患者作为对照组 ,测定 31例MG患者 (MG组 )行胸腺切除手术前、后外周静脉血T淋巴细胞亚型 (CD3+ 、CD3+ CD4 + 、CD3+ CD8+ 、CD3+ CD4 + /CD3+ CD8+ )和CD2 5 + 、CD3-CD5 6 + 细胞的变化。结果　与对照组相比 ,术前MG组的CD3+ CD8+ 、CD2 5 + 、CD3-CD5 6 + 水平显著降低 ,CD4 + /CD8+ 水平显著增高 (P值均 <0 .0 5 )。对照组术前和术后 1d、7d任意两个时间点T细胞亚群的差异均无显著性 (P >0 .0 5 ) ;MG组CD3+ 、CD4 + 、CD2 5 + 及CD4 + /CD8+ 在手术后第 1天下降 ,而CD8+ 、CD5 6 + 在手术后第 1天上升 (P <0 .0 5 )。MG组CD4 + 、CD2 5 + 、CD4 + /CD8+ 在术后 6个月较术前显著下降 (P <0 .0 5 ) ,CD5 6 + 显著上升 (P <0 .0 5 ) ,CD3+ 有所下降 ,CD8+ 有所上升 ,但是差异均无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　MG患者细胞免疫处于紊乱状态 ,其发病与T细胞有重要关系。胸腺切除术后 ,机体的免疫紊乱状态可得到一定程度的纠正。     

胸腺外CD4~+CD8~+(DP)T淋巴细胞

T细胞在胸腺内的分化发育经历CD4 -CD8-双阴 (DN)T细胞的早期阶段、CD4 +CD8+(DP)细胞的中期阶段、经过阳性选择和阴性选择分化发育成只表达CD4 +或CD8+的单阳 (SP)细胞的后期阶段。SP细胞为成熟的T细胞 ,从胸腺迁出后移居到血液和周围淋巴器官中。既往认为在成熟的T细胞上 ,CD     

重症肌无力患儿胸腺细胞体外增殖和CD4、CD8、Fas测定

目的:探讨胸腺异常在儿童重症肌无力(MG)患者发病中的作用。方法: 取临床确诊MG患儿手术切除的及 24~38周流产胚胎胸腺组织(对照),分离胸腺细胞,MTT比色分析法观察胸腺细胞体外增殖情况;用流式细胞仪测定胸腺细胞表面膜CD4、CD8和Fas。结果:与对照相比,MG患儿体外培养胸腺细胞增殖能力增强 (P<0. 01),胸腺细胞CD4-CD8+细胞增多(P<0. 01),CD4+CD8+细胞减少(P<0. 01),CD4-CD8-、CD4+CD8-细胞数量无变化;CD4+Fas+、CD8+Fas+胸腺细胞均减少(P<0. 01)。结论:MG患儿胸腺细胞存在增殖和膜分子表达的异常。     

胸腺外CD4+CD8+(DP)T淋巴细胞

T细胞在胸腺内的分化发育经历CD4 -CD8-双阴 (DN)T细胞的早期阶段、CD4 +CD8+(DP)细胞的中期阶段、经过阳性选择和阴性选择分化发育成只表达CD4 +或CD8+的单阳 (SP)细胞的后期阶段。SP细胞为成熟的T细胞 ,从胸腺迁出后移居到血液和周围淋巴器官中。既往认为在成熟的T细胞上 ,CD4抗原和CD8抗原的表达是互相排斥的 ,故根据T细胞上CD4抗原或CD8抗原的表达与否把外周T细胞分为CD4 +CD8-和CD4 -CD8+(SP)两大类。但国外自80年代以来 ,已有许多关于DPT淋巴细胞和DNT淋巴细胞研究的报道[1] 。故根据T细胞表面CD4或CD8抗原的表…     

妊娠母鼠静脉注射葡萄球菌肠毒素B对胎鼠胸腺发育的影响

目的: 观察妊娠母鼠静脉注射葡萄球菌肠毒素B (SEB)对胎鼠胸腺发育的影响。方法: 将孕鼠随机分为实验组及对照组,每组12只;实验组和对照组孕鼠在妊娠第16天分别尾静脉注射SEB 15 μg和等体积的生理盐水;于妊娠21天打开母鼠腹腔取出胎鼠,称量胎盘、胎鼠及其胸腺的湿重和干重;胎鼠胸腺细胞以抗CD4-APC及抗CD8-PE双标染色后用流式细胞仪检测T淋巴细胞各亚群。结果: 妊娠母鼠静脉注射SEB后可明显减少胎鼠胸腺的湿重和干重(P < 0.01),减少CD4-CD8+、CD4+CD8+T细胞(P < 0.01和P < 0.05),但明显增加CD4+CD8-T细胞(P < 0.01);胎鼠和胎盘的干、湿重与对照组差异均无统计学意义(P > 0.05)。结论: SEB可明显影响胎鼠胸腺的发育。     

白念珠菌菌血症诱导小鼠皮质胸腺细胞凋亡

采用白念珠菌诱导小鼠胸腺内细胞凋亡 ,对其发生部位和累及的胸腺内细胞表型进行了研究。结果发现 :静脉注射白念珠菌入小鼠体内 6h后 ,开始出现胸腺细胞凋亡 ;1 2h ,1 8h和 2 4h胸腺凋亡细胞百分率不断增加 ;CD3+和CD8+细胞百分率均较对照组有明显的下降 ;胸腺内细胞凋亡主要发生在皮质区 ,而髓质区则少。表明白念珠菌能诱导小鼠胸腺细胞凋亡 (主要是未成熟CD3+CD4+CD8+细胞及少量成熟的CD3+CD4- CD8+细胞 )     

胸腺五肽在晚期乳腺癌化疗治疗中的作用

目的观察胸腺五肽在晚期乳腺癌化疗治疗中的疗效。方法将62例晚期乳腺癌患者随机分为胸腺五肽+化疗组(A组)和常规化疗组(B组),分别观察用药前后的血象及治疗前后T细胞亚群变化。结果 A组和B组在化疗前血常规及T细胞亚群均无显著差异(P>0.05),A组治疗后CD3+、CD4+、CD8+与治疗前比较有显著差异(P<0.05),CD4+/CD8+与治疗前比较有显著差异(P<0.05);治疗后白细胞计数在两组之间有显著性差异(P<0.05)。结论胸腺五肽可提高晚期乳腺癌患者的细胞免疫功能。     

胸腺五肽诱导重症肌无力细胞免疫抑制的临床观察

目的 探讨在不同刺激条件下,胸腺五肽(TP5)对重症肌无力患者外周血单个核细胞(PBMC)的IFN-γ的产生以及对不同T淋巴细胞亚群的影响,为TP5临床治疗重症肌无力提供实验学依据.方法 重症肌无力患者PBMC在抗CD3单克隆抗体的刺激下,观察TP5对IFN-γ产生的影响.同时使用流式细胞仪,在单个细胞水平上评价TP5对各亚群T淋巴细胞细胞因子IFN-γ表达的影响.结果 用抗CD3单克隆抗体和TP5(300μg/ml)刺激后,所有重症肌无力患者PBMC的IFN-γ表达水平明显受抑制(P_(儿童)=0.0001,P_(成人)=0.01);正常对照儿童和成人PBMC的IFN-γ表达水平亦明显下降(P_(儿童)=0.009,P_(成人)=0.0001).同一年龄分层组的比较,TP5对PBMC的IFN-γ表达水平的抑制程度在儿童MG组中较正常对照组弱,统计学有差异,而成人MG组与对照组比较差异无统计学意义(P_(成人)=0.481);TP5明显抑制CD8+(P_(MG)=0.025,P_(正常)=0.002)和CD4+T(P_(MG)=0.009,P_(正常)=0.004)细胞IFN-γ表达.结论 TP5能抑制治疗重症肌无力患者的细胞免疫应答.     

伴胸腺增生的甲状腺功能亢进患者CD细胞亚群分析

目的 通过比较甲状腺功能亢进患者伴胸腺增生和不伴胸腺增生及正常人外周血中CD细胞数,探讨伴胸腺增生的甲状腺功能亢进患者CD细胞亚群在发病中所起的作用.方法 选择31例初次确诊甲状腺功能亢进患者(17例伴胸腺增生,14例胸腺正常)和18名健康体检者,通过流式细胞仪检测外周血中CD3+,CD3+CD4+,CD3+ CD8+,CD3+ CD4+/CD3+CD8+,CD3-/CD16+56+,CD19及行胸腺CT检查.结果 甲状腺功能亢进患者不论是否伴有胸腺增生,较正常对照组CD3细胞总数下降,CD3+CD8+减少;CD3+CD4+,CD3+CD4+/CD3+ CD8+及CD19增高(P＜0.01);伴胸腺增生与胸腺正常组相比,CD3+,CD3+CD4+,CD3+CD8+,CD3+CD4+/CD3+ CD8+,CD19无明显变化.CD3-/CD16+56+,则在甲状腺功能亢进伴胸腺增生组较胸腺正常组及对照组均明显减少,而胸腺正常组与对照组无明显区别.结论 在甲状腺功能亢进患者中,CD细胞亚群异常;而CD3-/CD16+56+细胞的减少,对伴有胸腺增生的甲状腺功能亢进的病理生理过程可能有重要影响.     

猪到猴异种胸腺修饰对受体心脏移植物存活时间及外周血T细胞的影响

目的通过猪-猴心脏移植模型来探讨异种胸腺修饰对移植物存活时间的影响,并在此基础上,研究异种器官移植中T细胞的作用及诱导异种T细胞中枢性耐受的可能性。方法将受体(中国猕猴)分为4组:(1)空白组:对受体不作任何处理。(2)照射组:于心脏移植前30 d(d30),接受60Co 3Gy全身剂量,余同空白组。(3)胸腺注射组:于心脏移植前21 d(d21),胸腺内注射供体脾细胞(5×107),余同空白组。(4)照射+胸腺注射组(8只):于心脏移植前28 d(d28),即1.5月龄时接受60Co 3Gy全身剂量,心脏移植前21 d(d21),胸腺内注射供体脾细胞(5×107),余同空白组。结果照射+胸注组存活期较空白组明显延长(P<0.01),照射+胸注组存活期较胸注组和照射组延长(P<0.05)。CD4+、CD8+与同期未照射的另两组相比有显著性差别(P<0.01),但照射的两组同期相比差别不大(P>0.05)。照射+胸腺注射组于手术当天MLR刺激效应较空白组、照射组下降明显(P<0.01),同时单独胸腺注射组与照射组、照射+胸腺注射组相比,刺激效应也有所下降(P<0.05)。结论(1)异种胸腺修饰对CD4+、CD8+T细胞亚群的生成与分布情况并无影响,但其针对异种抗原反应能力有所下降。(2)异种胸腺注射可支持T细胞的重建和诱导供体特异性的T细胞功能抑制或耐受,并有效地延长供心存活时间。     

BALB/c小鼠胸腺细胞发育模型的建立

目的建立胸腺细胞体外研究模型,为T细胞早期发育及相关实验提供有效技术平台。方法无菌摘取14.5天龄胚鼠胸腺,胸腺器官体外培养,FACS检测不同培养时间点细胞存活状况和表型变化,计数每个胸腺小叶的细胞数变化。结果胸腺体外培养显示:经过6d的培养,胸腺细胞存活率均在88.0%以上,由双阴性发育至双阳性细胞,CD4+CD8+双阳性细胞由培养第0天的0上升到第6天的89.07%;细胞数量随胸腺发育(培养时间的增加)而增多,每个胸腺小叶胸腺细胞数量也由培养0d的0.75×104个上升到第6天的1.38×106个。而体内数据显示:胸腺细胞由胚龄14.5d的双阴性阶段发育到新生鼠的双阳性阶段,每个胸腺小叶细胞数量由14.5d的0.75×104个上升到新生鼠的2.56×106个,同时间段CD4+CD8+双阳性细胞比例由0上升到91.22%。体内、外胸腺细胞表型、数量变化趋势一致。结论体外培养状态下胸腺细胞数量和表型变化与体内自然变化趋势一致,在体外培养可以模拟体内胸腺细胞由双阴性到双阳性的发育过程,这将为T细胞发育的研究提供简易、有效的技术平台。     

ADSCs对辐射诱发C57小鼠胸腺瘤免疫功能的影响及其机制

目的:观察脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)对辐射诱发小鼠胸腺瘤免疫功能的影响及其可能的机制,方法:清洁级C57BL/6小鼠32只,随机分为4组:对照组、照射组、照射+ADSCs组、假照射+ADSCs组,各8只,末次照射后第7天后分别处死4组小鼠,计算小鼠胸腺指数.刀豆素A(ConA)诱导的胸腺淋巴细胞转化率采用MTY法测定,运用流式细胞仪检测胸腺淋巴细胞的细胞周期以及T淋巴细胞亚群的变化.结果:照射+ ADSCs组相对于照射组小鼠的胸腺淋巴细胞转化率和胸腺指数显著增高(P＜0.05),并且CD4+T淋巴细胞的含量显著增加(P＜0.05),CD8+T淋巴细胞明显下降(P＜0.05),CD4+/CD8+T淋巴细胞比值显著升高(P＜0.05).结论:ADSCs可能通过调节小鼠胸腺内细胞水平的变化,保护小鼠胸腺细胞的免疫功能.     

中药复方提取物HNA-1对SIV慢性感染恒河猴胸腺输出及胸腺细胞发育的影响

目的：探讨中药复方提取物湘A-1号方（HNA-1,湖南省艾滋病防治小组推荐免费使用的两个中药复方之一的提取物）治疗HIV-1感染及艾滋病（Acquired Immune Deficiency Syndrome,AIDS）的疗效机制。方法用8只已感染猴免疫缺陷病毒SIVmac23916～21个月的中国恒河猴,治疗组采用2个月的HNA-1治疗;对照组给予等体积生理盐水灌胃。在预设时间点采集外周血提取DNA,采用定量PCR检测T细胞受体重排删除环（T cell receptor excision circles, TRECs）来评价胸腺输出功能;并用酶消化法分离胸腺细胞,利用流式细胞术检测胸腺内CD34+前体细胞、CD4+T细胞发育各阶段的比例改变。结果与模型对照组比较,HNA-1治疗组胸腺细胞输出明显增加（P<0.05）;且胸腺内CD34+Lin-细胞比例明显增加（P<0.05）,胸腺双阳性T细胞（Double positive,DP）Ⅱ阶段比例减少,而DPⅢ和DPⅣ阶段比例均增加。结论 HNA-1对艾滋病的疗效可能与其能显著增加胸腺输出有关;其作用机制可能涉及增加胸腺内前体细胞数量、以及促进胸腺细胞细胞从DPⅡ阶段发育至DP Ⅲ等。     

胸腺五肽对晚期非小细胞肺癌化学治疗后免疫功能的影响

目的观察胸腺五肽对晚期非小细胞肺癌(NSCLC)化学治疗患者免疫功能的影响。方法64例晚期NSCLC患者随机分为常规治疗组和胸腺五肽治疗组,常规治疗组采用NP方案(长春瑞滨+顺铂)治疗;胸腺五肽治疗组在NP方案基础上加用胸腺五肽1 mg溶于2 mL注射用水中,肌肉注射,每日1次,连用4周;完成2周期化学治疗后比较2组血T细胞亚群和血清免疫球蛋白IgG、IgA、IgM的变化,并与正常对照组进行比较。结果常规治疗组和胸腺五肽组之间治疗前CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+均无显著差异(P>0.05),均与正常对照组有明显差异(P<0.01)。胸腺五肽组治疗后CD3+、CD4+、CD8+与治疗前比较有极显著差异(P<0.01),CD4+/CD8+与治疗前比较有显著差异(P<0.05);治疗后胸腺五肽组与常规治疗组比较CD4+、CD8+、CD4+/CD8+均有显著差异(P<0.01);治疗前后常规治疗组和胸腺五肽组IgA、IgM、IgG均无显著差异(P>0.05)。结论晚期NSCLC患者免疫功能低下,胸腺五肽可提高晚期非小细胞肺癌患者的细胞免疫功能。     

胸腺基质淋巴细胞生成素表达与外周血调节性T细胞的相关性

目的:探讨人胸腺组织胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)表达水平与外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的相关性。方法:取23例先天性心脏病患者,分离外周血单个核细胞后表面染色及破膜胞内染色后,流式细胞仪检测CD4+CD25+Foxp3+Treg,同时取对应患者切除的胸腺组织,免疫组织化学法检测其TSLP的表达水平,统计分析其差异性,Logistic回归分析二者相关性。结果:23例先心病患者CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T细胞比率为(5.73±0.56)%,胸腺Hassall小体TSLP表达水平为(18.87±3.06)个,Logistic回归分析表明二者呈正线性相关性。结论:人外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的水平与胸腺组织TSLP的表达密切相关,外周血Treg细胞数量的增加可能依赖于更高水平TSLP的表达。     

胸腺五肽对胃癌患者化疗前后淋巴细胞亚群的影响及其临床意义

目的探讨胃癌患者免疫功能的状态及胸腺五肽(Thymopentin-5,TP-5)对胃癌化疗后淋巴细胞亚群的影响。方法40例进展期胃癌患者随机分为单纯化疗组和联合化疗组(联合应用TP-5),并设正常对照组。采用流式细胞术检测化疗前1天及化疗后7天患者外周血CD3+CD4+T细胞,CD3+CD8+T细胞,CD3-CD16+56+NK细胞,CD4+/CD8+比值。应用SAS 8.2软件进行统计学分析。结果1.胃癌患者外周血CD3+细胞,CD3+CD4+T细胞,CD3-CD16+56+NK细胞数量少,CD4+/CD8+比值低,CD3+CD8+T细胞数量多,与C组对照有统计学意义(P<0.05)。2.单纯化疗组化疗后患者外周血CD3+细胞,CD3+CD4+T细胞,CD3-CD16+56+NK细胞数量进一步减少,CD4+/CD8+比值再降低,CD3+CD8+T细胞数量升高,与化疗前相比有统计学意义(P<0.05);联合化疗组患者化疗后外周血CD3+细胞,CD3+CD4+T细胞,CD3-CD16+56+NK细胞,CD3+CD8+T细胞数量,CD4+/CD8+比值,与化疗前相比无统计学意义(P>0.05)。结论胃癌患者细胞免...     

小鼠胎儿胸腺T细胞体外培养的分化和成熟

目的 观察BALB／c小鼠胎儿胸腺T细胞体外培养的分化和成熟。方法：采用小鼠胎儿胸腺器官体外培养体系及流式细胞术测其T细胞CD4、CD8和TCR的表达。结果：受孕15d胎鼠胸腺T细胞主要为CD4^－CD8^-细胞（96．0％）;体外培养3d后,大部分分化为CD4^ CD8^ 细胞（65．4％）,小部分成熟为CD4^ CD8^-(14.3%)和CD4^-CD8^ (11.2%)细胞;培养5d后,CD4^ CD8^ 细胞（59．7％）减少,而CD4^ CD8^-(14.3%)和CD4^-CD8^ (15.8%)增多;培养后10d,CD4^ CD8^ 细胞降低到47．2％,CD4^ CD8^-和CD4^-CD8^ 细胞分别增加到20．0％和24．9％,同时TCR明显表达。结论：应用小鼠胎儿胸腺器官培养体系进一步通过胸腺细胞的阳性和阴性选择证实其T细胞的分化和成熟过程。