五倍子水提取物对LPS抑制人牙龈成纤维细胞DNA合成和对细胞周期改变的影响

目的：研究五倍子水提取物对内毒素(LPS)引起人牙龈成纤维细胞(HGF)DNA合成和细胞周期改变的影响。方法：采用健康人正常牙龈组织原代培养的牙龈成纤维细胞，以25μg／mL LPS作为刺激因子，用流式细胞仪技术观察20μg／mL五倍子水提取物对LPS引起HGF细胞周期改变的影响。结果：LPS作用后，DNA合成前期细胞比例(G1期)明显上升，而DNA合成期细胞比例(S期)及细胞增殖指数下降，五倍子可改善此现象。结论：五倍子水提取物可显著改善LPS抑制HGF增殖，提示五倍子对牙龈组织具有保护作用，有助于牙周病的防治。     

五倍子水提取物抑制内毒素诱导人牙龈成纤维细胞分泌IL-6

目的：研究不同浓度五倍子水提取物对内毒素(LPS)介导的人牙龈成纤维细胞(HGF)分泌IL-6水平的影响。方法：采用MTT比色法和放射免疫分析法(RIA)，测定五倍子水提取物对HGF增殖的影响；及对以25μg／mL内毒素作为刺激因子，HGF培养上清中IL-6水平的影响。结果：五倍子水提取物可显著抑制内毒素诱导HGF分泌IL-6水平，其作用在一定范围内呈浓度依赖性，同时当其浓度＞50μg／mL时，可抑制HGF增殖。结论：五倍子水提取物能够抑制内毒素诱导人牙龈成纤维细胞分泌IL-6的水平，浓度过高时对HGF增殖有影响，提示一定浓度(＜50μg／mL)的五倍子水提取物具有抗炎作用，有助于对牙周病的防治。     

五倍子提取物对牙龈卟啉菌内毒素介导白介素-1β活性的影响

目的：研究五倍子提取物对牙龈卟啉菌内毒素介导白介素—lβ活性的影响。方法：采用人外周血分离培养单核细胞，25μg／mL牙龈卟啉菌内毒素作为刺激因子，观察6．25、12．5、25、50、100μg/mL五种质量浓度的五倍子提取物对单核细胞分泌细胞因子白介素—lβ活性的影响，以放射免疫分析法(RIA)测定白介素—lβ的水平。结果：五倍子提取物可显著抑制牙龈卟啉菌内毒素介导单核细胞分泌白介素—lβ的活性，其作用在一定范围内呈浓度依赖性。结论：五倍子提取物抑制牙龈卟啉菌内毒素介导的白介素—lβ的活性，揭示五倍子提取物抗炎作用的机制。     

五倍子水提取物对Pg LPS诱导单核细胞分泌IL-6的抑制作用

目的：研究百倍子水提取物对牙龈卟啉菌(Pg)内毒素(LPS)介导的人单核细胞分泌IL-6水平的影响。方法：采用健康人外周血分离培养的单核细胞以25μg/ml牙龈卟啉菌内毒素作为刺激因子，用放射免疫分析法(RIA)测定细胞培养上清中IL-6的水平，观察5种浓度瓦倍子水提取物对单核细胞分泌炎性细胞因子的影响，结果：五倍子水提取物可显著抑制牙龈卟啉菌内毒素诱导人单核细胞分泌IL-6的水平，其作用在一定范围内呈浓度依赖性。结论：五倍子水提取物能够显著抑制牙龈卟啉菌内毒素诱导人单核细胞分泌IL-6的水平，提示五倍子具有一定的抗炎作用，有助于对牙周病的防治。     

五倍子水提取物对内毒素诱导人牙髓细胞分泌IL-6的影响

目的:观察不同浓度五倍子水提取物对内毒素诱导人牙髓细胞分泌IL-6的影响.方法:采用组织块法体外培养人牙髓细胞,以含不同浓度五倍子水提取物(1.25、2.5、5.10、20 μg/mL)、25μg/mL内毒素和20mL/L新生牛血清的DMEM培养基作用于第5代人牙髓细胞,用放射免疫法测定IL-6含量,采用单因素方差分析(完全随机设计)和t检验对实验数据进行统计学分析.结果:低浓度(1.25、2.5、5、10、20μg/mL)五倍子水提取物能明显抑制25μg/mL内毒素诱导人牙髓细胞分泌IL-6,这种抑制作用在一定范围内呈浓度依赖性.结论:低浓度五倍子水提取物具有抑制内毒素诱导人牙髓细胞分泌IL一6的作用.     

五倍子水提取物对LPS抑制PDLC的ALP活性的影响

目的：观察五倍子水提取物对LPS抑制牙周膜细胞(Periodontal ligament cell，PDLC)的ALP活性的影响。方法：本实验采用细胞培养技术和酶联免疫技术，对LPS抑制PDLC的ALP活性的影响进行观察。结果：100μg／mL LPS可显著抑制ALP活性。加入五倍子水提取物后，对LPS抑制ALP活性有拮抗作用，该作用随五倍子水提取物浓度增加而增加，到10μg／mL时，达到峰值。另外，培养液中先加入不同浓度的五倍子水提取物溶液，培养24h后再加入LPS时(A组)，与LPS和五倍子水提取物溶液同时加入组(B组)相比，除对LPS抑制ALP活性有同样拮抗趋势外，A、B两组间比较，B组效果更佳。结论：五倍子水提取物对LPS抑制ALP活性具有保护作用。     

五倍子水提取物对内毒素抑制人牙髓细胞活性的影响

目的：观察不同浓度及不同作用时间的五倍子水提取物对内毒素抑制人牙髓细胞活性的影响。方法：采用组织块法体外培养牙髓细胞,以不同浓度五倍子水提取物（1．25×10^3、2．5×10^3、5×10^3、10×10^3、20×10^3μg／L）和1×10^3μg／L内毒素作用于人牙髓细胞,用四唑盐比色试验（MTT法）检测细胞活性,采用单因素方差分析（完全随机设计）对实验数据进行统计学分析。结果：低浓度（1．25×10^3、2．5×10^3、5×10^3μg／L）五倍子水提取物能明显拮抗100μg／mL内毒素对细胞活性的抑制作用（P〈0．01）,2．5×10^3μg／L五倍子水提取物拮抗1×10^3μg／L内毒素对细胞活性的抑制作用第3天开始明显增加,并呈时间依赖性。结论：低浓度五倍子水提取物能够拮抗内毒素对人牙髓细胞活性的抑制作用。     

五倍子水提取物对胶原酶活性的影响

目的：观察五倍子水提取物对牙周炎组织中胶原酶活性的影响,并探讨其抗炎作用机制。方法：应用羟脯氨酸检测法,观察6．25ug／ml、12．5ug／ml、25ug／ml、50ug／ml、100ug／ml5种浓度五倍子水提取物对胶原酶活性的影响。结果：与胶原酶组比较,各浓度组五倍子水提取物均能明显降低胶原酶活性,其作用呈浓度依赖性。但浓度在100ug／ml以内时,其抑制效果比5ug／ml的强力霉素低。结论：五倍子水提取物能够阻断胶原酶对结缔组织的破坏作用,抑制或减缓牙周炎的进展。     

五倍子水提取物抑制LPS对牙周膜细胞附着牙骨质片表面的影响

目的观察五倍子水提取物对LPS抑制PDLC在牙骨质片表面附着的影响。方法采用细胞培养技术,细胞计数法及扫描电镜进行观察。结果加入五倍子水提取物溶液后,对LPS抑制PDLC在牙骨质片表面的附着有明显拮抗作用,该作用随五倍子水提取物浓度增加而增加,到10μg/mL时,达到峰值。另外,培养液中先加入不同浓度的五倍子水提取物溶液,培养24h后再加入LPS时(A组),与LPS和五倍子水提取物溶液同时加入组(B组)相比,除对LPS抑制PDLC在牙骨质片表面附着有同样拮抗趋势外,当五倍子水提取物浓度为10μg/mL、20μg/mL时,A组的细胞附着数明显高于B组。扫描电镜显示,A组与B组牙骨质片表面细胞数量较多,细胞形态丰满,细胞胞突伸展明显,并相互交织成栅栏状、网状结构,部分细胞呈叠层生长,其中A组效果更明显。结论五倍子水提取物对LPS抑制PDLC在牙骨质片表面附着有拮抗和保护作用。     

五倍子、黄芩提取物对牙龈卟啉菌超微结构的影响

目的:观察五倍子、黄芩提取物对牙龈卟啉菌(Porphyromonas gingivalis Pg)超微结构的影响.方法:采用透射电镜进行观察.结果:黑色的细菌经20 g/L的五倍子提取物液处理后变为淡褐色,可使Pg大部分胞壁不完整,破裂呈不连续状态或消失,胞浆内可见较多空泡,有的胞浆内可见黑色沉淀颗粒.20g/L的黄芩液处理后细菌仍为黑色,电镜下可见其细胞变形,胞壁变薄或破裂,胞浆消化呈空泡,有的胞浆内可见黑色沉淀颗粒.结论:20 g/L的五倍子、黄芩提取物可明显破坏Pg的细胞结构.     

五倍子水提取物对内毒素损伤人牙髓细胞超微结构的影响

目的：观察五倍子水提取物对内毒素损伤人牙髓细胞超微结构的影响。方法：采用组织块法体外培养人牙髓细胞，以5μg／mL五倍子水提取物和100μg／mL内毒素分别或共同作用于第5代牙髓细胞，并设空白对照组，在透射电镜下观察细胞超微结构的改变。结果：100μg／mL内毒素对牙髓细胞超微结构有不同程度的损伤，加入5μg／mL五倍子水提取物后，牙髓细胞超微结构损伤明显减轻，细胞器结构基本恢复正常。结论：低浓度五倍子水提取物能够抑制内毒素对人牙髓细胞超微结构的损伤作用。     

五倍子对牙龈卟啉单胞菌胰酶样蛋白酶活性的抑制作用

目的：观察五倍子水提取物对牙龈卟啉单胞菌胰酶样蛋白酶活性的影响。方法：通过应用荧光分光光度计检测荧光底物的降解测定酶活力。结果：浓度0.5g/L-1g/L的五倍子可以抑制50%的底物降解，4g/L的五倍子可抑制超过90%的底物降解。结论：五倍子水提取物可有效抑制牙龈卟啉单胞菌胰酶样蛋白酶活性，其抑制作用可能会降低细菌生长及其毒力，减缓牙菌斑的形成。     

五倍子提取物对人牙周膜成纤维细胞保护作用的实验研究

目的研究五倍子提取物对内毒素(LPS)抑制人牙周膜成纤维细胞(PDLCs)活性及对LPS损伤PDLCs超微结构的影响,并初步探讨其可能的作用机理.方法应用细胞培养技术、3H-TdR掺人法以及透射电子显微镜观测五倍子提取物对LPS抑制PDLCs活性及对LPS损伤PDLCs超微结构的影响.结果LPS在浓度为100 mg/L时明显抑制细胞生长,加入五倍子提取物后,细胞活性明显增强(P＜0.05);LPS(100mg/L)对PDLCs各超微结构均有不同程度的损伤,特别是线粒体损伤严重.加入五倍子提取物(10 mg/L)后,超微结构损伤减轻,细胞器结构基本恢复正常.结论五倍子提取物对LPS抑制PDLCs活性及对LPS损伤PDLCs超微结构具保护作用,其作用机制可能与降解LPS及作用于细胞膜表面阻止LPS进入细胞内部有关.     

五倍子提取液对实验性根面龋再脱矿作用的影响

目的：探讨中药五倍子提取液对实验性根面龋的抑制作用。方法：以50％五倍子提取液为实验药物,38％氟化双氨银[Ag（NH3）2F],2％氟化钠（NaF）为阳性对照,去离子水为阴性对照。测量实验性根面龋再脱矿中脱矿量与时间的关系及总矿物质损失量。结果：38％Ag（NH3）2F抑制脱矿作用最强,其余依次为50％五倍子提取液、2％氟化钠、去离子水。50％五倍子提取液与38％Ag（NH3）2F、2％氟化钠无显著性差异（P〉0．05）,各药物处理组与去离子水比较均有显著性差异（P〈0．01）。结论：50％五倍子提取液对Ca^2＋溶出量及总矿物质损失量具有显著的抑制作用,对Ca^2＋溶出量的抑制作用优于2％NaF。     

五倍子水提取物对根管显微硬度的影响

根管冲洗是根管治疗的重要步骤.本实验通过观察五倍子水提取物与常用根管冲洗液处理前后牙本质显微硬度的变化,研究各冲洗液对根管壁硬度的影响.结果表明:各组溶液处理后牙本质显微硬度均有下降;五倍子水提取物处理后,牙本质显微硬度变化较小.     

Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide stimulation of human monocytes: dependence on serum and CD14 receptor

The purpose of this study was to investigate factors influencing the ability of lipopolysaccharide (LPS) derived from Porphyromonas gingivalis to elicit secretion of tumor necrosis factor-a (TNFα) from human monocytes (adherent mono-nuclear cells). The results indicate that P. gingivalis LPS stimulation of TNFa from monocytes is comparable to LPS from Escherichia coli. Both LPS, although structurally different, increased TNFα secretion in a dose-dependent manner. In serum-free conditions, TNFα secretion was relatively low, but it dramatically increased at human serum concentrations as low as 1%. Maximal secretion was observed in the presence of 10% serum, with a slight decrease at higher serum concentrations. The CD14 molecule is a putative monocyte LPS receptor. When cells were pre-incubated with a blocking monoclonal antibody (My4) to CD 14, TNFα-mRNA accumulation and TNFα secretion were reduced to control levels at LPS concentrations of up to 10 ng/ml. At higher LPS concentrations, the blocking effect was only partial, in spite of 50-fold excess antibody concentration. The blocking effect was observed only in the presence of serum. The effect of the CD14 antibody was dose-dependent with saturation at 2.5 μg/ml. The results suggest that CD 14 is one of the major receptors for P. gingivalis LPS but highlight the necessity to investigate other cell-surface receptors mediating P. gingivalis -LPS interactions. These interactions are believed to be important in the pathogenesis of periodontal destruction.