ILK及CD151在人脑胶质瘤中的表达及其意义

目的探讨整合素连接激酶(ILK)及CD151在人脑胶质瘤中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测ILK及CD151在74例人脑胶质瘤及15例正常脑组织中的表达。按2007年WHO中枢神经系统肿瘤分类:低级别(Ⅰ、Ⅱ级)胶质瘤31例,高级别(Ⅲ、Ⅳ级)43例。结果高级别胶质瘤、低级别胶质瘤及正常脑组织ILK的阳性表达分别为83.72%、61.29%、20.00%,CD151阳性表达率分别为81.40%、54.84%、13.33%。ILK和CD151在胶质瘤中阳性表达明显高于正常脑组织(P0.05),在高级别胶质瘤中影响表达率显著高于低级别胶质瘤(P0.05);而且二者在胶质瘤组中的表达呈正相关(r=0.294,P0.05)。结论 ILK及CD151在人脑胶质瘤中的表达随胶质瘤恶性程度的增高而增高,二者可能共同促进胶质瘤的生长和浸润。     

人脑胶质瘤中CD133的表达及其意义

目的 探讨CD133 mRNA在人脑胶质瘤组织中的表达及其与病理分级的相关性.方法 用半定量逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)对43例胶质瘤患者、16例正常脑组织标本(均为急性颅脑损伤患者行内减压术切除的脑组织)进行CD133 mRNA检测.结果 (1)43例胶质瘤组织中CD133 mRNA表达全部呈阳性,而16例正常脑组织标本中仅有1例CD133 mRNA表达呈弱阳性.病例组和正常对照组CD133 mRNA的阳性率分别为100%和6.25%.病例组和对照组CD133 mRNA表达阳性率差异有统计学意义(P＜0.01).(2)在病例组中,参照1993年WHO分级标准分为Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级组,计算分组的标本CD133 mRNA与β-actin mRNA灰度比值.Ⅰ级和Ⅲ、Ⅳ级之间差异有统计学意义(P＜0.01),Ⅲ、Ⅳ级之间CD133 mRNA表达均高于Ⅰ级;Ⅱ级和Ⅲ、Ⅳ级之间差异有统计学意义(P＜0.01),Ⅲ、Ⅳ级之间CD133 mRNA表达均高于Ⅱ级.(3)相关性分析:CD133 mRNA表达量与胶质瘤病理分级呈正相关性(r=0.987,P＜0.001).结论 检测胶质瘤组织中CD133 mRNA的表达可用于胶质瘤患者的诊断及恶性程度和预后的判断.     

MCT1CD147在人胶质瘤中的表达与预后的相关性

目的 探讨MCT1、CD147在人胶质瘤中的表达及其与预后的相关性,分析其作为胶质瘤预后判断指标及药物治疗靶点的可能性.方法 本文采用实时荧光定量PCR和western blotting方法 检测MCT1和CD147在不同级别胶质瘤及正常组织中的表达情况,并利用生存曲线对患者的生存预后进行分析.结果 MCT1和CD47在人胶质瘤患者组织中均高表达,且高级别胶质瘤患者MCT1和CD147表达与低级别胶质瘤患者差异有统计学意义（P〈0.05）,低级别胶质瘤患者MCT1和CD147与正常组织表达差异统计学意义（P〈0.05）.不同级别胶质瘤患者与正常对照组MCT1和CD147表达生存相关曲线差异有统计学意义（P〈0.05）.结论 MCT1和CD47是神经胶质瘤恶性程度的重要标志物,且二者可以作为胶质瘤预后判断的指标参考及药物治疗的靶点.     

MMP-2及CD147在侵袭性垂体腺瘤中的表达及其相互关系的研究

目的检测基质金属蛋白酶(MMP-2)及CD147在侵袭性和非侵袭性垂体腺瘤中的表达,以探讨其与肿瘤侵袭发生的关系及两者之间的相关性。方法用免疫组化SP法和RTPCR方法对55例垂体腺瘤患者标本MMP2及CD147的表达进行检测。结果免疫组化显示,侵袭性垂体腺瘤的MMP-2强阳性及阳性表达率明显高于非侵袭性垂体腺瘤(65.6%和93.8%,13.0%和43.5%,P<0.05),CD147强阳性及阳性表达率明显高于非侵袭性垂体腺瘤(53.1%和96.9%,21.7%和52.2%,P<0.01)。侵袭性垂体腺瘤组MMP-2及CD147mRNA的表达(1.126±0.081,0.887±0.043,P<0.01),明显高于非侵袭性垂体腺瘤组(0.425±0.083,0.179±0.051,P<0.01)。侵袭性腺瘤组中MMP2与CD147的表达成正相关(r=0.73,P<0.05),非侵袭性腺瘤组中MMP-2与CD147的表达无明显相关性(r=0.34,P>0.05)。结论MMP2及CD147的高表达与垂体腺瘤的侵袭性密切相关。MMP-2和CD147可以作为垂体腺瘤侵袭性的2项有效指标。在肿瘤侵袭过程中CD147与MMP-2的产生关系密切。     

人脑胶质瘤CXCL12基因的甲基化分析研究

目的 检测胶质瘤CXCL12基因启动子区的甲基化状态及其mRNA表达水平,以及受体CXCR4、DNA甲基转移酶等基因的mRNA表达情况,分析甲基化在CXCL12/CXCR4生物轴参与胶质瘤恶性进展中的调控机制.方法 半定量RT-PCR和实时定量PCR检测CXCL12、CXCR4、DNMT1、DNMT3A和DNMT3B基闪在76例胶质瘤及10例正常脑组织中的表达情况;甲基化PCR检测CXCL12基因启动子区的甲基化状态.结果 (1)CXCR4 mRNA随胶质瘤恶性程度的增高而表达增加;(2)CXCL12基因在胶质瘤中的甲基化率为34.2%,甲基化率随胶质瘤恶性程度的增高而降低;(3)CXCL12基因的甲基化主要发生在低度恶性胶质瘤中,其甲基化状态与mRNA表达密切相关;(4)DNMT1、DNMT3A和DNMT3B在CXCL12基因甲基化胶质瘤中的表达明显高于未发生甲基化的胶质瘤.结论 CXCR4基因有望成为胶质瘤恶性程度的生物学标志;CXCL12基因启动子区的甲基化主要发生在低度恶性胶质瘤中,其CXCL12基因甲基化下调mRNA的表达;DNMT1、DNMT3A和DNMT3B的过表达可能参与CXCL12基因甲基化的调控.     

人脑胶质瘤Cx43基因表达及其与肿瘤细胞增殖关系的研究

目的 探讨缝隙连接蛋白43(Cx43)基因表达与胶质瘤细胞增殖之间的关系,及其在胶质瘤发生发展中的作用,拟为手术后治疗及疗效观察提供客观依据.方法 采用原位杂交和免疫组织化学染色方法检测胶质瘤细胞Cx43 mRNA、Cx43 蛋白和增殖细胞核抗原的表达水平.结果 对照脑组织和胶质瘤细胞Cx43 mRNA 阳性表达率分别为100%(10/10)和61.70%(29/47),差异具有统计学意义(Z =- 5.407,P = 0.000);低度恶性(WHOⅠ～Ⅱ级)胶质瘤细胞Cx43 mRNA 阳性表达率为100%(7/7)和93.75%(15/16),高度恶性(WHOⅢ～Ⅳ级)为33.33%(6/18)和16.67%(1/6);Cx43 mRNA 阳性表达率与胶质瘤组织病理学分级呈负相关(rs = - 0.794,P = 0.000).对照脑组织和胶质瘤细胞Cx43 蛋白表达水平与Cx43 mRNA 基本一致.对照脑组织增殖细胞核抗原表达阴性;不同级别胶质瘤细胞增殖细胞核抗原阳性表达率依次为WHOⅣ级100%(6/6)、WHOⅢ级94.44%(17/18)、WHOⅡ级62.50%(10/16)和WHOⅠ级42.86%(3/7);增殖细胞核抗原阳性表达率与胶质瘤组织病理学分级呈正相关(rs = 0.589,P = 0.000);WHOⅢ～Ⅳ级与WHOⅠ～Ⅱ级之间差异具有统计学意义(H = 13.239,P = 0.000).Cx43 mRNA 与Cx43蛋白表达水平呈正相关(rs = 0.963,P = 0.000),Cx43 mRNA 及其蛋白质与增殖细胞核抗原表达水平呈负相关(rs = - 0.621,P = 0.000;rs = - 0.913,P = 0.000).结论 胶质瘤细胞Cx43 mRNA 及其蛋白质与增殖细胞核抗原表达水平和肿瘤组织病理学分级呈负相关.提示,Cx43 基因表达与肿瘤细胞增殖活性和胶质瘤恶性进展密切相关.     

人脑胶质瘤中CCND1基因的转录与表达

目的检测和分析人脑胶质瘤中CCND1基因的转录与表达,及其对肿瘤发生、发展的生物学意义.方法采用免疫组化、原位杂交法检测52例人脑胶质瘤及8例正常人脑组织中Cyclin D1 mRNA蛋白以及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平.结果脑胶质瘤中CD1蛋白及mRNA呈过度表达,其标记指数和阳性率随肿瘤的恶性程度增高而增加.两者的标记指数之间、以及与PCNA标记指数之间均为显著正性相关.结论人脑胶质瘤中CCND1过度转录和表达,随胶质瘤临床病理分级增加而增高,同时与肿瘤细胞增殖状态密切相关,提示CCND1基因的异常转录和表达在胶质瘤的发生与发展中起着重要的促进作用.     

CD147反义RNA抑制神经胶质瘤侵袭的实验研究

目的 探讨CD147在人脑胶质瘤侵袭中的作用机制. 方法构建 CD147反义RNA表达质粒并转染人胶质瘤细胞系U251(转染组),同时设空载体对照组和空白对照组,经筛选、鉴定后应用明胶酶谱实验和重组基底膜实验分别检测3组细胞中基质金属蛋白酶(MMPs)的分泌和侵袭细胞的数量. 结果与空载体转染组和空白对照组比较,CD147反义RNA转染组U251细胞产生MMPs的能力下降,侵袭细胞的数量降低,差异有统计学意义(P<0.05). 结论 CD147反义核酸能抑制胶质瘤的侵袭浸润,提示其可能成为胶质瘤治疗的药物靶点.     

CD147反义RNA抑制神经胶质瘤侵袭的实验研究

目的 探讨CD147在人脑胶质瘤侵袭中的作用机制. 方法构建 CD147反义RNA表达质粒并转染人胶质瘤细胞系U251(转染组),同时设空载体对照组和空白对照组,经筛选、鉴定后应用明胶酶谱实验和重组基底膜实验分别检测3组细胞中基质金属蛋白酶(MMPs)的分泌和侵袭细胞的数量. 结果与空载体转染组和空白对照组比较,CD147反义RNA转染组U251细胞产生MMPs的能力下降,侵袭细胞的数量降低,差异有统计学意义(P<0.05). 结论 CD147反义核酸能抑制胶质瘤的侵袭浸润,提示其可能成为胶质瘤治疗的药物靶点.     

Stathmin在脑胶质瘤血管内皮细胞中的表达及意义

目的 观察Stathmin及CD105在脑胶质瘤血管内皮细胞中的表达,探讨其在脑胶质瘤血管形成中的作用. 方法 用SP免疫组化法检测10例正常脑组织和78例脑胶质瘤血管内皮细胞中Stathmin和CD105蛋白表达,并通过检测肿瘤微血管密度(MVD)分析肿瘤血管形成.结果 正常脑组织血管内皮细胞中Stathmin和CD105均无表达,脑胶质瘤血管内皮细胞中二者均呈高表达;随着胶质瘤病理级别的增高,Stathmin和CD105表达上调,MVD值增高,Stathmin-MVD和CD105-MVD与脑胶质瘤病理分级均成正相关(r=0.912,P<0.05;P<0.936,P<0.05);且Stathmin-MVD和CD105-MVD之间也存在正相关(r=0.996,P<0.05). 结论 Stathmin与CD105在脑胶质瘤血管内皮细胞中均呈高表达,在肿瘤微血管形成过程起重要作用.     

不同病理级别胶质瘤p57^kip2/p21^cip1mRNA的表达变化

目的探讨不同病理级别人脑神经胶质瘤组织中p57^kip2/p21^cip1mRNA的表达变化及其关系。方法采用实时荧光定量PCR检测p57^kip2/p21^cip1mRNA在68例脑胶质瘤组织和16例非肿瘤脑组织中的表达水平。结果①p57^kip2mRNA在脑胶质瘤中的表达水平显著低于非肿瘤脑组织（P〈0.01）,且其表达水平与肿瘤病理级别呈显著负相关（rs=-0.495;P〈0.01）。②p21^cip1mRNA在脑胶质瘤中的表达水平与非肿瘤脑组织相比无显著差异（P〉0.05）,但其表达水平与肿瘤病理级别呈显著负相关（rs=-0.615;P〈0.01）。结论p57^kip2/p21^cip1的异常表达可能与人脑胶质瘤的发生和发展有密切相关,其表达水平可反映肿瘤的恶性程度。     

人脑胶质瘤中ING4和CTGF的表达及其意义

目的 探讨人脑胶质瘤中生长抑制因子4(ING4)及结缔组织生长因子(CTGF)的mRNA的表达及其意义.方法 采用荧光实时定量聚合酶链式反应法检测ING4和CTGF mRNA在30例脑胶质瘤组织和5例正常脑组织中的表达水平,统计分析表达水平和肿瘤级别之间的关系以及二者表达水平的相天性.结果 ING4 mRNA在Ⅰ～Ⅱ级...     

实时荧光定量RT-PCR法测定脑胶质瘤中MT1-MMP基因mRNA表达水平

目的探讨胶质瘤恶性程度和MT1-MMP基因mRNA表达水平的关系。方法采用实时荧光定量RT-PCR法检测34例脑胶质瘤和7例正常脑组织（取自癫痫病人手术切除脑组织）中MT1-MMP的mRNA表达水平。结果经实时荧光定量RT-PCR法检测，正常脑组织和低级别、高级别胶质瘤的△△Ct（循环阈值）值分别为（0．834±0、517）、（4．063±2．309）和（7.072±4．072）。正常脑组织与低级别、高级别胶质瘤之间，低级别、高级别胶质瘤之间MT1-MMP基因mRNA表达水平的差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论脑胶质瘤中存在MT1-MMP基因mRNA高水平的表达，随着肿瘤恶性级别的增加，MT1-MMP基因mRNA表达水平有增高趋势。     

LAT1表达与人脑胶质瘤病理级别、增殖和血管形成的关系

目的探讨大型氨基酸转运载体1(LAT1)在人脑胶质瘤组织中的表达水平及其与胶质瘤病理学特征、细胞增殖以及血管形成的关系。方法采用免疫组化方法检测LAT1、Ki-67和CD34在62例人脑胶质瘤组织中的表达,计算Ki-67标记指数(Ki-67 LI)和微血管密度(MVD)。结果LAT1在胶质瘤中高表达,其免疫阳性染色既定位于瘤细胞也定位于血管内皮;LAT1表达随胶质瘤病理级别升高而明显增强(P=0.000),在高恶性度胶质瘤中LAT1表达明显强于低恶性度胶质瘤(P=0.002);LAT1表达与胶质瘤Ki-67标记指数(P=0.003)和微血管密度(P=0.000)都存在明显正相关。结论 LAT1与胶质瘤的发生和发展关系密切,可能在胶质瘤的恶性增殖和血管形成中发挥重要作用。     

瘦素与CD105在胶质瘤组织中的表达及其相关性研究

目的观察脑胶质瘤组织中瘦素和CD105的表达情况及其相关性,并探讨其意义。方法采用免疫组织化学染色法检测54例不同级别的脑胶质瘤组织及14例正常脑组织中瘦素与CD105的表达。结果正常脑组织中未检测到瘦素与CD105的表达。胶质瘤组织中瘦素和CD105的阳性表达率分别为75．93％和81．48％,且胶质瘤病理级别与二者的表达呈明显正相关（P〈0．01）;胶质瘤组织中瘦素与CD105表达呈正相关（P〈0．01）。结论瘦素可能参与了脑胶质瘤的发展,并可促进肿瘤组织中新生血管的生成。     

雄激素受体在脑胶质瘤中的表达及意义

目的探讨雄激素受体（androgen receptor,AR）在不同级别脑胶质瘤的表达及意义。方法收集12例正常脑组织和73例不同级别脑胶质瘤组织标本．其中WHOⅠ级8例,Ⅱ级15例,Ⅲ级23例,Ⅳ27例。采用免疫组织化学染色法和实时荧光定量PCR检测AR蛋白及AR mRNA表达情况,并分析正常脑组织和不同级别胶质瘤间AR表达差异。结果各级别胶质瘤组织中的AR蛋白阳性率和mRNA水平均明显高于正常脑组织（均P〈0．05）。胶质瘤WHO分级与AR阳性细胞率呈显著正相关（m=0．584,P〈0．001）,胶质瘤WHO分级与AR mRNA表达呈显著正相关（rs=0．885,P〈0．001）。结论AR在胶质瘤组织中表达增加．其表达水平与病理级别密切相关,提示AR可能在脑胶质瘤的生物学行为中发挥重要作用。     

Notch-1mRNA在人脑胶质瘤中的表达及其意义

目的探讨Notch信号通路在人脑胶质瘤发展中的作用。方法收集脑胶质瘤组织标本60例,其中Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤35例及Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤25例,并取22例瘤旁正常脑组织标本作为对照。采用半定量RT-PCR方法检测这些标本中Notch-l mRNA的表达。结果Notch-1 mRNA在人脑胶质瘤中的表达显著高于正常脑组织（P〈0.01）,且在Ⅲ~Ⅳ级胶质瘤组中的表达显著高于Ⅰ-Ⅱ级组（P〈0.01）。相关性研究发现,Notch-1 mRNA的表达与人脑胶质瘤病理分级呈正相关（r=0.706,P〈0.01）。结论Notch-1mRNA在人正常脑组织和脑胶质瘤中均有表达,但其在脑胶质瘤中的表达与脑胶质瘤的病理分级呈正相关。     

人脑胶质瘤中CD133、SSEA-1、Nestin的表达和意义

目的：研究胶质瘤干细胞标志物CD133、SSEA-1和Nestin在胶质瘤组织中表达及其与病理分级的相关性;探讨三者在人脑胶质瘤的诊断及恶性程度判断中的临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测54例脑胶质瘤组织和6例正常脑组织标本中CD133、SSEA-1及Nestin的表达。结果 CD133、SSEA-1和Nestin在胶质瘤组织中的阳性细胞平均表达率分别为25.38%、26.62%和22.39%,而在正常脑组织中均无表达。CD133、SSEA-1和Nestin阳性细胞率在胶质瘤各病理级别间比较,差异均有统计学意义,且三者的表达与胶质瘤病理级别呈正相关（P＜0.05）。SSEA-1与CD133、CD133与Nestin及SSEA-1与Nestin阳性细胞表达均呈正相关（P＜0.05）。结论检测CD133、SSEA-1、Nestin表达,有利于胶质瘤的诊断及恶性程度判断,并在胶质瘤的个性化综合治疗和预后评估发挥作用。     

胶质瘤中MCP-1表达、TAMs募集及其相关性研究

目的探讨胶质瘤中单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）表达与肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）的相互关系及其临床病理意义。方法采用免疫组化方法（SABC）检测不同级别胶质瘤中的MCP-1、CD68的平均阳性表达率。结果不同级别胶质瘤中,MCP-1、CD68阳性表达率有显著性差异（P〈0．05）,并且MCP-1、CD68随着胶质瘤级别的增高,阳性表达率也不断增加。结论MCP-1、TAMs在人胶质瘤发生、发展及相关生物学行为中起着重要的作用,且二者之间具有相互协同作用。