自体鼻中隔软骨、耳软骨和头部真皮联合鼻成形术

目的 探讨采用自体鼻中隔软骨、耳软骨和头部真皮行联合鼻成形术的临床效果.方法 设计鼻小柱开放式切口,以自体鼻中隔软骨行鼻延长术,以自体耳软骨作鼻小柱支柱抬高鼻尖,同时以自体头部真皮植入抬高鼻背.结果 本组31例患者,术后随访3～24个月,1例术后1周出现鼻中隔积液,排出积液后痊愈.所有患者术后鼻部美学效果明显改善,形态自然,无排异反应.结论 自体鼻中隔软骨、耳软骨和头部真皮联合鼻成形术,是鼻尖、鼻背整形的有效手术方法.     

自体鼻中隔软骨在唇裂继发鼻畸形矫治术中的应用

目的：探索自体鼻中隔软骨在唇裂继发鼻畸形中的应用。方法：在行唇裂术后鼻畸形矫治术时应用自体鼻中隔软骨重建鼻软骨支架,改善外观。结果：应用本法共矫治单侧唇裂30例,双侧唇裂12例,无感染及自体软骨外露,矫治畸形效果良好。结论：本法行鼻畸形矫治同时就近取材,无另外增加术区,取部分鼻中隔软骨后保留＂L＂形支撑结构,不出现鼻梁塌陷现象。应用自体软骨重建鼻软骨支架特别适用于自体鼻翼塌陷、鼻小柱歪斜的唇裂患者。     

鼻中隔软骨在单侧唇裂继发鼻畸形矫治术中的应用

目的 探讨自体鼻中隔软骨在单侧唇裂继发鼻畸形矫治术中的应用及效果.方法 对31例单侧唇裂继发鼻畸形患者,将错位畸形的鼻软骨松解复位后,用自体鼻中隔软骨移植,抬高塌陷鼻翼,重塑鼻尖软骨结构以矫正单侧唇裂鼻继发畸形.结果 术后切口均Ⅰ期愈合,供软骨区无严重并发症发生,切口瘢痕隐蔽,经6个月至2年随访,无软骨吸收变形,鼻整形效果稳定.结论 单侧唇裂继发鼻畸形,采用自体鼻中隔软骨移植矫治,既解决了软骨的取材来源,又对鼻中隔歪斜进行矫正,同时外鼻畸形矫正效果也良好.     

自体鼻中隔软骨在鼻尖和鼻小柱整形中的应用

目的 探讨自体鼻中隔软骨在鼻尖和鼻小柱整形中的应用效果.方法 将鼻中隔软骨移植与鼻小柱处大翼软骨内侧角之间作为支架,将鼻中隔软骨修剪成盾形移植于鼻尖.结果 本组108例患者均获随访l～2年,鼻尖、鼻小柱整形效果稳定,无软骨吸收变形,无皮肤坏死,切口瘢痕不明显.除2例术前鼻尖过于肥大圆钝的患者术后感觉鼻尖表现点较不明显外,余者临床效果均满意.结论 自体鼻中隔软骨进行鼻尖、鼻小柱整形,可获得良好的临床效果.     

自体骨髓细胞诱导肝移植大鼠长期存活的机制探讨

目的 研究自体骨髓细胞诱导肝移植大鼠长期存活的可能机制.方法 雌性受体大鼠随机分成空白对照组(A组)、D-hanks液组(B组)、全骨髓细胞组(C组)、间充质干细胞组(D组).观察大鼠的中位生存时间(median survival time,MST)、肝功能、病理变化、Sry基因原位杂交和甲胎蛋白、白蛋白免疫组化双标检测观察自体骨髓细胞的分化情况.结果 C组、D组MST均>180 d(P<0.01);血肝功能指标C组、D组降低明显,有显著差异(P<0.01);C组、D组之间比较无显著差异(P>0.05);移植术后60 d C、D组均无明显的急性排斥反应;C组、D组Sry基因原位杂交和甲胎蛋白、白蛋白免疫组化双标检测呈阳性.结论 自体骨髓细胞能减少排斥反应、诱导大鼠肝移植术后长期存活,其中间充质干细胞在移植肝内诱导分化为肝细胞发挥肝细胞功能,是其中可能的机制.     

自体骨髓细胞诱导肝移植大鼠长期存活的机制探讨

目的 研究自体骨髓细胞诱导肝移植大鼠长期存活的可能机制.方法 雌性受体大鼠随机分成空白对照组(A组)、D-hanks液组(B组)、全骨髓细胞组(C组)、间充质干细胞组(D组).观察大鼠的中位生存时间(median survival time,MST)、肝功能、病理变化、Sry基因原位杂交和甲胎蛋白、白蛋白免疫组化双标检测观察自体骨髓细胞的分化情况.结果 C组、D组MST均>180 d(P<0.01);血肝功能指标C组、D组降低明显,有显著差异(P<0.01);C组、D组之间比较无显著差异(P>0.05);移植术后60 d C、D组均无明显的急性排斥反应;C组、D组Sry基因原位杂交和甲胎蛋白、白蛋白免疫组化双标检测呈阳性.结论 自体骨髓细胞能减少排斥反应、诱导大鼠肝移植术后长期存活,其中间充质干细胞在移植肝内诱导分化为肝细胞发挥肝细胞功能,是其中可能的机制.     

自体骨髓细胞诱导肝移植大鼠长期存活的机制探讨

目的 研究自体骨髓细胞诱导肝移植大鼠长期存活的可能机制.方法 雌性受体大鼠随机分成空白对照组(A组)、D-hanks液组(B组)、全骨髓细胞组(C组)、间充质干细胞组(D组).观察大鼠的中位生存时间(median survival time,MST)、肝功能、病理变化、Sry基因原位杂交和甲胎蛋白、白蛋白免疫组化双标检测观察自体骨髓细胞的分化情况.结果 C组、D组MST均>180 d(P<0.01);血肝功能指标C组、D组降低明显,有显著差异(P<0.01);C组、D组之间比较无显著差异(P>0.05);移植术后60 d C、D组均无明显的急性排斥反应;C组、D组Sry基因原位杂交和甲胎蛋白、白蛋白免疫组化双标检测呈阳性.结论 自体骨髓细胞能减少排斥反应、诱导大鼠肝移植术后长期存活,其中间充质干细胞在移植肝内诱导分化为肝细胞发挥肝细胞功能,是其中可能的机制.     

髓芯减压自体骨髓细胞移植与带血管蒂骨瓣转位治疗股骨头缺血坏死的比较

目的 对比研究髓芯减压自体骨髓细胞移植与带血管蒂骨瓣转位两种方法治疗成人股骨头缺血性坏死的疗效.方法 对48例(60髋)成人股骨头缺血性坏死(ARCO分期:Ⅰc～Ⅱc期)分别采用带血管蒂骨瓣转位和髓芯减压自体骨髓细胞移植治疗.髓芯减压自体骨髓细胞移植治疗23例(30髋),带血管蒂骨瓣转位治疗25例(30髋).术后采用髋关节的Harris评分及影像学稳定情况评定疗效.结果 髓芯减压自体骨髓细胞移植与带血管蒂骨瓣转位两组的手术时间和出血量,分别为40.2±16.5 min、57.4±18.5 min(P＜0.05)和180.0±20.5 ml、260.6±19.5 ml(P＜0.05).术中、术后无严重并发症发生.所有患者获平均36.5个月随访,髓芯减压自体骨髓细胞移植与带血管蒂骨瓣转位两组的优良率为别为83.3%、90.0%(P＞0.05);两组影像检查学分别显示24髋、25髋保持稳定(P＞0.05).结论 髓芯减压自体骨髓细胞移植和带血管蒂骨瓣转位治疗成人早期股骨头缺血性坏死的优良率相近,但前者较后者出血少并且手术时间短,是一种安全、有效的治疗早期股骨头缺血坏死的微创治疗方法.     

自体骨髓细胞诱导肝移植大鼠长期存活的机制探讨

目的 研究自体骨髓细胞诱导肝移植大鼠长期存活的可能机制.方法 雌性受体大鼠随机分成空白对照组(A组)、D-hanks液组(B组)、全骨髓细胞组(C组)、间充质干细胞组(D组).观察大鼠的中位生存时间(median survival time,MST)、肝功能、病理变化、Sry基因原位杂交和甲胎蛋白、白蛋白免疫组化双标检测观察自体骨髓细胞的分化情况.结果 C组、D组MST均>180 d(P<0.01);血肝功能指标C组、D组降低明显,有显著差异(P<0.01);C组、D组之间比较无显著差异(P>0.05);移植术后60 d C、D组均无明显的急性排斥反应;C组、D组Sry基因原位杂交和甲胎蛋白、白蛋白免疫组化双标检测呈阳性.结论 自体骨髓细胞能减少排斥反应、诱导大鼠肝移植术后长期存活,其中间充质干细胞在移植肝内诱导分化为肝细胞发挥肝细胞功能,是其中可能的机制.     

自体骨髓细胞诱导肝移植大鼠长期存活的机制探讨

目的 研究自体骨髓细胞诱导肝移植大鼠长期存活的可能机制.方法 雌性受体大鼠随机分成空白对照组(A组)、D-hanks液组(B组)、全骨髓细胞组(C组)、间充质干细胞组(D组).观察大鼠的中位生存时间(median survival time,MST)、肝功能、病理变化、Sry基因原位杂交和甲胎蛋白、白蛋白免疫组化双标检测观察自体骨髓细胞的分化情况.结果 C组、D组MST均>180 d(P<0.01);血肝功能指标C组、D组降低明显,有显著差异(P<0.01);C组、D组之间比较无显著差异(P>0.05);移植术后60 d C、D组均无明显的急性排斥反应;C组、D组Sry基因原位杂交和甲胎蛋白、白蛋白免疫组化双标检测呈阳性.结论 自体骨髓细胞能减少排斥反应、诱导大鼠肝移植术后长期存活,其中间充质干细胞在移植肝内诱导分化为肝细胞发挥肝细胞功能,是其中可能的机制.     

Engineering Vascularized Bone Graft With Osteogenic and Angiogenic Lineage Differentiated Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells

Tissue‐engineered bone provides a promising method for the rehabilitation of acquired bone defects and congenital deformities. However, generating a vascular supply to the engineered graft remains a major challenge. We report a novel strategy to engineer vascularized bone grafts with osteogenic and angiogenic lineage differentiated marrow mesenchymal stem cells (MSCs). MSCs were expanded to form an osteogenic cell sheet using a continuous culture method and a scraping technique under osteogenic culture conditions. Another portion of MSCs was directed to differentiate into highly proliferative endothelial progenitor cells (EPCs), which were then seeded onto the cell sheets. Cell sheet–EPC complexes were implanted subcutaneously in nude mice. Cell sheets without EPCs were also implanted as a control. The mice were sacrificed, and the samples were harvested for evaluation consisting of micro‐CT scanning, histological analysis and scanning electronic microscopy 4 and 8 weeks after implantation. The results showed that cell sheets were composed of viable cells and extracellular matrix and showed apparent mineralization. The obtained EPCs could express the specific antigen marker of CD31 and form capillary‐like structures in vitro. The osteogenic cell sheet–EPC complexes yielded well‐vascularized bone grafts 4 and 8 weeks after implantation. Both bone density and vascular density were significantly higher in the cell sheet–EPC complex group than in the control group. The results demonstrated that the introduction of EPCs could not only generate a vascular network but also increase bone formation for cell sheet‐based bone engineering. These findings suggest that the strategy of engineering bone grafts with osteogenic and angiogenic lineage differentiated MSCs has great potential for clinical applications to repair large bone defects.     

自体骨软骨移植与含富集骨髓干细胞松质骨移植修复兔关节软骨缺损

目的:评价自体骨软骨移植与含富集骨髓干细胞松质骨镶嵌移植两种方法修复全层关节软骨缺损的生物学特征和效果。方法:采用新西兰大白兔制作左右后肢全层软骨缺损模型,分别进行自体骨软骨镶嵌移植、含富集骨髓干细胞松质骨镶嵌移植修复,对照组不作任何修复,每组12只。术后第4、8、12周处死动物取材,分别进行膝关节活动度测定、大体观察、光镜观察与电镜观察。结果:移植实验组在第12周时均能以类透明软骨组织修复缺损,对照组为纤维肉芽组织。形态学检查表明,两种方法均能以类透明软骨组织覆盖缺损,骨软骨移植组无明显免疫排斥现象,随着时间延长,修复高度逐渐增加。骨软骨移植组同含富集骨髓干细胞松质骨镶嵌移植组效果无显著差别。结论:骨软骨移植、含富集骨髓干细胞松质骨镶嵌移植两种方法均能以类透明软骨组织修复全层关节软骨缺损,含富集骨髓干细胞松质骨镶嵌移植更适用于较大面积软骨缺损的修复。     

人骨髓基质细胞接种珊瑚构建组织工程骨

目的：观察体外培养的人骨髓基质细胞与珊瑚复合物植入体内后的成骨能力。方法：穿刺抽吸入髂骨区骨髓基质细胞，体外培养扩增、诱导，将其与珊瑚复合后植入裸鼠体内，以单纯珊瑚作为对照。术后4、8周取材，通过大体、组织学、扫描电镜观察植入物体内成骨情况。结果：术后4周，复合物中有少量新骨形成；术后8周，复合物中出现大量成熟骨组织。而对照组无骨组织形成。结论：人骨髓基质细胞复合珊瑚在无免疫动物体内具有成骨能力，穿刺抽吸的人骨髓基质细胞可作为骨组织工程的种子细胞。     

Skeletal Cell Fate Decisions Within Periosteum and Bone Marrow During Bone Regeneration

Bone repair requires the mobilization of adult skeletal stem cells/progenitors to allow deposition of cartilage and bone at the injury site. These stem cells/progenitors are believed to come from multiple sources including the bone marrow and the periosteum. The goal of this study was to establish the cellular contributions of bone marrow and periosteum to bone healing in vivo and to assess the effect of the tissue environment on cell differentiation within bone marrow and periosteum. Results show that periosteal injuries heal by endochondral ossification, whereas bone marrow injuries heal by intramembranous ossification, indicating that distinct cellular responses occur within these tissues during repair. Next, lineage analyses were used to track the fate of cells derived from periosteum, bone marrow, and endosteum, a subcompartment of the bone marrow. Skeletal progenitor cells were found to be recruited locally and concurrently from periosteum and/or bone marrow/endosteum during bone repair. Periosteum and bone marrow/endosteum both gave rise to osteoblasts, whereas the periosteum was the major source of chondrocytes. Finally, results show that intrinsic and environmental signals modulate cell fate decisions within these tissues. In conclusion, this study sheds light into the origins of skeletal stem cells/progenitors during bone regeneration and indicates that periosteum, endosteum, and bone marrow contain pools of stem cells/progenitors with distinct osteogenic and chondrogenic potentials that vary with the tissue environment.     

组织工程化骨修复四肢骨缺损的初步临床研究

目的探索以人自体骨髓基质干细胞(Human bone marrow stromal cells,hBMSCs)为种子细胞构建的组织工程骨用于修复四肢骨缺损的可行性。方法选择9例四肢骨缺损病例(良性骨肿瘤5例、骨缺损4例)。经病人髂前上嵴,穿刺抽取10mL骨髓,用密度梯度离心法分离得到hBMSCs,用成骨诱导培养液定向培养、扩增,应用第3代的hBMSCs与珊瑚复合,继续在体外培养1周后,手术植入骨缺损区。分别在术后2个月、6个月、12个月和24个月进行临床观察和X线检查。1例病人在二次手术时,在原骨缺损区取出少量新生组织活检,进行组织学观察(HE染色)。结果患者术后X线检查显示,组织工程骨在原位形成新骨,能较好地修复骨缺损。活检标本HE染色显示,局部形成正常松质骨组织。结论以自体hBMSCs为种子细胞,利用组织工程技术制成的自体组织工程骨可以修复四肢骨缺损,并且能够修复较大的骨缺损,但组织工程骨的临床成骨效果与植骨床血供密切相关,目前所使用的组织工程骨植骨方法具有一定的适应证。     

犬骨髓单个核细胞构建组织工程骨的体外实验研究

目的 探索组织工程骨(Tissue Engineered Bone,TEB)的即刻构建方案,以符合临床骨缺损即刻修复的要求。方法 分离获取Beagle犬骨髓单个核细胞(Canine bone marrow mononuclear cells,cBMNCs)。将密度为30×10~6 cells/mL的cBMNCs复合部分脱钙骨(Partially demineralized bone matrix,pDBM)即刻构建TEB。对即刻构建的TEB进行体外培养和成骨检测。结果 在成骨诱导的体外培养环境下,即刻构建的TEB具有一定的细胞活性和成骨能力。结论 即刻构建的TEB可直接回植,以满足体内即刻骨缺损修复的要求。     

兔骨髓基质细胞的分离培养

目的 为骨组织工程寻找一种理想的种子细胞。方法 采取兔骨髓组织，应用梯度离心获取骨髓基质细胞，体外培养传代，通过光镜、透射电镜及成骨特性的鉴定，观察细胞的形态、生长特点及成骨特性。结果 培养的骨髓基质细胞形态多为三角形或梭形，生长增殖迅速，具有成骨能力，易于定向分化为成骨细胞。结论 自骨髓获得的骨髓基质细胞具有明显的增殖能力和成骨活性，可以做为骨组织工程中比较理想的种子细胞。     

不同骨愈合方式的细胞与分子机理研究-BMP与骨祖细胞的分布及其作用

目的 :研究骨形态发生蛋白 (BMP)及骨祖细胞的分布与作用 ,探讨不同骨愈合方式的细胞与分子机理。方法 :制造兔桡骨中下段骨折 ,缺损 3mm ,不同时期取骨痂作HE及BMP免疫组化染色 ,显微镜下观察结果并作计算机图像分析。结果 :膜内成骨区及软骨内成骨区骨祖细胞、成骨细胞、成软骨细胞及未成熟的骨细胞BMP染色呈强阳性 ;但肥大的软骨细胞和成纤维细胞为阴性染色。计算机图像分析显示 :膜内成骨区较软骨内成骨区有较高BMP浓度及较多阳性着色细胞。结论 :骨愈合方式与局部BMP浓度及骨祖细胞的来源与分布有关。     

Bone Vasculature and Bone Marrow Vascular Niches in Health and Disease

Bone vasculature and bone marrow vascular niches supply oxygen, nutrients, and secrete angiocrine factors required for the survival, maintenance, and self-renewal of stem and progenitor cells. In the skeletal system, vasculature creates nurturing niches for bone and blood-forming stem cells. Blood vessels regulate hematopoiesis and drive bone formation during development, repair, and regeneration. Dysfunctional vascular niches induce skeletal aging, bone diseases, and hematological disorders. Recent cellular and molecular characterization of the bone marrow microenvironment has provided unprecedented insights into the complexity, heterogeneity, and functions of the bone vasculature and vascular niches. The bone vasculature is composed of distinct vessel subtypes that differentially regulate osteogenesis, hematopoiesis, and disease conditions in bones. Further, bone marrow vascular niches supporting stem cells are often complex microenvironments involving multiple different cell populations and vessel subtypes. This review provides an overview of the emerging vascular cell heterogeneity in bone and the new roles of the bone vasculature and associated vascular niches in health and disease. © 2020 The Authors. Journal of Bone and Mineral Research published by Wiley Periodicals LLC on behalf of American Society for Bone and Mineral Research (ASBMR).     

自体骨髓基质细胞移植治疗兔膝关节半月板无血运区损伤

目的 观察自体骨髓基质细胞在体内分化为软骨细胞的能力及对半月板无血运区损伤修复的影响。方法 将体外培养的自体骨髓基质细胞收集后与纤维蛋白凝胶混合,植入４０只成年兔一侧膝半月板无血运区损伤的裂口内,另侧设空白对照或单纯纤维蛋白凝胶植放。分别于术后１（１２只）、２（１２只）、３（１５只）个月取村,行肉眼、光镜组织学观察。结果 术后２个月１２个膝半月板损伤处在量的软骨细胞并有胶原纤维形成,３个月１３个膝