八肽缩胆囊素受体在血管内皮细胞中的表达及脂多糖的影响

目的 观察八肽缩胆囊素受体(CCK-R)mRNA在人脐静脉内皮细胞株ECV-304中的表达,并探讨内毒素脂多糖(LPS)对CCK-AR、CCK-BR mRNA表达的影响.方法 培养人脐静脉内皮细胞株ECV-304,以LPS 0.01、0.1、1、10 mg/L孵育ECV-304 2 h或用1 mg/L LPS孵育ECV-304 0.5、2、6、12 h,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测CCK-AR、CCK-BR的mRNA表达,并对扩增产物的特异性进行测序分析.结果 与空白对照组比较,0.01、0.1及1 mg/L LPS孵育细胞2 h可剂量依赖性引起CCK-AR及CCK-BR的mRNA表达明显升高(P均<0.05),其中0.01 mg/L LPS诱导CCK-AR mRNA效应不明显,但可明显诱导CCK-BR mRNA表达;与1 mg/L LPS组比较,10 mg/L LPS孵育细胞2 h CCK-AR及CCK-BR的mRNA表达未继续出现明显升高(P均>0.05).与空白对照组比较,1 mg/L LPS孵育细胞0.5～2 h CCK-AR及CCK-BR的mRNA表达呈时间依赖性升高(P均<0.05);与LPS孵育2 h比较,1 mg/L LPS孵育细胞6 h CCK-AR及CCK-BR的mRNA表达明显下降,但仍高于空白对照组(P均<0.05);与LPS孵育6 h比较,1 mg/L LPS孵育细胞12 h CCK-AR及CCK-BR的mRNA表达进一步降低(P均<0.05),且与空白对照组比较已无显著差异(P均>0.05).结论 CCK-AR与CCK-BR的mRNA在ECV-304中均有表达;LPS可诱导CCK-AR及CCK-BR的mRNA表达上调.     

八肽胆囊收缩素对脂多糖诱导肺动脉内皮细胞凋亡的抑制作用

目的：探讨八肽胆囊收缩素（CCK－8）对脂多糖（LPS）诱导培养的肺动脉内皮细胞（BPAEC）凋亡的影响。方法：培养的BPAEC用LPS、CCK－8、CCK－8非特异性受体阻断剂丙谷胺分别或共同处理后,继续培养24小时。用流式细胞术和核荧光染色方法检测细胞凋亡,用生物化学方法检测培养上清中乳酸脱氢酶（LDH）活性和丙二醛（MDA）含量,用流式细胞术定量检测过氧亚硝基阴离子（ONOO^-)含量。结果：LPS可诱导BPAEC凋亡和坏死明显增多,培养上清中MDA含量增高;CCK－8抑制BPAEC凋亡和MDA含量的增高,此作用为CCK－8受体非特异性阻断剂丙谷胺翻转;CCK－8可抑制LPS诱导BPAEC生成ONOO^-增多;CCK－8和丙谷胺对LPS诱导的BPAEC坏死无明显影响。结论：CCK－8可抑制LPS诱导的BPAEC凋亡,此作用由其受体介导,并与CCK－8的抗氧化功能有关。     

八肽胆囊收缩素抑制大鼠脊髓损伤后诱导型一氧化氮合酶的表达

目的：观察八肽胆囊收缩素（CCK-8)对大鼠脊髓损伤后诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS)表达的影响，进一步探讨CCK-8对脊髓损伤后的神经功能及其组织的保护作用。方法：实验于2003-09／2004-02在解放军总医院神经外科实验室进行。将36只SD大鼠随机分成3组，参照改良的Gruner法建立大鼠T9脊髓损伤模型，用免疫组化研究损伤后不同时间点iNOS的表达变化；选取3个表达最强时间点应用CCK-8腹腔内注射观察iNOS的表达变化。结果：正常脊髓组织内iNOS表达为(4．34&;#177;1．15)％，脊髓损伤后3d明显上升，7d表达最强，为(47．57&;#177;8．62)％，高于正常(P&;lt;0．01)，14d时表达减弱；应用CCK-8后iNOS在7d时的表达明显减低为(30．50&;#177;5．17)％，与损伤组比差异有非常显著性意义(P&;lt;0．01)。结论：脊髓损伤后iNOS表达增高，与继发性的炎症反应相关；CCK-8能够抑制这种炎症反应，具有保护作用。     

缺氧对体外培养动脉内皮细胞中诱生型一氧化氮合酶表达和细胞形态的影响

目的：观察体外培养的动脉内皮细胞在缺氧条件下诱生型一氧化氮合酶的表达和细胞形态的变化情况。方法：实验于2004—09／11在哈尔滨医科大学组织学与胚胎学教研室实验室完成。原代培养牛动脉内皮细胞，将培养的内皮细胞随机分为5组，即常氧组、缺氧0．5，1，2，3h组、每组切片选取12个400倍视野进行观察。诱生型一氧化氮合酶的表达采用免疫组织化学法测定。用计算机图文分析系统对各组切片内皮细胞诱生型一氧化氮合酶阳性表达的平均积分吸光度和缺氧后的细胞形态进行分析：结果：①缺氧1h，2h，3h组的平均积分吸光度显著高于常氧组[0．1008&;#177;0．019，0．1179&;#177;0．037，0．1964&;#177;0．023，0．0735&;#177;0．032（t=-10．364～2．133，P〈0．05-0．01）1。②缺氧后细胞的最大直径和最小直径均变小，核浆比例增大，细胞数量减少。结论：缺氧后动脉内皮细胞的生长数量和形态发生明显变化，使其屏障作用降低；同时诱生型一氧化氮合酶表达的增加提示诱生型一氧化氮合酶在缺氧后内皮细胞的损伤中发挥重要作用。     

八肽缩胆囊素调节脂多糖诱导ECV-304细胞核转录因子-κB表达的受体机制研究

目的探讨八肽缩胆囊紊（CCK-8）调节脂多糖（LPS）诱导血管内皮细胞核转录因子-κB（NF—κB）表达的受体机制。方法培养人脐静脉内皮细胞株ECV-304；用溶剂（生理盐水）、LPS、CCK-8、CCK受体（CCK—R）非特异性拮抗剂丙谷胺、CCK—A受体（CCK—AR）特异性拮抗剂CR-1409、CCKB受体（CCK—BR）特异性拮抗剂CR-2945分别或联合刺激ECV-304细胞1h。用蛋白质免疫印迹法（Western blot）榆测NF-κB p65蛋白表达；用免疫细胞化学技术榆测NF—κB p65蛋白核移位。结果与溶剂对照组比较，LPS可诱导ECV-304细胞NF-κB p65蛋白核移位，且其表达明显上调；CCK-8可呈剂量依赖性地抑制LPS诱导的核移位及表达上调；CCK受体拮抗剂可翻转CCK-8的上述抑制效应，其中CR-1409、CR-2945、丙谷胺作用依次增强。结论CCK-AR和CCKBR参与介导了CCK-8对LPS诱导ECV-304细胞NF—κB表达的抑制作用，其中CCK—BR的作用比CCK—AR稍强。     

内皮细胞中血管紧张肽Ⅱ对内皮型一氧化氮合酶表达的影响

目的探讨在内皮细胞中血管情张肽Ⅱ（AngⅡ）对内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase，eNOS）表达的影响以及AT1、AT2和核因子-κB（NF—κB）在其中的作用。方法体外培齐人脐静脉内皮细胞，用AngⅡ单独和与缬沙坦（AT1的抑制剂）、PD123319（AT2的抑制剂）、PDTC（NF—κ的抑制剂）联合干预细胞后，用RT—PCR检测eNOS mRNA表迭，Western blot检测eNOS蛋白表达，EMSA检测NF—κB的活性。结果在AngⅡ干预2h后NF—κB活性增强（P〈0．05），PDTC和缬沙坦可以抑制活性的增强，而PD123319则无此作用；5h后eNOS的mRNA和蛋白表达下调（P〈0．05），缬沙坦能抑制这种下调（P〈0．05），PDTC无此作用，PD123319作用后eNOS的表达进一步下调，但与AngⅡ组无显著差别。结论在内皮细胞中AngⅡ与AT1结合后，可以导致NF—κB的激活和eNOS表达的下调，而NF—κB通路并没参与到AngⅡ对eNOS的调控中。     

脂多糖诱导巨噬细胞产生诱导型一氧化氮合酶的实验研究

目的 观察脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)对小鼠腹腔巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶(in-ducible nitric oxide svnthase,iNOS)的诱导作用.方法 常规方法获取小鼠腹腔巨噬细胞随机分成两组:空白对照组(培养基中不含LPS)及LPS组(分别含LPS 0.01,0.1.1.0,10mg/L的培养基培养24h).采用逆转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)和Western Blotting方法测定诱导型一氧化氮合酶的基因及蛋白表达水平.结果 RT-PCR和Westem Blotting结果表明,经0.1mg/L LPS刺激后细胞iNOS mRNA及蛋白表达水平均明显升高,与空白对照组比较有显著性差异(P&lt;0.05),并且在一定范围内呈剂量--效应关系.结论 LPS可诱导小鼠巨噬细胞产生诱导型一氧化氮合酶.     

脂多糖诱导巨噬细胞产生诱导型一氧化氮合酶的实验研究

目的观察脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)对小鼠腹腔巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶(in-ducible nitric oxide synthase,iNOS)的诱导作用。方法常规方法获取小鼠腹腔巨噬细胞随机分成两组:空白对照组(培养基中不含LPS)及LPS组(分别含LPS0.01,0.1,1.0,10mg/L的培养基培养24h)。采用逆转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)和Western Blotting方法测定诱导型一氧化氮合酶的基因及蛋白表达水平。结果RT-PCR和Western Blotting结果表明,经0.1mg/LLPS刺激后细胞iNOS mRNA及蛋白表达水平均明显升高,与空白对照组比较有显著性差异(P<0.05),并且在一定范围内呈剂量-效应关系。结论LPS可诱导小鼠巨噬细胞产生诱导型一氧化氮合酶。     

血管紧张素Ⅱ对猪动脉内皮细胞内皮型一氧化氮合酶基因表达的异质性研究

目的:通过观测血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对体循环和肺循环系统动脉内皮细胞内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因表达的影响,探讨体、肺循环系统病理生理学上的差异。方法:采用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫细胞化学方法(LSAB法)观察AngⅡ对培养的猪主动脉和肺动脉内皮细胞eNOSmRNA和蛋白质表达的影响。结果:AngⅡ分别作用6、12、24、36、48h后,主动脉内皮细胞eNOSmRNA及蛋白质的表达下调。在AngⅡ作用的早期(≤24h),肺动脉内皮细胞eNOSmRNA和蛋白质的表达也呈时间依赖性下调,但作用48h后,肺动脉内皮细胞eNOSmRNA恢复至正常水平,并且eNOS蛋白水平上调超过空白对照组,表现出先抑制后促进的特性。结论:AngⅡ对主动脉和肺动脉内皮细胞eNOS基因表达的影响不同,可能是由于不同的AT受体亚型或是不同的信使途径所调节,表明体循环和肺循环动脉之间存在着病理生理学的异质性。     

八肽胆囊收缩素抑制大鼠脊髓损伤后诱导型一氧化氮合酶的表达

目的:观察八肽胆囊收缩素(CCK-8)对大鼠脊髓损伤后诱导型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthase,iNOS)表达的影响,进一步探讨CCK-8对脊髓损伤后的神经功能及其组织的保护作用。方法:实验于2003-09/2004-02在解放军总医院神经外科实验室进行。将36只SD大鼠随机分成3组,参照改良的Gruner法建立大鼠T9脊髓损伤模型,用免疫组化研究损伤后不同时间点iNOS的表达变化;选取3个表达最强时间点应用CCK-8腹腔内注射观察iNOS的表达变化。结果:正常脊髓组织内iNOS表达为(4.34±1.15)%,脊髓损伤后3d明显上升,7d表达最强,为(47.57±8.62)%,高于正常(P<0.01),14d时表达减弱;应用CCK-8后iNOS在7d时的表达明显减低为(30.50±5.17)%,与损伤组比差异有非常显著性意义(P<0.01)。结论:脊髓损伤后iNOS表达增高,与继发性的炎症反应相关;CCK-8能够抑制这种炎症反应,具有保护作用。     

Exogenous nitric oxide regulates activity and synthesis of vascular endothelial nitric oxide synthase

Background Nitric oxide (NO) – a major signalling molecule of the vascular system – is constitutively produced in endothelial cells (EC) by the endothelial NO synthase (eNOS). Since a reduced NO synthesis is an early sign of endothelial dysfunction and NO delivering drugs are used to substitute the impaired endothelial NO production, we addressed the effect of exogenous NO on eNOS in human umbilical venous endothelial cell cultures. Materials and methods The synthetic NO donor DETA/NO (trade name, but in the following we refer to detNO), that releases NO in a strictly first order reaction with a half life of 20 h, was used in our experiments. Results Short‐term (20–30 min) detNO treatment of EC increases the Ser¹¹⁷⁷ phosphorylation of the constitutively expressed endothelial NOS and the production of endogenous NO generated by eNOS from [³H]arginine. The phosphorylation of eNOS is Akt‐dependent and completely reverted by the phosphatidylinositol‐3 kinase (PI‐3K) inhibitor LY294002. A prolonged continuous exposure of EC to detNO 150 µmol L^?1 over a period of 24–48 h causes a reversible cell cycle arrest at G₁‐phase associated with a larger cell volume and increased cell protein content (hypertrophic phenotype of EC). The eNOS protein and mRNA of the hypertrophic cells and the generation of endogenous NO are reduced but eNOS phosphorylation could still be elevated by stimulation with vascular endothelial growth factor. Conclusions Our data explain clinical studies describing a short‐term but not a long‐term benefit of NO treatment for patients with cardiovascular risk factors. The results could be a rational approach to develop a generation of NO donors accomplishing a retarded release from NO donors that mimic the low continuous pulsatile stress‐induced release of endogenous NO.     

诱导型一氧化氮合酶与血管内皮生长因子C在宫颈癌中表达及其与淋巴结转移的相关性研究

目的探讨诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）与血管内皮生长因子（vascularendothelial growth factor,VEGF）-C在宫颈癌组织中的表达及其与淋巴结转移之间的关系。方法 55例宫颈癌组织（宫颈癌组）与10例正常宫颈组织（对照组）,采用免疫组织化学SP法检测2组iNOS和VEGF-C的表达情况。结果宫颈癌组iNOS与VEGF-C阳性率分别为69.09%和63.64%,对照组分别为20.00%和10.00%,差异有统计学意义（P〈0.05）;iNOS表达与VEGF-C呈正相关（r=0.78,P〈0.01）;宫颈癌组iNOS（＋）VEGF-C（＋）者淋巴转移的发生率（54.55%）明显高于iNOS（-）VEGF-C（-）者（27.27%）（P〈0.05）。结论 iNOS、VEGF-C与宫颈癌的淋巴转移关系密切;针对iNOS、VEGF-C的靶向治疗可能成为宫颈癌治疗的新靶点。     

诱导型一氧化氮合酶与血管内皮生长因子C在宫颈癌中表达及其与淋巴结转移的相关性研究

目的探讨诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)与血管内皮生长因子(vascularendothelial growth factor,VEGF)-C在宫颈癌组织中的表达及其与淋巴结转移之间的关系。方法 55例宫颈癌组织(宫颈癌组)与10例正常宫颈组织(对照组),采用免疫组织化学SP法检测2组iNOS和VEGF-C的表达情况。结果宫颈癌组iNOS与VEGF-C阳性率分别为69.09%和63.64%,对照组分别为20.00%和10.00%,差异有统计学意义(P<0.05);iNOS表达与VEGF-C呈正相关(r=0.78,P<0.01);宫颈癌组iNOS(+)VEGF-C(+)者淋巴转移的发生率(54.55%)明显高于iNOS(-)VEGF-C(-)者(27.27%)(P<0.05)。结论 iNOS、VEGF-C与宫颈癌的淋巴转移关系密切;针对iNOS、VEGF-C的靶向治疗可能成为宫颈癌治疗的新靶点。     

Fatty acid incorporation in endothelial cells and effects on endothelial nitric oxide synthase

BACKGROUND: The nature of fatty acids provided by the diet as well as plasma lipid metabolism can modify the composition and properties of plasma membrane and thus the activity of membrane proteins. In humans, as well as in experimental models, diabetes is associated with both an alteration in serum lipid profile and a documented endothelial dysfunction. This in vitro study investigated on an immortalized human endothelial cell line (EA.hy 926) the specific effects of several free fatty acids (FFAs) on the composition of cellular membranes and the regulation of endothelial nitric oxide synthase (eNOS). MATERIALS AND METHODS: 0.1% of lipid deprived serum was added to the incubation medium with 25 mM glucose in order to study the effects of individual fatty acids: myristic acid, palmitic acid, stearic acid, oleic acid or linoleic acid at 100 microM bound with albumin. The effects of the FFAs on the endothelial nitric oxide synthase were investigated on mRNA level by quantitative PCR, on protein level and Ser1177 phosphorylation by Western blot and on enzymatic activity on living cells using radiolabelled arginine. RESULTS: Free linoleic acid increased the membrane content in n-6 fatty acids (mainly C18: n-6 and its metabolites) with a decrease in saturated and monounsaturated fatty acids. These conditions decreased the basal eNOS activity and reduced the phosphorylation of eNOS-Ser1177 due to activation by histamine. Free palmitic acid enriched the membranes with 16 : 0 with a slight decrease in monounsaturated fatty acids. These conditions increased eNOS activation without increasing Ser1177 phosphorylation upon histamine activation. The addition of the other FFAs also resulted in modifications of membrane composition, which did not to affect eNOS-Ser1177 phosphorylation. CONCLUSION: Among the fatty acids used, only modification of the membrane composition due to linoleic acid supply disturbed the basal enzymatic activity and Ser1177 phosphorylation of eNOS in a way that limited the role of histamine activation. Linoleic acid might involve the dysfunction of both eNOS basal activity and its phosphorylation status and may then contribute to an impaired vasodilatation in vivo.     

Low‐intensity ultrasound increases endothelial cell nitric oxide synthase activity and nitric oxide synthesis

Summary. Low‐intensity ultrasound (US) increases tissue perfusion in ischemic muscle through a nitric oxide (NO)‐dependent mechanism. We have developed a model to expose endothelial cells to well‐characterized acoustic fields in vitro and investigate the physical and biological mechanisms involved. Human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) or bovine aortic endothelial cells (BAEC) were grown in tissue culture plates suspended in a temperature‐controlled water bath and exposed to US. Exposure to 27 kHz continuous wave US at 0.25 W cm^?2 for 10 min increased HUVEC media NO by 102 ± 19% (P < 0.05) and BAEC by 117 ± 23% (P < 0.01). Endothelial cell NO synthase activity increased by 27 ± 24% in HUVEC and by 32 ± 16% in BAEC (P < 0.05 for each). The cell response was rapid with a significant increase in NO synthesis by 10 s and a maximum increase after exposure for 1 min. By 30 min post‐exposure NO synthesis declined to baseline, indicating that the response was transient. Unexpectedly, pulsing at a 10% duty cycle resulted in a 46% increase in NO synthesis over the response seen with continuous wave US, resulting in an increase of 147 ± 18%. Cells responded to very low intensity US, with a significant increase at 0.075 W cm^?2 (P < 0.01) and a maximum response at 0.125 W cm^?2. US caused minor reversible changes in cell morphology but did not alter proliferative capacity, indicating absence of injury. We conclude that exposure of endothelial cells to low‐intensity, low‐frequency US increases NO synthase activity and NO production, which could be used to induce vasodilatation experimentally or therapeutically.     

辛伐他汀纳米粒通过调节诱导型一氧化氮合酶/内皮型一氧化氮合酶系统对小鼠脓毒症相关急性肺损伤的影响

目的探讨辛伐他汀纳米粒对脓毒症相关急性肺损伤小鼠肺组织中诱导型一氧化氮合酶（iNOS）/内皮型一氧化氮合酶（eNOS）平衡的调节以及对脓毒症小鼠预后的影响。 方法将90只C57 / BL6小鼠分为假手术组、脓毒症组、灌胃组、静脉制剂组及纳米粒组,每组各18只。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）建立脓毒症小鼠模型;灌胃组小鼠通过灌胃针,给予辛伐他汀口服制剂灌胃治疗后进行CLP术;静脉制剂组及纳米粒制剂组小鼠CLP术后,立即分别通过尾静脉注射预配置好的辛伐他汀静脉制剂和辛伐他汀纳米粒制剂。其中每组12只小鼠用于7 d生存评估,另外6只用于24 h时间点标本采集。每24小时观察小鼠的生存情况,然后记算各组小鼠每日生存情况。采用苏木素-伊红（HE）染色观察5组小鼠病理变化并计算肺损伤病理评分,免疫组织化学法检测5组小鼠肺组织iNOS、eNOS表达水平。 结果Kaplan-Meier生存曲线结果显示,5组小鼠7 d生存情况比较,差异有统计学意义（χ² = 3.780,P < 0.001）。进一步两两比较发现,脓毒症组及灌胃组小鼠的7 d生存情况均较假手术组明显下降（P均< 0.001）,而纳米粒组小鼠的7 d生存情况显著优于脓毒症组（P = 0.001）。HE染色结果显示,假手术组小鼠肺组织未见明显病理征象;脓毒症组小鼠肺组织弥漫性中性粒细胞浸润、肺泡腔变小、肺泡间中隔增厚、肺间质弥漫性水肿、细胞排列紊乱、部分肺组织完整性遭破坏;灌胃组小鼠病理所示与脓毒症组相似;静脉制剂组及纳米粒组小鼠中性粒细胞渗出均较脓毒症组损伤减少、肺泡完整性较好、损伤程度较轻。5组小鼠肺损伤病理评分、iNOS及eNOS表达水平比较,差异均有统计学意义（F = 889.200、9.633、6.918,P均< 0.05）。进一步两两比较发现,脓毒症组小鼠的肺损伤病理评分、iNOS及eNOS表达水平与假手术组比较,差异均有统计学意义（P均< 0.05）;静脉制剂组及纳米粒组小鼠病理评分、iNOS及eNOS表达水平与脓毒症组比较,差异均有统计学意义（P均< 0.05）,且纳米粒组小鼠的肺损伤病理评分较静脉制剂组显著降低（P < 0.05）。 结论不同的辛伐他汀制剂具有不同的效应,其中纳米粒制剂对于脓毒症相关的肺损伤最具保护价值,建立eNOS与iNOS之间的平衡,可以成为具有保护效应的重要处理位点。     

N-硝基-L-精氨酸甲酯在急性颅脑创伤后对诱导型一氧化氮合酶表达的影响

探讨一氧化氮合酶抑制剂Ｎ 硝基 Ｌ 精氨酸甲酯（Ｌ ＮＡＭＥ）在实验性大鼠脑损伤后对诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）表达的影响。方法：选取ＳＤ大鼠制备脑损伤模型。应用免疫组织化学技术和高清晰度彩色病理图像分析系统,对大鼠脑组织神经细胞中ｉＮＯＳ的表达进行了检测。结果：实验性大鼠脑损伤后,大脑局部损伤区及周围神经细胞中有ｉＮＯＳ阳性产物表达明显增强,伤后２ 小时平均积分光密度（ＯＤＩ）较０．５ 小时升高不显著（Ｐ＞ ０．０５）,而伤后６、１２ 和２４ 小时ＯＤＩ较０．５ 小时升高非常显著（Ｐ 均＜ ０．０１）;伤前使用Ｌ ＮＡＭＥ则可使ＯＤＩ值下降。脑损伤组与用药组在０．５ 和２ 小时ＯＤＩ值差异不显著（Ｐ均＞ ０．０５）,而在６、１２ 和２４ 小时ＯＤＩ值差异非常显著（Ｐ均＜ ０．０１）。结论：Ｌ ＮＡＭＥ对脑损伤后ｉＮＯＳ具有明显的抑制作用,脑损伤后ｉＮＯＳ被大量合成是造成机体一氧化氮升高的直接原因     

肾血管性高血压对诱导型一氧化氮合酶表达及活性的影响

目的通过测定肾血管性高血压大鼠血管及肾组织诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活性及表达的变化情况,探讨血压与iNOS间的关系。方法运用肾动脉不全结扎方法制备SD大鼠肾血管性高血压模型,并应用Greiss反应、L-精氨酸同位素标记法及Westernblot等分别测定一氧化氮的终产物——尿中NO     

恒磁场对人脐静脉内皮细胞一氧化氮合酶活性的影响

目的:观察恒磁场(staticmagneticfield,SMF)对培养的人脐静脉内皮细胞(humanumbilicalveinendotheliumcell,HUVEC)一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)活性表达的影响,以探讨SMF能否用于经皮腔内冠状动脉成形术(percutaneoustransluminalcoronaryangioplasty,PTCA)及冠脉内支架植入术后冠脉再狭窄(restenosis,RS)的防治。方法:用含100g/L小牛血清的DMEM培养液体外培养人脐静脉内皮细胞(ECV304),分别在给予SMF和无SMF条件下培养,行ABC免疫酶染色法,采用图像分析法分析SMF对HUVEC的NOS活性的影响。结果:实验组内皮细胞结构型NOS(endotheliumconstructiveNOS,ecNOS)表达较对照组增强,差异显著(P<0.01),实验组与对照组诱生型NOS(inducedNOS,iNOS)均无表达。结论:恒磁场增强了培养的HUVEC的ecNOS的表达;恒磁场对PTCA支架植入术后的冠脉再狭窄可能具有防治作用。