甲状腺乳头状癌组织中14-3-3σ基因甲基化检测

目的:研究14-3-3σ基因启动子的甲基化与甲状腺乳头状癌发生的关系。方法:采用甲基化特异性聚合酶链反应法(MSP),对48份甲状腺乳头状癌组织和21份甲状腺非癌组织进行14-3-3σ基因甲基化检测。结果:48例甲状腺乳头状癌中,有34例检测到14-3-3σ基因甲基化,甲基化率为70.8%;21例甲状腺非癌组织中检测到10例甲基化,甲基化率为47.6%。14-3-3σ基因启动子的甲基化在甲状腺癌症组和非癌症组间统计学差异没有显著性(P>0.05)。结论:14-3-3σ基因甲基化在甲状腺乳头状癌中的作用还有待于进一步研究。     

14-3-3σ蛋白表达对恶性肿瘤诊断和治疗的意义

目前的研究表明,肿瘤从本质上来说是基因病。其中,抑癌基因的基因调控失活很大程度会导致肿瘤发展[1]。在许多癌组织中发现,由于启动子的DNA高度甲基化而致抑癌基因沉默。那些基因包括:FHI T、△Np63、CDH1、RASSFI A、CDH13、sFRP1、RARb、p16、DAPK和14-3-3σ基因[2]。14-3-3     

乳腺癌中组织14-3-3σ和cyclin B1的表达及其临床意义

目的:探讨14-3-3σ和cyclin B1蛋白在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌临床病理特征之间的关系。方法:选择2006年11月至2009年11月在辽宁医学院附属第一医院手术治疗的乳腺癌患者95例乳腺癌和30例癌旁组织(距癌边缘5 cm)的标本,患者年龄为31～85岁,中位年龄58岁。免疫组织化学PV法和Western blotting检测14-3-3σ和cyclin B1蛋白在乳腺癌和癌旁组织中的表达,分析两者与乳腺癌临床病理特征之间的关系以及两者的相关性。结果:Western blotting与免疫组化实验结果显示,14-3-3σ蛋白在乳腺癌中表达率为22.1%(21/95),显著低于癌旁组织的93.3%(28/30)(P<0.01);14-3-3σ蛋白的表达与乳腺癌组织学分级、TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。Cyclin B1蛋白在乳腺癌中的表达率为69.5%(66/95),显著高于癌旁组织的40%(12/30)(P<0.05);CyclinB1蛋白的表达与乳腺癌淋巴结转移相关(P<0.05)。乳腺癌组织中14-3-3σ和cyclin B1蛋白的表达呈负相关(r=-0.333,P=0.001)。结论:14-3-3σ和cyclin B1蛋白与乳腺癌的发生、转移相关,两者联合检测可为乳腺癌诊断和治疗提供参考。     

乳腺癌中14-3-3σ的表达及其与Bcl-2和Bax的相关性研究

目的探讨乳腺癌中及其与Bcl-2和Bax表达的关系,进一步研究乳腺癌中14-3-3σ的表达情况及与14-3-3σ相关的细胞凋亡调控的分子机制。方法应用免疫组织化学方法检测58例乳腺癌组织中14-3-3σ,Bcl-2和Bax的表达情况。对58例乳腺癌组织中14-3-3σ的表达水平与相应临床病理参数进行统计分析,并根据随访资料对患者进行生存分析。应用Spearman相关分析分别统计14-3-3σ表达与Bcl-2和Bax蛋白表达的相关关系。结果 14-3-3σ在乳腺癌组织中阳性表达率为70.7%(41/58),Bcl-2的阳性表达率为62.1%(36/58),Bax的阳性表达率为32.8%(19/58)。14-3-3σ蛋白表达与肿瘤大小、腋窝淋巴结的转移和TNM分期有关。随访的58例乳腺癌病例中,14-3-3σ阳性组的5年累积生存率为51.2%(21/41),14-3-3σ阴性组的5年累积生存率为82.4%(14/17),14-3-3σ阳性组的5年累积生存率明显低于14-3-3σ阴性组,两者差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析结果表明,14-3-3σ蛋白的表达与Bcl-2蛋白的表达呈正相关,而与Bax蛋白的表达呈负相关(P<0.05)。结论 14-3-3σ参与了乳腺癌的发生和发展,并可作为衡量患者预后的新指标。14-3-3σ可能是通过调节凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达,从而参与了抑制肿瘤细胞凋亡的过程。     

RAR-β2基因启动子异常甲基化与散发性乳 腺癌的关系

 目的探讨RAR-β2基因（retinoic acid receptor β2 gene）在散发性乳腺癌中启动子异常甲基化状况,进而探讨在散发性乳腺癌早期诊断中的检测价值。方法用甲基化特异性PCR(MSP)法和实时荧光定量PCR法对62例散发性乳腺癌病人的癌组织,15例增生的乳腺组织,10例正常乳腺组织进行RAR-β2基因的异常甲基化的检测。结果散发性乳腺癌癌组织中50%(31/62)发生了RAR-β2基因甲基化,增生的乳腺组织标本中20%(3/15)发生了RAR-β2基因启动子甲基化,正常的乳腺组织中均未检测到RAR-β2基因的甲基化。散发性乳腺癌癌组织中甲基化率与年龄、绝经与否无相关性,与淋巴结转移和临床分期有相关性(P<0.05);散发性乳腺癌与增生的乳腺组织和正常的乳腺组织间的差异有统计学意义（P<0.05）。结论RAR基因甲基化可能参与了乳腺癌的发生发展过程,与乳腺癌的病理分期和预后评估等方面有关。     

肝癌组织中1433sigma启动子异常甲基化及基因转录水平检测

 目的探讨肝癌14-3-3σ基因启动子异常甲基化状况及其与转录水平的关系。方法14-3-3σ启动子甲基化用甲基化特异性PCR检测;14-3-3σ mRNA的表达水平用实时定量PCR检测。结果14-3-3σ启动子甲基化在肝癌患者癌旁组织、肝硬化组织和癌组织中的阳性率分别为6.8%(3/44)、56.1%(23/44)和93.2%(41/44)。不同性别、分化程度和乙型肝炎病毒状态的组织中14-3-3σ甲基化频率无显著差异(P>0.05);发生甲基化的组织标本中90.6%(58/64)转录缺失,10.4%转录水平下降,而未发生甲基化的标本14-3-3σ mRNA表达水平基本正常。14-3-3σ甲基化与其mRNA水平明显负相关(P<0.05)。14-3-3σ甲基化与其mRNA表达水平下降密切相关(P<0.05)。结论从癌旁组织、肝硬化组织到癌组织,14-3-3σ基因启动子甲基化频率逐步升高,且与其mRNA表达相关,提示14-3-3σ启动子甲基化可能在肝癌形成过程中是一个早期事件,与肝癌发生有一定关系。     

甲状腺乳头状癌组织中14—3—3σ基因甲基化检测

目的：研究14—3—3σ基因启动子的甲基化与甲状腺乳头状癌发生的关系。方法：采用甲基化特异性聚合酶链反应法（MSP）,对48份甲状腺乳头状癌组织和21份甲状腺非癌组织进行14—3—3σ基因甲基化检测。结果：48例甲状腺乳头状癌中,有34例检测到14—3—3σ基因甲基化,甲基化率为70．8％;21例甲状腺非癌组织中检测到10例甲基化,甲基化率为47．6％。14—3—3σ基因启动子的甲基化在甲状腺癌症组和非癌症组间统计学差异没有显著性（P〉0．05）。结论：14—3—3σ基因甲基化在甲状腺乳头状癌中的作用还有待于进一步研究。     

非小细胞肺癌中Reprimo以及14-3-3 Σ基因启动子异常甲基化检测

目的探讨Reprimo以及14-3-3 Σ基因启动子在非小细胞肺癌(NSCLC)中的异常甲基化状态及其与临床病理资料的联系。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation Specific-PCR,MSP)技术检测60例NSCLC以及癌旁正常组织中Reprimo以及14-3-3 Σ基因启动子异常甲基化状态。结果Reprimo以及14-3-3 Σ基因启动子异常甲基化在NSCLC组织中发生频率分别为36.67%(22/60)和28.33%(17/60),与癌旁正常组织具有显著性差异(P值分别为0.000和0.002)。Reprimo基因启动子异常甲基化频率与吸烟习惯以及年龄相关;14-3-3 Σ启动子异常甲基化与年龄、吸烟习惯、性别、病理类型和临床分期以及淋巴结转移等无相关。结论NSCLC中存在Reprimo和14-3-3 Σ等基因启动子较高频率的异常甲基化。     

14-3-3蛋白与乳腺癌的关系及研究进展

14-3-3蛋白家族是一组高度保守的酸性蛋白质,参与细胞内信号传导、蛋白运输、生长增殖、凋亡和侵袭迁移.研究证明,在许多恶性肿瘤中,14-3-3蛋白均有较高水平的表达.本文就14-3-3蛋白的生物学功能、与肿瘤发展的关系、与乳腺癌的关系及潜在治疗靶点做一综述.     

14-3-3σ及其在鼻咽癌中的研究进展

14-3-3σ是p53调控的重要肿瘤抑制因子,在细胞周期调控、凋亡、迁移和扩散等过程中起关键作用,影响肿瘤的形成、浸润和转移.14-3-3σ甲基化失活是目前公认的肿瘤发生的重要机制之一,且与鼻咽癌的浸润转移等有关.     

14-3-3σ及其在鼻咽癌中的研究进展

14-3-3σ是p53调控的重要肿瘤抑制因子,在细胞周期调控、凋亡、迁移和扩散等过程中起关键作用,影响肿瘤的形成、浸润和转移.14-3-3σ甲基化失活是目前公认的肿瘤发生的重要机制之一,且与鼻咽癌的浸润转移等有关.

Abstract：

14-3-3σ,an vital tumor suppressor which is regulated by p53,plays a key role in cell cycle regulation, apoptosis, migration and proliferation, affecting tumor formation, invasion and metastasis. The methylation inactivation of 14-3-3σ is widely recognized as one of the mechanisms of tumorigenesis,and be associated with the metastasis of NPC.     

大鼠肺鳞癌癌变过程中基因组甲基化水平动态研究

背景与目的:研究大鼠肺鳞癌癌变各阶段基因组DNA甲基化水平动态变化趋势.材料与方法:支气管灌注3-甲基胆蒽(MCA)及二乙基亚硝胺(DEN)碘油溶液诱发Wistar大鼠肺鳞癌模型.采用免疫组化法检测大鼠肺鳞癌癌变各阶段基因组DNA甲基化水平,利用图像分析系统测量其平均光密度值和积分光密度值.结果:经支气管灌注MCA及DEN碘油溶液,诱发Wistar大鼠肺鳞癌模型,共获取癌变各阶段标本154例,其中增生25例,鳞状化生组织27例,不典型增生组织37例,原位癌组织30例,浸润癌组织25例.大鼠肺鳞癌癌变各阶段基因组DNA甲基化水平按上述顺序呈递减的趋势,癌变各阶段甲基化水平与正常对照组比较,差异具有统计学意义(P＜0.01),正常和癌变支气管上皮基底层甲基化水平高于腔细胞层,差异亦具有统计学意义(P＜0.01).结论:大鼠肺鳞癌癌变过程中基因组DNA甲基化水平的降低,可能是介导其癌变的重要表遗传学机制.     

5-氮-2’-脱氧胞苷对肺癌A549细胞凋亡及14-3-3σ表达的影响

目的:探讨5-氮-2’脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人肺癌A549细胞凋亡及抑癌基因14-3-3σ表达的影响。方法:以浓度为0.5、5、50μmol/L的5-Aza-CdR处理人肺癌细胞株A549,常规培养采用四唑盐(MTT)比色法观察细胞的生长活性,甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测14-3-3σ基因甲基化状态;以FQ-PCR法检测14-3-3σmRNA的表达,并用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:5-Aza-CdR能明显抑制肿瘤细胞的生长,随5-Aza-CdR浓度增加及培养时间的延长,细胞生长率下降;药物处理后14-3-3σmRNA表达明显升高,细胞凋亡率与5-Aza-CdR剂量呈正相关。结论:5-Aza-CdR能使14-3-3σ基因去甲基化、促进细胞凋亡、增强抑癌功能。     

宫颈癌组织14-3-3σ蛋白表达及其临床意义

目的:探讨14-3-3σ蛋白在宫颈癌组织中的表达及意义.方法:采用免疫组化ABC法检测14-3-3σ蛋白在80例宫颈癌和20例正常宫颈组织中的表达水平.结果:14-3-3σ蛋白在正常宫颈组织中为表达阳性率为15%,而在宫颈癌组织中为56.25%,两者差异有统计学意义,P<0.05.宫颈癌细胞分化程度低、临床期晚期及有淋巴结转移者14-3-3σ蛋白阳性率高反之则低.结论:14-3-3σ蛋白表达的阳性率与宫颈癌的分化程度、临床分期及有无淋巴结转移密切相关,可能在宫颈癌的发生过程中具有重要作用,它可作为诊断宫颈癌、判断预后的参考指标.     

散发性乳腺癌患者血浆BRCA1基因启动子异常甲基化的检测

目的:探讨散发性乳腺癌组织及外周血浆中BRCA1基因启动子异常甲基化状况及其在散发性乳腺癌诊断中的价值。方法:用甲基化特异PCR方法对散发性乳腺癌患者癌组织、癌旁组织及相应血浆进行BRCA1异常甲基化检测。结果:93例散发性乳腺癌组织中,BRCA1基因启动子异常甲基化率为29%(27/93),相应血浆中BRCA1的甲基化检出率为24.7%(23/93),而癌旁组织、正常对照血浆未检出甲基化,只检出未甲基化的BRCA1。血浆中甲基化改变与肿瘤组织甲基化状况显著相关(P<0.05);BRCA1异常甲基化与髓样癌和粘液腺癌的组织分型显著相关(P<0.05),也与肿瘤淋巴结转移显著相关(P<0.005);但与散发性乳腺癌患者年龄(绝经与否)及肿瘤分级无显著的相关性(P>0.05)。结论:血浆BRCA1基因异常甲基化改变的检测在散发性乳腺癌的特异诊断、组织分型和淋巴结恶性转移等方面有一定的应用价值。     

p53突变型乳腺癌细胞系中14-3-3σ对p73基因稳定性的影响

目的探讨在p53突变的乳腺癌细胞系MDA-MB-231中，14-3-3σ对p73基因稳定性的影响。方法采用基因转染、反转录聚合酶链反应（RT-PCR）、蛋白质印迹检测（Western blot）和放线菌酮（CHX）蛋白抑制分析的方法研究14-3-3σ对p73基因稳定性的影响。结果RT-PCR显示，单独转染1μgp73后，p73与GAPDH的灰度值比为0．635；转染1μgp73＋1μgld-3-3σ和1μgp73＋2μg14-3-3σ后，p73与GAPDH的灰度值比分别为0．643和0．631。Western-blot显示，单独转染1μgp73后，p73与actin的灰度值比为0．333；转染1μgp73＋1μg14-3-3σ和1μgp73＋2μg14&#183;3-3σ之后，p73与actin的灰度值比分别为0．797和0．826。放线菌酮蛋白抑制分析显示：单独转染p73的对照组，放线菌酮处理0、1、2、4、6h后，p73与actin灰度比值分别为0．075、0．166、0．124、0．100和0．092；而共转染p73和14-3-3σ的实验组结果分别为0．963、0．244、0．244、0．234和0．185。结论在转录水平上，14-3-3σ．不影响p73基因的稳定性；而在蛋白表达水平上，14-3-3σ可以增加p73基因的稳定性。     

细胞周期调控因子14-3-3σ对抗和逆转肺腺癌细胞代谢重编程的研究进展

14-3-3σ是一种细胞周期调控因子,属于14-3-3蛋白质家族,在多种信号转导通路中发挥关键调控作用.在胰腺癌、肠癌、非小细胞肺癌等多种恶性肿瘤中14-3-3σ表达缺失,提示其可能发挥抑癌作用.14-3-3σ可通过与多种信号通路相互作用调控肿瘤代谢.因此,14-3-3σ驱动型肿瘤的显著特征之一即为代谢途径的改变,包括...     

DNA甲基化与乳腺癌关系的研究进展

乳腺癌相关的遗传学变化已有很多的研究,包括特殊基因的缺失、点突变、染色体重排以及非整倍性等。近年来研究显示,表观遗传学改变所导致的基因表达异常也是乳腺癌发生的重要因素,其中异常DNA甲基化的是人类肿瘤的表观遗传改变之一。大量的证据表明在乳腺癌患者中DNA甲基化与不良的肿瘤分型、进展及预后有关。