辐射后骨髓造血基质细胞对粒系造血祖细胞生长的影响

本文观察了骨髓造血基质细胞贴壁层及细胞悬液对 GM-CFU-C 生长的影响及照射后的变化。实验结果表明,骨髓基质细胞贴壁层及细胞悬液均有增高 GM-CFU-C 产率的作用。这种刺激性影响与基质细胞贴壁层的细胞密度和细胞悬液的浓度没有依赖关系。1～5Gyγ线照射的骨髓基质细胞贴壁层和细胞悬液支持 GM-CFU-C 集落生成的作用明显削弱。文中讨论了造血基质细胞的辐射损伤在放射病骨髓综合征发病机理中的意义。     

真皮多能干细胞促进大鼠急性放射损伤造血恢复的研究

目的 观察真皮多能干细胞移植对大鼠急性放射损伤后造血恢复的作用。方法 分离新生大鼠真皮多能干细胞体外培养至第10代用于研究，观察干细胞层体外对正常大鼠骨髓粒-巨噬系祖细胞和红系祖细胞集落生长的影响；进一步将真皮多能干细胞经尾静脉输入5Gyγ射线全身照射的大鼠体内，检测移植后骨髓有核细胞、粒-巨噬系祖细胞集落CFU—GM、红系祖细胞集落CFU—E和外周血白细胞数量、血红蛋白含量等指标的恢复情况，观察4周后动物的存活率。结果 真皮多能干细胞层体外可促进正常大鼠CFU—GM和CFU—E集落的生长；全身输入干细胞促进了5Gyγ射线全身照射动物的外周血白细胞和骨髓有核细胞、CFU-GM和CFU—E集落数的恢复。实验组动物4周后的存活率也明显高于对照组。结论 真皮多能干细胞具有一定支持造血的功能，可促进急性放射损伤大鼠的造血恢复，为造血损伤相关疾病的干细胞治疗提供新的细胞来源途径。     

小鼠15%Ⅲ度烧伤时骨髓基质细胞对粒单系祖细胞生长的影响

目的 研究烧伤情况下骨髓造血基质细胞支持粒单系造血的功能变化。方法 采用体外小鼠骨髓基质细胞融合培养和粒单系祖细胞集落（ＣＦＵ－ＧＭ）培养的方法,动态观察１５％Ⅲ度烧伤时骨髓基质细胞对粒单系祖细胞生长的影响。结果 当在烧伤组基质细胞层上培养正常骨髓细胞的ＣＦＵ－ＧＭ时,其集落生成能力在伤后１,３,５,７,１０天均明显低于正常对照组,而同时培养的烧伤小鼠骨髓细胞ＣＦＵ－ＧＭ时,其集落生成能力在伤后１     

小鼠胎肝造血基质细胞株无血清培养上清中造血负调控物质的初步研究

采用离子交换层析和凝胶过滤层析方法，从小鼠胎肝造血基质细胞株（ＭＦＬＳＣ株）无血清培养上清中纯化出一个对红系及粒系造血祖细胞生长表现抑制作用的组分。此抑制活性组分的分子量约为６０－７０ｋＤａ，高热和蛋白酶处理可使之灭活。文中讨论了该组分的可能本质及与胎肝造血调控的关系．     

小鼠胎肝造血基质细胞株无血清培养上清中造血负调控物…

采用离子交换层析和凝胶过滤层析方法，从小鼠胎肝血基质细胞株无血清培养上清中纯化出一个对红系及粒系造血祖细胞生长表现抑制作用的组分。此抑制活性组分的分子量约为６０－７０ｋＤａ，高热和蛋白酶处理可使之灭活。本文讨论了该组分的可能本质及与胎肝造血调腔的关系。     

再生障碍性贫血与急性白血病骨髓纤维母细胞集落生成细胞体外培养的初步观察

目前研究的结果提示骨髓基质细胞对于调节造血干细胞的增殖与分化有重要作用。由骨髓培养生长的纤维母细胞可反映基质细胞的一个结构成分。这种纤维母细胞对造血的调节是复杂的,它不仅可释放一种,可溶性因子,使小鼠造血干细胞(S—CFu)或人类造血祖细胞(GM—CFu)在体外的存活延长,且其形成的集落也刺激粒系祖细     

长期培养的骨髓的造血基质祖细胞的辐射敏感性

骨髓长期培养体系可支持各类造血细胞,其中包括造血干细胞达数周之久。这一理想的结果是基于在培养中可形成起造血微环境作用的贴壁细胞层。将贴壁细胞层回植给同系小鼠肾被膜下时,造血基质祖细胞可形成异位造血灶。问题是,这种基质祖细胞是否与能转移造血微环境的原初骨髓基质细胞相同。细胞     

骨髓长期培养的造血基质祖细胞的辐射敏感性

骨髓的长期培养体系使造血干细胞等所有造血细胞活存数周。这是由于培养过程中所形成的贴壁细胞层起到了造血微环境作用所致。把培养的这种贴壁细胞层接种到同系小鼠的肾包膜下,造血基质祖细胞形成异位造血灶。问题是培养的基质祖细胞在转移造血微环境的能力上是否和骨髓基质祖细胞相一致?辐射敏感性是细胞的最重要的特征之一。新鲜骨髓中转移造血微环境的细胞辐射敏感性的特征已有详细介绍。     

胚胎期胺辐射对子鼠造血基质细胞功能的影响

目的 研究胚胎期２．０Ｇｙ＾１３７Ｇｓγ射线照射后对子鼠造血基质细胞的远期影响。方法 建立胚胎期受辐射小鼠模型；以细胞计数检测股骨骨髓有核细胞（ＢＭＮＣｓ）数；用免疫组化ＡＢＣ法检测基质细胞粒单系集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）和干细胞因子（ＳＣＦ）的表达；用体外小鼠骨髓细胞培养法以粒单细胞系祖细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）为指标观察基质细胞对正常骨髓造血的支持功能。结果 胚胎期受辐射小鼠ＢＭＮＣｓ     

胚胎期受辐射对子鼠造血基质细胞功能的影响

目的　研究胚胎期 2 0Gy137Csγ射线照射后对子鼠造血基质细胞的远期影响。方法　建立胚胎期受辐射小鼠模型 ;以细胞计数检测股骨骨髓有核细胞 (BMNCs)数 ;用免疫组化ABC法检测基质细胞粒单系集落刺激因子 (GM CSF)和干细胞因子 (SCF)的表达 ;用体外小鼠骨髓细胞培养法以粒单细胞系祖细胞集落形成单位 (CFU GM )为指标观察基质细胞对正常骨髓造血的支持功能。结果　胚胎期受辐射小鼠BMNCs数明显低于正常小鼠 (P <0 0 1) ,其骨髓基质细胞生长因子GM CSF和SCF的表达均高于正常小鼠 (P <0 0 5 ) ,同时 ,胚胎期受辐射小鼠骨髓基质细胞对正常骨髓造血的支持能力也高于正常小鼠 (P <0 0 5 )。结论　 2 0Gy137Csγ射线对发育中的小鼠胚胎的造血基质细胞产生了明显影响。     

骨髓基质细胞负调因子与 IL-4、IL-10的关系

目的:探讨IL-4、IL-10对骨髓基质细胞负调因子TGF-β、MIP-1α、LIF的调节。方法:用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定在IL-4、IL-10作用下骨髓基质细胞负调因子TGF-β、MIP-1α、LIF的水平。结果:IL-4作用下,TGF-β、MIP-1α的水平明显升高,P<0.05;而LIF水平却明显降低,P<0.05;IL-10则对三种负调因子无明显作用,P>0.1。结论:IL-能上调骨髓基质细胞TGF-β、MIP-1α表达,而下调LIF的表达;IL-10对这三种负调因子则无明显调控作用。     

来源于骨髓与脐带血的基质细胞基本特性比较研究

目的 比较骨髓与脐带血细胞体外培养基质细胞的基本特性，为基质细胞的选择应用提供依据。方法 用Dexter长期培养体系培养骨髓和脐带血基质细胞，以细胞增殖、细胞形态、细胞化学染色、细胞表面抗原及基质细胞支持另一骨髓细胞形成的鹅卵石造血区、长期培养起始细胞为指标，比较两者的生长特性、成分及功能。结果 生长特性：出现贴壁细胞时间，骨髓细胞为培养3d，脐带血细胞为培养5-6d；细胞融合成片时间，骨髓细胞为培养10～14d，脐带血细胞为培养12—18d；第21天细胞增殖数，骨髓比脐带血细胞增殖少。细胞成分：21d培养后细胞成分，骨髓来源者以成纤维细胞为主，其次是巨噬细胞与内皮细胞，脂肪细胞最少；而脐带血细胞来源者，以巨噬细胞为主，其次是内皮细胞、成纤维细胞，偶见脂肪细胞；细胞化学与上述结果基本一致；细胞表面抗原检测，CD14、CD45的表达骨髓细胞明显低于脐带血细胞。细胞功能：骨髓来源的基质细胞较脐带血细胞的基质细胞支持另一骨髓细胞形成的鹅卵石造血区和长期培养起始细胞明显多。结论 ①生长特性：形成贴壁细胞时间骨髓较脐带血短，骨髓细胞比脐带血细胞有核细胞数增殖快、持续时间相对短。②细胞成分特性：骨髓来源形成的基质细胞以成纤维细胞为主，脐带血来源者以巨噬细胞为主。③细胞功能特性：骨髓细胞形成的贴壁细胞较脐带血细胞形成的贴壁细胞更利于鹅卵石造血区、长期培养起始细胞生长。     

胎儿肝脏中抑制HL—60细胞生长的低分子抑制物的研究

在胎儿肝脏中存在着丰富的精氨酸酶以及一类分子量<10000dal 的抑制物,它们对 HL-60细胞有明显的细胞毒性作用。然而,与精氨酸酶不同的是,这类低分子抑制物对HL-60细胞比对人骨髓 CFU-GM 有更强的抑制细胞生长的作用。     

茜甙对小鼠骨髓粒-巨噬祖细胞的辐射防护作用

本文报告了茜甙对小鼠骨髓GM-CFU-C的影响与辐射防护作用。给小鼠分别口服茜甙10,50,100mg/鼠,于药后1,7h和1,3,7,14天测定骨髓内GM-CFU-C的含量,并在体外照射这些骨髓细胞,观察它对射线的防护作用。实验结果表明,茜甙对骨髓内GM-CFU-C数量和辐射敏感性呈现时相性的变化,即药后早期GM-CFU-C数量稍有下降,而辐射敏感性增加,7h后其数量明显增加,辐射敏感性降低呈现防护作用,药后14天GM-CFU-C数又显著下降,而辐射敏感性增加。     

Bone marrow from Balb/c mice radiocontaminated with 241Am in utero shows a deficient in vitro haemopoiesis

Radiation damage from 241Am to bone marrow cells was manifest in long-term bone marrow cultures (LTC) from offspring of mice radiocontaminated at the 14th day of gestation (119, 479, 803, 1754 kBq 241Am/kg). Offspring were reared by their own contaminated mother for 3 weeks postnatal. LTC from these offspring were less able to support in vitro CFC proliferation than control LTC from non-contaminated offspring. This radiation damage persisted 71 weeks after radiocontamination in utero. Using this in vitro culture system, damage was observed at lower doses if 241Am contamination occurred at foetal than at adult ages. Radiation damage was observed only using LTC, while the haemopoietic stem cell concentration (CFU-S, in vitro CFC) and the stromal stem cell concentration (CFU-F) from marrow in situ were not impaired after 241Am radiocontamination in utero. After culturing LTC in 25 per cent FCS and recharging the stromal adherent layer with bone marrow cell suspensions originating either from control offspring or from offspring contaminated with 241Am in utero, some evidence was found that the proliferation capacity of the haemopoietic cells was diminished. However, the nature of effects on the stromal elements is currently somewhat equivocal. Following in utero contamination the stromal adherent cells appeared to support better the production of in vitro CFC.     

胎肝基质细胞强化骨髓移植治疗急性放射病

目的为进一步提高骨髓移植效果。方法以昆明种小鼠急性放射病为模型，进行了胎肝基质细胞强化同种异基因骨髓移植，观察了小鼠造血重建、急性移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ）及小鼠存活率。结果胎肝基质细胞移植可强化骨髓移植效果，与单纯骨髓移植组比较，于照射后第１１天小鼠外周血白细胞、骨髓有核细胞计数，ＣＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－Ｆ、ＣＦＵ－Ｓ回升较快，ＣＦＵ－Ｆ已达正常，于照射后第１７天造血得以重建；ＧＶＨＤ较轻，存活率显著提高，达６０％。结论胎肝基质细胞改善了造血微环境，可能既改善了“龛位”，又增加了“龛位”使干细胞更多的植入，促进了造血重建，提高了骨髓移植效果，是一种“种子与土壤”并重的移植新方法。     

骨形成蛋白-2和地塞米松对骨髓基质细胞的联合生物学效应

探讨重组人骨形成蛋白－2（rhBMP-2）的地塞米松（Dex）单独和联合作用对骨髓基质细胞（BMSC）增殖和分化的影响。利用四唑盐比色法（MTT）、细胞总蛋白考马斯亮蓝测定法及碱性磷酸酶（ALP）检测试剂盒分别测定不同浓度的rhBMP-2和Dex单独和联合作用后BMSC的增殖和分化情况。结果显示,rhBMP-2对BMSC的增殖和ALP的表达均有促进作用,Dex促进ALP的表达,但高浓度的Dex对BMSC有增殖抑制,rhBMP-2和Dex联合作用后BMSC的增殖和ALP活性较单独作用有更明显的作用。提示 rhBMP-2和Dex联合作用对于促进BMSC的增殖和向成骨细胞分化有协同作用。     

基质细胞支持的体外扩增造血细胞对致死剂量照射小鼠造血恢复的促进作用

目的 研究基质细胞支持条件下体外扩增的造血细胞回输体内后，促进经致死剂量照射小鼠造血功能恢复的作用。方法 在培养的小鼠骨髓基质细胞层存在的条件下，加入或不加入几种细胞因子组合，分别在小鼠骨髓单个核细胞液体培养体系中进行造血细胞体外扩增。将不同条件下扩增的细胞经尾静脉回输至经致死剂量照射的小鼠体内，并与单纯细胞因子存在条件下的扩增及末扩增造血细胞进行比较，动态观察小鼠的外周血象变化及其一般状况和生存宰。结果 ①单纯细胞因子介导小鼠骨髓单个核细胞(BMMNC)体外扩增后并不能增进这些细胞促进造血恢复的能力；②含有骨髓基质细胞底层的体外扩增，无论是否加入细胞因子，均有明显的促进移植受体造血功能迅速恢复的作用。     

SCF和IL-6双基因共转染促进小鼠造血和免疫功能的恢复

目的：探讨逆转录病毒介导的IL－6和SCF双基因共转染骨髓基质细胞对辐射小鼠造血和免疫功能的影响。方法：利用动物实验观察逆转录病毒介导的含IL－6和SCF双基因共转染的骨髓基质细胞对辐射小鼠外周血，骨髓有核细胞数，骨髓细胞CFU－GM培养，脾脏淋巴细胞ITT，CD4／CD8等指标的影响。结果；表明转IL－6和SCF基因的骨髓基质细胞可以促进辐射小鼠造血和免疫功能的恢复，结论：IL－6与SCF基因在骨髓基质细胞中获得表达，为进一步研究转基因骨髓基质细胞对造血调控的作用奠定了基础。