大量元素和植物生长物质对怀牛膝愈伤组织生长及多糖量的影响

目的 研究大量元素和植物生长物质对怀牛膝愈伤组织生长及怀牛膝多糖量的影响.方法 以怀牛膝无菌苗的叶片、茎段为材料,采用正交试验设计方法研究培养基中大量元素和植物生长物质6-BA、IBA、NAA和2,4-D对怀牛膝愈伤组织生长的影响,并在愈伤组织形成高峰期30 d时,采用酚一硫酸比色法对其中多糖的量进行检测,对所得实验数据进行极差分析、方差分析比较.结果 大量元素的添加量对愈伤组织的诱导、生长和多糖的量无显著影响,6-BA对怀牛膝愈伤组织多糖量影响影响显著.结论 诱导怀牛膝愈伤组织形成多糖的适宜培养基是1/4MS+6-B.A0.5 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L.     

HPLC法测定红景天及愈伤组织中的红景天苷

由于生境狭窄、生殖障碍、开采过度等原因,红景天野生资源已几近枯竭,红景天愈伤组织和细胞的大规模培养成为重要的替代途径[1]。红景天苷是红景天属(Rhod iola L.)植物中一种重要的活性成分,其量的高低是评价该属植物药用价值的重要指标之一[2]。用HPLC法测定红景天苷的研究已有报道[3,4]。为了配合红景天愈伤组织和细胞培养的研究,建立了红景天属植物及其愈伤组织中红景天苷测定的HPLC方法,测定了4种不同来源的红景天和来源于深红红景天R.coccinea(R oy le)A.Bor.的愈伤组织中的红景天苷。1实验部分1.1仪器与试剂:A g ilent 1100高…     

培养基类型、植物生长物质浓度对王枣子愈伤组织诱导和继代的影响＊

目的 优化王枣子愈伤组织的诱导和探究疏松愈伤组织的继代条件，为王枣子悬浮细胞培养奠定初步基础。方法 以王枣子无菌苗幼叶为外植体，采用单因素试验研究不同培养基类型对愈伤组织诱导的影响；采用L₉(3² )正交试验设计，研究2，4-D、KT不同浓度配比对王枣子疏松愈伤组织的增殖培养的影响。结果 愈伤组织的诱导率在MS、1/2MS和B₅培养基上呈上升趋势。MS的出愈时间最晚，1/2MS的出愈时间次之；在B₅培养基上出愈时间最早，且愈伤组织的质地和生长状态较好。正交试验的结果显示，愈伤组织的在B₅培养基上添加2，4-D 2.5 mg·L^-1 +KT 1.0 mg·L^-1增殖倍数最小为19.78倍，添加2，4-D 1.5 mg·L^-1 +KT 0.2 mg·L^-1 达到最大增殖倍数27.34倍；王枣子疏松愈伤组织增殖试验中2，4-D(P<0.01)的影响效应比KT(P=0.091)大。结论 B₅培养基是最佳的王枣子愈伤组织诱导培养基，B₅培养基中添加2，4-D 1.5 mg·L^-1 +KT 0.5 mg·L^-1 为疏松愈伤组织增殖的最佳配比。     

几种红豆杉植物愈伤组织诱导培养的观察

本文介绍了红豆杉属中3种1变种植物愈伤组织的诱导发生情况。在67-V IAA1.0mg/1(单位下同) 2,4-D1 KT0.1及67-V IAA1.0 NAA1.0 KT0.1中30天内愈伤组织发生率均在70％以上,其中以2,4-D组合的效果较好。     

柴胡愈伤组织生长和不定根诱导的研究

目的探讨柴胡愈伤组织生长和其不定根诱导的适宜培养条件。方法以无菌苗为外植体诱导获得愈伤组织后,对不同种类和不同质量浓度的生长素进行实验,并对光和温度对柴胡愈伤组织生长和其不定根诱导的影响进行了研究。结果柴胡的愈伤组织适宜于在MS NAA4mg/L KT0.2mg/L培养基或MS NAA2mg/L KT0.2mg/L培养基上继代培养。诱导其不定根时宜采用的培养基为MS IBA2mg/L KT0.2mg/L。25℃条件下,黑暗培养既有利于柴胡愈伤组织的生长又有利于其不定根的诱导。结论比较适宜于柴胡愈伤组织生长的生长素为NAA,而有利于不定根诱导的生长素为IBA。温度对愈伤组织的生长影响非常明显,光照是其发根的限制因素。     

L-谷氨酰胺和桂皮酸对云南红豆杉愈伤组织生长的影响

研究了不同化合物对褐化严重的云南红豆杉愈伤组织生长的影响。结果表明,在培养基中添加０．２９ｍｇ／ＬＬ－谷氨酰胺和０．０７４－０．２２ｍｇ／Ｌ桂皮酸后能有效地抑制愈伤组织和培养基的褐化,显著改善愈伤组织的生长,并对紫杉醇的含量影响不大;     

喜树愈伤组织的诱导与培养

目的：研究喜树叶片、茎段和带芽茎段的愈伤组织诱导效果以及愈伤组织继代培养条件。方法：以MS为基本培养基,附加不同质量浓度6-BA,NAA和2,4-D,通过正交试验研究愈伤组织继代培养的适宜条件。结果与结论：MS+6-BA 2 mg·L^-1+NAA 2 mg·L^{-1+2,4-D 2 mg·L-1的诱导效果较好,容易诱导出愈伤组织,其中叶片的诱导率可达80%以上。愈伤组织在MS+６-BA 1 mg·L-1+2,4-D 1 mg·L-1培养基上继代培养生长快速,疏松易分散,适合用于细胞培养。}     

叶下珠愈伤组织的诱导与培养

目的建立叶下珠愈伤组织培养方法。方法采用组织培养方法,比较不同外植体、蔗糖、植物生长物质及其配比对叶下珠愈伤组织诱导的影响。结果茎段的诱导率最高,为55.56%,叶片诱导不出愈伤组织。6-BA是叶下珠愈伤组织形成的主要影响因素,2,4-D、NAA、蔗糖次之。结论叶下珠愈伤组织诱导及继代的适宜培养基为MS 2,4-D0.5mg/L 6-BA1.0mg/L NAA0.1mg/L 蔗糖10g/L。     

雷公藤愈伤组织的诱导与初步培养

从雷公藤的茎、叶诱导出愈伤组织,测定了愈伤组织的诱导率及愈伤组织发生时间。比较了不同培养基及生长素对愈伤组织的诱导率及愈伤组织发生时间的影响。选择出5个优良无性系。初步测定结果表明,雷公藤愈伤组织中含有雷公藤甲素、雷公藤乙索等二萜内酯化合物。     

培养基成分对怀牛膝愈伤组织诱导及牛膝多糖含量的影响

目的:研究培养基成分对怀牛膝愈伤组织诱导形成及牛膝多糖含量的影响。方法:以怀牛膝无菌苗的叶片、茎段为材料,采用正交设计研究基本培养基,碳源,2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、6-苄基腺嘌呤(6-BA)、N-苯基-N′-噻二唑-5-脲(TDZ)、水解酪蛋白(CH)对愈伤组织诱导和多糖含量的影响。结果:诱导叶片愈伤组织形成的适宜培养基为B₅+2mg·L^-12,4-D+0.5mg·L^-16-BA+30g·L^-1葡萄糖+1g·L^-1CH,诱导茎段愈伤组织形成的适宜培养基为B₅+2mg·L^-12,4-D+1mg·L^-16-BA+30g·L^-1葡萄糖+0.5g·L^-1CH;有利于叶片愈伤组织中多糖含量提高的培养基是LS+1mg·L^-16-BA+1mg·L^-1TDZ+30g·L^-1蔗糖,有利于茎段愈伤组织中多糖含量提高的培养基是LS+1mg.L^-12,4-D+0.5mg·L^-16-BA+1mg·L^-1TDZ+30g·L^-1葡萄糖。结论:初步建立了怀牛膝叶片、茎段诱导愈伤组织的适宜培养条件,为通过植物组织细胞培养途径生产牛膝多糖提供了依据。     

狭叶红景天化学成分的研究

利用聚酰胺-活性炭柱,对狭叶红景天根茎的醇提取物进行了分离。从其水溶部分分得3个单体,通过光谱分析,确认其中的晶2,晶3分别为红景天甙和酪醇。脂溶性部分得到一晶体为β-谷甾醇。     

四裂红景天与大花红景天红景天的NMR指纹图谱与化学模式识别方法研究

目的建立基于核磁共振技术~1H-NMR指纹图谱-化学模式识别的四裂红景天和大花红景天的品种分类和鉴别方法。方法采用高分辨(600 MHz)的核磁共振(NMR)指纹图谱技术,测定四裂红景天和大花红景天的全成分信息~1H-NMR指纹图谱,结合相似性分析、层次聚类分析、主成分分析(PCA)和偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)进行化学模式识别分析。结果 ~1H-NMR指纹图谱-化学模式识别方法是一种有效的区分、鉴别四裂红景天和大花红景天的方法。四裂红景天和大花红景天的~1H-NMR指纹图谱差异性较明显,能够真实、全面地反映红景天中的特征性成分和内在品质,四裂红景天和大花红景天主要差异成分为萜类、黄酮类,尤其萜类成分大花红天素是鉴别四裂红景天和大花红景天的特征性成分,可作为四裂红景天和大花红景天的分类和鉴别指标。结论 ~1H-NMR指纹图谱-化学模式识别方法是一种有效的红景天品种分类和鉴别方法,为红景天属药用植物的品种鉴别和品质评价奠定基础。     

长鞭红景天细胞悬浮培养体系优化研究

目的 优化长鞭红景天Rhodiola fastigiata细胞悬浮培养体系及生长条件.方法 研究基本培养基、激素、碳源、氮源等因素对长鞭红景天细胞生长和红景天苷产量的影响,建立高产红景天苷的细胞悬浮培养体系.结果 MS培养基+BA5.0 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L为长鞭红景天细胞悬浮培养的最适培养条件.结论 对培养条件进行优化,为利用长鞭红景天细胞大规模生产天然活性成分奠定基础,为缓解野生长鞭红景天资源的匮乏提供可行途径.     

菱叶红景天组织培养及植株再生

目的:探索菱叶红景天组织培养与植株再生技术并优化体外繁殖体系。方法:采用正交试验设计分别研究外植体种类、植物生长物质种类和浓度对菱叶红景天愈伤组织的诱导、丛生芽的产生以及生根诱导的影响,实验数据进行极差和方差分析。结果:影响菱叶红景天愈伤组织诱导的因素依次为外植体2,4-D6-BA,叶片产生愈伤组织最佳的培养基为MS附加2,4-D 1.5 mg.L-1和6-BA0.5 mg.L-1;影响菱叶红景天丛生芽诱导的因素依次为外植体NAA6-BA,茎段产生丛生芽最佳的培养基为MS附加6-BA1.5 mg.L-1和NAA1.0 mg.L-1;试管苗生根的最佳培养基为1/2MS附加IBA1.0 mg.L-1,生根率可达90%以上,生根试管苗移栽成活率达98%以上。结论:本试验初步建立了菱叶红景天组织培养与植株再生的基本体系。     

三叶木通愈伤组织培养研究

目的：探讨影响三叶木通愈伤组织诱导因素,建立三叶木通愈伤组织培养方法。方法：采用组织培养方法,比较不同外植体、培养基、pH、温度、光照、植物生长物质种类及其配比对三叶木通愈伤组织诱导的影响。结果：叶片的诱导率最高,为87.5%；茎段次之,叶柄较差；培养基MS,B5愈伤组织诱导率较高,达到了80%以上,高于培养基H,SH和改良White的愈伤组织诱导率；偏低的pH对愈伤组织生长有利,出愈率高,但从愈伤组织生长质量方面看,不同pH差异不明显；愈伤组织诱导最适温度为25 ℃。结论：三叶木通愈伤组织的适宜培养基为MS+2,4-D 4.0 mg·L^-1+NAA 1.0 mg·L^-1+KT 1.0 mg·L^-1(pH 5.8),培养温度为25 ℃,暗培养。     

Effect of different plant growth regulators on callus and adventitious shoots induction, polysaccharides accumulation and antioxidant activity of Rhodiola dumulosa

ObjectiveAs a medicinal plant, the resource of Rhodiola dumulosa is deficient along with the large collection. For the protection and utilization of R. dumulosa, the influence of plant growth regulators (PGRs) on callus induction and adventitious shoots differentiation, polysaccharide production and the antioxidant activity were tested.MethodsInternodes of R. dumulosa were used as explants and cultured on MS medium plus different plant growth regulators (PGRs). The anti-oxidative activities of polysaccharides were evaluated using radical scavenging assays.ResultsBy response surface plot, 0.85 mg/L N6-benzyladenine (BA), 0.34 mg/L naphthaleneacetic acid (NAA) and 0.33 mg/L 2,4-dicholorophenoxyacetic acid (2,4-D) were the optimal factors for callus induction (90.03%) from internodes explants on MS medium. The fresh weight of green callus increased 47.26 fold, when callus was inoculated on MS + thidiazuron (TDZ) 0.5 mg/L + NAA 2.0 mg/L. Adventitious buds regenerated from callus on the media of MS were fortified with BA 1.0 mg/L plus NAA 0.5 mg/L, and the induction rate was 40.00%. MS plus indole-3-butyric acid (IBA) 1.0 mg/L produced the highest rooting rate with 10 to 15 roots in a length of 2–3 cm per shoot. The content of total polysaccharides in callus developed on MS + TDZ 0.5 mg/L + NAA 2.0 mg/L and MS + BA 1.0 mg/L + NAA 0.5 mg/L was as high as 1.72%−2.15%. At the dose of 0.5 mg/mL polysaccharides extracted from different callus induced on MS + NAA 2.0 mg/L + TDZ 0.5 mg/L or MS + BA 1.0 mg/L + NAA 0.5 mg/L or MS + BA 0.5 mg/L + 2,4-D 0.5 mg/L, the ABTS radical eliminating percentages were 82.78%, 80.18% and 68.59%, respectively, much higher than that of wild plant.ConclusionA rapid micropropagation system for R. dumulosa has been developed. The combination of TDZ and NAA or BA and NAA can increase the yield of the total polysaccharides. The polysaccharides isolated from callus and whole wild plants had stronger free radicals scavenging activities, indicating that polysaccharides from R. dumulosa are the potential pharmaceutical supplements.     

甘草愈伤组织培养中激素优化组合的研究

目的选择甘草愈伤组织诱导和继代培养的最佳激素组合。方法以甘草无菌苗的胚根为外植体设计正交试验考察不同浓度的激素组合对愈伤组织诱导和继代的影响。结果以诱导率为指标,NAA对甘草细胞脱分化影响最显著;以相对生长速率为指标,6-BA、2,4-D、NAA对甘草细胞生长分裂影响最显著。结论甘草愈伤组织诱导及继代的最佳激素组合为2,4-D1.0mg/L NAA1.0mg/L 6-BA1.0mg/L KT0.3mg/L。     

抱茎苦荬菜的组织培养及植株再生

目的:探讨苦荬菜组织培养和植株再生条件。方法:以苦荬菜叶片为外植体,应用正交设计方法,对愈伤组织的诱导和分化培养基进行优化筛选。结果:最佳的愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D 1.5 mg.L^-1+6-BA1.5 mg.L^-1+NAA1.0 mg.L^-1+IBA1.5 mg.L^-1+KT1.5 mg.L^-1,最佳的不定芽诱导培养基为MS+2,4-D 0.2 mg.L^-1+6-BA0.5 mg.L^-1+NAA 0.5 mg.L^-1+IBA 0.5 mg.L^-1+KT0.5 mg.L^-1,不定芽经附加IBA0.1 mg.L-1的1/4 MS培养基生根后移栽成活,获得再生植株。结论:建立了一套有效的苦荬菜组织培养再生体系。     

HPLC-小粒径色谱柱法测定红景天提取物中红景天苷、酪醇和络赛维

目的 建立应用小粒径色谱柱快速测定红景天(蔷薇红景天)提取物中红景天苷、酪醇和络赛维的HPLC方法.方法 色谱柱为HALO C1s(150mm×4.6 mm,2.7μm):流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B),梯度洗脱:0～5 min,7%～15%A;5～8min,15%～18%A;8～20min,18%～30%A;20～25min,30%～40%A;25～30min,40%～55%A;体积流量0.6mL/min;柱温30℃;检测波长280 nm;进样量5 μL.结果 红景天苷、酪醇、络赛维15min内达到分离,峰形尖锐对称,线性范围分别为0.41～106.00、0.42～108.00、0.38～98.00 μg/mL,平均加样回收率分别为99.29%、98.82%、98.33%.采用所建立的方法测定不同来源红景天提取物的多种成分,结果表明单一采用红景天苷作为质量控制指标,9批样品的差异度较小(RSD=7.95%),如果将酪醇或络赛维引入质量评价体系,则红景天提取物各批次间就存在较大的差异(酪醇,RSD=24.42%;络赛维,RSD=50.55%);但是,同一单位提供的样品间的差异度较小.结论 建立的HPLC-小粒径色谱柱法高效、准确,经济,精密度好,灵敏度高,可用于红景天提取物中的红景天苷、酪醇和络赛维的同时快速测定;引入多成分的测定方法,可以评价不同厂家提取物质量的差异,并筛选出导致质量差异的成分,为提取物的工艺优化提供参考.