厄贝沙坦对大鼠心肌缺血再灌注细胞凋亡与细胞外信号调节激酶通路的影响

目的观察厄贝沙坦对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响,并探讨其与细胞外信号调节激酶(ERK)通路的关系。方法健康雄性SD大鼠72只,随机分为假手术组、缺血再灌注组、缺血预处理组、厄贝沙坦组、厄贝沙坦+PD-98059组(PD组)。厄贝沙坦灌胃1周后制作大鼠心肌缺血再灌注模型,PD-98059于缺血前15 min尾静脉注射。实验结束后用TTC染色测定心肌梗死面积;免疫组织化学法检测心肌组织BcI-2、Bax表达;Western blot法测定磷酸化ERK的活性;TUNEL检测凋亡细胞指数。结果与假手术组比较,缺血再灌注组、缺血预处理组、厄贝沙坦组、PD组心肌细胞凋亡指数、磷酸化ERK活性及Bcl-2、Bax表达明显增加(P<0.01);与缺血再灌注组比较,缺血预处理组、厄贝沙坦组心肌梗死面积、心肌细胞凋亡指数和Bax表达明显降低,磷酸化ERK活性及Bcl-2表达明显增加(P<0.01);与厄贝沙坦组比较,缺血再灌注组、PD组心肌梗死面积、心肌细胞凋亡指数和Bax表达明显增加,磷酸化ERK活性及Bcl-2表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论厄贝沙坦能够激活ERK通路,进一步调控Bcl-2、Bax蛋白的表达,抑制再灌注心肌细胞的凋亡。     

中药复方冠心康对大鼠缺血再灌注损伤心肌细胞Bcl-2、Bax表达的影响

目的观察中药复方冠心康对大鼠缺血再灌注损伤(MIRI)心肌细胞相关凋亡因子Bcl-2、Bax表达的影响。方法 40只SD雄性大鼠随机分为假手术组、MIRI模型组、冠心康组、盐酸地尔硫卓组。采用结扎左冠状动脉前降支30min,再灌注2h复制大鼠MIRI模型,分别以HE染色、TUNEL法及免疫组织化学法检测心肌组织病理学、心肌细胞凋亡指数、心肌细胞Bcl-2、Bax的阳性表达。结果 MIRI组与假手术组比较心肌细胞凋亡指数值显著升高(P<0.01),而冠心康组明显降低(P<0.01);抑凋亡因子Bcl-2在MIRI后表达明显降低,而促凋亡因子Bax表达则明显升高,冠心康可明显升高Bcl-2的表达,同时降低Bax的表达(P<0.01)。结论中药复方冠心康对大鼠MIRI心肌细胞具有明显的保护作用,其作用机制与调控心肌细胞的凋亡因子Bcl-2、Bax的表达有关。     

胰岛素样生长因子-1对大鼠结肠平滑肌细胞增殖、凋亡及MAPK通路的影响

目的 探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对大鼠结肠平滑肌细胞(SMCs)增殖、凋亡及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路的影响.方法 利用酶解法分离培养Sprague-Dawley大鼠结肠SMCs,进行免疫组化染色鉴定后,将其分为对照组、IGF-1组和IGF-1+ PD98059[细胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂]组,分别采用噻唑蓝(MTT)法检测SMCs增殖,流式细胞术AnnexinV-FITC/PI检测SMCs凋亡,Western印迹检测磷酸化ERK、ERK、磷酸化p38MAPK、p38MAPK和磷酸化c-Jun氨基末端激酶(JNK)、JNK的表达.结果 分离培养的细胞经免疫组化鉴定为结肠SMCs,IGF-1组较对照组细胞增殖增强[(1.786 ±0.271)比(0.998±0.057),P＜0.01],凋亡率降低[(2.59±0.28)％比(20.68±2.48)％,P＜0.01],磷酸化ERK表达增强,磷酸化ERK/ERK比值升高[(42.71±3.74)％比(23.88±2.52％),P均＜0.01];磷酸化p38MAPK、p38MAPK、磷酸化JNK、JNK表达无差异(P均＞0.05).IGF-1+ PD98059组较对照组细胞增殖下降[(0.154±0.021)比(0.998±0.057),P＜0.01],凋亡率升高[(84.31±7.54)％比(20.68±2.48)％,P＜0.01],磷酸化ERK表达减弱,磷酸化ERK/ERK比值降低[(10.47±1.22)％比(23.88±2.52)％,P均＜0.01].结论 IGF-1可能通过激活结肠SMCs MAPK通路中的ERK途径,促进细胞增殖,抑制凋亡,可能与p38MAPK途径和JNK途径无关.     

Y-27632预处理对心肌缺血再灌注损伤过程中d凋亡的影响研究

目的：探讨Rho激酶抑制剂Y-27623对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)中细胞凋亡的影响,以及对丝裂原活化蛋白激酶（Mitogen-activated protein kinase,MAPK）和凋亡相关蛋白表达水平的变化和意义。方法：成年雄性SD大鼠60只, 随机分为4组（n=15）:正常对照组(Sham组) 、缺血再灌注组(ischemia-reperfusion即I/R组) 、Dil组( diltiazem即地尔硫卓组)、Y-27632组。Dil组每日给予地尔硫卓(10mg/kg)灌胃, Y-27632组每日给予Y-27632（5mg/kg）,其余两组给予等体积清水。给药五天后Sham组只穿线,不结扎冠状动脉左前降支,I/R组、Dil组和Y-27632组建立MIRI模型。TUNEL法检测各组心肌凋亡,计算心肌细胞凋亡指数(AI),western blotting 法检测心肌组织中MAPK信号传导途径相关蛋白（p-JNK/ERK/P38）和凋亡相关蛋白（Bcl-2、Bax、Caspase-3和Caspase-9）的表达。结果：相对于Sham组,I/R组AI明显增加（P<0.01）,MAPK信号传导途径和心肌促凋亡相关蛋白（Bax、Caspase-3和Caspase-9）表达显著增加（均为P<0.05）,心肌抗凋亡蛋白Bcl-2表达显著减少（P<0.05）;相对于I/R组,Y-27632治疗组AI明显下降（P<0.01）,与Dil治疗组没有显著差异(P>0.05),Y-27632治疗组MAPK信号传导途径相关蛋白和Bax、Caspase-3和Caspase-9表达均显著降低（P<0.05）,Bcl-2表达显著增加（P<0.05）,与Dil治疗组没有显著差异(P>0.05)。结论：Y-27632通过抑制JNK/ERK/P38的磷酸化,抑制Bax、Caspase-3和Caspase-9的表达,加强Bcl-2的表达,来减少心肌细胞的凋亡,从而减轻心肌缺血再灌注损伤。     

CARD6通过调控ASK1表达抑制炎症反应和细胞凋亡保护心肌缺血再灌注损伤

目的:探讨胱天蛋白酶募集域蛋白6(CARD6)对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)中炎症反应和细胞凋亡的影响,并分析其相关分子机制。方法:将60只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(MIRI组)、MIRI+空载慢病毒(LV-NC)组、MIRI+CARD6过表达慢病毒组(MIRI+LV-CARD6组),每组15只。除Sham组外,其他各组大鼠采用手术结扎冠状动脉左前降支的方法构建MIRI模型。采用全自动生化分析仪检测心肌损伤指标含量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测炎性细胞因子水平,苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠心肌组织形态学变化,原位末端标记测定(TUNEL)染色法检测大鼠心肌细胞凋亡情况,蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测大鼠心肌组织中凋亡相关蛋白表达,实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法和Western Blot法检测大鼠心肌组织中CARD6、细胞凋亡信号调节激酶1(ASK1)mRNA和蛋白表达。结果:与Sham组比较,MIRI组大鼠心肌细胞水肿变性,大量间质炎性细胞浸润,存在明显心肌组织病理损伤;大鼠血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激...     

厄贝沙坦、依那普利及其合用对缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的:比较厄贝沙坦、依那普利及其合用对缺血再灌注损伤(MIRI)心肌细胞凋亡及基因调控的影响。方法:将20只Wistar雄性大鼠随机分为4组,厄贝沙坦组、依那普利组、合用组及对照组,药物预处理1周后建立大鼠MIRI模型。采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡,免疫组织化学方法检测心肌组织bcl-2和Bax基因的表达。结果:厄贝沙坦组、依那普利组、合用组心肌细胞凋亡指数(AI)较对照组明显减少(均P<0.05),3个治疗组抑制了心肌Bax的表达,增加了bcl-2的表达。且AI与bcl-2/Bax的相关分析呈负相关(r=-0.585,P<0.01)。结论:厄贝沙坦、依那普利对MIRI有相似的保护作用,可明显减少心肌细胞凋亡数量,抑制了心肌Bax的表达,促进bcl-2的表达。两药合用并无叠加效应。     

促红细胞生成素衍生肽对小鼠心肌缺血再灌注损伤的作用及机制研究

目的:探讨促红细胞生成素衍生肽(HBSP)对小鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的作用及其机制。方法:64只雄性ICR小鼠随机分成四组,每组16只:假手术组、MIRI组、HBSP组、HBSP+胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)特异性阻断剂(PD98059)组(HBSP+PD98059组)。通过结扎小鼠冠状动脉左前降支45 min后解除结扎线建立小鼠心肌缺血再灌注模型,HBSP于再灌注前5 min给药。再灌注2 h后,用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)和伊文氏蓝(EB)双染色法检测小鼠心肌梗死面积,原位缺口末端标记法(TUNEL法)检测心肌细胞凋亡率,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测ERK1/2和磷酸化ERK1/2的表达。结果:缺血再灌注2 h后,与MIRI组相比,HBSP组心肌梗死面积显著缩小(P0.05),心肌细胞凋亡率降低(P0.05),ERK1/2的磷酸化水平升高(P0.05),差异均有统计学意义。与HBSP组相比,HBSP+PD98059组的ERK1/2磷酸化水平明显降低,心肌细胞凋亡率升高,心肌梗死面积明显增大(P均0.05),差异均有统计学意义。结论:HBSP可通过抑制心肌细胞凋亡,缩小心肌梗死面积,在小鼠心肌缺血再灌注损伤中发挥保护作用,其机制与ERKl/2通路的激活有关。     

薯蓣皂苷元对心肌缺血再灌注损伤大鼠细胞凋亡的影响及相关机制的分析

目的：探究薯蓣皂苷元对心肌缺血再灌注损伤（MIRI）大鼠细胞凋亡的影响,并初步分析其对NOD样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶1(Caspase-1)信号通路的作用。方法：采用左冠状动脉前降支结扎法建立MIRI大鼠模型,将造模成功的72只大鼠,按照随机数字表法分成MIRI组、薯蓣皂苷元低剂量组（50 mg/kg）、薯蓣皂苷元中剂量组（75 mg/kg）和薯蓣皂苷元高剂量组（100 mg/kg）,每组18只;另取18只大鼠为假手术组。造模完成后,给予相应药物灌胃,每日1次。末次给药后,记录每组大鼠在不同时间段的心脏血液动力学参数;三苯基四氮唑（TTC）法检测大鼠心肌梗死面积;苏木素-伊红染色检测各组心肌组织病理学变化;TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况;ELISA法检测大鼠血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;免疫蛋白印迹法检测大鼠心肌组织中NLRP3、Caspase-1、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、IL-1β蛋白表达水平。结果：与假手术组相比,MIRI组大鼠心肌梗死面积更大,心肌细胞凋亡率、左心室舒...     

苯甲酰芍药苷影响冠状动脉粥样硬化性心脏病模型大鼠心肌细胞凋亡的机制研究

目的探究苯甲酰芍药苷(BP)通过细胞外调节蛋白激酶(ERK)-钙蛋白酶2(Calpain2)途径对冠心病模型大鼠心肌细胞凋亡的影响及潜在机制。方法将健康雄性SD大鼠35只随机分为对照组11只、冠心病组12只和药物组12只,后2组大鼠用高脂饮食成功建立冠心病模型,药物组灌胃BP 170 mg/kg,1次d,干预4周。苏木精-伊红染色和TUNEL染色测心肌组织变化和心肌细胞凋亡。Western blot测ERK-Calpain2通路和凋亡相关蛋白。结果冠心病组和药物组干预后J点位移值高于对照组[(0.226±0.021)mV和(0.173±0.014)mV vs(0.076±0.011)mV,P0.05],且药物组J点位移值显著低于冠心病组(P0.05)。冠心病组心肌细胞凋亡率显著高于对照组(P0.05),药物组心肌细胞凋亡率显著低于冠心病组[(19.02±3.77)%vs(37.14±6.58)%,P0.05]。冠心病组半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-12和Bax蛋白表达高于对照组,Bcl2蛋白低于对照组(P0.05)。药物组Caspase-12和Bax蛋白表达低于冠心病组,Bcl2高于冠心病组(P0.05)。冠心病组心肌组织磷酸化ERK/ERK和Calpain2表达高于对照组(P0.05),药物组磷酸化ERK/ERK和Calpain2表达低于冠心病组(P0.05)。结论 BP缓解冠心病大鼠模型心肌损伤,可能与通过抑制ERK-Calpain2通路抑制心肌细胞凋亡有关。     

益母草碱抑制ERK/NF-κB信号通路对心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的:观察益母草碱抑制细胞外调节蛋白激酶(ERK)/核转录因子κB(NF-κB)信号通路对心力衰竭(HF)大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法:将大鼠随机分为Control组、HF组,低剂量益母草碱(L-益母草碱)组、高剂量益母草碱(H-益母草碱)组及ERK抑制剂组。采用腹腔注射阿霉素法建立HF模型,HF模型建立成功后根据分组进行给药干预,连续14 d。利用彩色多普勒动物超声仪测量心功能指标[左室射血分数(LVEF)、左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室短轴缩短率(LVFS)]变化;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡情况;免疫组化法检测心肌组织凋亡相关蛋白表达情况;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测心肌组织ERK/NF-κB信号通路相关蛋白表达情况。结果:与Control组比较,HF组LVEF、LVFS及心肌组织Bcl-2蛋白表达均减少,LVESD、LVEDD、心肌细胞凋亡率及心肌组织Bax蛋白表达均增加(P<0.05);与HF组比较,L-益母草碱组、H-益母草碱组、ERK抑制剂组LVEF、LVF...     

氯沙坦增加Akt活性对慢性心力衰竭大鼠心功能及心肌细胞凋亡的保护作用

目的研究氯沙坦对腹主动脉结扎所致慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡和心功能保护作用的可能机制。方法采用腹主动脉缩窄法制备SD大鼠心力衰竭模型,将SD大鼠随机分为模型组,治疗组,假手术组,对照组,每组10只。治疗组和对照组氯沙坦(20 mg·kg~(-1)·d~(-1))干预8周后,采用超声心动图和心室插管法评估各组大鼠心功能,计算左、右心室质量指数(LVMI),放射免疫法检测血浆和心肌组织血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平,高敏ELISA检测去甲肾上腺素(NE)水平。琼脂糖凝胶电泳和TUNEL法观察心肌细胞凋亡状态,通过RT-PCR检测凋亡相关基因表达,Western blot检测磷酸化Akt(p-Akt)蛋白水平表达变化。结果与模型组比较,治疗组大鼠心功能和LVMI等指标明显好转(P<0.05),血浆NE和心肌组织AngⅡ水平降低(P<0.05),但血浆AngⅡ水平升高(P<0.05),未出现细胞凋亡特有的"DNA梯度"现象,且凋亡指数减少(P<0.05),Bax/Bcl-2基因表达比例降低(P<0.05),p-Akt蛋白水平显著升高(P<0.05)。与假手术组和对照组相比,模型组大鼠各项心功能指标明显恶化,心肌细胞凋亡较为严重(P<0.05)。结论氯沙坦通过阻断AngⅡ与AngⅡ1型受体结合抑制凋亡通路并可促进Akt信号通路活化,从而保护慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡,改善心功能。     

miR-362-3p通过MAPK1/PTEN/AKT信号通路调节冠心病大鼠心肌细胞凋亡和内皮细胞损伤

目的:通过构建冠心病大鼠模型,探讨微小RNA-362-3p(miR-362-3p)是否通过调节有丝分裂原活性蛋白激酶1(MAPK1)、蛋白酪氨酸磷酸酶基因(PTEN)、蛋白激酶B(AKT),参与影响冠心病大鼠的心肌细胞凋亡和内皮细胞损伤。方法:构建冠心病大鼠模型,随即将大鼠分为健康组、冠心病组、miR-362过表达组、过表达阴性对照组、过表达+MAPK1激活组,苏木精-伊红(HE)染色观察各组大鼠冠状动脉组织病理学变化;原位末端标记测定法(TUNEL)检测各组大鼠心肌细胞凋亡情况;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中炎性相关因子及一氧化氮(NO)、内皮素(ET)-1等含量;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测各组大鼠冠状动脉组织中MAPK、磷酸化MAPK(p-MAPK)、PTEN、AKT、磷酸化AKT(p-AKT)信号通路蛋白表达水平。结果:健康组大鼠冠状动脉组织完好;与健康组比较,冠心病组大鼠冠状动脉组织增厚明显,心肌细胞凋亡率、血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、ET-1含量及冠状动脉组织p-MAPK/MAPK...     

促红细胞生成素对急性心肌梗死大鼠心脏的保护作用及抗凋亡信号机制

目的 探讨促红细胞生成素(EPO)对急性心肌梗死(AMI)大鼠心肌梗死面积、细胞凋亡和磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达的影响.方法 24只雄性SD大鼠,按随机数字表法分为假手术组、AMI组和EPO组(每组8只),用结扎左冠状动脉前降支方法制作大鼠AMI模型,EPO组同时给予5 000 U/kg重组人EPO(rhEPO)腹腔内注射.建模24 h后摘取心脏标本分别用TTC染色检测心肌梗死面积、TUNEL法检测心肌细胞凋亡、Western印迹分析检测心肌组织中p-Akt蛋白表达的变化.结果 与假手术组比较,AMI组和EPO组心肌梗死区/左心室质量比值均显著增加[(0.00±0.00)％ vs (21.73 ±4.14)％和(17.95±2.66)％,P均＜0.01],但与AMI组比较,EPO组心肌梗死区/左心室质量比值明显降低(P＜0.05);与假手术组比较,AMI组和EPO组心肌细胞凋亡指数均显著增加[(0.51 ±0.08)％ vs (29.62±3.02)％和(21.37±2.39)％,P均＜0.01],但与AMI组比较,EPO组心肌细胞凋亡指数显著减少(P＜0.01).p-Akt蛋白在三组心肌组织中均有表达,但与假手术组比较,AMI组心肌组织p-Akt蛋白表达显著减少,仅为假手术组的41％ (P ＜0.01);与AMI组比较,EPO组心肌组织p-Akt蛋白表达显著增多,比AMI组升高1.7倍(P＜0.01).结论 EPO干预通过明显缩小AMI大鼠的心肌梗死面积和显著减少心肌细胞凋亡发挥心脏保护作用,其机制可能与上调p-Akt蛋白表达激活Akt抗细胞凋亡信号通路有关.     

基于p38 MAPK-CRYAB途径探讨8-O-乙酰山栀子苷甲酸对急性心肌梗死大鼠的影响及作用机制

目的基于p38 MAPK-CRYAB途径探讨8-O-乙酰山栀子苷甲酸对急性心肌梗死大鼠的影响及作用机制。方法采用结扎冠状动脉左前降支的方法建立急性心肌梗死大鼠模型,取50只造模成功的雄性SD大鼠随机分为模型组、阳性对照组、8-O-乙酰山栀子苷甲酸低、中、高剂量组,每组10只,另选10只作为空白对照组。空白对照组与模型组均给予等体积生理盐水,阳性对照组给予阿司匹林肠溶片[100 mg/(kg·d)],8-O-乙酰山栀子苷甲酸低、中、高剂量组分别给予8-O-乙酰山栀子苷甲酸[10、20及30 mg/(kg·d)],连续给药14天。检测大鼠心功能; HE染色法观察大鼠心肌组织病理变化; TUNEL法检测心肌细胞凋亡; ELISA检测SOD、LDH、GSH-Px和MDA水平; RT-PCR检测Bcl-2、Bax和Caspase-3 m RNA表达; Western blot检测p-p38 MAPK/p38 MAPK和p-CRYAB/CRYAB表达。结果 8-O-乙酰山栀子苷甲酸可显著改善急性心肌梗死大鼠的心功能及心肌组织病理变化(P 0.05),降低心肌细胞凋亡率(P0.05),减轻氧化应激损伤(P0.05),上调抑凋亡基因Bcl-2表达,下调促凋亡基因Bax和Caspase-3表达(P0.05),促进p38 MAPK和CRYAB磷酸化(P0.05),但各组间p38 MAPK和CRYAB蛋白表达无明显变化(P0.05)。结论 8-O-乙酰山栀子苷甲酸可显著改善急性心肌梗死大鼠心肌损伤症状,上调Bcl-2表达,下调Bax和Caspase-3表达,促进p38 MAPK和CRYAB磷酸化,其作用机制可能与p38 MAPK-CRYAB途径有关。     

阿芬太尼调节SphK1/S1P信号通路保护心肌缺血再灌注损伤大鼠

[目的]探究阿芬太尼对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠的作用及在该过程中对鞘氨醇激酶1(SphK1)/鞘氨醇-1-磷酸(S1P)信号通路的调节机制。[方法]将SPF级SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药物组(复方丹参组)和阿芬太尼低剂量组、阿芬太尼高剂量组、阿芬太尼高剂量+SphK1激动剂组(阿芬太尼+PMA组),每组20只。除假手术组,其余组均利用结扎左前降支冠状动脉后再灌注复制MIRI模型。全自动生物化学分析仪检测血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)和谷草转氨酶(AST)的活性;TTC检测大鼠心肌梗死面积;HE染色观察大鼠心肌组织形态学特征;TUNEL染色检测大鼠心肌细胞凋亡;ELISA检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)及S1P的水平;试剂盒检测心肌组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性;Western blot检测心肌组织SphK1蛋白表达。[结果]相较于假手术组,模型组大鼠心肌组织病理损伤严重,血清中心肌损伤标志物LDH、CK和AST的活性,心肌梗死面积和心肌细胞凋亡率,TNF-α、I...     

抑郁对急性心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的探讨抑郁对急性心肌梗死后大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法 30只SD大鼠随机分为三组,假手术组,心肌梗死对照组,心肌梗死抑郁组,每组10只。制备相应模型并干预后,用TUNEL法检测心肌细胞凋亡,用免疫组织化学法检测心肌细胞Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果心肌梗死抑郁组和心肌梗死对照组大鼠心肌细胞凋亡率以及心肌细胞Bcl-2、Bax蛋白表达均高于假手术组,差异有统计学意义(P<0.01),心肌梗死抑郁组大鼠心肌细胞凋亡指数以及心肌细胞Bax蛋白表达高于心肌梗死对照组,而心肌细胞Bcl-2蛋白表达低于心肌梗死对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论抑郁可增加急性心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡,其机制可能与促进促凋亡基因Bax表达、抑制抗凋亡基因Bcl-2表达有关。     

替米沙坦通过JAK/STAT通路对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨JAK-STAT通路的主要成员STAT1和STAT3在心肌缺血再灌注(I/R)损伤过程中激活的功能作用及AT1受体拮抗剂替米沙坦抗心肌I/R损伤的受体后机制。方法采用Langendorff离体心肌I/R模型,65只雄性Wistar大鼠分为5组,每组13只:正常对照组、I/R组、AG490组、替米沙坦预处理组、替米沙坦后处理组。动态监测LVDP和dp/dtmax;免疫印迹法检测p-STAT1,p-STAT3的蛋白表达;TTC染色计算心肌梗死面积;TUNNEL法检测心肌细胞凋亡指数(AI),RT-PCR法检测Bcl-2、Bax的mRNA表达。结果与I/R组比,JAK阻断剂AG490、替米沙坦预处理及后处理均能缩小心肌梗死面积(P<0.01),降低心肌细胞AI(P<0.01),改善心功能,使LVDP和dp/dtmax均明显升高(P<0.01),而使p-STAT1和p-STAT3的蛋白表达明显减少(P<0.01和P<0.05),以p-STAT1表达降低更为明显,p-STAT1与p-STAT3比值下调,Bax mRNA表达显著减少(P<0.01),而Bcl-2 mRNA表达增多(P<0.05)。结论替米沙坦具有抗心肌I/R损伤作用,其机制与阻断JAK-STAT通路,下调促凋亡基因Bax,上调抑制凋亡基因Bcl-2有关。     

曲美他嗪干预对心力衰竭大鼠心肌细胞线粒体超微结构、心肌细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3蛋白、细胞色素C蛋白表达的影响

目的:探讨曲美他嗪干预对心力衰竭(心衰)大鼠左心室心肌细胞线粒体超微结构、心肌细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)蛋白和细胞色素C蛋白表达的影响。方法:雄性wistar大鼠30只随机分为假手术组、心衰模型组、曲美他嗪组,每组10只。除假手术组外,其余两组大鼠采用肾上腹主动脉缩窄法建立慢性心衰模型,其中曲美他嗪组大鼠给予曲美他嗪10 mg/(kg·d)灌胃4 w。观察各组左心室舒张末期压(LVEDP)、左心室压力最大上升及下降速率(±dp/dtmax);苏木素伊红(HE)染色法观察大鼠心肌细胞形态结构;透射电镜观察心肌细胞线粒体超微结构;原位缺口末端标记(TUNEL)法检测心肌细胞凋亡指数(AI);SP免疫组织化学法检测各组大鼠左心室心肌细胞caspase-3蛋白、细胞色素C蛋白的表达。结果:与假手术组比较,心衰模型组大鼠心肌细胞线粒体形态发生明显改变,排列紊乱,空泡变性,LVEDP显著升高(P<0.01),±dp/dtmax明显降低(P<0.01),心肌细胞凋亡指数、caspase-3蛋白及细胞色素C蛋白的表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.01);与心衰模型组相比,曲美他嗪组大鼠心肌细胞线粒体形态变化明显改善,LVEDP明显下降(P<0.01),±dp/dtmax显著升高(P<0.01),心肌细胞凋亡指数、caspase-3蛋白及细胞色素C蛋白的表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:曲美他嗪可有效改善心功能,抑制心肌细胞凋亡,其机制可能与保护心肌细胞线粒体功能有关。     

白藜芦醇通过c-fos通路对AMI大鼠心肌损伤标志物含量的影响

目的 探究白藜芦醇(RSV)通过即刻早期基因(c-fos)通路对急性心肌梗死(AMI)大鼠心肌损伤标志物含量的影响。方法 选取48只SD大鼠随机分为Sham组、AMI组和AMI+RSV组,每组各16只。通过结扎建立AMI模型,AMI+RSV组使用RSV灌胃干预(10 mg·kg/d)。检测各组大鼠心功能和心肌损伤标志物肌酸激酶MB(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)。HE染色和TUNEL染色检测组织损伤和心肌细胞凋亡。Western blot检测细胞外调节蛋白激酶(ERK)、磷酸化的ERK(p-ERK)和c-fos水平。结果 AMI组大鼠左室射血分数(LVEF)及左室内压力最大变化率(±dp/dtmax)水平显著低于Sham组(P0.05),AMI+RSV组LVEF、±dp/dtmax水平显著高于AMI组(P0.05)。AMI组CK-MB和LDH水平显著高于Sham组(P0.05),AMI+RSV组CK-MB和LDH水平显著低于AMI组(P0.05)。AMI组凋亡率(38.75%±4.36%)显著高于Sham组(4.54%±0.58%,P0.05),AMI+RSV组心肌细胞凋亡率(19.67%±4.18%)显著低于AMI组(P0.05)。AMI组p-ERK/ERK和c-fos蛋白水平显著高于Sham组(P0.05),AMI+RSV组p-ERK/ERK和c-fos蛋白水平显著低于AMI组(P0.05)。结论 RSV通过调节c-fos通路抑制AMI模型大鼠的心肌细胞凋亡,缓解心肌细胞损伤并发挥保护AMI后心功能的作用。     

银杏内酯B对大鼠心肌缺血再灌注损伤后细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响

目的探讨银杏内酯B对大鼠心肌缺血再灌注损伤后细胞凋亡及相关蛋白表达的影响。方法将100只SD大鼠随机分为假手术组、模型组及银杏内酯B低剂量组(15mg/kg)、中剂量组(30mg/kg)、高剂量组(60mg/kg),每组20只。通过夹闭左冠状动脉前降支制作心肌缺血再灌注大鼠模型。监测各组大鼠心电图波动变化;红四氮唑(TTC)染色法测量心肌梗死体积;苏木精-伊红(HE)染色法观察心肌组织病理变化;末端标记法(TUNEL)观察细胞凋亡状况;免疫蛋白印记法测定凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、激活型Caspase-3)表达。结果与模型组比较,银杏内酯B各剂量组心电图明显改善,其中银杏内酯B高剂量组基本恢复正常;银杏内酯B中剂量组、高剂量组心肌梗死体积显著降低(P<0.05或P<0.01),心肌组织病变明显改善,心肌细胞凋亡指数(AI)显著降低(P<0.01),Bcl-2蛋白表达显著上调(P<0.05或P<0.01),Bax和激活型Caspase-3蛋白表达显著下调(P<0.05或P<0.01),Bcl-2/Bax比值显著升高(P<0.01)。结论银杏内酯B通过调节凋亡相关蛋白表达从而抑制再灌注性损伤后心肌细胞凋亡。