脊髓损伤治疗干预对细胞自噬及凋亡影响的相关研究进展

脊髓损伤是脊柱外科常见的严重疾患之一,其治疗一直是世界性难题。脊髓损伤后继发性损伤所引起的后果更严重,细胞自噬与凋亡在其调控过程中起重要作用。该文对近年来脊髓损伤治疗干预对细胞自噬及凋亡影响的相关研究进展作一综述。     

长链非编码RNA HOTAIR在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的探讨长链非编码RNA HOX转录反义RNA(HOTAIR)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达,及与临床病理及预后的关系。方法收集我院60例NSCLC手术切除标本(包括癌组织及对应的正常肺组织),qRT-PCR检测60例NSCLC中HOTAIR的表达,并分析其与临床病理及预后的关系。结果肺癌组织中的HOTAIR的表达水平(5.18±2.44)显著高于正常肺组织中的表达水平(3.54±1.65)(P0.001)。NSCLC患者肿瘤组织中HOTAIR的表达水平与肿瘤的大小、分化程度及临床分期明显相关(P0.05)。HOTAIR高表达者生存时间明显低于低表达者,差异有显著统计学意义(P0.05)。HOTAIR高表达组和低表达组的中位生存时间分别为46.03和52.9个月。结论 HOTAIR在NSCLC组织中显著高表达,可能成为NSCLC判断预后和治疗的新的分子标记物。     

LncRNA HOTAIR/miR-126在喉癌中的表达及相关性

目的 探讨喉鳞状细胞癌(LSCC)中长链非编码RNA(LncRNAs)HOX基因座转录反义RNA(HOTAIR)和微小核糖核酸(miR)-126的表达及相关性。方法 选取46例LSCC患者的喉癌组织及癌旁正常组织,实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-126和LncRNA HOTAIR表达,分析与肿瘤分化程度的相关性。结果 与癌旁正常组织相比,喉癌组织中miR-126表达水平显著降低(P<0.01);生物信息学预测LncRNA HOTAIR的作用靶点是miR-126;喉癌组织中LncRNA HOTAIR表达水平显著升高(P<0.05),且随肿瘤分化程度而增加。结论 LncRNA HOTAIR靶向miR-126参与介导LSCC的发生和肿瘤细胞分化。     

非小细胞肺癌组织中HOX转录反义RNA的表达变化及意义

目的 观察HOX转录反义RNA(HOTAIR)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达变化,并探讨其临床意义。方法 收集125例NSCLC患者的肿瘤组织及其瘤旁正常肺组织,采用实时RT-PCR法检测HOTAIR的表达。检索高通量基因表达数据库(GEO)、Array Express数据库中NSCLC组织与HOTAIR表达相关的芯片数据。结果125例患者中,HOTAIR在NSCLC组织中的表达高于癌旁正常肺组织(P<0.05)。HOTAIR表达水平与NSCLC患者年龄、肿瘤直径、淋巴结转移、TNM分期有关(P均<0.05)。从数据库检索出的基因芯片显示HOTAIR表达水平与肿瘤病理类型不相关(P>0.05)。结论 HOTAIR在NSCLC组织中呈现高表达,可能参与NSCLC的发生发展。     

lncR-HOXA-AS3靶向miR-29a对前列腺癌细胞凋亡和自噬的影响

目的 探讨长链非编码RNA(lncR)HOXA-AS3和微小RNA-29a(miR-29a)对前列腺癌（PCa）细胞凋亡、自噬的影响。方法 体外培养人PCa细胞（DU-145、LNCaP、C4-2B）和人正常前列腺细胞RWPE-1,采用RT-qPCR法检测细胞中lncR-HOXA-AS3和miR-29a表达。应用双荧光素酶报告基因实验验证lncR-HOXA-AS3和miR-29a之间的靶向调控关系。取对数生长期LNCaP细胞,分为si-NC组、si-HOXA-AS3组、si-HOXA-AS3+anti-miR-NC组和si-HOXA-AS3+anti-miR-29a组,利用脂质体转染法分别将si-NC、si-HOXA-AS3、si-HOXA-AS3+anti-miR-NC、si-HOXA-AS3+anti-miR-29a转染至各组LNCaP细胞,应用RT-qPCR法检测各组细胞中lncR-HOXA-AS3和miR-29a表达,应用流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,应用Western blotting法检测各组细胞中凋亡相关蛋白Caspase-3及自噬相关蛋白LC3II、LC3I、Becl...     

长链非编码RNA HOTAIR在肝癌细胞生物学行为中的调节作用及其机制研究进展

反义转录长链非编码RNA-同源盒基因转录反义RNA(HOTAIR)是在肝癌细胞中第一个被发现的长链非编码RNA,其可通过调控表观遗传和染色质状态来调节其基因的表达水平,并影响肝癌细胞的生物学行为。其中,HOTAIR可通过与PRC2转录抑制复合物结合,使其相应靶基因甲基化,从而诱导和促进肝癌细胞的激活与增殖,或者通过竞争同种miRNA,参与靶基因的水平表达调节,来促进肝癌细胞的侵袭与转移。沉默HOTAIR可通过调控miR-217-5p活化磷酸化-磷脂酰肌醇3-激酶/磷酸化-苏氨酸蛋白激酶/基质金属蛋白酶-2/9信号通路及降低磷酸化信号转导和转录激活因子3的表达水平,促进肝癌细胞凋亡现象的发生。     

肝细胞癌自噬相关标志物生物信息学分析

目的 基于生物信息学方法分析肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)自噬相关长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)生物标志物,用于评估HCC的临床预后及指导治疗。方法 从TCGA数据库中下载HCC全转录组数据以及对应的临床数据,在人类自噬数据库(http://www.autophagy.lu/)下载自噬相关基因,通过共表达分析找到自噬相关lncRNA。然后,根据K-M分析及Cox分析构建临床预后模型预测HCC患者生存风险及临床相关性分析。最后,针对这些自噬相关lncRNA进行GSEA功能富集分析和临床样本验证。结果 共筛选出919条自噬相关lncRNA,其中AC009403.1、AC099850.3、AL365203.2、AL117336.3和AC015908.3具有临床预后价值且能预测HCC患者生存风险。根据构建的风险模型将高表达AC015908.3患者归为低风险患者,AC099850.3,AL117336.3和AL365203.2归为高风险患者,独立预后分析也验证了构建的预后模型能够预后肝癌患者的生存风险。GSEA功能富集...     

神经元自噬在缺血缺氧性脑损伤中的作用

自噬是广泛存在于真核细胞中通过溶酶体机制降解自身成分的一种代谢途径.自噬不仅可通过激活经典的自噬小体-溶酶体途径,而且还可通过影响凋亡和坏死的发生、发展对细胞死亡进行调控.目前,自噬在急性脑缺血缺氧后神经元损伤方面的作用及其具体机制尚不明确.研究表明,缺血缺氧后的自噬具有神经保护作用,如维持神经元稳态、减少神经元死亡等;但也有研究认为,自噬能通过激活多种通路加重缺血缺氧后神经元损伤,甚至诱导神经元死亡.     

蒲葵子总黄酮对帕金森病细胞模型中人神经母细胞瘤细胞的保护作用

目的 探讨蒲葵子总黄酮(TFFL)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的帕金森病细胞模型中人神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH)损伤的影响.方法 以正常培养的SK-N-SH作为正常组.SK-N-SH用2000 μmol/L MPP+处理48 h建立帕金森病细胞模型,依据不同处理分为模型组、低浓度组(5 μg/ml...     

Bcl-2蛋白在调控细胞凋亡与自噬中的作用

细胞凋亡与自噬均属于细胞死亡的形式。程序性细胞死亡的细胞凋亡,主要依赖一系列蛋白水解,而细胞的残余部分最终被巨噬细胞清除。自噬被称为Ⅱ型程序性细胞死亡,与凋亡方式不同的是不依附于蛋白的水解,而是以独特的自噬体的结构出现为其特征,此独特结构和其细胞内的成分最终将通过自身溶酶体系统而被消除。两者紧密联系在哺乳动物发育,维持组织动态平衡中且起着核心作用,并与疾病的发生、发展密切相关。通过对Bcl-2蛋白构象与功能的不断研究,意识到Bcl-2蛋白不仅具有抗凋亡的功能,也可通过与其他蛋白的相互作用介导细胞自噬,提示其有助于维持细胞的存活,而不单单是促进细胞死亡的双重作用。新近研究发现,Bcl-2蛋白在脑缺血后的病理机制中起着关键性的作用,但其具体机理还有待进一步研究。     

细胞色素C释放与Caspase-3表达在脊髓损伤后神经元细胞凋亡过程中的作用

目的 探讨细胞色素C(Cyt-C)释放和Caspase-3表达在脊髓损伤(SCI)后神经元细胞凋亡过程中的作用及意义.方法 采用改良Allen's法制备大鼠SCI模型,于损伤后5个时间点取材,HE染色观察损伤脊髓组织病理变化,原位末端标记法对凋亡细胞进行标记,免疫组化法对Cyt-C释放和Caspase-3表达进行规律性观察.结果 大鼠SCI后8 h凋亡细胞开始出现,3 d达高峰,灰质和白质均有表达;Cyt-C及Caspase-3阳性细胞8 h即有表达,Cyt-C 1 d达高峰,Caspase-3 3 d达高峰,后均逐渐减少;Cyt-C、Caspase-3表达的阳性细胞与TUNEL标记阳性凋亡细胞出现的时限相似.结论 SCI后存在细胞凋亡,Cyt-C释放和Caspase-3表达参与了SCI细胞凋亡的调节.     

细胞自噬对衰老的调节

细胞内损伤物质的积累是所有衰老细胞的普遍特征,能导致生命有机体生存能力降低.细胞自噬能够降解受损蛋白质和衰老或损伤细胞器等细胞结构,是细胞内主要的异化途径,参与衰老以及与衰老相关的各种病理过程.近年来研究发现,衰老进程中,细胞自噬活动下调,而对各种长寿突变体的研究表明自噬活动是寿命延长所必需的,多种自噬相关基因或蛋白直接受长寿途径的调节[1~5],这些发现都支持细胞自噬是各种真核生物衰老非常重要的调节机制.     

细胞凋亡和细胞自噬在慢性环孢素A肾毒性中的作用

目的探讨细胞凋亡和细胞自噬在慢性环孢素A(CsA)肾毒性中的作用。方法 Sprague-Dawley大鼠分为两组:对照组:皮下注射橄榄油(1 ml·kg-1·d-1)4 w;慢性CsA肾毒性组:皮下注射CsA(15 mg·kg-1·d-1)4 w。检测两组大鼠的体重和肾功能;三色染色检测肾小管间质纤维化程度;ELISA法检测血、尿8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平;原位末端标记法(TUNEL)染色观察细胞凋亡;免疫印迹法检测细胞凋亡调控基因(Bcl-2、Bax、Caspase-3)和细胞自噬体膜型LC3-Ⅱ蛋白的表达;Pearson直线相关分析肾小管间质纤维化程度与细胞凋亡和LC3-Ⅱ蛋白表达的相关关系。结果与对照组相比,毒性组大鼠体重减轻、肾功能低下、血尿8-OHdG水平升高,同时肾毒性组可见明显的肾小管间质纤维化和大量TUNEL阳性细胞。免疫印迹结果表明,毒性组Bax、Caspase-3、LC3-Ⅱ蛋白的表达明显增加,反之,Bcl-2的表达显著减少。直线相关分析提示,肾小管间质纤维化程度与TUNEL阳性细胞数和LC3-Ⅱ蛋白表达呈正向相关。结论细胞凋亡和细胞自噬参与了慢性CsA肾毒性肾小管间质的损伤。     

长链非编码核糖核酸H19通过抑制自噬促进人主动脉平滑肌细胞表型转化

目的:探讨长链非编码核糖核酸H19(IncRNA)对人主动脉平滑肌细胞(HA-VSMCs)自噬及表型转化的调控作用。方法:药物诱导HA-VSMCs发生表型转化,检测细胞内成骨相关蛋白RUNX2及平滑肌标志物α-SMA的表达水平,通过茜素红s染色及碱性磷酸酶ALP含量测定实验检测钙化水平,通过检测泛素化连接蛋白LC-3、P62观察自噬水平变化。结果:与正常组相比,钙化诱导HA-VSMCs组lncRNA H19表达量明显升高,成骨相关蛋白RUNX2表达水平增加,平滑肌标志物α-SMA表达下调,自噬被抑制。敲低lncRNA H19后,平滑肌细胞表型转化减缓,钙化程度减弱,自噬水平有所回升。结论:lncRNA H19可促进HA-VSMCs的表型转化及动脉钙化的发生,其机制可能与抑制HA-VSMCs的保护性自噬有关。     

lncRNA减轻心肌缺血再灌注损伤的研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度大于200个核苷酸且无蛋白质编码能力的RNA,但在增殖、凋亡、迁移、侵袭和分化等多种生物过程中起着非常重要的调节作用。研究发现lncRNA与心肌缺血再灌注(I/R)损伤的发生发展密切相关。本综述讨论了lncRNA减少心肌I/R损伤及其可能机制的研究进展。     

lncRNA影响脊髓损伤修复机制的研究进展

脊髓损伤（SCI）涉及严重的中枢神经系统损伤,可导致患者损伤平面以下运动和感觉功能异常或缺失以及自主神经功能紊乱。lncRNA在SCI后病情发展及转归中发挥重要作用,其机制具体表现为促进SCI后神经细胞功能改变、调节炎症、抑制细胞凋亡、减缓神经性疼痛以及促进血管的再生等。     

长链非编码RNA前列腺雄激素调节转录因子1对帕金森模型细胞损伤的实验研究

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)前列腺雄激素调节转录因子1(PART1)对1-甲基-4-苯基-吡啶离子(1-methyl-4-phenyl,MPP+)诱导的帕金森模型细胞氧化应激和凋亡的影响及分子机制.方法 将SK-N-SH细胞分为对照(Con)组(细胞未经任何处理)、MPP+组、空白组、转染组(pcDNA-...     

长链非编码RNA AC090809在人肝癌细胞系中的表达及对Huh7细胞增殖凋亡调控作用观察

目的 观察长链非编码RNA AC090809在不同转移能力人肝癌细胞系Huh7、MHCC97L、HCCLM3中的表达及对Huh7增殖凋亡的调控作用.方法 采用实时荧光定量PCR法检测人肝癌细胞系Huh7、MHCC97L、HCCLM3中的AC090809.分别将AC090809降表达质粒sh-AC090809、对照质粒s...     

长链非编码RNA SNHG15可通过靶向miR-24-3p/Atg12减轻缺氧诱导的心肌细胞损伤

目的 探讨长链非编码RNA (lnc RNA)小核仁RNA宿主基因15(SNHG15)通过miR-24-3p/Atg12对缺氧诱导的心肌细胞损伤的影响。方法 采用RT-qPCR检测SNHG15和miR-24-3p在缺氧诱导的心肌细胞中表达,细胞设为对照组、缺氧组、缺氧+si-SNHG15组、缺氧+si-NC组、缺氧+miR-24-3p inh组、缺氧+inh-NC组、si-SNHG15+miR-24-3p inh组。采用MTT法、流式细胞术、Caspase-3试剂盒和Transwell法检测SNHG15和miR-24-3p对心肌细胞增殖、凋亡和迁移的影响,目的基因预测与筛选、荧光素酶报告基因检测验证SNHG15和miR-24-3p下游目的基因,Western blot检测Atg12蛋白及相关自噬基因的表达。结果 随着过氧化氢处理持续时间的延长,心肌细胞内SNHG15水平明显升高,miR-24-3p水平明显降低,且呈时间依赖性（P<0.05）;与对照组相比,缺氧组细胞活力、迁移和侵袭性明显降低（P<0.05）,Caspase-3活性和细胞凋亡率均明显增加（P<0.05）...