TGF-α、TNF-α和VEGF对人嗜铬细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的研究转化生长因子α(TGFα)、肿瘤坏死因子α(TNFα)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)对原代培养的人嗜铬细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法用噻唑兰(MTT)法观察TGFα、TNFα和VEGF对原代培养的人嗜铬细胞瘤细胞增殖的作用;用PI染色流式细胞分析、Hochest33342染色的方法检测上述细胞因子对人嗜铬细胞瘤细胞凋亡的影响。结果0.1～100μg/L的TGFα、TNFα和VEGF均促进人嗜铬细胞瘤细胞增殖。无血清培养72h,人嗜铬细胞瘤细胞的凋亡率为3.98%,100μg/L的TGFα、TNFα和VEGF对其凋亡无明显影响。结论TGFα、TNFα和VEGF刺激原代培养的人嗜铬细胞瘤细胞增殖,但对其凋亡无明显影响。     

低氧对人骨髓间充质干细胞HIF-1α、SDF-1、VEGF mRNA表达的影响

目的 观察低氧对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、基质细胞衍生因子-1(SDF-1)及血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响.方法 分别在1% O2及20% O2条件下培养hBMSCs,定量RT-PCR技术检测其HIF-1α、SDF-1及VEGF mRNA.结果 在1% O2条件下,hBMSCs 的HIF-1α、SDF-1、VEGF mRNA表达水平明显增高(P＜0.01).HIF-1α mRNA与SDF-1 mRNA及VEGF mRNA的表达密切相关(r分别为0.488、0.644,P均<0.01),但SDF-1 mRNA与VEGF mRNA的表达无明显关系(r=0.077,P>0.05). 结论 低氧可促进hBMSCs的 HIF-1α表达,并使SDF-1、VEGF mRNA表达增加.     

AMD3100对胰腺癌细胞AsPC-1及其移植瘤血管生成的影响

目的 探讨非肽类特异性CXCR4拮抗剂AMD3100对胰腺癌细胞株AsPC-1细胞增殖及其移植瘤生长的影响.方法 AsPC-1细胞分为对照组、基质细胞衍生因子-1(SDF-1α)处理组、AMD3100处理组和SDF-1α+AMD3100处理组,MTT法检测细胞增殖,Western blotting检测血管内皮生长因子(VEGF)表达.建立AsPC-1细胞裸鼠移植瘤模型,应用AMD3100瘤内及瘤周注射,观察移植瘤的生长,免疫组化法检测裸鼠移植瘤的微血管密度(microvessel density,MVD).结果 SDF-1α可明显促进AsPC-1细胞增殖(1.430±0.122对1.002±0.001,P<0.05),而同时应用AMD3100处理能抑制这种增殖反应(0.983±0.068对1.430±0.122,P<0.05);SDF-1α亦可促进AsPC-1细胞VEGF的表达(0.565±0.047对0.439±0.034,P<0.05),而同时用AMD3100处理可抑制这种效应(0.450±0.071对0.565±0.047,P<0.05).AMD3100可抑制AsPC-1细胞皮下移植瘤的生长,第24天的抑瘤率达59.5%,移植瘤的MVD显著减少(28.56±6.94对98.75±20.60,P<0.01).结论 AMD3100在体外和体内均可抑制AsPC-1细胞增殖及其移植瘤的血管生成.     

地黄低聚糖对人脂肪组织源性间充质干细胞分泌血管内皮细胞生长因子的影响

目的 探讨地黄低聚糖(RGO)对分离、培养的人脂肪组织源性间充质干细胞(ADMSCs)分泌血管内皮细胞生长因子(VEGF)的影响。方法 人脂肪组织用2.5 g/L胶原蛋白酶Ⅰ消化、分离ADMSCs。取沉淀的细胞进行培养,用免疫细胞化学染色法鉴定其表面CD44、CD105、CD45和CD34分子的表达。以IMDM培养基作为空白对照,加入RGO配成不同浓度（0、1、10、100及400 mg/L）的IMDM分别培养ADMSCs,用MTT比色法检测ADMSCs的增殖。培养72 h后,用ELISA法测定不同培养基中VEGF的含量。结果 免疫细胞化学染色显示,分离培养的细胞表面CD44+、CD105+、CD34-、CD45-。MTT比色法的结果显示,与空白对照组相比,1和10 mg/L组无明显差别,100及400mg/L组明显升高（均P<0.01）,且100mg/L组明显高于400mg/L组(P<0.05)。0、1、10、100、400mg/L5个组VEGF的含量,分别为(627.88±33.86)、(655.50±40.29)、(666.50±43.20)、（843.50±53.05）和（722.88±51.34）ng/L。结论 RGO对ADMSCs 的增殖有促进作用,且呈一定的浓度依赖性,并导致其分泌VEGF的作用增强。     

体外预处理骨髓间充质干细胞移植对心肌梗死作用的实验研究

目的初步研究基质细胞衍生因子-1(SDF-1)预处理后骨髓间充质干细胞(MSCs)产生的系列效应变化;并将预处理后的MSCs移植入大鼠心肌梗死模型,观察细胞归巢、增殖,及对心肌缺血区细胞凋亡、新生毛细血管生成、心室重构和心功能的影响,进一步探讨MSCs作用于缺血性心脏病的机理。方法干细胞部分:取SD大鼠胫骨及股骨分离骨髓,用全骨髓差异贴壁法培养MSCs,并进行表面标志鉴定;用5-溴脱氧尿核苷(Brd U)标记MSCs细胞,制作细胞爬片,检测其标记率,以确保标记能满足移植示踪及观察需要;将MSCs分别在不含(对照组)或含(SDF-1预处理组)SDF-1的无血清培养基中孵育60分钟,检测各上清液中血管内皮生长因子(VEGF)含量,及处理后细胞表面CXCR-4受体表达的变化。动物实验部分:建立大鼠心梗模型48只,随机平均分为三组:空白组(A),干细胞对照组(B),SDF-1预处理组(C);分别在其心梗后1天经尾静脉注射生理盐水(A组)、未处理的MSCs(B组)或SDF-1预处理后的MSCs(C组);移植后24小时检测梗死周边区心肌细胞凋亡;一周后检测梗死周边区归巢增殖的Brd U阳性细胞;四周后检测心功能,计算梗死面积,并通过血管荧光灌注显像检测梗死周边区新生血管密度。结果利用全骨髓差异贴壁法可以获取稳定分裂大鼠MSCs,经表型鉴定证明其为CD29~+CD90~+CD34~-细胞:用10μmol/L Brd U标记MSCs24小时,标记率>98%,能满足移植示踪需要;用SDF-1预处理MSCs可显著增加其释放VEGF能力[(68.92±5.03)pg/mL vs.(38.79±3.16)pg/mL,P<0.05],并使CXCR-4受体发生内摄作用,表现为膜外表达减少(P<0.05)。结论 (1)SDF-1预处理MSCs可显著增加其释放VEGF的能力,并使CXCR-4受体发生内摄作用,增强归巢能力,促进细胞旁分泌作用。(2)SDF-1预处理MSCs后移植,可减少大鼠梗死周边区心肌细胞的凋亡,增加缺血区的灌注,从而抑制心室重构,改善心功能。     

冠心病患者外周血内皮祖细胞数量及生物学功能与肝细胞生长因子的关系

目的观察冠心病患者外周血内皮祖细胞（EPCs）数量及生物学功能的变化,进一步探讨肝细胞生长因子（HGF）对其影响,为临床应用HGF提供理论依据。方法收集50例非冠心病患者（对照组）、50例冠心病患者（冠心病组;每例分为HGF干预组和非HGF干预组）外周血,应用流式细胞仪和ELISA法分别检测各组CD133＋／CD34＋细胞的数量和HGF水平;采用密度梯度离心法分离培养各组外周血中EPCs,通过MTT法、Transwell迁移试验、黏附能力测定试验及PI—AnnexinV双重染色法来分别检测EPCs的增殖、迁移、黏附能力和凋亡水平。结果与对照组比较,冠心病组外周血中CD133＋／CD34＋细胞数量减少[（2．15±0．69）％1）S（5．26±1．16）％,P〈0．011,血浆中HGF浓度升高[（6．80±1．22）w（2．62±0．83）gg／L,P〈0．01],EPCs增殖、迁移、黏附等生物学功能减弱（P〈0．05）;HGF干预组EPCs增殖、迁移、黏附等生物学功能显著改善（P〈0．05）。各组细胞凋亡水平差异无统计学意义（P〉0．05）。结论外周血中CD133＋／CD34＋细胞数量和血浆中HGF水平的变化可能成为冠心病患者新的危险评估因素。     

赖氨酸特异性的去甲基化酶3A对内皮祖细胞功能的影响

目的探讨赖氨酸特异性的去甲基化酶3A(KDM3A)对内皮祖细胞(EPCs)增殖、迁移、管形成能力及分泌促血管生成细胞因子功能的影响。方法从同基因型成年雄性SD大鼠的后肢长骨中分离出骨髓单核细胞,EGM-2培养基诱导形成EPCs,将EPCs按完全随机设计的方法分为3组:空白组、Ad-GFP转染对照组和Ad-KDM3A转染处理组。分别用CCK-8、Transwell检测EPCs的增殖和迁移能力,基质胶检测EPCs的管形成能力。免疫印记法检测KDM3A蛋白的表达及EPCs分泌血管内皮生长因子(VEGF)和基质细胞衍生因子1(SDF-1)蛋白表达量,同时检测调控分泌机制相关的丝/苏氨酸蛋白激酶(Akt)、p-Akt蛋白的表达。结果与Ad-GFP转染对照组比较,Ad-KDM3A转染处理组下调KDM3A的表达可显著增强EPCs的增殖能力(1.393±0.058比1.031±0.059)、迁移能力(1.89±0.12比1.21±0.11)和管形成功能(1.552±0.109比1.027±0.038),同时EPCs合成和分泌的促血管生成细胞因子VEGF(0.738±0.029比0.153±0.003)和SDF-1(0.333±0.013比0.163±0.005)增多。与Ad-GFP转染对照组比较,Ad-KDM3A转染处理组下调KDM3A可使Akt蛋白表达增加(0.553±0.005比0.169±0.001)。结论下调KDM3A蛋白的表达可增强EPCs的增殖、迁移、管形成能力及分泌促血管生成细胞因子的功能,这可能与增加Akt蛋白表达有关。     

大鼠肝细胞对肝星状细胞增殖与活化的影响及其机制探讨

目的观察肝细胞对原代肝星状细胞（HSC）增殖、表型、胶原表达等生物学特性的影响，并为探讨其作用机制提供线索。方法原位灌流分离大鼠HSC，与大鼠肝细胞系BRL共培养48h。在相差显微镜下观察HSC的表型变化，用Westernblot方法检测其α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型前胶原的表达，TUNEL方法检测其凋亡。取BRL细胞的培养上清液培养原代HSC，用MTT法检测其增殖。采用抗体芯片投水碌示BRL细胞的培养上清液与对照培养基之间细胞凶子的表达差异。结果BRL细胞的培养上清液明显促进HSC增殖（P〈0．01）。与BRL细胞共培养的原代HSC胞体收缩性增强，Ⅰ型前胶原及α-SMA的表达上调，凋亡增加（P〈0．01）。较对照培养基，BRL细胞的培养上清液中帆管内皮生长因子（VEGF）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、金属蛋白酶组织抑制剂（TIMP-1）等三种细胞因子显著上调。结论肝细胞可促进原代HSC的增殖与活化，其机制可能与肝细胞分泌VEGF、MCP-1、TIMP-1等细胞因子有关。     

Klotho蛋白促进内皮祖细胞旁分泌和分化的作用及机制研究

目的探讨Klotho蛋白促进内皮祖细胞(EPC)旁分泌和分化的作用及机制。方法选取健康人外周血分离培养EPC,分为对照组、Klotho组、AKT阻断组及ERK阻断组(n=6)。采用流式细胞术检测其表型;ELISA方法检测血管内皮生长因子(VEGF)、基质细胞衍生因子(SDF1)和碱性成纤维生长因子(bFGF)水平;MTT检测内皮细胞增殖率;划痕实验检测内皮细胞的迁移;流式细胞术检测EPC向CD31阳性内皮细胞的分化。结果 EPC培养到第7天后,CD34的阳性率为93.6%,VEGF受体2的阳性率为94.9%。与对照组比较,Klotho组、AKT阻断组及ERK阻断组内皮细胞增殖率、内皮细胞划痕区域闭合率、CD31阳性细胞比例更高(P0.05,P0.01);AKT阻断组VEGF、SDF1、bFGF表达明显低于Klotho组和ERK阻断组[(46.44±4.62)ng/ml vs(70.29±5.87)ng/ml和(65.21±4.69)ng/ml;(16.56±2.03)ng/ml vs(37.84±3.53)ng/ml和(34.29±3.72)ng/ml;(5.09±1.40)ng/ml vs(7.52±2.61)ng/ml和(7.36±2.18)ng/ml,P0.05]。与Klotho组比较,AKT阻断组内皮细胞增殖率、划痕区域闭合率及CD31阳性细胞比例显著降低[(29.81±2.55)%vs(43.37±4.29)%,(29.41±3.46)%vs(56.56±6.42)%,(7.08±1.11)%vs(23.91±3.69)%,P0.01]。结论 Klotho蛋白能够通过AKT信号通路,促进EPC旁分泌和分化,进而促进血管生成。     

转化生长因子α对人内皮祖细胞分化功能的影响

目的研究转化生长因子α(TGF-α)对人内皮祖细胞(EPC)分化功能的影响并初步揭示其作用机制。方法从健康人外周血中分离EPC,分别用含0、1、10μg/L浓度的TGF-α完全培养基诱导培养。观察各组中EPC分化的形态变化,并利用流式细胞术检测各组EPC培养分化过程中CD34+/CD133+和CD31+/v WF+阳性细胞率,Real-time PCR方法测定各组中EPC分化的内皮细胞特异性基因内皮型一氧化氮合酶(e NOS)和Flk-1/KDR表达差异,并通过测定各组中一氧化氮(NO)含量变化比较EPC分化内皮细胞的功能,Western Blot检测各组EPC分化中TGF-α受体EGFR和血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果用TGF-α诱导培养分离的人EPC,细胞形态能够更快地由干细胞球形分化成梭形;流式细胞仪检测发现与空白对照组相比,1、10μg/L TGF-α组中3天时EPC标记CD34+/CD133+阳性率和7天时分化的内皮细胞标记CD31+/v WF+阳性率均显著增高,差异有统计学意义(P0.05);Real-time PCR检测各TGF-α组EPC分化的内皮细胞特异性基因e NOS和Flk-1/KDR表达量也显著上升(P0.05);1、10μg/L TGF-α诱导培养组中EPC分化的内皮细胞分泌NO含量显著升高(P0.05);1、10μg/L TGF-α诱导培养能够显著促进EPC分化过程中EGFR和VEGF的表达(P0.05)。结论 TGF-α能够显著促进人EPC的增殖分化及分化内皮细胞的功能,并通过与受体EGFR结合刺激VEGF表达发挥作用。     

DC与CIK或LAK联合对结肠癌细胞株SW480杀伤作用的研究

[目的]研究树突状细胞(DC)联合细胞因子诱导或未诱导的杀伤细胞(CIK)或淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)对结肠癌细胞株SW480的杀伤活性.提供DC联合CIK或LAK治疗结肠癌的实验依据.[方法]取人外周血分离出单个核细胞(PBMNC),诱导生成DC、CIK、LAK细胞;流式细胞仪检测DC经SW480肿瘤抗原冲击后的表型变化;以CIK+DC细胞、CIK细胞、LAK+DC细胞及LAK细胞作为效应细胞,SW480为靶细胞,以15∶1、30∶1、45∶1为效靶比,LDH释放法测定细胞杀伤试验活性;ELISA检测杀伤试验中干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素2(IL-2)、IL-12、IL-17的分泌水平.[结果]流式细胞仪检测DC经SW480肿瘤抗原冲击后,其表面分子HLA-DR、CD40、CD80和CD86表达分别平均为90.23％、73.68％、85.96％、57.55％,与未经肿瘤抗原冲击DC比较,DC成熟的表面标志分子表达明显增加(P＜0.01).相同效靶比下,CIK+DC细胞组对SW480的杀伤作用最强,明显高于其他细胞组(P＜0.01);CIK+ DC细胞组在效靶比为45∶1时,杀伤活性最强(P＜0.01);单独CIK细胞组的杀伤活性明显高于LAK+DC细胞组(P＜0.01);LAK+ DC细胞组的杀伤活性明显高于单独LAK细胞组(P＜0.01).效靶比为45∶1时,各杀伤试验细胞组上清液中IFN-γ、IL-2、IL-12、IL-17的分泌量,CIK+DC细胞组的IFN-γ、IL-12的分泌量显著高于其他细胞组(P＜0.05);LAK+DC、单独LAK细胞组IL-2的分泌量明显高于CIK+DC、单独CIK细胞组(P＜0.05);单独CIK细胞组IFN-γ的分泌量明显高于LAK+DC、单独LAK细胞组(P＜0.05).[结论]CIK+DC细胞组对SW480的杀伤活性明显强于单独CIK、LAK+ DC组、单独LAK细胞组.其机制可能是,SW480抗原致敏的DC分泌IFN-γ、IL-12等刺激、诱导CIK细胞的活化和增殖,明显增强CIK细胞杀伤SW480的活性.     

树突状细胞对不同诱导时间LPAK抗肝癌作用的影响

目的　比较ＤＣ对诱导４ ｄ（Ｌ４） 和诱导７ ｄ（Ｌ７） 的ＬＰＡＫ 细胞体外杀伤人肝癌细胞株ＢＥＬ－ ７４０２（Ｂ） 的杀伤力和杀伤模式的影响．方法　Ｌ４ 组为Ｂ＋ Ｌ４ ,ＬＤ４ 组为Ｌ４ 组＋ ＤＣ;Ｌ７ 组为Ｂ＋ Ｌ７ ,ＬＤ７ 组为Ｌ７ 组＋ ＤＣ．Ｌ４ 和Ｌ７ 与Ｂ的效靶比均为５∶１ 和１０∶１两种． 采用杀伤细胞检测技术及电镜技术,比较各组的杀伤效应和杀伤模式．结果　各组的细胞毒活性为ＬＤ４ ＞ Ｌ４（ Ｐ＜ ０－０１） ,ＬＤ７ ＞ Ｌ７（ Ｐ＜ ０－０１） ．Ｌ４ 组和ＬＤ４ 组的ＢＥＬ７４０２ 细胞呈现不同程度的变性坏死,Ｌ７ 组和ＬＤ７ 组的ＢＥＬ７４０２ 细胞则呈现不同程度的凋亡改变．结论　ＤＣ对不同诱导时间的ＬＰＡＫ 细胞体外杀伤肿瘤细胞都有明显的促进作用,但并不改变ＬＰＡＫ 细胞对肿瘤细胞的杀伤模式．     

人类胚胎干细胞定向分化为胰岛素分泌细胞的研究进展

人类胚胎干(hES)细胞具有极其强大的增殖能力,理论上具有分化为机体所有组织细胞的潜能.治疗性克隆技术可用于制备带有患者基因型的hES细胞及其分化而来的胰岛素分泌细胞,但存在激烈的伦理学争论.新近,通过体外转基因处理可诱导人类体细胞重构形成hES样的多潜能干细胞.本文着重介绍hES细胞定向分化为胰岛素分泌细胞的研究进展.     

Thymic stromal cells support differentiation of natural killer cells from CD34+ bone marrow cells in vitro

Abstract: Natural killer (NK) cells are CD3^? CD56⁺ lymphocytes characterized by exhibiting non-MHC restricted cytotoxicity. A developmental relationship between NK cells and T lymphocytes has been proposed, and, moreover, the thymus has been shown to contain NK cell precursors. In this study we utilized an in vitro assay, devised to study T-lymphocyte development from bone marrow progenitors, to investigate the ability of thymic stromal cells to support generation of NK cells from CD34⁺ bone marrow cells. CD34⁺ cells purified from healthy adults were seeded on adherent thymic stromal cells. The cells emerging after culture were phenotypically characterized by flow cytometry. We show that lymphocytes expressing the phenotypical characteristics of NK cells were generated from CD34⁺ bone marrow cells, and that these cells represented 1% of the cells recovered from the cultures. Furthermore, this was accomplished without supplement of exogenous interleukin 2 which is required for NK cell differentiation in bone marrow cultures.     

祖细胞和干细胞与缺血性疾病的治疗

缺血性疾病是严重危害人类健康的疾病之一,主要包括缺血性脑血管疾病、缺血性心血管疾病、下肢缺血性疾病等。祖细胞和干细胞都是具有自我复制能力的多潜能细胞,在一定条件下,它们可以分化成多种功能细胞。根据干细胞所处的发育阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞,虽然胚胎干细胞具有万能分化型功能,但伦理学方面的争议使其研究困难重重,而成体干细胞相较胚胎干细胞,不仅避免了伦理学方面的争议问题,而且无移植后免疫排斥反应。本文主要讨论成体干细胞和祖细胞在缺血性疾病中的应用。近年来,关于祖细胞和干细胞在缺血性疾病中应用的研究日益增多,受到了广泛的关注,为我们提供了一条治疗缺血性疾病的新思路。     

Immune regulatory cells in umbilical cord blood: T regulatory cells and mesenchymal stromal cells

A major goal in haematopoietic cell transplantation (HCT) is to retain the lymphohaematopoietic potential of the cell transfer without its side effects. In addition to the physical injury caused by the conditioning regimen, donor T cells can react to alloantigens of the recipient and cause graft- versus -host disease (GVHD), which accounts for the largest share of morbidity and mortality after HCT. Immune modulator cells, such as regulatory T cells (Tregs) and mesenchymal stromal cells (MSCs) have shown promise in their ability to control GVHD and yet, in preclinical models, preserve the graft- versus -malignancy effect. Initially, MSCs and Tregs have been isolated from adult sources, such as bone marrow or peripheral blood, respectively. More recent studies have indicated that umbilical cord blood (UCB) is a rich source of both cell types. We will review the current data on UCB-derived Tregs and MSCs and their therapeutic implications.     

Natural cytotoxic cells from rat liver and spleen kill human glioma cells

Summary Natural cytotoxic cells from rat spleen and rat liver, (isolated using the collagenase method) were found to be cytotoxic against different lines of human gliomas: T406, T508, T705, HeRo, HeRoCl 1, HeRoCl8, and HeRo-SV 7/114. After 18 h the lytic units ranged from 75 to 251 in the liver and from 5 to 24 in the spleen. Analyzing the ratio of lysis at 4 h/ 18 h, it may be concluded that this natural killing is predominantly macrophage (Kupffer cell)-dependent. Lysis by Kupffer cells cannot be increased by transforming glioma cells with SV40. Experiments with SV40-transformed mouse fibroblasts (3T3) and virustransformed human cell lines (SV80) suggested a SV40 receptor on Kupffer cells. Thus Kupffer cells have receptors for glioma cells and SV40-dependent membrane structures.     

树突状细胞联合细胞因子诱导的杀伤细胞对胃癌细胞杀伤作用

目的探讨树突状细胞联合细胞因子诱导的杀伤细胞对胃癌细胞的杀伤作用。方法采用胃癌患者自身血液中单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC),经体外诱导分别扩增出DC和CIK细胞,二者共同培养后,利用MTT法检测DC细胞联合CIK细胞体外杀伤人胃癌细胞株(MNK-45、MNK-28、SG-7901)的活性。结果DC与CIK细胞共培养后得到的细胞群高表达CD3 CD56 ,平均值达到(56.74±7.63)%。通过彼此相互作用诱导出的细胞群体对胃癌细胞株MNK-45、MNK-28、SG-7901有杀伤作用,且杀伤活性随着效靶比的增加而增强。结论DC与CIK细胞共培养后有很强的增殖能力,对胃癌细胞具有杀伤活性,且其杀伤作用与胃癌细胞类型无相关性。     

Clusterin induces differentiation of pancreatic duct cells into insulin-secreting cells

Aims/hypothesis We recently reported that expression of the gene encoding clusterin (Clu) is upregulated in the regenerating pancreas, particularly in tissues undergoing differentiation. This led us to propose that clusterin participates in the cytodifferentiation of pancreatic tissue, particularly the endocrine islet cells. The aim of this study was to investigate whether clusterin induces the differentiation of duct-lining cells into insulin-secreting cells. Methods We isolated ductal tissue from rat pancreas and cultured it to develop epithelial cell explants for transfection of the Clu cDNA as well as for treatment of clusterin protein. Results The number of newly differentiated insulin cells increased 6.9-fold upon Clu overexpression compared with controls. Ins1 mRNA and peptide levels were also increased. Furthermore, glucose-stimulated insulin secretion was observed in the differentiated insulin cells. These cells were immunoreactive for insulin and C-peptide, but negative for other islet hormones and for cytokeratin-20, which indicates a fully differentiated state. Insulin cell differentiation was also increased in a dose-dependent manner by treating duct cells in culture with clusterin, indicating a growth-factor-like action of clusterin in insulin cell differentiation. Conclusions/interpretation These results suggest that clusterin can be considered as a potential morphogenic factor that promotes differentiation of pancreatic beta cells.