DNA甲基化及其在中医证候研究中运用研究进展探析

DNA甲基化研究的是基因在核苷酸序列不变的情况下DNA发生的天然修饰。目前,DNA甲基化在生物医药领域运用集中在研究疾病全基因组DNA甲基化的特点、规律以及寻找疾病的DNA甲基化生物标记物。本文在系统综述DNA甲基化研究技术的基础上,归纳和分析了DNA甲基化技术在中医证候生物学基础研究中运用的现状,提出了从全基因组DNA甲基化作为切入点来筛选中医证候生物标志物的建议。     

从表观遗传学开展复杂性疾病证候本质的研究

复杂性疾病是多基因遗传和环境等因素相互作用的结果,而表观遗传学机制能很好地体现环境和基因的交互作用。中医认为证候是内外环境与人体相互影响的阶段性病理概括,并通过对环境等因素的干预以及方药的运用,可以调整证候的表现,从而影响复杂性疾病的发生发展。这种方式也正好与现代医学试图通过对环境及药物来调控表观遗传学机制,进而可逆性地对复杂性疾病施加积极影响的观念一致。中医的证候可能包含表观遗传学的内容,对表观遗传学机制的调控是中医对复杂性疾病证候干预的环节之一。     

证候生物学基础的研究——中医药研究的重要突破口

证候的客观量化是中医学有待突破的关键科学问题之一,系统生物学及信息分析技术是证本质研究的重要突破口。中医证候与生物网络动态平衡的阐释疾病发生发展的观点具有相通性,网络分析是揭示证候内涵的有效手段,其关键节点可用于证候潜在生物标志物的筛选。方证相应的疗效反馈是验证证候内涵的有效方式,基于药物靶标网络和证候网络“共模块”的比对分析,可以在系统的分子水平上明晰对证方药的作用机制,聚焦证候的潜在标志物,筛选和聚焦所得的证候潜在标志物最终仍需要大量反复的临床实践的验证。目前,中医证候实质的研究发展迅速,但总体尚属起步探索阶段,对证候的生物标志物群多处于初步单一的分析,缺乏对各种组学信息的整合、聚焦和验证。中医证候的研究需要从整体论和转化医学理念出发,立足临床,采用“病-证-方”结合及“整合-聚焦-验证”的体系思路,在严格的临床样本选择与质量控制前提下开展研究工作。     

冠心病血瘀证转录组学研究——病证结合生物标志物研究思路与方法

中医证候的生物学基础研究是影响中医学发展与创新的重大科学问题,证候相关生物标志物及中药干预调控网络的研究对于在证候标准规范的基础上进一步提高诊断效能和临床疗效具有重要意义。因此,在前期冠心病证候标准规范研究的基础上,本项目组以冠心病心绞痛血瘀证为切入点,从分子生物水平对证候进行了深入研究。第一,通过采集累计312例患者外周血基因信息,运用差异显示法、实时定量聚合酶链式反应(Real-time polymerase chain reaction,Real-time PCR),斑点杂交法,高通量芯片,测序等方法,确立了冠心病血瘀证长链非编码核糖核酸-微小核糖核酸-信使核糖核酸(long noncoding ribonucleic acid-micro ribonucleic acid-messenger ribonucleic acid,lncRNA-miRNA-mRNA)3个层面的潜在生物标志物。第二,在前期筛选出的差异基因的基础上,运用生物信息学分析结合细胞功能学验证的方法,构建了冠心病血瘀证基因miRNAmRNA以及lncRNA-miRNA-mRNA 2个水平的调控网络。第三,基于血瘀证差异基因及调控网络,通过累计202例活血化瘀中药干预冠心病心绞痛血瘀证患者的随机对照试验,治疗前后共计400余人次的基因检测,以及活血化瘀中药处理相关细胞模型的体外实验,从基因-蛋白-功能3个层面研究中药作用机制,从分子水平揭示了活血化瘀中药干预冠心病血瘀证的基因调控网络机制。本研究将相关的分子生物学技术及生物信息学方法引入证候的生物学基础研究,建立了一套证候相关生物标志物的研究方法,为证候实质的研究提供了新思路。     

冠心病血瘀证表观遗传学研究进展

从表观遗传学研究探讨冠心病血瘀证的证候实质,主要包括DNA甲基化修饰和非编码RNA调控两个方面。DNA甲基化的调控方式具有整体、可逆、间接的特点,而非编码RNA的调节方式具有广泛、多样、复杂的特点。总体而言,表观遗传学调控的时间特异性和组织特异性明显,调节方式相对间接,充分体现基因遗传与环境的相互作用,其中渗透着中医天人相应、整体观的思想,为研究中医证候实质与中药作用机制提供了合作平台。     

脂质组学在中医证的生物学基础研究中的优势探讨

证是中医认识诊断疾病,据此遣方用药和观察疗效的基础,证候诊断及疗效评价的客观化与标准化研究对实现中医药现代化至关重要。脂质组学是对整体脂质进行系统分析的一门新兴学科,通过比较不同生理状态下脂代谢网络的变化,进而识别代谢调控中关键的脂生物标志物,最终揭示脂质在各种生命活动中的作用机制。中医的整体观及系统理论与脂质组学的系统研究不谋而合,随着质谱技术的进步,脂质组学在中医证本质研究、证候脂生物标志物的识别、证候诊断、药物作用机制的研究等方面已展现出广泛的应用前景。     

基于DNA甲基化/羟甲基化水平中药调控冠心病血瘀证相关基因分子生物学研究进展

冠心病是多基因遗传和环境等因素相互作用的复杂性疾病,血瘀证是其常见证型之一。目前,表观遗传学是心血管领域研究的热点,通过表观遗传学机制可解释基因和环境的交互作用,冠心病的发生发展与DNA异常甲基化关系密切,而表观遗传学的修饰可逆。本文以DNA甲基化作为冠心病血瘀证新的诊疗工具,论述通过中药干预手段调控冠心病血瘀证相关基因羟甲基化修饰的研究进展,亦为中医证候本质研究提供新思路。     

转录组学在中医证候中的研究进展

转录组学能够从整体上研究基因功能以及基因结构,揭示特定生物学过程以及疾病发生发展过程中的分子机理。通过近年来对转录组学在中医证候中的研究进行归纳、分析、总结,发现中医证候有共同的物质基础,转录组学可以用来研究中医证候的微观实质。应用转录组学在不同个体证候的证候状态进行扫描,探寻不同证候相关基因表达谱,以及分析micro R N A的功能,能从微观上阐释中医的证候本质为证候的规范化、标准化和现代化提供依据。本文就转录组学在中医证候的国内外研究进展方面作了综述。     

中医证本质研究中的血清蛋白质组学应用探讨

中医的证候间存在不同证候标志物,表现为差异蛋白质的表达。血清蛋白质组学是系统生物学的重要组成部分。通过对以往运用血清蛋白质组学技术研究中医证候的本质的探讨,提出了自己的看法,认为在中医证候动物模型、中医临床证候、方证结合的应用方面进行血清蛋白质组学研究,可以找到证候标志物,探明中医的证本质。     

肺癌中医证候标准化研究

肺癌是发病率、死亡率较高的恶性肿瘤之一,中医证候标准化的研究有利于提高中医整体辨证治疗准确性与有效率。文章系统地回顾了国内肺癌中医证候标准化研究概况,发现现存的肺癌证候分析主要分为两个方面,一个方面是与肺癌相关的证候分析,包括与肺癌临床分期相关,与肺癌病理类型相关,与治疗干预手段及疗效相关的证候研究;另一方面主要采用包括系统评价,大样本的流行病学调查,证候证素分析等方法分析总结肺癌相关的中医证候。文章对其进行归纳分析,为今后肺癌中医证候标准化研究提供一定的参考。     

中医药调节溃疡性结肠炎常见证候肠道菌群的研究进展

溃疡性结肠炎作为难治性肠道疾病之一,其病因尚未完全明确,研究证实肠道菌群失调与溃疡性结肠炎发病联系密切。中医药治疗溃疡性结肠炎体现了整体调节、辨证论治的特色与优势,中医药可通过改善菌群结构、调节菌群数量、调整肠道菌群稳态治疗溃疡性结肠炎,且溃疡性结肠炎不同中医证候的肠道菌群存在着明显差异。现通过分析溃疡性结肠炎常见证候（大肠湿热证、脾虚湿蕴证、脾肾阳虚证、脾气亏虚证、肝郁脾虚证、寒热错杂证、热毒炽盛证）肠道菌群的特点及中医药调节溃疡性结肠炎常见证候肠道菌群的研究现状,以期为溃疡性结肠炎的微观辨证及中医药治疗溃疡性结肠炎的作用机制研究提供依据。     

中医证和病证结合动物模型研制的利弊与症结

虽然单纯证的动物模型的现代医学疾病属性确定无疑,但证的属性则因中医病因造模、干预后动物症状体征辨证和理化检测指标异常与证没有特异性对应关系而无法确定。病证结合动物模型的研制,叠加了现代医学疾病模型和中医证模型两种造模方法,此类模型不仅自身存在各种弊端,而且还存在两种造模方法叠加后不确定的关系。病证结合模型通常不是在同病诸证的比较中建立起来,因而不具备排他性。中医证和病证结合动物模型的造模方法和证属性评价方法存在众多问题,根本原因在于西医疾病诊断的症状体征与该病所辖诸证的症状体征相差悬殊,西医疾病的症状体征甚少,而病辖诸证辨证的症状体征远远超出疾病的症状体征,辨证症状绝大多数来历不明,以一种虚拟状态存在,进而导致由虚拟症状抽象出众多虚拟证,并通过相关辨证标准得以体现,给动物模型的研制造成严重后果。     

糖尿病肾病中医证候的现代研究

糖尿病肾病是糖尿病重要的微血管并发症,目前尚无令人满意的西医治疗方法。中医中药在糖尿病肾病的治疗上具有一定的优势和特色。中医证候是辨证论治的核心,是中医学对疾病的定位及定性,决策了疾病的治疗方案及用药配伍方法,是现代医学探索中医学、联合中西医的关键切入点之一。运用现代医学的研究技术与手段使糖尿病肾病的中医证候逐步实现客观化及量化,对中医药在糖尿病肾病的认识、诊治及提高疗效中至关重要,更有利于推进中医药发展并促进中西医结合。据此,特结合近年来有关糖尿病肾病中医证候的研究概况,依次从其现代研究方法及证候分布情况、证型与理化指标的相关性,以及代谢组学方法在中医证候研究中的应用3方面展开论述,以期为糖尿病肾病的现代医学研究及临床诊疗提供新思路。     

基于现代文献报道的精液不液化所致男性不育的中医证治规律分析

目的:基于现代文献报道分析、总结精液不液化所致男性不育的中医辨证、治疗规律。方法:通过检索CNKI中文期刊全文数据库,获取2002—2012年间发表的与精液不液化所致男性不育症中药有效治疗相关的文献报道,建立数据库,分析涉及的证候及用药分布情况,归纳、总结其辨证、治疗规律。结果:纳入分析的39篇文献中,属辨证论治者19篇,专方治疗者15篇,中西医结合治疗者5篇。1)辨证论治的文献中,共计出现辨证结果16个,排在前五位的是肾阴虚证,下焦湿热证,肾阳虚证,痰瘀阻滞证及肾阴虚、下焦湿热证,但从用药看不单纯是针对所辨证候,而是兼顾了疾病的复杂病机;从运用专方或专方结合西医手段治疗用药情况看,以滋阴清热、凉血化瘀及清热利湿、软坚散结的药味出现频率为高,且均有以淫羊藿为代表的补阳药物的较高出现频率,反映了20个专方的药物构成是针对虚实夹杂的复杂病机的。2)基于辨证的用药及专方用药特点,体现了辨病与辨证相结合及补中有泻,补而不滞,泻中有补,顾护正气的补清相兼与阴中求阳、阳中求阴的阴阳平衡的基本治疗原则和用药特点。结论:本病存在虚实夹杂、错综复杂的病机,虚主要表现为肾阴虚、肾阳虚,实主要表现为下焦的湿热(毒)及瘀血、痰浊;临床治疗时当根据患者的具体情况,明辨其虚与实的孰轻孰重以及阴虚、阳虚和湿热(毒)、瘀血、痰浊的不同与侧重。     

Biologic basis of TCM syndromes and the standardization of syndrome classification

Traditional Chinese medicine (TCM) syndrome is an integral and essential component of TCM theory, and goes beyond philosophic concepts. This article reviews the concept of TCM syndromes and summarizes research findings on the biologic foundation of syndromes. In addition, insight is provided into the promotion of standardization of syndrome classification by enforcing uniformity of TCM terminology, applying standardized diagnostic criteria and operating procedures to minimize subjective effects. Also incorporating interdisciplinary approaches such as data mining and structure modeling, as well as integrating findings on biomarker research are discussed. Consideration is made of the fundamental TCM aspects of syndrome elements, symptoms, phenotypic features, as well as diseases, to form an integral process in the diagnostic path. We believe that better understanding of the biologic basis of the TCM syndrome and standardization of syndrome classification will improve diagnosis, which in turn will enhance therapeutic efficacy and disease prognosis.     

从应激综合征与"基本证候"的联系探讨中西医结合之途径

通过30多年的证候研究,认为中医的基本证候即为应激综合征,即疾病的非特异性症状(特异性症状则为定位证候),二者当为中西医理论上结合的切入点、共同点,据此深入研究可相互补充发展,研发出一条中西医结合之新途径.     

基于临床实践的中医学神的诠释思路

中医学神的复杂性导致了其难以客观地把握和认识。从临床实践角度揭示中医学的神、五脏、脑之间的生理、病理联系,诊断、治疗机制,是科学诠释中医学神的正确可行途径。诠释神的内容体系包括:相关概念如神明、元神、识神、神志等;生理机制如不同层次、不同类型的神在不同脑区的定位、神经调节路径、各种网络、调节物质等;病理机制如从功能性病理到器质性病变、从微观气化到宏观产物、从五脏功能单位到脑区定位等的具体内容和机制;证候学内容如确立以神的症状为辨证要点引领的症状群、揭示证候实质的科学内涵;疗效作用机制如客观准确评价中药方剂对于脑病的防治效果、阐明中药方剂治疗脑病的作用途径、作用方式和作用靶点等。     

朱颖教授治疗月经前后诸证经验总结

月经前后诸证,西医称之为"经前期综合征",一直困扰众多女性,却未被引起重视,现代医学尚无一种统一的、特异的治疗方法,主要是针对症状给予相应的对症用药处理,以纠正水肿,调节植物神经功能和激素疗法为主,并不为广大患者所接受,而中医擅长辨证及从整体观出发进行治疗,根据症候辨证施治是中医治疗月经前后诸证的优势所在,效果甚佳,尤其是经行泄泻,经行乳房胀痛,经行头痛疗效显著,笔者跟随朱颖教授学习后总结如下。     

基于因子分析法探讨顽固性感冒后咳嗽中医证候分布规律

目的:探讨顽固性感冒后咳嗽中医证候分布规律,为该病的辨证论治提供依据。方法:多中心收集319例顽固性感冒后咳嗽患者,采用因子分析法对其症状信息进行中医证候非线性降维研究。结果:在提取的4个公因子中,F1代表气滞痰郁证,F2代表肺脾两虚证,F3代表心肾阴虚证,F4代表风燥犯肺证,并且初步建立了各个证候的辨证要点。结论:采用因子分析法对顽固性感冒后咳嗽进行证候分布规律研究是可行的,可为本病的辨证论治提供依据。