用原位聚合酶链反应方法检测结节病病理组织中博氏疏螺旋…

目的 进一步探讨结节病与博氏疏螺旋体Ｂｂ感染之间的关系。方法 用原位聚全酶链反庆（ＰＣＲ）和免疫荧光方法分别对２３例结节病患者病理活组织检查（活检）组织中Ｂｂ鞭毛ＤＮＡ和５５例血清标本中Ｂｂ抗体进行了检测。结果（１）２３例病理组织中未有１例检测到Ｂｂ鞭毛ＤＮＡ的存在。（２）５５例结节病患者血清中Ｂｂ抗体总阳性率为５５％。明显高于正常人的１０％（Ｐ〈０．００５）。结论Ｂdisplay status     

结节病病人血清抗布氏疏螺旋体抗体测定及其意义

用酶联免疫检测法（ＥＬＩＳＡ）测定４０例患者血清抗布氏疏螺旋体（ＢｏｒｒｅｌｉａＢｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ，简称ＢＢ）抗体水平，其中结节病２３例，非结节病１７例。结节病病人血清抗ＢＢ抗体阳性１８例，占７８．３％，非结节病病人阳性１３例，占７６．５％。初步认为结节病可能是一种自身免疫异常疾病，血清抗ＢＢ抗体可能是机体对某种不明抗原刺激所产生的一种自体抗体，与风湿病、结核病、肿瘤和莱姆病可能存在着交叉反应；但是否有另外一种可能：即ＢＢ抗原本身是一种混合物，不同疾病中的不同抗体与ＢＢ抗原中的不同组分起反应？因此，ＢＢ抗体不能作为诊断结节病的特异性指标。     

聚合酶链反应检测致病性钩端螺旋体DNA的研究

以黄疸出血型ＲＧＡ菌株对所有致病性钩端螺旋体特异的ＤＮＡ克隆片段序列为基础合成聚合酶链反应引物Ｇ１Ｇ２。用该对引物扩增各群型致病性钩端螺旋体微量ＤＮＡ，均获阳性结果，对非致病性钩端螺旋体和其他细菌不扩增。纯化的钩端螺旋体ＤＮＡ５ｐｇ经聚合酶链反应后，琼脂糖凝胶电泳可以目测。用地高辛配基标记的特异性探针可检测到５ｆｇ即相当于１条钩端螺旋体ＤＮＡ量的扩增产物。将该对引物扩增早期钩体病患者血清标本，阳性率为８２％，显著高于ＭＡＴ和ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ阳性率。由此表明，ＰＣＲ技术是灵敏、特异、快速的钩端螺旋体病早期诊断方法，还可用于流行病学调查。     

用聚合酶链反应检测结节病患者标本中的博氏疏螺旋体

用聚合酶链反应检测结节病患者标本中的博氏疏螺旋体连伟，罗慰慈，邱长春，高志强，朱席琳结节病的病因至今不明。１９９１年化冰等应用血清学方法对结节病人的血清标本进行博氏疏螺旋体（Ｂｏｒｒｅｌｉａｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ，Ｂｂ）抗体的测定，发现抗体滴度明显增...     

实时定量聚合酶链反应技术在鉴别结节病与增殖性结核病中的应用

目的利用实时定量聚合酶链反应（PCR）方法检测结节病和结核病病理组织中结核分枝杆菌DNA，以探讨结核分枝杆菌在结节病发病中的作用及本方法在结节病与增殖性结核病鉴别中的应用价值。方法以上海市肺科医院1998年1月至2003年12月住院患者76例为研究对象，其中结核病组30例、结节病组31例和正常对照组（其他疾病）15例，利用定量PCR检测用石蜡包埋的淋巴结或肺组织中结核分枝杆菌DNA，并以胎鼠肺组织作为阴性对照。结果结核病组结核分枝杆菌DNA检出的阳性率（30／30）明显高于结节病组（6／31）和正常对照组（2／15），结节病组与正常对照组结核分枝杆菌DNA检出的阳性率无明显差别。结核病组结核分枝杆菌DNA检出的绝对和相对拷贝数明显高于结节病组和正常对照组，结节病组与正常对照组无明显差别，而胎鼠肺组织中未检出结核分枝杆菌DNA。结论本研究结果不支持结核分枝杆菌感染与结节病的相关性。实时定量PCR法检测石蜡包埋病理组织中结核分枝杆菌DNA可作为鉴别增殖性结核和结节病的方法之一。     

吉林省莱姆病伯氏疏螺旋体外膜蛋白A的初步研究

莱姆病是人兽共患传染病,其病原体为伯氏疏螺旋体（即莱姆病螺旋体）,主要经蜱叮咬动物或人而传播.莱姆病螺旋体有6种主要外膜蛋白,其中外膜蛋白A（OSPA）存在于90%的莱姆病螺旋体,人感染莱姆病螺旋体2～4周后,体内即可出现抗OSPA特异性抗体,持续时间长达数年,并且OSPA与其他微生物的交叉反应性低,这提示其在临床诊断中具有一定的应用价值;同时OSPA具有良好的免疫原性,能够诱导具有高度保护作用的抗体应答,可以用来制备疫苗[1-4].莱姆病螺旋体最初被认为是一个同质的菌种,然而大量的表型和基因型研究揭示了伯氏疏螺旋体菌株间存在明显的差异性.我们应用聚合酶链反应（PCR）技术从吉林省长白山区获得的7株莱姆病螺旋体中扩增出外膜蛋白A的基因,并进行克隆与核酸序列分析.     

伯氏疏螺旋体抗体测定对结节病的诊断价值

对１００例结节病、４０例可疑结节病、４５例肺结核、３９例肺部感染和１７例肺癌患者进行了伯氏疏螺旋体抗体测定，并以６０例健康人作对照，以探讨伯氏疏螺旋体抗体测定对结节病的诊断价值。结果显示结节病的阳性率最高，其余依次为可疑结节病、肺部感染和肺结核，肺癌和健康对照组最低。提示结节病可能是一种与感染因素有关的疾病。     

应用聚合酶链反应检测病原性耶尔森氏菌

目的 用聚合酶链反应检测病原性Yersinia(耶尔森氏菌)属菌。方法 通过病原性Yersinia属菌3对引物，进行基因扩增，并且用凝胶电泳分离，照像。结果 病原性Yersinia属菌得到目的扩增带，非病原性Yersinia属菌及其他细菌没有扩增带。结论 聚合酶链反应方法简便，易行，特异性强，敏感性高。     

伯氏疏螺旋体外膜蛋白C基因在大肠杆菌中的表达

目的　体外表达伯氏疏螺旋体外膜蛋白Ｃ（ＯｓｐＣ） ,以制备基因工程重组抗原用于莱姆病血清学诊断研究。方法　应用聚合酶链反应技术和基因重组技术,从２ 个伯氏疏螺旋体中国分离株基因组ＤＮＡ 中扩增得到ＯｓｐＣ基因,分别克隆到表达载体ＬＫＢ２ 中,在大肠杆菌中进行表达。结果　以天然蛋白形式高效表达了ＯｓｐＣ。扫描分析显示,表达的ＯｓｐＣ 相对分子质量均在２３ ０００ 左右,表达量占菌体总蛋白的３４ ％ ～５０ ％ 。Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 试验证明,重组ＯｓｐＣ 蛋白可与莱姆病患者血清发生特异性反应。结论　重组ＯｓｐＣ 的成功表达为制备新型莱姆病早期诊断试剂奠定了基础     

荧光定量聚合酶链反应技术检测结节病肺泡灌洗液结核分枝杆菌DNA

目的探讨结核分枝杆菌感染在结节病发病中的作用;方法荧光定量聚合酶链反应技术检测22例结节病肺泡灌洗液结核分枝杆菌DNA;结果22例肺泡灌洗液中9例检出结核分枝杆菌;结论结核分枝杆菌感染可能是结节病病因之一。     

聚合酶链反应检测恶性疟原虫的研究

根据编码恶性疟原虫红细胞结合抗原（ＥＢＡ－１７５）的部分ＤＮＡ片段而设计合成寡核苷酸引物并进行多聚酶链反应（ＰＣＲ）以检测体外培养的恶性疟原虫（Ｐ．ｆ．）。扩增产物经琼脂糖凝胶电泳分析，可见扩增出了特异的４９２ｂｐ大小的ＤＮＡ片段，而对间日疟原虫（Ｐ．ｖ．）、食蟹猴疟原虫（Ｐ．ｃ．）、约氏鼠疟原虫（Ｐ．ｙ．）、伯氏鼠疟原虫（Ｐ．ｂ．）及正常人血白细胞ＤＮＡ不能扩增出此片段。本法可检原虫密度下限为２０μｌ血中仅含１０个原虫，具有高敏感性和特异性。     

聚合酶链反应方法检测诱导排痰标本对卡氏肺孢子虫肺炎的诊断价值

目的 评价聚合酶链反应方法检测诱导排痰标本中卡氏肺孢子虫DNA对卡氏肺孢子虫肺炎（PCP）的诊断意义。方法 分别用姬姆萨和六胺银（GMS）两种染色方法和mt-rRNA-PCR方法检测痰液中的卡氏肺孢子虫。结果 化学染色法检测16例临床拟诊PCP的患者痰标本。结果 8例阳性,20例非PCP患者痰标本均为阴性,化学染色方法的敏感性和特异性分别为50％和100％。PCR方法检测16例临床拟诊PCP患者痰液中卡氏肺孢子虫,14例阳性,20例非PCP患者痰标本均为阴性,mt-rRNA-PCR方法的敏感性和特异性分别为88％和100％。结论 姬姆萨和GMS两种细胞化学染色方法联合检测痰标本卡氏肺孢子虫,特异性高,但敏感性偏低。mt-rRNA-PCR检测痰标本中卡氏肺孢子虫DNA方法敏感性高于化学染色法且特异性高,更适于临床应用。     

从全沟硬蜱分离的伯氏疏螺旋体的实验研究

本文报道了从全沟硬蜱分离的一株伯氏疏螺旋体(VL株)实验研究的结果。该株螺旋体同莱姆病螺旋体标准株在超微结构上相近,可以和高稀释度的抗伯氏疏螺旋体抗体发生间接免疫荧光反应。SDS-PAGE电泳结果显示其蛋白组成和标准株的蛋白图谱相同。热变性温度法测定其DNA的G+Cmol％含量为28.1％,和标准株的含量无明显区别,试验结果证实此株螺旋体属伯氏疏螺旋体。     

用聚合酶链反应检测胃活组织标本中的幽门螺杆菌

用聚合酶链反应检测胃活组织标本中的幽门螺杆菌王蔚虹，胡伏莲，贾博琦，王化虹幽门螺杆菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ，ＨＰ）已被证实是慢性Ｂ型胃炎的主要原因，它在十二指肠溃疡病的发病机理中起重要作用，与胃癌的关系也越来越受到学者们的重视。诊断Ｈ...     

用聚合酶链反应技术检测间日疟原虫感染的研究

用５种不同的Ｐ．ｖ# 物分别对间日疟原虫ＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增,在比较和分析各引物ＰＣＲ扩增结果的敏感性和特异性的基础上,筛选出一对根据间日疟原虫线粒体细胞色素Ｃ氧化酶基因序列设计的引物为最佳引物,其检测敏感度可达到第μｌ血中０．２４个疟原虫。向时还对血样本处理方法地改进,从而建立了一种更为简捷、快速、经济且适用于现场应用的间日疟原虫ＰＣＲ检测方法。并利用该方法对２３８例门诊发热病人滤纸干血滴样本进行