大鼠死后心肌肌红蛋白mRNA的含量变化与死亡时间的相关性研究

目的:研究大鼠心肌肌红蛋白(Myoglobin,Mb)mRNA 的降解规律,探讨其与死亡时间(Postmonem interval,PMI)的关系.方法:在25℃±1 ℃,65%～70%温度控制系统下,通过采用RT-PCR技术检测大鼠死后心肌Mb mRNA在体保存和离体保存条件下各相应时间段的含量变化,用SPSS 17.0软件对数据进行分析.结果:大鼠死后心肌Mb mRNA随死亡(离体)时间延长而逐渐降低,且与死亡(离体)时间呈线性关系,但在体保存要比离体保存降解慢.结论:Mb mRNA的降解呈时间相关性,在体与离体条件下的降解规律并不完全一致;Mb mRNA有望用于推断较早期死后经过时间.     

创伤后癫痫大鼠模型海马突触素的变化

目的：探讨突触素在创伤后癫痫海马结构的改变及意义。方法：应用铁离子杏仁体注射制作创伤后癫痫模型，用免疫组织化学和计算机图像分析技术定量分析海马各区突触素在不同时间的改变。结果：模型组损伤侧及对侧齿状回分子层内带突触素免疫反应产物密度逐渐增加，15d达高峰，一直延续到30d。结论：齿状回突触素含量的变化可能是创伤后癫痫发生的分子病理学基础。     

大鼠死后脑组织GAPDH mRNA多位点降解与晚期死亡时间的关系研究

目的 探讨看家基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH) mRNA上不同位点降解速率的规律性及其用于晚期死亡时间推断的可行性.方法 选取在死后较长时间内仍能检测出扩增产物的大鼠脑顶叶皮质,对GAPDH mRNA的6个不同位点进行不同时间点(死后即刻、1 d、5 d、9 d、12 d)的实时荧光定量RT-PCR监测,这些位点依次分布于GAPDH mRNA的5′～ 3′端.结果 用Ct值表示,并将所得数据及其比值(GAPDH mRNA 1～GAPDH mRNA 5与GAPDH mRNA 6的比值)与死亡时间(PMI)进行线性回归分析. 结果各位点GAPDH mRNA均与死后经过时间有相关性,但不同位点的mRNA降解速率不同.GAPDH mRNA 1～GAPDH mRNA 3的斜率为1.577、1.596、1.553,这3个位点的降解速率基本相同.GAPDH mRNA 4～GAPDH mRNA 6的斜率为0.936、0.892、0.829,这3个位点的降解速率基本相同.但后3个位点mRNA的降解速率要慢于前3个位点(P<0 05).以GAPDH mRNA 6作为外标,GAPDH mRNA 1～GAPDH mRNA 3与其的比值同PMI之间有相关性(R2=0 898,0 871,0 879),而GAPDH mRNA 4和GAPDH mRNA 5与其的比值同PMI之间无相关性.结论 同一组织中看家基因GAPDH的不同位点存在降解速率的差异性.选取降解速率慢的靠近3′端的位点作为引物,可能更适于研究晚期死亡时间的推断.     

早期死亡时间推断的法医学研究现状

精确的早期死亡时间推断在法医学领域中是一个非常重要但迄今仍未能完全解决的问题之一。本文笔者综述了近年来国内外学者采用较先进的技术与方法从不同角度对此问题的法医学研究现状。如何将这些研究成果变成可供早期死亡时间推断精确量化的标准与指标，还有待于今后国内外法医学者进一步的努力研究。     

不同死亡方式大鼠骨骼肌羟脯氨酸含量比较

目的 探讨不同死亡方式大鼠骨骼肌羟脯氨酸(HYP)含量变化与死亡时间(PMI)的关系.方法 126只SD大鼠随机分为电击组、窒息组和失血组,用电击、窒息、失血分别将其致死,MRK3型酶标仪测定死后不同时间点(0,24,48,72,96,120 h和168 h)骨骼肌HYP含量.结果 以各组0 h作为对照进行组内t检验,各个时间点HYP含量差异均有统计学意义(P<0.05),随着死亡时间的延长,HYP含量逐渐减少.用死后168 h占0 h骨骼肌HYP含量的百分比表示HYP的分解速度,对上述三个实验组进行x2检验,三组问168 h占0 h骨骼肌HYP含量的百分比差异具有统计学意义(P<0.05),其中电击组最快(45.2%),其次为窒息组(49.7%),失血组最慢(54.9%).结论 不同死亡方式大鼠骨骼肌HYP含量变化与PMI有关.     

晚期死亡时间推断的法医学研究现状与进展

死亡时间推断是法医学鉴定中首先要解决的问题.法医学往往根据死后尸体变化发生的规律推断死亡时间,而晚期(腐败)尸体死亡时间推断在法医学领域中是一个非常重要但迄今仍未能完全解决的问题之一.本文综述了近年来采用较先进的技术与方法从不同角度对此问题的法医学研究现状.如何将这些研究成果变成可供晚期死亡时间推断精确量化的标准与指标,还有待于今后国内外法医学者进一步的努力研究.     

兔急性肺损伤死后肝内血管内皮生长因子时序性变化的研究

目的研究大潮气量机械通气致兔急性肺损伤（ALI）12h后处死，死后肝微血管内血管内皮生长因子（VEGF）的动态变化。方法机械通气（VT60mL／kg，R50次／min）致急性肺损伤后12h处死兔，应用免疫组织化学染色（SABC法）和图像分析系统，观测死后不同时间点肝内微血管内皮细胞内vEGF的动态变化。结果对照组死后即刻肝内微血管内皮细胞胞浆vEGF呈弱阳性染色，死后2h阳性染色程度有轻度增加，但以后随PMI的延长VEGF逐渐减弱，死后18h呈阴性；试验组死后肝内微血管的内皮细胞胞浆VEGF呈强阳性表达，但随着PMI延长逐渐减弱，在死亡后0-24h减弱幅度较小，但21-36h阳性染色程度下降较快，直至死后42h随肝内微血管结构崩解而完全消失。结论大潮气量机械通气致急性肺损伤12h处死后，肝微血管内VEGF的变化在一定的时间段内与死亡时间呈现相关关系。     

早期死亡经过时间的推断

死亡时间的推断是法医病理学家面临的一个重要问题,由于脑死亡在我国尚未立法,因此仍以心脏停止为死亡标准进行死亡时间推断。目前研究最多的是早期死亡经过时间研究的意义最大,本文对早期死后时间的推断的研究及进展,从早期死后现象、尸体化学、超生反应以及法医昆虫学等方面进行综述。     

大鼠脑缺血再灌注后海马CA1区血管内皮细胞生长因子与突触素的关系

目的探讨脑缺血再灌注后海马CA1区是否有血管新生和突触新生,以及二者是否有一致性。方法采用动脉夹箝闭双侧颈总动脉,制作大鼠脑缺血再灌注模型。用免疫组织化学方法观察大鼠脑缺血再灌注后立即处死组、24h组、48h组、3d组、7d组的血管内皮细胞生长因子（VEGF）和突触素（SYP）表达的情况。结果VEGF对照组呈极低表达,缺血再灌注后阳性细胞数增加灰度值增强,48h达峰值,再灌注3d,表达呈下降趋势但仍在较高水平,再灌注7d有少量表达,略高于对照组,差异均有统计学意义（P〈0．05）;SYP缺血再灌注后立即处死组、24h组SYP阳性产物的光密度值低于对照组（P〈0．05）,再灌注48h,光密度值达峰值（P〈0．05）,再灌注3d、7d阳性表达逐渐呈下降趋势,略高于对照组,差异无统计学意义。结论VEGF和SYP早期的高表达有助于保护缺血半暗带,可能与血管新生和突触新生有关,血管新生与突触新生具有一致性。     

彗星试验检测大鼠死后肾脏细胞DNA含量与死亡时间的关系

 【目的】 探讨特定条件下,利用彗星试验测定SD大鼠死后6 ~ 48 h肾脏细胞DNA含量与死亡时间的关系&#65377;【方法】 健康成年雌性SD大鼠,按取材时间随机分为6组,每组3只&#65377;颈椎脱臼法处死动物,置于25.1 ℃(广州地区近5年10月份平均气温)培养箱中,分别于0&#65380;6&#65380;12&#65380;24&#65380;36&#65380;48&#65380;60 h取大鼠肾脏组织,制备单细胞悬液,进行彗星试验,荧光显微成像系统采集图像,采集相关参数(Comet 4.0)并进行Kruskal-Wallis检验&#65377; 【结果】 死后6 ~ 48 h, SD大鼠肾脏细胞DNA碎片随死亡时间延长而增加,尾长在死后各时间点依次呈明显的增长趋势,Oliver尾矩和尾DNA随死亡时间的延长,亦有一定的增长趋势,60 h未能测出&#65377;Kruskal-Wallis检验显示:各时间点彗星尾长均数的差异有高度显著性(P < 0.01);彗星尾矩均数在死后6 h和12 h差异无统计学意义(P > 0.05),24 h和36 h彗星尾矩均数差异有显著性(P < 0.05);尾DNA均数在6 h,12 h,24 h三个时间点差异无显著性(P > 0.05),但与36 h,48 h尾DNA均数的差异均有显著性(P < 0.05)&#65377;【结论】 SD大鼠肾脏细胞DNA降解随死亡时间延长而增加,彗星试验技术为死亡时间推断提供了重要的实验依据&#65377;     

大鼠肾HGPRT mRNA降解与死亡时间关系的研究

〗目的:探讨大鼠死后肾次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)mRNA降解情况与死亡时间(PMI)的关系。方法:40只Wistar大鼠断颈处死,置于20℃温控系统内,利用一步法荧光标记RT-PCR技术检测大鼠肾管家基因HGPRTmRNA在死后即刻至36 h降解情况。结果:在死后即刻至32 h大鼠肾组织均可检测到HGPRTmR-NA,且其扩增产物呈规律性下降趋势。结论:大鼠死亡后肾HGPRTmRNA降解与PMI负相关,可为PMI推断提供一种新的观测指标。     

谷氨酸单钠致大鼠肾上腺组织化学变化的研究

观察谷氨酸单钠（ＭＳＧ）对大鼠肾上腺酶和脂类的影响。动物分为新生期（１１ｄ）、青春期（５２ｄ）、成年期（１００ｄ）３组。用酶组织化学方法显示琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、３ β 羟甾脱氢酶（３ β ＨＳＤＨ）、葡萄糖 ６ 磷酸酶（Ｇ ６ Ｐａｓｅ）、葡萄糖 ６ 磷酸脱氢酶（Ｇ ６ ＰＤＨ）、非特异性酯酶（ＮｓＥ）、三磷酸腺苷酶（ＡＴＰａｓｅ），用油红Ｏ法显示脂类。用半定量和显微分光光度计进行定量测定。结果：１１ｄ，ＭＳＧ组上述指标高于对照组；而５２ｄ和１００ｄ，ＭＳＧ组的ＬＤＨ高于对照组，其他指标都低于对照组     

实验性脾虚证大鼠肾上腺形态学与细胞化学研究

对实验性脾虚证和对照组大鼠的肾上腺进行常规组织学与细胞化学的对比观察。结果显示：脾虚组肾上腺球状带明显变窄;各带细胞染色浅,胞质呈空泡状;细胞间隙变宽。细胞化学观察显示肾上腺皮质与髓质琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、碱性磷酸酶（ＡＬＰ）、酸性磷酸酶（ＡＣＰ）、三磷酸腺苷酶（ＡＴＰａｓｅ）、３－β－羟甾脱氢酶（３－β－ＨＳＤＨ）、糖原（ＰＡＳ）均有不同程度的改变,表现明显的有ＡＣＰ和ＡＴＰａｓｅ。研究结果表明脾虚证不仅表现为消化系统功能低下,肾上腺也有明显的病理改变。     

死后脾组织mRNA降解程度与死亡时间的关系

目的 探讨小白鼠死后脾组织GAPDH mRNA和β-actin mRNA降解情况与死亡时间(PMI)的关系.方法 24只NIH小白鼠断颈处死,置于25℃温控系统内,利用两步法RT-PCR技术和核酸蛋白测定仪定量cDNA方法检测小白鼠脾GAPDH mRNA和β-actin mRNA在死后即刻至72 h降解情况.结果 在25℃温控系统内的小白鼠死后即刻至48 h脾组织均可检测到GAPDH mRNA和β-actin mRNA,且其扩增产物呈规律性下降趋势.结论 小白鼠死亡后脾组织GAPDH mRNA和β-actin mRNA降解程度与PMI负相关,可为PMI推断提供一种新的观测指标.     

季节与生殖相关性实验研究

目的　“肾主生殖 ,与冬相应” ,是中医藏象理论的重要组成部分。本实验目的是探索生殖季节性变化的生理机制。方法　本实验采用大鼠松果体摘除模型 ,运用放射配体结合分析 (RBA)方法测定冬夏季节大鼠睾丸细胞膜黄体生成素 (LH)受体变化。结果　正常组睾丸细胞膜LH受体最大结合量和结合力在冬夏季节存在明显差异 (P <0 0 1) ,表现出冬高夏低的变化 ;正常组和模型组之间睾丸细胞膜LH受体数目存在显著差异 ;模型组睾丸细胞膜LH受体最大结合量和结合力在冬夏季节不存在明显差异。结论　季节因素对大鼠睾丸LH受体有调节作用 ;松果体可能是生殖与季节联系的中介。     

正常肾上腺磁共振成像表现及肾上腺肿瘤磁共振成像诊断

用PhilipsGyroscan0.5Tesla超导磁共振仪检查30名正常人肾上腺、8例肾上腺良性肿瘤及1例肾上腺癌。结果：正常双侧肾上腺的高度和宽度均为2.5～3.5cm，厚度为0.8～1.08cm。横断位右侧大多数呈倒置Y型，少数呈V型。左侧大多数呈三角型，少数呈Y型。冠状位双侧同正常解剖学所见一致。正常肾上腺信号强度：T_1加权像(T_1WI）同肾髓质；质子像与肝相同；T_2WI与肌肉相同。肾上腺良性肿瘤表现：T_1WI信号均匀减低，T_2WI信号均匀增高，肿瘤未破坏脂肪包膜。肾上腺癌的表现：T_1WI信号不均匀减低，T_2WI信号不均匀增高，穿破脂肪包膜。     

小白鼠死后脾组织RNA降解程度与死亡时间关系的研究

目的探讨小白鼠死后脾组织GAPDH mRNA和β-actin mRNA降解情况与死亡时间(PMI)的关系。方法 48只NIH小白鼠安乐死处死,分别置于10℃和25℃温控系统内,利用两步法RT-PCR技术和核酸蛋白测定仪定量cDNA方法检测小白鼠脾GAPDH mRNA和β-actin mRNA在死后即刻至72h降解情况。结果在10℃温控系统内的小白鼠死后即刻至72h脾组织均可检测到GAPDH mRNA和β-actin mRNA,且其扩增产物呈规律性下降趋势。25℃温控系统内的小白鼠死后即刻至48h脾组织均可检测到GAPDH mRNA和β-actin mRNA,且其扩增产物呈规律性下降趋势。结论小白鼠死亡后脾GAPDH mRNA和β-actin mRNA降解与PMI负相关,可为PMI推断提供一种新的观测指标。     

盐酸阿米替林在大鼠体内死后的分布研究

目的观察并研究盐酸阿米替林在大鼠体内死亡后的分布。方法建立盐酸阿米替林的中毒致死大鼠模型,大鼠经2倍LD50（39．2mg／kg）剂量盐酸阿米替林灌胃后,观察中毒症状,死亡后取脑、心、肺、肝、脾、肾、肌肉（左腿）、心血、周围血等组织、脏器和体液,薄层色谱扫描法检测其中盐酸阿米替林含量。结果大鼠在灌药后3～5min即出现抽搐症状,间隔3min抽搐1次,每次抽搐持续2～4秒,2h内死亡。2倍LD50剂量盐酸阿米替林灌胃后,各脏器阿米替林浓度由高向低分别为肺〉肝、肌肉、肾、脾〉心、脑、心血、外周血。结论使用薄层色谱分析法检测盐酸阿米替林,其方法简便、快速,中毒死亡大鼠肺、肝、肾、脾和肌肉中盐酸阿米替林含量较高,可作为疑似阿米替林中毒案件毒物分析的检材。     

高血压性左心室肥厚与QTc间期关系

研究了４１例高血压性左心室肥厚患者超声心动图左心室舒张末期内径（ＬＶＤｄ）和心电图ＱＴｃ间期的关系。结果显示：①左心室肥厚者ＱＴｃ间期延长（ｘ２＝１１．７０１，Ｐ＜０．０１），②左心室肥厚程度与ＱＴｃ间期延长呈直线性相关关系（ｒ＝０．４０，Ｐ＜０．０１）。     

链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠胃底腺中壁细胞的体视学研究

采用HE染色显示壁细胞，结合生物体视学技术对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠在胃底腺中的壁细胞进行了研究。结果显示：糖尿病状态的早期，胃底腺腺体上部壁细胞的体密度显著增加，而数密度却明显减少；腺体下部壁细胞的体密度和面密度均无显著变化，但数密度却显著地减少。提示糖尿病状态下，壁细胞数量显著减少，但体积却明显增大。根据正常情况下壁细胞的细胞动力学变化及上述实验结果，认为大鼠胃底腺峡部的干细胞向壁细胞分化成熟的功能在胰岛素缺乏的情况下受到一定程度的抑制，而这种功能的抑制可能是糖尿病状态下易出现目粘膜萎缩和胃酸分泌减少的重要原因之一。