川芎嗪对儿茶酚胺诱导大鼠心肌损伤时Bcl-2和Fas蛋白表达的影响

目的 :观察川芎嗪对儿茶酚胺诱导大鼠心肌损伤时心肌细胞Bcl 2和Fas蛋白表达的影响。方法 :采用皮下多点注射异丙肾上腺素 (ISO ,5mg·kg- 1)每天 1次 ,连续 3d ,诱导大鼠心肌损伤 ,采用免疫组化方法检测Bcl 2和Fas蛋白的水平 ,并利用图像分析系统分析蛋白阳性表达区域平均光密度值。结果 :损伤组和川芎嗪保护组心肌细胞Bcl 2蛋白表达较对照组均显著升高 (P <0 .0 1 ) ,损伤组Fas蛋白水平较对照组也显著升高 (P <0 .0 1 ) ,川芎嗪保护组的Fas蛋白水平较损伤组显著下降 (P <0 .0 1 ) ,且Bcl 2 Fas比值也较损伤组和对照组明显增加。川芎嗪保护组的病理损伤程度明显低于损伤组。结论 :川芎嗪可抑制儿茶酚胺诱导的心肌损伤时心肌细胞中促凋亡基因Fas的表达 ,提高心肌细胞中Bcl 2 Fas比值     

异丙肾上腺素对大鼠心肌细胞凋亡相关基因表达的影响

目的　研究异丙肾上腺素(isoprenaline, Iso)诱导大鼠急性心肌缺血与心肌细胞凋亡相关基因表达的关系。方法　sc大剂量Iso建立大鼠急性心肌缺血模型。RT-PCR法检测凋亡相关基因Fas,CPP32,Bcl-2和Bax在心肌的表达。并用同样方法,观察苦豆碱(aloperine, Alo, 20 mg.kg^-1)和普萘洛尔(propranolol, Prop, 2 mg.kg^-1)对急性心肌缺血大鼠心肌细胞凋亡相关基因表达的影响。结果　急性心肌缺血模型大鼠心肌的Fas,CPP32和Bcl-2基因表达显著增加,Bax变化不明显;Alo和Prop能降低缺血心肌中Fas和CPP32基因的表达,增加Bcl-2基因的表达,且Prop对Bax表达有下调作用。结论　sc大剂量Iso可诱导大鼠心肌细胞凋亡相关基因异常表达;Alo和Prop对该模型大鼠心肌相应基因的异常表达亦有影响。     

参乌冠心颗粒剂对大鼠实验性缺血心肌细胞凋亡及Fas、Bcl-2蛋白表达的影响

目的:探讨中药复方参乌冠心颗粒剂防治冠心病心肌缺血的分子作用机制。方法采用异丙肾上腺素连续多点皮下注射,复制大鼠心肌缺血动物模型。运用DNA末端标记(TUNEL)法,观察复方参乌冠心颗粒剂对缺血损伤大鼠心肌细胞凋亡的影响,并运用免疫组化的方法观察其对细胞凋亡相关基因Fas、Bcl-2蛋白表达的影响。结果①参乌冠心颗粒剂有明显的抗心肌缺血作用。②参乌冠心颗粒剂可显著下调Fas基因的蛋白表达,上调Bcl-2基因的蛋白表达,明显抑制和阻断心肌细胞发生凋亡。③参乌冠心颗粒剂可能通过抑制和阻断心肌细胞过度凋亡的发生而起到保护心肌的作用。结论通过调节缺血心肌Fas、Bcl-2基因的蛋白表达从而抑制和阻断细胞凋亡的发生,说明中药复方参乌冠心颗粒剂具有防治冠心病心肌缺血损伤的分子作用机制。     

牛磺酸对心肌缺血损伤细胞凋亡与Fas/FasL基因表达变化的影响

目的探讨大鼠心肌缺血损伤心肌细胞凋亡与Fas/FasL基因表达变化及牛磺酸对其的影响。方法结扎冠状动脉制备心肌缺血模型,转移酶介导脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记法检测心肌凋亡细胞,免疫组织化学法检测Fas/FasL蛋白水平,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法分析Fas基因mRNA表达变化。结果心肌缺血后心肌细胞凋亡指数、Fas/FasL蛋白阳性染色细胞指数及Fas基因的mRNA表达水平均明显增加,心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量升高,Ca2+-ATP酶活性降低。牛磺酸能明显降低心肌细胞凋亡指数,Fas基因mRNA表达及Fas/FasL蛋白阳性染色细胞指数,抑制心肌组织MDA的生成,提高Ca2+-ATP酶活性。结论牛磺酸对心肌缺血的心肌细胞凋亡与Fas/FasL基因表达水平增高有较好的拮抗作用。     

氯氨酮对大鼠心肌缺血再灌注心肌细胞凋亡和Fas蛋白、Bcl-2蛋白表达的影响

目的:探讨氯胺酮作用下大鼠实验性心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡与Fas及Bcl-2蛋白表达的变化及与心肌组织损伤的关系,并分析心肌组织病理学损伤程度。方法:以穿线结扎或松扎左冠状动脉制备大鼠心肌缺血再灌注模型。32只大鼠随机分成假手术组(假手术4.5 h)、缺血再灌注组(缺血30min、再灌注4 h)、低剂量氯胺酮+缺血再灌注组(缺血30min、再灌注4h)及高剂量氯胺酮+缺血再灌注组(缺血30min、再灌注个4 h)。以缺口末端标记法检测心肌细胞凋亡的变化,S-P免疫组化法分别检测Fas与Bcl-2蛋白水平变化,做病理组织切片检查心肌损伤情况。结果:心肌缺血再灌注后心肌细胞凋亡指数及Fas蛋白阳性染色指数与Bcl-2蛋白阳性染色指数均增加,氯氨酮可减少心肌凋亡,减少Fas和Bcl-2蛋白阳性细胞表达;心肌缺血再灌注后心肌组织呈大小不一的灶性坏死,坏死周围有炎性细胞浸润,氯胺酮作用后坏死减轻,低剂量氯胺酮作用更明显。结论:心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡、Fas基因的蛋白与Bcl-2蛋白表达量均增加,氯氨酮可减少心肌凋亡,减少细胞Fas和Bcl-2蛋白阳性表达,从而减轻心肌损伤,且低剂量氯氨酮作用更明显。     

丹参酮对实验性心肌肥厚大鼠凋亡相关因子表达的影响

目的探讨丹参酮对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞肥大的影响。方法采用皮下注射异丙肾上腺素造成心肌肥厚大鼠模型,通过免疫组织化学方法观察丹参酮对肥大心肌细胞凋亡相关因子Fas、Bcl-2表达的影响。结果异丙肾上腺素组大鼠心肌肥厚,Fas、Bcl-2基因表达增加（P〈0.05）,加入丹参酮干预后,Fas基因表达减弱（P〈0.05）,Bcl-2基因表达增加（P〈0.05）。结论丹参酮具有保护心肌,预防心肌肥厚的作用,其机制可能与抑制Fas基因表达,增加Bcl-2基因表达有关。     

蜂胶总黄酮对大鼠心肌缺血再灌注损伤Fas、Bax和Bcl-2基因蛋白表达的影响

目的研究蜂胶总黄酮对大鼠心肌缺血再灌注损伤相关基因蛋白表达的影响。方法建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,研究Fas、Bax、Bcl2、p53基因蛋白表达。结果缺血30min,再灌注48h后,模型组和蜂胶总黄酮组的大鼠心肌Fas基因蛋白表达均明显高于假手术组,差异有显著性;且蜂胶总黄酮组的Fas表达均低于模型组,证明蜂胶总黄酮对Fas表达具有明显的抑制作用。Bax基因的蛋白表达:模型组与蜂胶总黄酮组均高于假手术组,但蜂胶总黄酮组与模型组之间并无差异。Bcl2基因蛋白的表达:模型组与蜂胶总黄酮组均高于假手术组,其中蜂胶总黄酮高剂量组与假手术组比较差异有显著性,而其它各组间比较差异无显著性。p53基因蛋白表达:各组切片经免疫组化反应后,均未见明显的p53基因蛋白表达迹象。结论蜂胶总黄酮通过抑制Fas蛋白表达,上调Bcl2蛋白表达而减少了心肌细胞的凋亡,保护了心肌组织的结构与功能。     

硝酸甘油对持续心肌缺血模型动物心肌细胞凋亡及凋亡相关基因的影响

目的：研究硝酸甘油对持续心肌缺血心肌细胞凋亡以及对凋亡相关基因的影响。方法：采用大鼠动物模型，用原位标记与半定量分析检测心肌细胞凋亡程度；以S-P免疫组化分别检测Fas基因蛋白。结果：持续心肌缺血组与假手术组相比，心肌细胞凋亡程度明显增加，Fas-L蛋白、Bcl-2蛋白的表达都有明显增高，差异有极显著性（P〈0．01）；硝酸甘油组与持续心肌缺血组比较，心肌细胞凋亡程度明显降低，差异有极显著性（P〈0．01）；Bcl-2蛋白表达增高，差异有显著性（P〈0．05）、Fas—L蛋白表达降低，差异有显著性（P〈0．05）。结论：硝酸甘油能够减轻持续心肌缺血过程中心肌细胞凋亡程度。     

红景天苷心脏保护药理作用的研究进展

红景天苷通过促进心肌细胞肌浆网释放Ca²⁺,增强心肌收缩力,又可上调肌浆网钙泵的表达和下调钙调神经磷酸酶的表达,促进Ca²⁺返回肌浆网,阻滞钙超载引起的心肌损伤,有利于改善心功能。红景天苷通过抗氧化和抗炎作用,抑制心脏脂质过氧化反应,提高心脏组织的抗氧化酶活性,抑制炎性细胞因子表达和线粒体通透性转换孔开放,阻滞心肌细胞凋亡;也可通过上调缺氧诱导因子和血管内皮生长因子表达,促进缺血心肌血管形成,改善心肌缺血;还通过上调PGC-1α-NRF-1/NRF-2表达的通路,改善心肌线粒体呼吸功能,最终产生心脏保护作用。基于上述作用机制,红景天苷可对抗缺氧、缺血、缺血再灌注、力竭运动、化学品、生物毒素等引起的心脏损伤。     

异丙酚和硫喷妥钠对大鼠心肌细胞钙离子移动的影响

目的　观察不同浓度异丙酚和硫喷妥钠对氯化钾、异丙肾上腺素和咖啡因诱发的大鼠心肌细胞钙离子移动的影响 ,探讨其心肌抑制作用的机制。方法　用Fluo 3AM钙荧光指示剂染色培养的大鼠心肌细胞 ,在激光共聚焦显微镜下动态观察用药前和使用临床麻醉诱导峰浓度和 5倍诱导峰浓度的异丙酚 (5 0、2 5 0 μmol·L-1)和硫喷妥钠 (10 0、5 0 0μmol·L-1)后 ,氯化钾、异丙肾上腺素和咖啡因诱发的细胞内钙离子荧光强度的变化。结果　诱导峰浓度的异丙酚和硫喷妥钠减弱氯化钾和异丙肾上腺素诱发的钙离子跨膜内流 ,细胞内钙荧光强度的峰值下降 ,与对照组相比差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,硫喷妥钠的抑制作用较异丙酚大。 5倍诱导峰浓度的异丙酚和硫喷妥钠使钙离子跨膜内流进一步降低。但两种浓度的异丙酚和硫喷妥钠对咖啡因诱发的细胞肌浆网内储存钙的释放、钙荧光强度的升高均无影响 (P >0 0 5 )。结论　异丙酚和硫喷妥钠呈浓度依赖地抑制电压门控和受体门控性钙通道的开放 ,钙离子跨膜内流 ,降低兴奋收缩耦联时细胞内钙离子浓度 ,这可能是其心肌抑制作用的原因之一 ,而对肌浆网的功能无明显影响     

雷米普利对实验性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡和Fas Fas配体基因表达的影响

目的探讨实验性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡和心肌组织Fas、Fas配体(FasL)蛋白及信使核糖核酸(mRNA)表达的变化及血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)干预的影响及意义。方法将30只健康Wistar大鼠,随机分为假手术组、慢性心力衰竭组和雷米普利组各10只。通过缩窄Wistar大鼠腹主动脉建立慢性心力衰竭模型,以雷米普利进行干预,对照观察血流动力学、心肌细胞凋亡、心肌组织Fas、FasL蛋白及其mRNA表达的变化。结果与假手术组相比,慢性心力衰竭组左心室舒张末压、心率显著升高(P<0.01);收缩压、舒张压、平均动脉压、左心室收缩压、左心室内压最大收缩率、左心室内压最大舒张率显著降低(P<0.01)。雷米普利组舒张压、左心室收缩压、左心室舒张末压、心率显著低于慢性心力衰竭组(P<0.01),左心室内最大收缩率、左心室内最大舒张率显著高于慢性心力衰竭组(P<0.01)。慢性心力衰竭组心肌细胞凋亡指数、心肌组织Fas、FasL蛋白及其mRNA表达水平显著低于慢性心力衰竭组(P<0.05)。结论慢性心力衰竭的发生、发展过程中有心肌细胞凋亡的变化及Fas/FasL系统的参与;心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡指数、心肌组织Fas、FasL蛋白及其mRNA表达水平增高,雷米普利长期干预慢性心力衰竭,能够降低细胞凋亡及Fas、FasL基因的表达,可能与其减少Fas/FasL系统介导的细胞凋亡的发生、改善心功能有关。     

M3受体与大鼠缺血性心肌细胞凋亡关系的研究M3受体与大鼠缺血性心肌细胞凋亡关系的研究

目的观察M₃受体对大鼠缺血性心肌细胞凋亡的作用及其机制。方法结扎大鼠左冠状动脉前降支建立急性心肌缺血模型,给予M₃受体激动剂胆碱或阻断剂4DAMP进行干预,观察M₃受体对其的影响。结果缺血前15 min iv胆碱10 mg·kg^-1可提高血清超氧化物歧化酶(SOD)活力,降低丙二醛(MDA)含量,减少凋亡细胞的数量(P<0.01),并可增加Bcl-2表达,减少Fas表达。预先5 min iv 4DAMP 0.12 mg·kg^-1阻断心肌M₃受体可逆转胆碱的作用。结论激动M₃受体对结扎大鼠冠状动脉诱导的心肌损伤有保护作用,其机制可能与调节Bcl-2和Fas表达从而抑制心肌细胞凋亡有关。     

Allopurinol modulates reactive oxygen species generation and Ca2+ overload in ischemia-reperfused heart and hypoxia-reoxygenated cardiomyocytes

Myocardial oxidative stress and Ca2+ overload induced by ischemia-reperfusion may be involved in the development and progression of myocardial dysfunction in heart failure. Xanthine oxidase, which is capable of producing reactive oxygen species, is considered as a culprit regarding ischemia-reperfusion injury of cardiomyocytes. Even though inhibition of xanthine oxidase by allopurinol in failing hearts improves cardiac performance, the regulatory mechanisms are not known in detail. We therefore hypothesized that allopurinol may prevent the xanthine oxidase-induced reactive oxygen species production and Ca2+ overload, leading to decreased calcium-responsive signaling in myocardial dysfunction. Allopurinol reversed the increased xanthine oxidase activity in ischemia-reperfusion injury of neonatal rat hearts. Hypoxia-reoxygenation injury, which simulates ischemia-reperfusion injury, of neonatal rat cardiomyocytes resulted in activation of xanthine oxidase relative to that of the control, indicating that intracellular xanthine oxidase exists in neonatal rat cardiomyocytes and that hypoxia-reoxygenation induces xanthine oxidase activity. Allopurinol (10 microM) treatment suppressed xanthine oxidase activity induced by hypoxia-reoxygenation injury and the production of reactive oxygen species. Allopurinol also decreased the concentration of intracellular Ca2+ increased by enhanced xanthine oxidase activity. Enhanced xanthine oxidase activity resulted in decreased expression of protein kinase C and sarcoendoplasmic reticulum calcium ATPase and increased the phosphorylation of extracellular signal-regulated protein kinase and p38 kinase. Xanthine oxidase activity was increased in both ischemia-reperfusion-injured rat hearts and hypoxia-reoxygenation-injured cardiomyocytes, leading to reactive oxygen species production and intracellular Ca2+ overload through mechanisms involving p38 kinase and extracellular signal-regulated protein kinase (ERK) via sarcoendoplasmic reticulum calcium ATPase (SERCA) and protein kinase C (PKC). Xanthine oxidase inhibition with allopurinol modulates reactive oxygen species production and intracellular Ca2+ overload in hypoxia-reoxygenation-injured neonatal rat cardiomyocytes.     

牛磺酸对缺血大鼠心肌腺苷三磷酸酶的影响

目的观测牛磺酸（ｔａｕｒｉｎｅ，Ｔａｕ）对心肌缺血损伤时心肌肌膜和线粒体ＡＴＰ酶活性的影响。方法以异丙肾上腺素（Ｉｓｏ，５ｍｇ·ｋｇ－１）诱导心肌缺血损伤模型，用定磷法分别测定Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶、Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶及Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性。结果与对照组比较，缺血组心肌肌膜和线粒体Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶、Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶及Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性均降低，在注射ＩＳＰ前３０ｍｉｎ腹腔注射Ｔａｕ（２００ｍｇ·ｋｇ－１），则上述酶活性未见显著性变化。结论Ｔａｕ具有拮抗缺血大鼠心肌肌膜及线粒体Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶、Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶及Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性降低的细胞保护作用     

西红花酸对去甲肾上腺素所致原代培养心肌细胞能量代谢和凋亡的影响

目的研究西红花酸对去甲肾上腺素(NE)诱导原代培养心肌细胞能量代谢障碍和细胞凋亡的保护作用。方法1 μmol·L^-1 NE损伤原代培养的心肌细胞,检测细胞培养上清液的LDH、心肌细胞ATPase、线粒体琥珀酸脱氢酶(MSDH)的活力,线粒体膜电位的变化,流式细胞仪检测细胞凋亡,观察西红花酸保护作用。结果模型组细胞培养上清液LDH增加,心肌细胞MSDH和ATPase的活力降低,线粒体膜电位降低,心肌细胞凋亡率增加。西红花酸明显降低培养上清液LDH增加,提高MSDH和ATPase的活力、线粒体膜电位的水平,对心肌细胞的凋亡具有明显的保护作用。结论西红花酸对NE所致的心肌细胞能量代谢障碍和凋亡具有明显的保护作用。     

川芎嗪减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤后心肌细胞凋亡及其机制研究

目的：观察川芎嗪预处理对在体大鼠心肌缺血再灌注所致心肌细胞凋亡的影响,探讨其可能机制。方法40只雄性SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、川芎嗪组、川芎嗪＋渥曼青霉素组和渥曼青霉素组。结扎左前降支35 min,再灌120 min建立缺血再灌注模型。假手术组前降支近端穿线但不结扎。用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的原位缺口末端标记法（TUNEL）检测心肌细胞凋亡,酶联免疫吸附测定法测定缺血心肌组织半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（caspase3）活性,实时荧光定量PCR法测定缺血心肌Bax和Bcl?2 mRNA的表达水平,Western blot法检测心肌磷酸化Akt的表达。结果缺血再灌注增加心肌细胞凋亡指数及caspase 3活性,川芎嗪预处理明显降低心肌细胞凋亡指数及caspase 3活性,降低Bax mRNA的表达水平,增加Bcl?2 mRNA和磷酸化Akt的表达水平,渥曼青霉素显著抑制上述指标的变化并取消了川芎嗪所致的磷酸化Akt表达水平的增加。结论川芎嗪能减轻在体大鼠心肌缺血再灌注所致心肌细胞凋亡,PI3K／Akt信号通路可能参与这一保护作用。