新生家兔主动脉旁体嗜铬组织脑内移植治疗黑质纹状体损伤的研究

本实验将新生家兔主动脉旁体嗜铬组织移入帕森氏病模型大鼠脑内,观察了对黑质纹状体损伤金行为的纠正情况及移植物的生长状况。47只经6-羟多巴胺损毁一侧黑质的大鼠(帕金森氏病模型鼠)分为5组:1.一点移植组(12只),4小块(每块约0.3mm~3)主动脉旁体组织移入尾壳核头部一个点;2.两点移植组(12只),在尾壳核头部选两个点,每点各移入4小块主动脉旁体组织;3.移植对照组(7只),等量的坐骨神经组织块移入尾壳核头部;4.非移植对照组(8只),仅做同样的手术而不植入任     

丙酸睾丸酮早期处理对大鼠脑内5-羟色胺及其转运体的影响

目的:观察丙酸睾丸酮(TP)早期处理对大鼠脑内5-羟色胺(5-HT)及其转运体(SERT)的影响.方法:对生后第7天(PND7)的雄性Wistar乳鼠皮下注射TP至生后第21天(PND21),利用免疫组织化学和免疫印迹法观察生后第49天(PND49)实验大鼠中缝背核和尾壳核5-HT及SERT表达的变化.结果:免疫组织化学结果显示TP早期处理增加大鼠中缝背核和尾壳核处5-HT和SERT的免疫反应强度,中缝背核和尾壳核5-HT的灰度值比对照组分别降低了11.38%和7.90%,SERT的灰度值比对照组分别降低了6.79%和8.81%;免疫印迹结果显示TP早期处理增加大鼠脑内中缝背核和尾壳核处SERT的表达,中缝背核和尾壳核处SERT与β-actin相对吸光度比值比对照组分别升高了86.06%和26.29%.结论:TP早期处理影响大鼠脑内5-HT能神经,导致中缝背核和尾壳核5-HT和SERT增加.     

谷氨酸钠、γ-氨基丁酸注入黑质对大鼠尾壳核二价金属离子转运体1和膜铁转运辅助蛋白表达的影响

目的 探讨谷氨酸、γ-氨基丁酸(GABA)对大鼠尾壳核铁代谢的影响.方法 大鼠立体定位后,向大脑黑质分别注射谷氨酸钠(MSG)和GABA,观察大鼠尾壳核铁含量,黑质多巴胺能神经元酪氨酸羟化酶(TH)的变化以及尾壳核的无铁反应元件结构的二价金属离子转运体1(DMT1-IRE)、膜铁转运辅助蛋白(HP)含量的变化.结果 与对照组相比,MSG组大鼠尾壳核铁含量显著增加,GABA组与对照组相比没有显著差异;谷氨酸钠组和GABA组大鼠黑质TH免疫阳性细胞平均吸光度(AA)与对照组相比均无显著差异;与对照组相比,谷氨酸钠组大鼠尾壳核DMT1-IRE表达均显著增加,而GABA组DMT1-IRE表达有明显降低;谷氨酸钠组大鼠尾壳核HP表达显著降低,GABA组HP表达显著增高.结论 黑质的谷氨酸和GABA可能通过影响尾壳核DMT1-IRE和HP的表达影响纹状体尾壳核的铁代谢.     

微囊化人肾上腺嗜铬细胞瘤细胞在人工脑脊液中的生长和分泌特征

背景：微囊化细胞是目前常用的免疫隔离工具,可以解决细胞蛛网膜下腔移植存在的免疫排斥问题,然而微囊化对人嗜铬细胞瘤细胞分泌功能的影响尚不明确。 目的：观察微囊化的人嗜铬细胞瘤细胞在人工脑脊液中的生长及分泌功能。 方法：取手术切除的人嗜铬细胞瘤组织,采用连续分次胶原酶消化法分离人嗜铬细胞瘤细胞,并用人工脑脊液进行原代细胞培养。用海藻酸盐-聚赖氨酸-海藻酸盐微囊包裹原代培养的人嗜铬细胞瘤细胞,用倒置相差显微镜观察人工脑脊液中的微囊化和非微囊化的人嗜铬细胞瘤细胞的形态;用CCK-8试剂盒测定人嗜铬细胞瘤细胞的增殖情况;用Elisa试剂盒检测微囊化和非微囊化的人嗜铬细胞瘤细胞分泌的去甲肾上腺素和甲硫氨酸脑啡肽浓度。 结果与结论：微囊化的人嗜铬细胞瘤细胞镜下呈悬浮、聚集生长状态,细胞突起观察不明显。与非微囊化组相比,微囊化人嗜铬细胞瘤细胞增殖较快,甲硫氨酸脑啡肽和去甲肾上腺素的分泌量较多。但不同病例来源的细胞,甲硫氨酸脑啡肽和去甲肾上腺素的分泌量差异较大。提示微囊化的人嗜铬细胞瘤细胞在人工脑脊液中具有良好的生长和分泌功能,并且不同病例来源的人嗜铬细胞瘤细胞可以相对稳定地分泌甲硫氨酸脑啡肽和去甲肾上腺素。中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程     

大白鼠丘脑—纹状体投射——HRP法研究

大白鼠尾壳核注射HRP后,在丘脑板内核群中有较多的标记细胞,并有一定的定位关系。尾壳核头部背内侧注射HRP时,标记细胞主要在板内核的背侧部;尾壳核头部腹外侧注射HRP时,标记细胞主要在板内核的腹侧部。除板内核群外,丘脑腹前核、腹外侧核及腹内侧核均有较多纤维投射到尾壳核。丘脑背内侧核和前核群可能发出少量纤维投射到尾壳核。     

异位嗜铬细胞瘤的CT诊断价值

目的探讨异位嗜铬细胞瘤的CT诊断价值,指导临床手术,降低手术风险。方法回顾性分析10例异位嗜铬细胞瘤的临床资料及CT表现,并复习文献。结果10例异位嗜铬细胞瘤术前均进行CT平扫及增强检查,8例位于腹主动脉旁,1例位于膀胱,1例位于后纵隔。平扫肿瘤呈类圆形或椭圆形,伴有囊变、坏死及钙化密度常不均匀;动脉期明显强化,病灶内或周围见增粗迂曲血管影;实质期病灶强化程度稍下降或持续强化。结论 CT检查对异位嗜铬细胞瘤的定位、定性有重要价值,并对手术方案制定及术后的随访有重要意义。     

尾核向大脑皮层和丘脑非特异核群的纤维投射

本实验破坏家兔尾核头部,用Nauta和Glees法显示轴索和终末溃变,观察尾核向大脑皮层和丘脑非特异核群的纤维投射,所得结果如下: 尾核头部的纤维投射到大脑额部皮层(主要是前中央区)和边缘区皮层,并终止于皮层的各层。尾核头部的纤维投射到中央中核和束旁核等丘脑非特异核群。根据上述结果,我们认为尾核向大脑皮层和丘脑非特异核群的纤维投射,乃是非特异传导系统的径路之一;尾核不仅属于锥体外系,也是非特异系统的组成部分;尾核参与电针镇痛过程是有形态学根据的。     

黄胸鹀主动脉体的结构及其神经供给

在人和哺乳动物的主动脉与肺动脉之间的结缔组织内,存在着一种由类上皮细胞组成的结构。这种结构首先由Penitschka所发现,它先后被这位捷克学者命名为主动脉嗜铬体和心上主动脉嗜铬体(1930,1931)。在鸟类,与之相当的结构,曾经由Palme和Nonidez研究过。前者描绘过一只黄鹀(Emberiza citrinella)的主动脉壁内的相似结     

人骨髓造血细胞经腹腔内和尾静脉注射移植SCID鼠的研究

目的 :比较腹腔内与尾静脉注射对SCID鼠进行异种骨髓移植的体内植入能力及GVHD的发生情况 ,为异种骨髓移植构建银屑病动物模型奠定基础。方法 :密度梯度离心法分离正常人骨髓单个核细胞 (BMMNC) ,以 4× 10 7的剂量分别经尾静脉和腹腔注射移植于经γ射线预照射的SCID鼠 ,移植后观察GVHD反应及外周血白细胞恢复动力学 ,并采用流式细胞术检测小鼠外周血及骨髓中人源性CD4 5 + 细胞比例 ,观察嵌合状态。结果 :单纯尾静脉注射移植组 ,在移植后 2周即出现明显GVHD症状 ,12周仅存活 1例 ;尾静脉注射结合CsA +MTX处理组 ,个别小鼠出现轻度GVHD表现 ,12周存活率 80 % (8 10 ) ;而经腹腔内注射者移植后出现轻度GVHD症状 ,之后逐渐恢复正常 ,12周存活率 70 % (7 10 )。移植后外周血白细胞动力学恢复情况、外周血及骨髓中人CD4 5 + 细胞比例 ,尾静脉注射结合CsA +MTX处理者与经腹膜腔内注射者二组间比较无显著性差异。结论 :人骨髓造血细胞可以顺利地由SCID鼠腹腔归巢到骨髓造血组织 ,并能重建骨髓造血 ,腹腔内注射的移植方式不影响植入能力 ,既可达到骨髓移植的目的 ,又可减少GVHD的发生及反应强度     

鼠尾壳核头部的胆碱能神经元的分布——免疫组织化学法研究

尾壳核功能复杂,生理学及药理学的研究提示:尾壳核在功能上及神经递质的分布上有区域性的差异,但形态学上有无此类差异未见报道。本文以免疫组化ABC技术用乙酰胆碱转移酶单克隆抗体研究了胆碱能神经元在尾亮核头部的分布,结果显示胆碱能神经元在尾壳核头部的分布存在着区域性差异,背外侧区神经元的密度最高,13.47±3.46个/mm~2。利用VIDS—Ⅲ型图像分析仪随机测量尾壳核头部的529个胆碱能神经元,发现组成尾壳核头部的胆碱能神经元有两类:中等神经元和大型神经元。中等神经元的平均球直径为13.82±1.32μm,大神经元的平均球直径17.88±1.95μm。本文从形态学上显示的胆碱能神经元分布密集区与放射免疫测定结果相一致。对神经元大小的表示提出了更精确的参数及相应的分类标准。     

抑制EGF-1受体表达对人鼻咽癌裸鼠移植瘤生物学行为的影响

目的诱导IGF-I受体基因沉默的shRNA真核表达质粒的在体抗瘤效应,探讨RNA干扰IGF-I受体基因对裸鼠人鼻咽癌移植瘤的生物学行为的影响。方法将右侧背部接种人鼻咽癌CNE2细胞后,肿瘤直径达5～7mm的24只裸鼠随机分为3组:A组为IGF-1RmRNA特异性真核表达质粒(pshRNA1)治疗组,瘤体内多点注射pshRNA1;B组为pshRNA2质粒载体对照组,瘤体内多点注射阴性质粒载体pshRNA2(剂量同A组);C组为生理盐水对照组,瘤体内多点注射0.3ml生理盐水。从开始治疗后3周处死裸鼠,分离肿瘤,部分做共聚焦观察质粒转染情况,其余肿瘤组织观察肿瘤组织的病理变化和IGF-I受体蛋白在瘤体内的表达变化。结果所有裸鼠移植瘤接种成功,14d左右肿瘤直径达5～7mm。治疗裸鼠7d后,pshRNA1治疗组抑制率达67.21%,瘤体积明显小于阴性质粒组和生理盐水组(P<0.05),阴性质粒组与对照组无显著差异。pshRNA1治疗组移植瘤可见大片癌组织表达绿色荧光,其中仅少数细胞为IGF-IR阳性细胞。阴性质粒组癌组织也表达绿色荧光,但IGF-IR阳性细胞数明显多于pshRNA1治疗组(p<0.05),而生理盐水组的移植瘤未见绿色荧光。结论shRNA干扰IGF-I受体基因能在体内有效下调IGF-I受体蛋白的表达、抑制鼻咽癌裸鼠移植瘤的生长。     

大鼠黑质—纹状体对侧投射

大鼠单侧尾壳核头部引入辣根过氧化物酶后,在同侧黑质致密部、丘脑束旁核及中缝背核内均存在大量标记细胞。对侧黑质致密部、被盖腹侧区及中脑网状结构内也可见少许阳性神经元胞体,说明黑质一纹状体对侧投射系统确实存在。通过细胞计数,我们发现对侧黑质及被盖腹侧区内标记细胞仅占同侧标记的0.81%。电镜观察发现,单侧黑质损毁鼠的损毁侧尾壳核内神经囊泡广泛破损,而其健侧尾壳核神经囊泡,电镜象与正常动物者近似,这也从另一角度印证了黑质一纹状体对侧投射成分极少这样一个事实。本实验结果可能有助于探讨黑质一纹状体对侧投射系统的机能意义。     

~(125)I放射性粒子对荷人结肠癌裸鼠治疗效应的实验研究

目的观察125I放射性粒子组织间植入对裸鼠皮下人结肠癌移植瘤的局部抑制作用。方法雌性Balb/c裸鼠20只,以人Colo205型结肠癌细胞建立裸鼠皮下人结肠癌实体肿瘤模型,待肿瘤体积长至理想大小,随机分成2组,对照组不予任何处理,治疗组给予移植瘤以125I放射性粒子组织间植入,每周测量2次肿瘤体积,治疗27d后,处死裸鼠,观察移植瘤的相对肿瘤体积(RTV)、相对肿瘤增殖率(T/C)、ABC免疫组化染色观察肿瘤增殖率[Brdu标记指数(LI)]。结果治疗27d后,裸鼠均存活。治疗组(125I粒子组)移植瘤的RTV为(251.59±72.24),明显小于对照组的RTV(1087.94±510.72),相对肿瘤增殖率为23.13%,明显减少,治疗组的LI为(15.00±5.00),明显小于对照组的LI(38.75±6.29)。结论①人Colo205型结肠癌模型是放射性粒子植入治疗大肠癌基础研究的良好模型之一;②125I放射性粒子对人结肠癌细胞增殖有明显的局部抑制作用;③125I放射性粒子在肿瘤体内累积一定剂量才会逐渐显现治疗效应。     

人外周血内皮祖细胞移植促裸鼠缺血组织血管新生的初步研究

目的观察人外周血内皮祖细胞移植对下肢缺血裸鼠血管新生的影响。方法从人自愿者外周血中分离单个核细胞 ,置于EBM -2培养基内培养7d后 ,获得内皮祖细胞。将1×106个内皮祖细胞通过尾静脉注入下肢缺血裸鼠体内 (8只 ) ,对照组 (8只 )通过尾静脉注入等量的PBS。移植后第28d ,处死动物 ,进行组织学和生理学评估。结果内皮祖细胞组毛细血管密度较对照组明显增加[(136.4±40.5)/视野 ,(53.65±14.02)/视野 (P<0.01)] ;内皮祖细胞组的肢体致残率 (25 % )较对照组 (50 % )减少。结论体外扩增的内皮祖细胞移植能够促进缺血组织的血管新生 ,并能减少肢体的致残率。     

免疫抑制剂降低同种带瓣主动脉移植后钙含量的观察

探讨在同种带瓣主动脉移植后早期使用免疫抑制剂降低钙含量的机制和效果。成年SD大鼠为供体;Wistar大鼠为受体,行同种异体带瓣主动脉腹主动脉的异位移植,实验组移植后给予环孢素A(CsA)15mg/kg·d,共2周。对照组不做任何处理。同基因组行同一种系的近交系大鼠同种带瓣主动脉移植。各组随机分为5组,每组8只,分别于术后2、4、8、12、16周使用流式细胞仪测定大鼠CD25、CD71的表达,移植物进行光镜和电镜观察,免疫组化测定CD40的表达,同时测定钙含量。对照组移植后CD25、CD71和CD40表达的高峰时间段主要在移植后早期(2～4周),此后的表达水平逐渐回落,12周后维持在低水平。CsA组在移植后2～4周CD25、CD71和CD40的表达明显低于对照组(P<0.01),但是在8周后的表达水平与对照组无差别(P>0.05)。对照组的钙含量从4周开始升高,随着时间的推移,逐渐升高,在12周达到高峰,此后进入平台期。CsA组在移植后4、8、12、16周4个不同时间点的钙含量显著低于对照组(P<0.01)。移植后早期,实验组的内皮细胞脱落和平滑肌细胞的坏死情况较对照组减轻。同种瓣移植后早期使用免疫抑制剂具有抗钙化作用,其机制在于抑制移植后早期的免疫排斥,减轻了内皮细胞和平滑肌细胞所受到的免疫攻击,保护了内皮细胞和平滑肌细胞;但是否能改善同种瓣功能和血流动力学尚需进一步观察。     

尾加压素Ⅱ对大鼠及人嗜铬细胞瘤细胞体外增殖的影响

目的 研究尾加压素Ⅱ(UⅡ)对大鼠嗜铬细胞瘤细胞系PC12细胞及体外培养的人原代嗜铬细胞瘤细胞增殖的影响.方法 以噻唑兰法(MTT法)观察UⅡ对PC12细胞及体外培养的人原代嗜铬细胞瘤细胞增殖的影响.结果 UⅡ对PC12细胞的增殖无明显影响.10-7、10-6mol/L浓度的UⅡ可促进体外培养的原代人嗜铬细胞瘤细胞增殖.结论 UⅡ可促进嗜铬细胞瘤细胞的生长,在嗜铬细胞瘤的发病机制中可能起一定作用.     

MPTP对小鼠纹状体尾壳核细胞超微结构和GluR1表达的影响

目的探讨1-甲基,4-苯基,1、2、3、6-四氢砒啶(MPTP)对C57BL小鼠纹状体尾壳核内神经元结构及谷氨酸受体(GluR1)表达的影响。方法通过MPTP注射至C57BL成年小鼠腹腔内建立帕金森病(Parkinson's disease,PD)动物模型。采用免疫细胞化学技术、显微图像分析技术检测小鼠纹状体尾壳核内谷氨酸受体GluR1的表达;应用透射电镜技术观察小鼠纹状体尾壳核内神经元超微结构的改变。结果透射电镜观察实验组小鼠纹状体尾壳核神经元内线粒体肿胀,嵴结构部分模糊,部分内质网扩张,细胞核皱缩变形;GluR1的表达与对照组相比明显减少(p<0.05)。结论MPTP引起小鼠纹状体尾壳核神经元超微结构改变,其神经毒性作用可能与降低GluR1的表达有关。     

海马移植的实验研究(综述)

<正> 自1890年Thompson首先报道,用成年猫和成年狗的大脑皮质进行移植以来已有近一个世纪的历史,但直到1982年,瑞典的Bakland等人在2例震颤性麻痹病人中,将自体肾上腺髓质移植到尾核头部而取得成功后,中枢神经系统(CNS)的移植才掀起高潮。近十几年来人们才认识到,哺乳动物CNS具有很强的同移植的神经组织形成纤维联     

经鼻给予丙酸睾丸酮增加大鼠中脑5羟色胺能神经元的表达

目的:观察经鼻给予丙酸睾丸酮(TP)后大鼠中缝背核色氨酸羟化酶(TPH)及中缝背核、尾壳核与伏核5羟色胺(5-HT)和5羟色胺转运体(SERT)表达的改变.方法:对正常成年雄性及去势大鼠经鼻给予TP 21 d,利用免疫组织化学观察给药后大鼠中缝背核TPH及巾缝背核、尾壳核与伏核5-HT和SERT的免疫反应强度变化.结果:大鼠去势处理降低中缝背核TPH及中缝背核、尾壳核与伏核5-HT和SERT的表达;去势大鼠经鼻给予TP则可提高巾缝背核TPH及巾缝背核、尾壳核与伏核5-HT和SERT的表达,但未达到假手术水平;正常大鼠鼻腔给予TP后,中缝背核TPH及中缝背核、尾壳核与伏核5-HT和SERT的表达也显著增加.结论:经鼻给予TP增加大鼠中缝背核TPH及中缝背核、尾壳核与伏核5-HT和SERT的表达,为经鼻给予TP辅助治疗衰老过程中出现的运动相关行为障碍及抑郁症状提供实验依据.     

Huntington舞蹈病动物模型及其脑移植的实验研究

本实验用15μg鹅膏蕈氨酸分3点注入SD大鼠右侧尾壳核头部。术后1个月进行跳台试验,有29只动物(占被破坏鼠69％)表现明显的学习记忆能力低下,且存活7个月无明显变化。光电箱试验表明,大鼠有明显的夜间过度活动。形态学观察发现,破坏后1个月鼠尾壳核头部萎缩,侧脑室扩大,破坏区神经元明显减少,胶质增生。破坏后7个月,破坏区乙酰胆碱酯酶(AChE)组织化学染色阳性细胞以及胆碱乙酰化酶(ChAT)、γ-氨基丁酸(GABA)免疫组织化学染色阳性细胞明显减少,破坏侧苍白球、黑质网状部及覆盖破坏区的皮质萎缩。结果表明该动物模型是成立的。