ST11型KPC-2和NDM-1联产肺炎克雷伯菌流行病学特征分析*

摘要:目的了解联产KPC-2和NDM-1型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的流行病学特征,为临床使用抗菌药物提供参考依据。方法收集徐州医科大学附属医院2021 年6月至12月分离的碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(CRKP),采用微量肉汤稀释法进行抗菌药物最低抑菌浓度( MIC)测定,使用K-B法检测头孢他啶/阿维巴坦抑菌圈直径,采用PCR扩增法检测碳青霉烯酶基因(blakpc、blaNM、blavm、blaymp 、blax.)和超广谱β-内酰胺酶基因(blacnx.M、blasv、blareu),采用多位点序列分型(MIST)和脉冲场凝胶电泳(PFGE)方法检测其同源性。结果2021 年下半年分离出239例CRKP ,其中发现3株KPC-2和NDM-1联产的CRKP ,且均为ST11型。3株联产碳青霉烯酶的CRKP菌株对头孢菌素类、喹诺酮类、氨基糖苷类、碳青霉烯类和头孢他啶/阿维巴坦100%耐药,对多黏菌素均敏感,其中1株对替加环素中介耐药。同源性分析显示,其中2株高度同源。结论3 株KPC-2和NDM-1联产CRKP菌株对多种抗菌药物均呈现高水平耐药,为中国主要的碳青霉烯类耐药流行株ST11型,应当加强对此类碳青霉烯酶联产茵株的检测,控制此类细茵在医疗机构内的流行。     

产KPC-2耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌ST2237与ST11的分子流行特征分析

目的了解耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP) ST2237型与ST11型的分子流行特征。方法收集河南科技大学第一附属医院2018年1月至12月63株非重复CRKP,采用琼脂稀释法和微量肉汤稀释法检测菌株最低抑菌浓度(MIC);用PCR及测序方法检测毒力基因(iucA、rmpA2、rmpA、iroN)及耐药基因(bla_(KPC)、bla_(NDM)、bla_(IMP)、bla_(CTX-M)、bla_(TEM)、bla_(SHV)、bla_(DHA)、bla_(cmy)和mcr-1);用多位点序列分型(MLST)和goe BURST软件对菌株进行同源性分析;用SPSS 22软件统计分析不同ST型菌株间耐药性、毒力基因检出和耐药基因检出的差异。结果 63株CRKP对阿米卡星、磷霉素、氯霉素、米诺环素、黏菌素、替加环素和头孢他啶/阿维巴坦耐药率分别为97%、94%、78%、43%、1.6%、1.6%和0。63株菌株均携带bla_(KPC-2)、bla_(SHV)和bla_(TEM),54株菌株携带blaCTX-M,6株菌株携带bla_(DHA)。49株(77.8%)携带毒力基因。MLST分型显示,院内有ST11 55株(占87.3%)和ST2237 7株(占11.1%)。美罗培南、厄他培南、替加环素、头孢他啶/阿维巴坦、头孢他啶、头孢噻肟、头孢曲松、米诺环素和氯霉素对CRKP ST2237型的MIC值低于ST11型(Z分别为-4.146、-4.535、-2.893、-4.635、-7.803、-6.699、-7.797、-2.223、-3.395,P0.05)。27.3%(15/55) ST11株携带iucA、rmpA2、rmpA、iroN4种毒力基因,85.7%(6/7) ST2237株携带iut A和rmp A2 2种毒力基因。ST2237型bla_(DHA)携带率(85.7%,6/7)高于ST11型(0,0/55)(Fisher's精确检验,P=0); ST2237型bla_(CTX-M)携带率(0,0/7)低于ST11型(98.2%,54/55)(Fisher's精确检验,P=0)。结论 ST2237 CRKP菌株在药物敏感性、耐药基因及毒力基因携带方面与ST11不同,需加强监测。     

重症监护室患者胃肠道产KPC-2肺炎克雷伯菌ST11株的分布调查及遗传相关性分析

目的 分析产KPC-2肺炎克雷伯菌ST11株在南京大学附属鼓楼医院重症监护室(Intensive Care Unit, ICU)住院患者胃肠道的定植情况,并分析bla_KPC-2阳性肺炎克雷伯菌ST11菌株之间的遗传相关性。方法 采集我院ICU患者的肛拭子,使用含有0.5μg/mL美罗培南的麦康凯平板筛选碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌,K-B法测定其对临床常用抗菌药物的敏感性;采用PCR法和DNA测序技术检测bla_KPC-2基因;多位点序列分型技术分析bla_KPC-2基因阳性肺炎克雷伯菌的序列分型(sequence type, ST),筛选出ST11菌株。脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis, PFGE)技术分析产bla_KPC-2肺炎克雷伯菌ST11菌株之间的遗传相关性。结果 共收集肛拭子125份,30株(24.2%)为碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌。其中,27株(90.0%)携带bla_KPC-2基因,26株(86.7%)细菌为肺炎克雷伯菌ST11...     

产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的耐药基因及流行病学研究进展

肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制主要包括产碳青霉烯酶、外膜蛋白缺失或突变、外排泵过度表达以及青霉素结合蛋白变异等,其中最主要的是产碳青霉烯酶。虽然各种肠杆菌科细菌的耐药机制大体相同,但是各种耐药基因在不同种属细菌中的分布和流行情况并不相同。肺炎克雷伯菌是临床上最常见的条件致病菌之一,也是检出率最高的耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌。由于临床上治疗耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌感染的药物非常有限,此类患者的病死率较高［1］。自1997年在美国北卡罗莱纳州发现第1株耐碳青霉烯类抗生素的肺炎克雷伯菌以来［2］,对碳青霉烯类耐药或敏感性降低的肺炎克雷伯菌检出率呈持续上升趋势,在肺炎克雷伯菌中发现的耐药基因突变类型也越来越多,这些基因大多存在细菌质粒上,往往通过细菌间的传播导致医院感染的流行。     

产碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌耐药机制及流行病学研究进展

正自2009年报道产NDM-1的肠杆菌后,"超级细菌"这一概念为公众所熟知,这一类耐碳青霉烯类抗生素的肠杆菌常表现为多重耐药菌(MDR),甚至泛耐药菌(PDR),对几乎所有β-内酰胺类抗生素耐药,并使酶抑制剂(克拉维酸等)失效,使临床治疗陷入被动。肠杆菌主要耐药机制为产碳青霉烯酶,水解β-内酰胺类抗生素而表现耐药性状。肺炎克雷伯菌(CPKP)常见于人体呼吸道、消化道,是一种条件致病的肠杆菌科细菌,临床检出率高。近年来产碳青霉烯酶类CPKP报道日渐增多,[1-2]     

碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌分子流行病学和耐药基因分析

目的：探究徐州医学院附属医院临床分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的分子流行病学特征及耐药基因。方法收集并鉴定该院2013年2～12月临床分离非重复碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌株55株。肠杆菌基因间重复性共有序列（ERIC）‐聚合酶链反应（PCR）分析菌株的分子流行病学特征。药敏试验采用琼脂稀释法,改良 Hodge 方法检测碳青霉烯酶,亚胺培南＋乙二胺四乙酸双纸片协同法检测金属β‐内酰胺酶,PCR 方法检测细菌携带的耐药基因。结果 ERIC‐PCR 将55株肺炎克雷伯菌分为4型,以Ⅰ型为主,共41株。55株肺炎克雷伯菌对除多黏菌素和替加环素外的其他抗菌药物显示了较高的耐药性。改良 Hodge 试验阳性43株,金属酶检测试验结果均为阴性。 PCR 结果显示,K PC‐2型44株,CTX‐M‐9型27株,S HV 型22株, TEM 型23株,其中有25株同时携带3种或3种以上的耐药基因。结论该院分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌对临床大多数常用抗菌药物显示较高水平的耐药性;其耐药机制主要是 K PC‐2碳青霉烯酶,CTX‐M‐9、S HV 和 TEM 型β‐内酰胺酶同时参与其多重耐药机制。     

某院ST11型耐碳青霉烯酶高毒力肺炎克雷伯菌分子流行病学研究

目的对连云港市某院ST11型耐碳青霉烯酶高毒力肺炎克雷伯菌(CR-HVKP)进行分子流行病学调查。方法收集连云港市中医院2017年1月至2019年6月临床分离的26株耐碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌(CRKP),采用改良碳青霉烯酶灭活试验(mCIM)、EDTA-改良碳青霉烯酶灭活试验(eCIM)及PCR法分别检测菌株碳青霉烯酶耐药表型和碳青霉烯酶耐药基因。采用拉丝实验检测实验菌株的黏液表型。采用3种多重PCR进行检测,第1体系对实验菌株进行ST分型,第2体系检测最强毒力的荚膜血清型wzyK1、wzyK2,以及K位点wzyKL47、wzyKL64,第3体系检测rmpA、rmpA2、iroN、intA毒力相关基因,并采用大蜡螟感染模型检测毒力表型,采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行同源性分析。结果26株CRKP菌株,携带以肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPC)为主的耐药基因菌株有22株,结果与相对应的22株菌株的mCIM结果一致。ST分型以ST11型为主,占73.1%(19/26),wzyKL47、wzyKL64阳性率分别为15.8%(3/19)、84.2%(16/19)。检出8株携带毒力相关基因且具有毒力表型的ST11型CR-HVKP以KL64为主,康复科检出率最高。采用PFGE可分为3群,带型相似度高于85%的有2株。结论连云港市中医院检出ST11型CR-HVKP 8株,可能存在克隆株的散在传播,需加强对康复科院内感染的防控。     

23株血液分离产KPC-2肺炎克雷伯菌毒力及同源性研究

目的 了解肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物的主要耐药基因携带情况、毒力、分子分型及同源性.方法 收集六安市人民医院2018年1月～2019年12月分离自血培养的非重复CRKP菌株共23株,拉丝试验筛查高毒力菌株;Wzi分型检测荚膜血清型别;聚合酶链式反应检测荚膜多糖合成调节基因(rmpA)、毒力基因及常见碳青霉烯酶基因...     

广东省东莞地区发现1株泛耐药产KPC一2型碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌

目的研究泛耐药肺炎克雷伯菌的相关耐药机制和治疗对策。方法细菌鉴定采用VITEK2全自动细菌鉴定系统,药敏试验采用K—B法,通过产碳青霉烯酶确证试验（改良Hodge试验）及聚合酶链反应（PCR）检测KPC-2基因,并进行序列测定。同时调查感染患者的诊疗情况。结果常规药敏试验显示,该菌株对阿米卡星敏感,对其他抗菌药物均耐药;Hodge试验阳性,PCR检测到KPC-2基因,序列测定与GenBank1i844849序列一致。患者经拔除气管插管,人住隔离病房,加强支持治疗后,1个月内未检测到泛耐药肺炎克雷伯菌。结论加强泛耐药肺炎克雷伯菌监测,提高对泛耐药菌的认识有助于感染疾病的治疗和预防。     

碳青霉烯类抗菌药物不敏感的肺炎克雷伯菌产KPC酶监测

目的了解武汉地区肺炎克雷伯菌产KPC型碳青霉烯酶的耐药基因流行状况及型别,为有效监测和控制医院感染提供实验室依据。方法收集2014年6月至2015年10月武汉地区3家三甲医院对碳青霉烯类抗菌药物敏感性下降的肺炎克雷伯菌53株,均采用Phoenix-100全自动系统进行鉴定和药敏试验,采用改良Hodge试验进行KPC初筛,聚合酶链反应对53株菌分别进行blaKPC基因扩增,阳性扩增测序验证型别。结果 53株菌中38株菌改良Hodge试验阳性,阳性率为71.70%(38/53);32株扩增出780bp左右的目的条带,阳性率为60.38%(32/53);经测序和比对分析为blaKPC-2基因。结论武汉地区对碳青霉烯酶类抗菌药物不敏感的肺炎克雷伯菌的碳青霉烯酶基因主要为KPC-2型,临床感染和控制部门应加强监控,防范产KPC-2型碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌在院内暴发和流行。     

对肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶的研究进展

碳青霉烯类抗菌药物在临床上可用于多重耐药的细菌感染,随着临床上碳青霉烯类抗菌药物的广泛使用,产生了对亚胺培南或美罗培南耐药的肠杆菌。至今为止对碳青霉烯类耐药的肠杆菌还比较少见,     

发现一株产KPC-2型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌

目的 研究1株亚胺培南耐药肺炎克雷伯菌的耐药机理。方法 采用浓度梯度法（Etest）测定细菌对各抗菌药物最低抑菌浓度（MIC）。通过等电点分析（IEF）、质粒抽提、接合试验、转化试验、聚合酶链反应（PCR）扩增及耐药基因克隆测序分析细菌编码的B内酰胺酶。结果临床分离的肺炎克雷伯菌等电点显示3条β内酰胺酶条带，分别为5．4、6．7和8．2。PCR扩增测序临床分离菌含TEM-1（pI，5．4）、SHV-12（pI，8．2）和KPC-2（pI，6．7）β内酰胺酶编码基因。转化菌只有一条β内酰胺酶条带，为6．7。从转化菌质粒（60000bp）上获得1500bp的克隆片段，测序证实其为KPC-2编码基因。结论 亚胺培南耐药肺炎克雷伯菌的质粒上携带水解碳青霉烯类抗生素的A类2f组KPC-2酶的编码基因。     

产NDM-1酶肺炎克雷伯菌的目前研究进展

自1940年代青霉素诞生以来,人类开始结束了对致病菌的束手无策,成就了医学上的一段光辉历史。而此同时,抗生素与致病微生物之间的斗争也拉开了帷幕。后来,超级细菌开始登上历史舞台,所谓的ES-     

产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌克隆复合群258的分子流行特征

肺炎克雷伯菌是临床常见的条件致病菌之一,可引起血流感染、肺炎、尿路感染和中枢神经系统感染等。肺炎克雷伯菌遗传背景丰富多样,据巴斯德研究所统计,目前已检出3 000余种序列型(sequence type,ST)。近年,耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiellapneumoniae,CRKP)的广泛播散已成为最棘手的全球性公共卫生问题之一,给人类健康带来了严重的威胁[1]。产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌(carbapenemase-producing Klebsiella pneumoniae,CPKP)是最常见的CRKP之一。目前在世界范围内流行的CPKP临床分离株以克隆复合群258(CC258)最为常见。本文旨在对CPKP的CC258流行特点作一综述。     

肯尼亚检测到产NDM-1的肺炎克雷伯菌

临床最常见的水解碳青霉烯类β内酰胺酶如KPC(Ambler A类),IMP和VIM(Ambler B类)和OXA-48(AmblerD类)等。近来1例曾在印度住院的瑞典患者身上分离到肺炎克雷伯菌(05-506)和大肠埃希菌中发现一种新的金属β内酰胺酶(MBL)被命名为NDM-1(新德里金属β内酰胺酶)。2007—2009年在肯尼亚首都内罗毕的1所三级转诊     

KPC酶在肺炎克雷伯菌碳青霉烯类耐药中的研究

目的运用RNA干扰技术探讨blaKPC表达与碳青霉烯类耐药的关系。方法用电转移法将双链小RNA（SiRNA）转入到2株产肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶-2（KPC-2）的肺炎克雷伯菌中,检测RNA干扰前后菌株blaKPC的RNA水平和亚胺培南、厄他培南的最低抑菌浓度（MIC）值的变化。结果菌株在RNA干扰前后blaKPC-2的RNA水平有差异,但干扰前后亚胺培南和厄他培南的MIC值没有变化。结论 SiRNA虽然能在RNA水平上抑制blaKPC的表达,但对产KPC-2菌株碳青霉烯类耐药的影响不明显,证明革兰阴性杆菌对碳青霉烯类耐药由多种因素共同引起。     

浙江省丽水地区发现1株泛耐药产KPC-2碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌

目的 研究泛耐药肺炎克雷伯菌的相关耐药机制及初步探讨治疗对策。 方法 细菌鉴定采用Vitek-compact细菌鉴定系统,药敏实验采用K-B法,通过产碳青霉烯酶确证试验(Hodge实验)及聚合酶链反应(PCR)检测KPC-2基因,并进行序列测定。同时调查患者感染的诊疗情况。 结果 常规药敏实验显示除多粘菌素、米诺环素外全部耐药;增加磷霉素K-B法药敏实验显示抑菌环直径为20 mm,K-B法协同药敏实验显示多粘菌素、米诺环素、磷霉素、亚胺培南等均无协同抗菌活性;Hodge实验阳性,PCR检测到KPC-2基因,序列与GenBank AF297554序列一致。患者经拔除导尿管,入隔离病房,加强支持治疗后,1个月内未检查到泛耐药肺炎克雷伯菌。 结论 加强泛耐药肺炎克雷伯菌监测,提高对泛耐药菌的认识有助于感染疾病的治疗和预防。     

KPC酶在肺炎克雷伯菌碳青霉烯类耐药中的研究

目的运用RNA干扰技术探讨blaKPC表达与碳青霉烯类耐药的关系。方法用电转移法将双链小RNA(SiRNA)转入到2株产肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶-2(KPC-2)的肺炎克雷伯菌中,检测RNA干扰前后菌株blaKPC的RNA水平和亚胺培南、厄他培南的最低抑菌浓度(MIC)值的变化。结果菌株在RNA干扰前后blaKPC-2的RNA水平有差异,但干扰前后亚胺培南和厄他培南的MIC值没有变化。结论 SiRNA虽然能在RNA水平上抑制blaKPC的表达,但对产KPC-2菌株碳青霉烯类耐药的影响不明显,证明革兰阴性杆菌对碳青霉烯类耐药由多种因素共同引起。     

3株临床分离产OXA-232碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌的流行病学分析

目的描述临床OXA-232肺炎克雷伯菌(OXA-232-producing Klebsiella pneumoniae,OXA-232Kp)的流行病学特征。方法收集2018年9月—2019年9月江苏5家医院临床分离的碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae, CRKP),采用微量肉汤稀释法和Phoenix-M50自动微生物系统进行药敏分析;PCR结合测序检测bla_(OXA-232)基因;脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株同源性;质粒测序分析携带bla_(OXA-232)基因的质粒周围环境。结果筛选出3株OXA-232Kp ST15型, PFGE分析呈克隆性传播,携带6 141 bp ColKP3型质粒,与中国东部研究发现携带bla_(OXA-232)基因的质粒高度同源。结论本文首次调查OXA-232Kp ST15在江苏地区的流行病学特征。携带bla_(OXA-232)的质粒具有高度的同源性,表明该6 141 bp ColE型质粒对OXA-232在江苏地区的流行具有重要作用。