耐碳青霉烯类药物肺炎克雷伯菌耐药基因研究

目的了解对碳青霉烯类药物耐药的肺炎克雷伯菌(CRKP)碳青霉烯酶基因的携带情况。方法收集本院2013年1月至2016年6月临床标本中分离的630株肺炎克雷伯菌,采用VITEK-2 Compact全自动微生物鉴定系统进行细菌鉴定和药敏检测以及改良Hodge试验筛选CRKP,采用聚合酶链反应(PCR)检测碳青霉烯酶基因,采用多位点序列分型(MLST)技术对CRPK进行分子遗传学分析。结果 630株肺炎克雷伯菌中,61株对亚胺培南耐药,为CRKP,占9.7%,CRKP对多种临床常用抗菌药物均显著耐药,对替加环素具有良好的敏感性。PCR结果显示59株CRKP携带碳青霉烯酶基因,其中53株携带bla KPC-2型基因(89.8%),4株携带bla NDM-1型基因(6.8%),2株携带bla OXA-48型基因(3.4%)。MLST分型主要以ST11为主(49株,80.3%)。结论我院CRKP基因型主要为KPC-2型,另外有散在NDM-1和OXA-48型,MLST分型主要为ST11型。     

重症监护室流行耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药机制及同源性分析

目的分析佳木斯大学附属第一医院重症监护室(ICU)流行的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)耐药机制和分子流行病学特征。方法收集2016年4-12月分离自ICU的CRKP,改良Hodge试验和改良碳青霉烯灭活试验(m CIM)检测碳青霉烯酶表型;聚合酶链反应(PCR)法检测碳青霉烯酶、ESBL耐药基因、Amp C酶、血清型及毒力基因;肠杆菌科基因间重复一致序列PCR(ERIC-PCR)和多位点序列分型(MLST)进行同源性分析和分型。结果 16株CRKP改良Hodge试验均阳性;15株m CIM阳性;14株同时携带blaKPC、blaSHV、blaTEM,blaCTX-M-1基因,1株同时携带blaKPC、blaSHV、blaCTX-M-1基因,还有1株携带blaNDM-5基因;16株CRKP血清型均为阴性,毒力基因uge、mrk D、fim H、kpn阳性。ERIC-PCR检测为同一型别,MLST均为ST76型。结论我院ICU分离CRKP为ST76型并携带多种耐药基因及毒力基因。     

耐碳青霉烯肠杆菌科细菌的耐药性和分子特征

目的了解该院耐碳青霉烯肠杆菌科细菌(CRE)的流行特点、耐药现状及分子型别,为控制CRE的传播及临床治疗提供科学依据。方法收集该院微生物室2017年1月至2019年5月临床标本中分离的91株CRE,使用Vitek 2Compact全自动细菌鉴定系统进行细菌鉴定和药敏试验,改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)和乙二胺四乙酸改良碳青霉烯灭活试验(eCIM)联合检测碳青霉烯酶表型,采用PCR扩增耐药基因,多位点序列分型(MLST)分析菌株间同源性,采用WHONET5.6和SPSS23.0进行统计分析。结果 91株CRE菌株中,肺炎克雷伯菌42株,大肠埃希菌23株,阴沟肠杆菌15株,其他CRE 11株。CRE菌株对替加环素和阿米卡星敏感性较高,但对其他大部分抗菌药物耐药性较高。mCIM筛选碳青霉烯酶的灵敏度为97.1%,特异度为100.0%。60株CRE携带1种碳青霉烯酶基因,8株CRE菌株合并2种碳青霉烯酶基因,毒力基因wcaG检出率为2.4%。耐碳青霉烯类药物肺炎克雷伯菌的MLST结果是ST11型12株,ST37型8株,ST17型8株,ST147型2株,ST48型1株;耐碳青霉烯类药物大肠埃希菌的MLST结果是ST167型17株;耐青霉烯类药物阴沟肠杆菌的MLST结果是ST418型6株,ST93型4株,ST74型2株,ST175型1株。结论该院CRE菌株对碳青霉烯类抗菌药物的耐药机制复杂。分子型别较多,各菌种呈现不同特点。     

儿童患者中分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌分子流行病学分析及耐药机制研究

目的研究儿童患者中分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)的流行特征及耐药机制。方法收集2013年1-12月上海市儿童医院临床微生物室分离的12株碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌,采用琼脂稀释法检测其对常用抗菌药物的耐药性,乙二胺四乙酸(EDTA)协同试验和3'-氨基苯硼酸(APB)协同试验进行碳青霉烯酶表型分析,PCR扩增及DNA测序进行碳青霉烯酶基因型确证,接合试验检测碳青霉烯酶耐药基因是否位于质粒上,脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型(MLST)检测菌株间基因相关性。结果 12株CRKP对多黏菌素E均敏感,对头孢菌素类耐药率均为100%,对亚胺培南、美罗培南和厄他培南耐药率分别为91.7%、91.7%和100%。PCR及DNA测序显示12株CRKP中8株产KPC-2,1株产NDM-1,3株未检出碳青霉烯酶。将12株CRKP与大肠埃希菌J53进行接合,获得3株接合子。PFGE分型显示,12株CRKP可分为4个型3个亚型。MLST结果显示,8株blaKPC阳性肺炎克雷伯菌均为ST11型,1株blaNDM-1阳性肺炎克雷伯菌为ST278,3株不产碳青霉烯酶菌分别为ST76、ST37、ST610。结论产KPC-2型碳青霉烯酶是该院分离的肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药的主要机制,产NDM-1阳性的肺炎克雷伯菌已在该院出现。     

山东某院耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌临床感染特征及耐药基因分析

目的了解济宁医学院附属医院耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)临床感染特征、药物敏感性及耐药基因分型,为预防和治疗CRE感染及医院多重耐药菌管理提供参考。方法收集CRE临床分离株93株,采用全自动微生物鉴定系统进行细菌鉴定及体外药物敏感性试验,并通过全自动快速微生物质谱检测系统确证菌株。采用简易碳青霉烯类灭活法(sCIM)试验进行碳青霉烯酶表型确证,采用Xpert Carba-R检测并鉴别碳青霉烯酶分型,通过聚合酶链反应(PCR)扩增碳青霉烯酶耐药基因并进行测序分型。结果济宁医学院附属医院CRE主要分离自痰液样本,其次是血液和尿液样本,科室来源主要为重症监护病房。CRE对临床常用的24种抗菌药物均耐药,对替加环素均敏感。sCIM试验检出79株产碳青霉烯酶;Xpert Carba-R检出KPC基因阳性38株、NDM基因阳性31株、IMP基因阳性6株、NDM+KPC基因阳性4株。PCR扩增结果显示,有38株携带KPC耐药基因,31株携带NDM耐药基因,6株携带IMP耐药基因,4株同时携带KPC和NDM耐药基因,未检出VIM及OXA-48耐药基因。结论济宁医学院附属医院CRE临床分离株对多种临床常用抗菌药物耐药,但对替加环素具有良好的体外敏感性;肺炎克雷伯菌碳青霉烯类耐药基因主要为KPC型,大肠埃希菌主要为NDM型;应加强对CRE的监控,防范其在院内的暴发流行。     

临床分离碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌株的血清荚膜分型及耐药机制

目的分析碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)的荚膜血清型和携带毒力基因的情况,以探究其耐药机制。方法采用Vitek-2Compact全自动微生物鉴定仪对分离菌株进行体外药物敏感试验;利用黏液丝试验筛选高黏液阳性菌株;使用改良Hodge试验及碳青霉烯酶抑制试验(CIM)对碳青霉烯酶表型进行检测;利用PCR法检测常见荚膜基因型、碳青霉烯酶耐药基因、β-内酰胺酶基因、膜孔蛋白基因、毒力基因。结果本研究共分离出CRKP 126株[39.87%(126/316)],CRKP菌株中对头孢菌素类、酶抑制剂类、碳青霉烯类、单环类药物耐药率最高,且耐药率显著高于non-CRKP菌株(P<0.05),替加环素类耐药率最低,与non-CRKP菌株差异无统计学意义(P>0.05);改良Hodge试验阳性106株,CIM试验阳性117株;检测出A类碳青霉烯酶KPC基因最多,共117株;β-内酰胺酶基因TEM基因53株,SHV基因100株,CTX-M基因112株,膜孔蛋白Ompk35基因缺失50株,Ompk36基因缺失94株;126株CRKP中携带4种不同耐药基因的菌株数目最多。结论本研究分离获得的CRKP大部分荚膜血清分型尚不清楚,其主要耐药机制为产生碳青霉烯酶,部分菌株合并有膜孔蛋白基因缺失。     

耐碳青霉烯类的肺炎克雷伯菌的感染特点及耐药基因分析

目的了解该院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的感染特点、药物敏感性和碳青霉烯酶基因携带情况。方法收集该院2018年1月至2019年2月临床标本中分离的非重复耐碳青霉烯类的肺炎克雷伯菌,采用VITEK 2Compact全自动微生物鉴定仪进行细菌鉴定及药敏检测,改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)和EDTA改良碳青霉烯灭活试验(eCIM)检测碳青霉烯酶表型、聚合酶链反应(PCR)检测碳青霉烯酶常见基因型。结果共收集95株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌,细菌对多种临床常用抗菌药物均显著耐药。改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)91株阳性,EDTA改良碳青霉烯灭活试验(eCIM)3株阳性。PCR结果显示92株携带碳青霉烯酶基因,未检测出耐药基因有3株,其中有86株携带KPC基因(93.4%),3株携带NDM基因,3株既携带KPC基因又携带NDM基因。结论耐碳青霉烯类的肺炎克雷伯菌对多种抗菌药物耐药,对四环素、多西环素、替加环素相对敏感,而产KPC型碳青霉烯酶是该院肺炎克雷伯菌碳青霉烯类抗菌药物耐药的主要原因。因此临床应根据药物敏感性结果合理选用抗菌药物,做好院感监测及防护,以防止耐药菌株的传播和流行。     

携带不同酶型基因耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌对常见抗耐药菌药物的敏感性观察

目的 了解宁波地区耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌（CRKP）菌株携带碳青霉烯酶型基因分布,以及携带不同碳青霉烯酶型基因的CRKP对常见抗耐药菌药物的敏感性。方法 选择2019年1月—2021年12月宁波地区多家中心市医院临床非重复分离的CRKP共150株,采用PCR法检测碳青霉烯酶基因携带情况;采用肉汤稀释法检测常用抗CRKP药物替加环素、多黏菌素B、头孢他啶/阿维巴坦对分离CRKP的敏感性;采用K-B法检测CRKP对8种报道中使用的联合药物的敏感性。结果 宁波地区CRKP菌株主要携带KPC-2型耐药基因,其次是NDM-1型耐药基因,对替加环素、多黏菌素B敏感率均较高;头孢他啶/阿维巴坦对携带A类酶基因的CRKP的作用力较强,对携带B类、D类酶基因的CRKP作用弱;磷霉素、阿米卡星和氯霉素的抑菌圈直径较大,可以作为治疗CRKP感染的联合药物,氨曲南和阿米卡星可用于治疗携带B类酶基因的CRKP感染。结论 部分抗菌药物对携带不同酶型基因菌株敏感性不同。     

重症监护室耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药机制和同源性分析

目的探讨安徽医科大学第一附属医院4个重症监护室(ICU)中耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药机制和流行状况,为医院感染控制提供依据。方法收集4个ICU病房中CRKP菌株39株,采用纸片扩散法和Vitek 2 Compact仪器法测定临床常见抗菌药物的敏感性,用Carba NP试验对碳青霉烯酶进行筛选,同时对超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、头孢菌素酶(AmpC酶)、碳青霉烯酶基因进行PCR扩增和序列分析,用基质辅助激光解吸电离飞行质谱(MALDI-TOF MS)技术及多位点序列分型(MLST)进行同源性分析。结果 PCR检测基因型显示36株CRKP以产KPC-2型酶为主,部分菌株同时拥有ESBL和AmpC耐药基因。MALDI-TOF MS将39株CRKP分为3大簇,MLST结果显示35株菌均为ST11型,ST379、ST751、ST307、ST490各有1株,经eBURST在线软件分析ST11与ST379、ST751的亲缘关系较近,来源于同一克隆株。结论 4个ICU病房中CRKP以产KPC-2型酶为主,是CRKP对碳青霉烯类抗菌药物耐药的主要机制。37株CRKP高度同源,提示不同ICU病房间应进一步加强感染控制。     

临床分离的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌的耐药机制研究

目的探究肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药的分子机制。方法通过Carba NP确证试验检测碳青霉烯酶表型;PCR扩增碳青霉烯酶基因,质粒介导AmpC酶基因,超广谱β-内酰胺酶基因;采用多序列位点分型(MLST)对菌株进行遗传相关性分析。结果 50株耐破青霉烯肺炎克雷伯菌中,42株PCR扩增KPC-2阳性,1株NDM-1P阳性,其余7株未检测到碳青霉烯酶基因;产KPC-2肺炎克雷伯菌相关耐药基因的携带率为:bla CTX-M 21.5%,bla SHV 42.9%,bla TEM 69.1%和bla DHA4.8%;MLST结果显示42株KPC-2阳性菌株中,37株为ST11型。结论 KPC-2的产生是肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药的主要机制,且该院存在着ST11产KPC-2肺炎克雷伯菌的暴发流行。     

携带blaNDM-1耐药基因高毒力肺炎克雷伯菌的耐药和毒力分析

目的 了解携带blaNDM-1耐碳青霉烯高毒力肺炎克雷伯菌（CR-hvKP）对常用抗菌药物耐药和毒力特征分析，为有效防控医院感染提供依据。方法 采用细菌分离鉴定和药敏试验方法，对成都地区部分医院临床分离CR-hvKP耐药和毒力情况进行统计分析。结果 收集的160株耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌（CRKP）中，有41株携带blaNDM-1耐药基因，其中8株为CR-hvKP。携带blaNDM-1基因的CR-hvKP对头孢菌素类、喹诺酮类和酶抑制剂类药物耐药率为100%，对阿米卡星和庆大霉素耐药率较低。CR-hvKP血清荚膜分型以K1和K2型为主，主要携带rmpA和aerobactin毒力基因，多位点序列分型以ST11和ST307型为主。结论 成都地区部分医院临床分离的CRKP菌株blaNDM-1携带率较高，CR-hvKP具有高耐药性和高毒力，应加强防控措施。     

耐碳青霉烯肠杆菌科细菌碳青霉烯酶检测与多位点序列分型分析

目的了解耐碳青霉烯肠杆菌科细菌(CRE)的耐药机制及分子流行病学特征。方法采用全自动微生物鉴定系统鉴定菌株,并进行药物敏感性试验;采用改良碳青霉烯类灭活试验(m CIM)筛查菌株碳青霉烯酶;采用聚合酶链反应(PCR)及基因测序方法检测菌株碳青霉烯酶耐药基因;采用多位点序列分型(MLST)方法对菌株进行分子分型。结果共收集到24株CRE,其中13株为肺炎克雷伯菌,11株为阴沟肠杆菌,mCIM阳性率均为100%。13株肺炎克雷伯菌中有10株携带bla_(KPC-2)基因,1株携带bla_(NDM-1)基因,1株携带bla_(NDM-4)基因,1株未检出bla_(KPC)、bla_(IMP)、bla_(VIM)、bla_(NDM)及bla_(OXA)基因;11株阴沟肠杆菌均携带bla_(NDM-1)基因。MLST结果显示13株肺炎克雷伯菌中有12株为ST11型,1株为ST571型;11株阴沟肠杆菌均为ST93型。结论研究涉及的肺炎克雷伯菌碳青霉烯类耐药的主要机制为携带bla_(KPC-2)基因,优势序列分型(ST)为ST11;阴沟肠杆菌碳青霉烯类耐药的主要机制为携带bla_(NDM-1)基因,优势ST为ST93。应及时采取有效措施防止CRE的传播。     

产KPC型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的检测及感染现状

目的通过对碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)的检测及病例分析,了解CRKP对碳青霉烯类抗菌药物的耐药机制及感染现状,为临床抗感染治疗及院感控制提供依据。方法应用BD phoenixTM-100全自动细菌鉴定及药敏分析系统筛选耐亚胺培南或美罗培南的肺炎克雷伯菌,然后通过改良Hodge试验检测碳青霉烯酶表型,用PCR方法检测KPC、NDM-1和OXA-48碳青霉烯酶耐药基因。结果 71株CRKP改良Hodge试验阳性56株,阳性率为78.9%,PCR结果显示:71株CRKP中有53株检测出blaKPC-2基因、8株blaNDM-1基因、2株blaOXA-48基因;标本来源主要见于ICU、肾内科和神经内科等病房的痰液、尿液和引流液标本;药敏结果显示:所分离的71株CRKP除了对阿米卡星、替加环素和多粘菌素的耐药率较低外,对其他抗菌药物的耐药率均70%。结论 CRKP临床分布较为广泛,多药耐药严重,其耐药基因以产KPC-2型为主,但同时还出现了NDM-1和OXA-48基因型,应加强监控。     

耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌耐药机制及同源性分析

目的了解我院临床分离碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)耐药机制及流行病学特点。方法收集2015-2017年佳木斯大学附属第一医院临床分离CRKP 31株,采用Vitek 2 Compact检测常用抗菌药物的敏感性;PCR法扩增碳青霉烯酶基因(blaKPC、blaNDM、blaIMP-4、blaIMP-8、blaVIM-1、blaVIM-2、blaOXA-23、blaOXA-24、blaOXA-48、blaOXA-51、blaOXA-58)及其他β内酰胺酶基因(blaDHA、blaACC、blaTEM、blaSHV、blaCTX-M-1、blaCTX-M-9);多位点序列分型(MLST)分析肺炎克雷伯菌ST分型。结果 31株CRKP中28株携带blaKPC-2基因,2株携带blaIMP-4,同时携带blaKPC-2和blaNDM-5基因1株;其中26株菌同时携带blaCTX-M-15、blaSHV和blaTEM基因。25株同时携带blaKPC-2、blaCTX-M-15、blaSHV和blaTEM基因。28株菌为ST76型,其余3株分别为ST323、ST896和ST2964型。结论产blaKPC-2是我院CRKP主要耐药机制,并存在ST76型克隆流行。     

耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌的耐药分子学研究

目的研究该院临床分离的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌的耐药分子学机制。方法分析该院临床微生物实验室分离的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌株(CRKP),采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)和全自动微生物分析仪(VITEK-2compact)鉴定细菌并进行药物敏感试验分析,采用改良Hodge试验(MHT)和碳青霉烯酶灭活试验(CIM)进行表型确证;聚合酶链式反应(PCR)法检测碳青霉烯酶基因型,并进行基因测序BLAST比对和多位点序列分析(MLST)。结果 46株耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌对常用抗菌药物均表现出高耐药性;耐碳青霉烯表型确证均呈阳性,PCR检测结果显示其中包括A类碳青霉烯酶(KPC-2型)和B类金属酶(NDM-1和IMP-4),MLST分型以ST11型为主。结论该院分离的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌的耐药分子学机制主要以产KPC-2型碳青霉烯酶的ST11型为主,同时有少量其他型别的检出,加强院内感染监测强度和力度,以及进一步规范抗菌药的合理使用显得尤为重要。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药基因及同源性分析

目的了解急诊重症监护病房(ICU)分离耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)耐药基因携带情况和菌株同源性。方法收集2015年7月至2016年8月分离自徐州医科大学附属医院急诊ICU的CRKP 19株,PCR检测碳青霉烯类耐药基因、超广谱β内酰胺类相关基因及头孢菌素类耐药基因;脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型(MLST)进行菌株分子分型。结果 19株CRKP菌株中18株检出碳青霉烯类耐药基因,包括blaKPC-2型17株和blaNDM-5型1株;18株菌均携带ESBLs基因,其中blaSHV-12型8株、blaSHV-11型3株、blaSHV-2a型5株,blaTEM-1型15株、blaCTX-M-65型10株,blaCTX-M-15型3株,blaCTX-M-14及blaCTX-M-27型各1株;13株检出头孢菌素类耐药基因,且均为blaDHA-1型。PFGE分型显示19株CRKP可以分为4个型和4个亚型,包括A1型12株,A2型、A3型、A4型各1株,B型2株,C型及D型各1株。MLST显示ST11型15株,ST48型2株以及ST37型1株,1株菌未能分型。其中15株blaKPC-2阳性ST11型菌株PFGE分型为型别A。结论我院急诊ICU存在携带blaKPC-2基因ST11型CRKP菌株克隆传播,应加强急诊ICU的耐药性监测以及病房的隔离和消毒。     

碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌的分子特征

目的了解碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)耐药基因与毒力基因的分布及分子流行病学特征。方法收集2015年上海地区两所教学医院临床分离非重复的84株CRKP,采用纸片扩散法检测其对15种抗菌药物耐药表型,黏液丝试验检测高黏液表型,聚合酶链反应(PCR)及测序分析常见的碳青霉烯类耐药基因(bla_(KPC-2)、bla_(NDM)、bla_(IMP)、bla_(OXA)、bla_(VIM))与毒力基因(rmpA、mrkD、entB、ybtS、magA、iutA、allS、kfu),多位点序列分型(MLST)方法进行克隆分型,eBURST软件对克隆分型结果进行种群结构分析。结果 84株CRKP除对环丙沙星及阿米卡星耐药率分别为77.4%(65株)和82.1%(69株)外,对其他抗菌药物耐药率高,均在90%以上,对亚胺培南、美罗培南、厄他培南耐药率均为100%。黏液丝试验阳性2株。PCR测序显示92.9%(78株)CRKP携带碳青霉烯类耐药基因,其中blaKPC-2的阳性率为90.5%(76株),分别检出1株bla_(NDM)、bla_(IMP)阳性菌株,未检出bla_(OXA)和bla_(VIM)。毒力基因mrkD、ybtS和entB分别为97.6%(82株)、92.9%(78株)和100%(84株),其他毒力基因阳性率较低。MLST分为8个ST型,以ST11为主,占71株(84.5%),ST15为4株,ST323为4株,2株高黏液表型克隆株均为ST11型。e BURST分析发现84株CRKP中有2个ST群。每个ST群分别包括2个ST型(ST11和ST1869,ST15和ST709)。其他4个ST型都是单个ST型,本研究中71株ST11、4株ST15、4株ST323和1株ST45分别属于CC258、CC15、CC163克隆复合体。结论 CRKP对临床常用抗菌药物呈高度耐药状态,肺炎克雷伯菌多重耐药或广泛耐药主要与菌株携带bla_(KPC-2)有关,CRKP中3种常见毒力基因mrkD、ybtS、entB阳性率高,ST11为该两所医院CRKP的主要ST型。     

ST11型KPC-2和NDM-1联产肺炎克雷伯菌流行病学特征分析*

摘要:目的了解联产KPC-2和NDM-1型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的流行病学特征,为临床使用抗菌药物提供参考依据。方法收集徐州医科大学附属医院2021 年6月至12月分离的碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(CRKP),采用微量肉汤稀释法进行 抗菌药物最低抑菌浓度( MIC)测定,使用K-B法检测头孢他啶/阿维巴坦抑菌圈直径,采用PCR扩增法检测碳青霉烯酶基因(blakpc、blaNM、blavm、blaymp 、blax.)和超广谱β-内酰胺酶基因(blacnx.M、blasv、blareu),采用多位点序列分型(MIST)和脉冲场凝胶电泳(PFGE)方法检测其同源性。结果2021 年下半年分离出239例CRKP ,其中发现3株KPC-2和NDM-1联产的CRKP ,且均为ST11型。3株联产碳青霉烯酶的CRKP菌株对头孢菌素类、喹诺酮类、氨基糖苷类、碳青霉烯类和头孢他啶/阿 维巴坦100%耐药,对多黏菌素均敏感,其中1株对替加环素中介耐药。同源性分析显示,其中2株高度同源。结论3 株KPC-2和NDM-1联产CRKP菌株对多种抗菌药物均呈现高水平耐药,为中国主要的碳青霉烯类耐药流行株ST11型,应当加强对此类碳青霉烯酶联产茵株的检测,控制此类细茵在医疗机构内的流行。     

氨曲南联合头孢他啶/阿维巴坦对产新德里金属β-内酰胺酶大肠埃希菌的体外抗菌活性评估

摘要:目的评估氨曲 南联合头孢他啶/阿维巴坦对产新德里金属β-内酰胺酶(NDM)大肠埃希菌的体外抗菌活性。方法收集2018- -2020 年临床分离的碳青霉烯耐药大肠埃希菌30株,采用微量肉汤稀释法检测常规药物的敏感性,采用E-test 试验检测菌株对氨曲南和头孢他啶/阿维巴坦的最低抑菌浓度(MIC),双E-test纸条法检测氨曲南与头孢他啶/阿维巴坦之间的协同作用;酶抑制剂增强试验检测碳青霉烯酶表型;PCR扩增和测序技术检测碳青霉烯酶基因和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因;多位点序列分型(MLST)对菌株进行分子分型。结果碳青霉烯酶表 型检测结果显示,30株大肠埃希菌均为金属酶表型,基因检测结果显示携带NDM-5基因26株,携带NDM-7基因2株,携带NDM-1和NDM-9基因各1株。另外,15株携带TEM-I基因,22株携带CTX-M-I组基因( 10株携带CTX-M-I5,12株携带CTX-M-55) ,9株携带CTX-M-9组基因(均为CTX-M-27)。MLST将30株菌分为8个不同的ST型,以ST167(40% , 12/30)、ST405 (20% ,6/30)和ST410( 20% , 6/30)为主。30 株细菌仅对替加环素和多黏菌素敏感,对阿米卡星耐药率为46.7%。27 株对氨曲南耐药的菌株,在联合头孢他啶/阿维巴坦后25株细茵由耐药变为敏感,氨曲南MIC3g和MIC。分别下降至2 μg/mL和4 μg/mL。结论氨曲南联合 头孢他啶/阿维巴坦对产NDM金属酶大肠埃希菌有较强的体外协同作用，可成为一种治疗产金属酶大肠埃希菌感染的潜在药物组合。     

碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌的分布及耐药性分析

目的研究山西大医院碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)分离株的临床分布,主要耐药表型和耐药基因,评估CRKP菌株在改良碳青霉烯类灭活实验(mCIM)中的诊断能力。方法以41株CRKP菌株为研究对象,采用VITEK-2全自动微生物分析仪进行鉴定和药敏试验。使用mCIM进行产酶菌株筛选。使用PCR方法检测KPC、NDM等基因。结果41株临床分离株主要来自重症医学科,占24.39%。标本类型主要为痰标本,占31.71%。41株对90%以上的常用药物具有耐药性,其中40株携带KPC基因,1株携带KPC和NDM基因,1株携带NDM基因。mCIM可以准确的检测出碳青霉烯酶。结论KPC型碳青霉烯酶是临床分离的CRKP株中的主要酶,通过使用mCIM可以有效地发现产生耐碳青霉烯酶的菌株。