新鱼腥草素对小鼠移植型肝癌抑制作用的研究

新鱼腥草素(Neo-Houttuyninum)化学名为十二酰乙醛亚硫酸氢钠,临床上多用于治疗各种感染性疾病,也有用于治疗孢子丝菌病。为探索新鱼腥草素对肿瘤的治疗作用,本文试用于体外抑制小鼠移植型肝癌(腹水型)细胞及新鱼腥草素瘤苗对小鼠移植型肝癌(皮下型)抑制作用观察。     

新鱼腥草素对小鼠艾氏腹水癌的作用及癌细胞内c-AMP水平影响的研究

腹水测量:将处死的小白鼠称重后,剖腹取出腹水于刻度试管内,并用干棉球将剩下的腹水吸干称重,取腹水前鼠重减去取腹水后鼠重,即该鼠的腹水量。癌细胞总数测定:按常规用白细胞计数器计数(腹水经过一定稀释倍数以后计数),求算出每只小鼠癌细胞总数,并根据给药组与对照组的比较算出抑制率。     

甘草对大戟缓解小鼠肝癌腹水的影响

目的 观察不同比例的甘草-大戟配伍煎剂对肝癌腹水小鼠的干预作用。方法 120只昆明小鼠随机分为空白、模型、大戟与甘草不同配比（1∶0.5、1∶1、1∶2和1∶4）、大戟单煎和甘草单煎共8组,每组15只。除空白组外,其他组小鼠腹腔均接种制备肝癌腹水小鼠模型,并分别灌胃给药12d,模型组给予等量生理盐水。12d后检测体质量、腹围、腹水量和肝肾指数,筛选甘草对大戟抗肝癌腹水药效影响显著的配比条件,并采用Western Blot法分析肾组织的水通道蛋白-2（Aquaporin-2,AQP2）和肾加压素受体（Renal vasopressin receptors-2,V2R）的蛋白含量,采用生化法测定小鼠血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、尿素氮（BUN）和尿肌酐（Cr）的含量。结果 与模型组比较,大戟单煎组和大戟∶甘草1∶2组的腹水量、腹围和体质量显著减少（P<0.05~0.01）,并降低肾组织AQP2和V2R的表达（P<0.05~0.01）,其中,大戟∶甘草1∶2组能增强大戟单煎组的作用（AQP2:P<0.05,V2R:P<0.01）,而大戟∶甘草1∶4组则降低单煎组的作用（AQP2:P<0.05,V2R:P<0.01）。结论 大戟防治小鼠肝癌腹水的作用可能会因不同比例甘草的配伍而改变:或增强或被抵消,且相关变化可能与其有效调节了肾组织内的AQP2和V2R蛋白表达有关。      

白藜芦醇对小鼠移植性肝癌组织中细胞周期蛋白的影响

目的　研究白藜芦醇 (Res)对小鼠移植性肝癌组织中细胞周期蛋白CyclinD1,CyclinB1和p34cdc2表达的影响 ,探讨Res抗肝癌作用及其机制 .方法　利用小鼠移植性肝癌H2 2模型研究Res的体内抗肿瘤效果 ,免疫组织化学检测实验组与对照组小鼠肝癌及瘤旁肝组织CyclinD1,CyclinB1和p34cdc2蛋白的表达情况 .结果　Res治疗组能不同程度抑制小鼠肝脏移植瘤的生长 ,10mg·kg- 1 和 15mg·kg- 1 的Res治疗时抑瘤率分别为 36 .3%和 4 9.3% ,与对照组比较有显著差异 (P <0 .0 5 ) .与对照组相比 ,Res治疗组癌组织中CyclinD1的表达无明显变化 (6 6 .7%vs 6 0 .0 % ,P >0 .0 5 ) ,而CyclinB1(77.8%vs30 .0 % ,P <0 .0 5 )和p34cdc2 (88.9%vs 4 0 .0 % ,P <0 .0 5 )的表达明显降低 .结论　Res具有抗肝癌作用 .通过抑制Cy clinB1和p34cdc2的表达影响细胞周期的进程 ,可能是Res抗癌作用的机制之一 .     

瑞香狼毒提取物对小鼠H22肝癌细胞细胞周期的影响

目的 研究中药瑞香狼毒三种不同提取物A、B、C(SCL-A、SCL-B、SCL-C)在体外对小鼠H22肝癌细胞的抑制作用,并探讨其抑制肿瘤的作用机制.方法 联合应用细胞培养技术,MTT比色法,流式细胞术等方法研究三种不同的提取物在体外对小鼠H22肝癌细胞的抑制作用.结果 体外MTT实验结果显示,三种提取物作用于体外培养的H22肝癌肿瘤细胞后,细胞的增殖明显受到抑制,用药组细胞培养孔的OD值明显小于对照组,表现出正的剂量效应关系.SCL-A、SCL-B和SCL-C的IC50分别是:0.43 μg/mL、0.26 μg/mL、0.15 μg/mL.流式细胞分析表明,经药物作用后细胞被阻止在G0G1期,PI指数明显降低,AI指数明显增高.结论 体外抗肿瘤研究表明,SCL-A、SCL-B和SCL-C作用于H22细胞后,可明显抑制细胞增殖、阻止细胞在G0G1期.瑞香狼毒的三种提取物均具有显著抗肿瘤作用.     

蜂毒素对小鼠肝癌H22细胞增殖的影响

目的 观察蜂毒素对小鼠肝癌H22细胞增殖的影响，探讨其抗肿瘤的可能作用环节。方法 以MTT法测定蜂毒素体外对小鼠肝癌H22细胞增殖的影响，运用流式细胞术分析增殖细胞核抗原(PCNA)的表达，并观察iv蜂毒素对荷瘤小鼠的抑瘤作用。结果蜂毒素对H22细胞的抑制作用随药物浓度增加而增强；蜂毒素作用于H22细胞后，细胞PCNA平均荧光强度低于对照组；iv蜂毒素对小鼠皮下H22肝癌细胞具有明显的抑制作用，抑瘤作用随浓度增加而增强。结论蜂毒素在体内外对小鼠肝癌H22细胞增殖均有明显的抑制作用，下调细胞PCNA表达可能是其作用环节之一。     

鱼腥草素类衍生物的合成研究进展

鱼腥草为三自草科植物菜Houttuynia CordataThuna的新鲜全草或干燥地上部分,始载于《名医别录》。因其叶具鱼腥气,故俗称鱼腥草。其味辛,性微寒,具有清热解毒、消痈排脓、利尿通淋的功效,主要用于肺痈吐脓、痰热喘咳、热痢、热淋、痈肿疮毒等病症的治疗。     

5种鱼腥草素类似物的合成

鱼腥草(Houttuynia cordata Thunb)有效成份为癸酰乙醛,它的亚硫酸氢钠加成物在临床上作为抗菌消炎药。我组于1976年合成了十二酰乙醛亚硫酸氢钠加成物,称新鱼腥草素(neo-houttugninum)已广泛用于临床。动物实验证明新鱼腥草素对小鼠移植性肝癌及艾氏腹水癌有抑制作用并可升高癌细胞内cAMP水平,为寻找性能更好的药物。本文报告笔者近年以构效原理合成的5个不同酰基的乙醛亚硫酸氢钠加成物R-CO-     

丹参注射液对小鼠Lewis肺癌细胞周期素D1表达的影响

目的:观察丹参注射液对小鼠Lewis肺癌细胞周期素D1(Cyelin D1)的表达.方法:建立Lewis肺癌小鼠模型,用免疫组织化学方法检测丹参对肿瘤细胞Cyclin D1表达的影响,测肿瘤体积、瘤重.结果:生理盐水组Cyclin D1阳性表达率与丹参组和环磷酰胺组有显著性差异,而后两组差异无显著性.结论:丹参可抑制小鼠Lewis肺癌Cyclin D1的异常表达并抑制小鼠IJewis肺癌生长.     

抑制细胞周期素依赖性蛋白激酶5对小鼠足细胞凋亡的影响

目的探讨细胞周期素依赖性蛋白激酶5(Cdk5)在高糖刺激体外培养小鼠足细胞中的表达及抑制Cdk5表达对高糖诱导足细胞凋亡的影响。方法 (1)体外培养条件性小鼠足细胞,分为正常糖组、甘露醇组、高糖组,高糖组按不同刺激时间分为0、6、12、24、48h5组,应用蛋白质印迹(Western blot)法检测足细胞中Cdk5蛋白表达水平。(2)应用Cdk5miRNA干扰质粒抑制足细胞中Cdk5基因的表达水平。分别设立:NG组(正常糖);HG组(高糖);HG+S组(高糖+Scrambled阴性质粒);HG+C组(高糖+Cdk5miRNA质粒)。以上各组细胞培养48h后,应用流式细胞术和末端脱氧核苷酰基转移酶介导性dUTP切口末端标记(TUNEL)法检测足细胞凋亡水平,Western blot法检测凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和分裂型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)的蛋白表达水平。结果与正常糖组相比,高糖刺激后,足细胞中Cdk5的蛋白表达水平明显增加(P<0.05)。Cdk5miRNA干扰质粒能显著抑制足细胞中Cdk5的表达水平。与HG组和HG+S组相比,HG+C组足细胞凋亡率显著降低(P<0.05),凋亡相关蛋白cleaved caspase-3蛋白表达水平和Bax/Bcl-2蛋白表达比率也有明显降低(P<0.05)。结论高糖刺激可以增加足细胞中Cdk5蛋白的表达水平;抑制Cdk5表达可以降低高糖刺激诱导的足细胞凋亡。     

新鱼腥草素钠对小鼠鲍曼不动杆菌肺感染模型的保护作用

目的 构建小鼠鲍曼不动杆菌诱导的肺炎模型,观察新鱼腥草素钠对鲍曼不动杆菌肺部感染的保护作用。方法 将小鼠分为对照组、肺炎模型组、低剂量新鱼腥草素钠组和高剂量新鱼腥草素钠组。术前4 d和1 d利用环磷酰胺预处理各组C57BL/6小鼠,从术前3 d开始,低剂量新鱼腥草素钠组和高剂量新鱼腥草素钠组每天给予新鱼腥草素钠治疗,使用重症监护病房分离的鲍曼不动杆菌菌株制备新鲜菌液,通过气道接种方法接种至小鼠制备鲍曼不动杆菌肺感染模型,分别于接种后24、72 h进行小鼠肺及血液细菌计数,苏木精-伊红染色观察肺组织炎症变化,检测支气管肺泡冲洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）白细胞、中性粒细胞数量以及肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）的水平。结果 小鼠接种鲍曼不动杆菌后肺及血液中细菌数量增多（P＜0.05）;小鼠肺部有严重的炎性反应和组织损伤,BALF中白细胞计数升高（P＜0.05）,TNF-α、IL-1β含量增加。而经过新鱼腥草素钠治疗后,小鼠肺及血液中细菌数量显著低于肺炎模型组,肺组织损伤较轻, BALF中白细胞、中性粒细胞以及TNF-α、IL-1β水平均显著升高（P＜0.05）。结论 新鱼腥草素钠能够显著提高鲍曼不动杆菌感染小鼠的白细胞数量和活性,从而增强抗感染能力。     

Mitomycin C对小鼠腹水肝癌细胞膜脂的作用

本实验用1,6-二苯基-1,3,5-已三烯(DPH)作荧光探剂,应用荧光偏振技术研究Mitomycin C(MC)对小鼠腹水肝癌细胞膜脂的作用。结果表明,MC使细胞膜脂区流动性降低,呈明显的量效关系。薄层液相色谱分析,MC改变了膜脂的Rt值。但MC不改变膜的相变温度。     

鱼腥草素的合成及临床疗效观察

鱼腥草为三白草科蕺菜属植物,学名Houttynia Cordata Thunberg。民间广泛用为清热解毒药,近年来临床上用其挥发油制成注射剂,治疗某些炎症疾病取得良好效果。天然鱼腥草中挥发油含量较低,经测定新鲜植物中含油率仅达千分之一。植物     

氯化汞对小鼠Lewis肺癌细胞周期的影响

目的：研究氯化汞MC对小鼠Lewis肺癌细胞周期的影响。方法：采用流式细胞仪检测了MC对小鼠Lewis肺癌细胞周期的影响。结果：Lewis肺癌细胞表现为G0／G1期细胞数呈剂量依赖性增加，S期细胞数呈剂量依赖性减少。结论：MC能诱导小鼠Lewis肺癌细胞周期阻滞，使进入S期的细胞数明显减少，DNA复制受阻，进而死亡。     

威麦宁对小鼠Lewis肺癌细胞周期的影响

目的复制小鼠Lewis肺癌模型,检测威麦宁的抑瘤率.方法采用流式细胞术分析、免疫组化法检测药物对模型鼠肿瘤细胞周期及对Cyclin D1表达的影响.结果威麦宁浓度在100、150、200、250 mg/(kg*d)时,对小鼠Lewis肺癌的抑制率分别为19.14%、33.59%、40.63%、51.56%, 药物对肿瘤的抑制作用具有剂量依赖性;药物可将肿瘤细胞阻滞在G0～G1期,并降低肿瘤细胞Cyclin D1的表达(P＜0.01).结论威麦宁可能是通过降低肿瘤细胞Cyclin D1的表达,将肿瘤细胞阻止于G0～G1期,使细胞不能进入S期进行DNA复制,从而抑制肿瘤的生长.     

大蒜素对小鼠脾脏及其细胞周期的影响

目的利用流式细胞仪研究大蒜素对小鼠脾脏及其细胞周期的影响。方法将80只昆明小鼠随机分为高剂量900 mg/(kg·bw)、中剂量600 mg/(kg·bw)、低剂量300 mg/(kg·bw)和生理盐水对照组,各剂量组雌雄各半,每日灌胃大蒜素,对照组灌胃生理盐水。每天灌胃1次,灌胃容量为0.1 m L/10 g,连续灌胃14 d。于灌胃结束1周后将小鼠处死,分离脾脏计算脾脏器系数并制取单细胞悬液,应用流式细胞仪检测分析小鼠脾脏的细胞周期。结果高剂量组小鼠的脾脏器系数较生理盐水对照组显著升高(P0.05);其中高剂量组和中剂量组脾G2/M期细胞、S期细胞百分比明显增加(P0.05),脾G0/G1期细胞百分比明显减少(P0.05),并且随着大蒜素剂量的增加,3个剂量组进行两两比较,差异有统计学意义,呈现剂量依赖性。结论大蒜素可促进脾脏产生、释放免疫活性物质,促进脾脏的生长,调节脾脏的免疫活动,使G0/G1期细胞百分比减少,G2/M期细胞、S期细胞百分比增加,缩短细胞周期,增加小鼠脾脏指数,对小鼠的免疫具有正向调节作用。     

益气健脾方对H22肝癌腹水小鼠生存期及体重的影响

目的:探讨益气健脾方对于H22肝癌腹水的生存期及体重的影响。方法:取传代后的H22腹水接种于小鼠腹腔,造成H22肝癌腹水模型,随机分为4组:模型组、5-Fu组、益气健脾小剂量组、益气健脾大剂量组,每组10只,造模后开始给药,模型组予灌NS 0.4 mL;5-Fu组,予隔日灌胃0.2 mL/d;益气健脾大、小剂量组分别灌益气健脾方不同浓度0.4 mL/d,灌胃至空白组出现第1只死亡时停止灌胃,观察各组小鼠的生存时间及体重的变化。结果:其他3组小鼠体重增长情况较空白组有无显著差异;生存期大剂量组与小剂量组之间存在差异,5-Fu组生存时间最长,较其他3组有显著差异。结论:益气健脾方对于H22肝癌腹水小鼠模型的体重无明显有影响,对于小鼠的生存期存在剂量依赖性。     

单味溪黄草对小鼠移植性腹水型肝癌的防治效果观察

目的探讨单味溪黄草水煎剂对小鼠移植性腹水型肝癌(H22)细胞防治效果。方法将实验小鼠除正常对照组皮下注射生理盐水外，其它各组皮下移植H22细胞后，预防组小鼠饮用溪黄草水煎剂，治疗组小鼠4d后待有肿物形成时饮服溪黄草水煎剂．以观察小鼠生瘤率、死亡率、瘤体重量及淋巴和肺组织转移情况。结果实验各组除正常对照组外小鼠生瘤率100．0％，预防和治疗组的瘤重和死亡率与模型对照组比较均有增加，肺转移明显，但未见淋巴转移。结论单味溪黄草水煎剂不能抑制H22细胞生长，对经血循环转移至肺有激发加强作用。     

冬虫夏草对未成年小鼠腹水型肝癌移植瘤生长影响的性别差异分析

目的：探讨具有雄激素样作用的冬虫夏草对肝癌细胞生长的影响。方法：以不同性别未成年小鼠的腹水型肝癌皮下移植瘤为实验模型,从移植瘤细胞当天起,每天给试验组小鼠经口灌服虫草水提物液体2次,连续给药3周,对照组不给药,满1个月时终止实验,解剖小鼠,称瘤体湿重,比较对照组与试验组的平均瘤重和计算抑瘤率。结果：在雌性小鼠中,呈现明显抑瘤效果,试验组平均瘤重明显小于对照组,抑癌率：第一批为33．007％;第二批为37．5105％;第三批为36．0099％;在雄性小鼠中,则呈现相反作用,试验组平均瘤重明显大于对照组,促癌率：第一批为34．5227％;第二批为31．2388％;第三批为32．8780％。结论：在与性激素相关的动物肿瘤中,冬虫夏草的抑癌或促癌活性可能受到性别差异的影响。在人体是否存在这种关系有待进一步研究。     

单味溪黄草对小鼠移植性腹水型肝癌的防治效果观察

目的　探讨单味溪黄草水煎剂对小鼠移植性腹水型肝癌 (H2 2 )细胞防治效果。方法　将实验小鼠除正常对照组皮下注射生理盐水外 ,其它各组皮下移植H2 2 细胞后 ,预防组小鼠饮用溪黄草水煎剂 ,治疗组小鼠 4d后待有肿物形成时饮服溪黄草水煎剂 ,以观察小鼠生瘤率、死亡率、瘤体重量及淋巴和肺组织转移情况。结果　实验各组除正常对照组外小鼠生瘤率 10 0 .0 % ,预防和治疗组的瘤重和死亡率与模型对照组比较均有增加 ,肺转移明显 ,但未见淋巴转移。结论　单味溪黄草水煎剂不能抑制H2 2 细胞生长 ,对经血循环转移至肺有激发加强作用