FoxP3+ CD4+ CD25+调节性T细胞在重症肌无力发病机制中的作用

目的 在细胞与分子水平检验重症肌无力(myasthenia gravis,MG)患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Tregs)的表达缺陷,探讨CD4+CD25+Tregs亚群异常与MG发病间的关系.方法 流式细胞技术检测21例MG患者(11例经胸腺切除)与20名健康对照者(healthy controls,HCs)外周血CD4+CD25+Tregs及FoxP3+CD4+CD25+Tregs含量,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-FQ-PCR)分析MG患者与HCs外周血CD4+CD25+Tregs中FoxP3 mRNA的表达.结果 MG患者外周血CD4+CD25+ Tregs占CD4+T细胞含量与HCs比较无统计学差异(P＞0.05).MG患者外周血FoxP3+CD4+CD25+ Tregs含量及FoxP3 mRNA表达量与HCs比较均显著性降低(P＜0.05);胸腺切除的MG患者与未经胸腺切除的MG患者外周血FoxP3+CD4+CD25+ Tregs含量及FoxP3mRNA表达量无统计学差异(P＞0.05).结论 MG患者外周血CD4+CD25+ Tregs数量正常,但其表面分子FoxP3的表达下调,这种CD4+CD25+ Tregs亚群的异常发现有助于深入阐明MG的免疫发病机制.     

重症肌无力患者外周血Th17和调节性T细胞分析

目的 观察重症肌无力(myasthenia gravis,MG)患者Th17细胞和调节性T细胞的水平,并研究甲强龙冲击治疗对其影响.方法 应用四色流式细胞仪检测66例MG患者及35名健康对照者外周血Th17细胞和CD4+CD25highT细胞百分率;分析其中18例患者外周血Th17细胞与美国MG协会(MGFA)评分相关性;观察8例MG患者甲强龙冲击治疗2周后上述细胞的变化.结果 MG患者与健康对照者外周血Th17细胞百分率分别为2.61%±0.28%与0.94%±0.12%(Z=4.059,P=0.0001);甲强龙治疗前后8例MG患者Th17细胞百分率分别为4.72%±1.21%与1.81%±0.69%,差异有统计学意义(Z=1.995,P=0.0460);患者外周血Th17细胞水平与MGFA评分呈正相关(r=0.5359,P=0.0219).结论 MG患者外周血中Th17细胞升高,甲强龙冲击治疗可降低其水平,这可能是改善MG患者病情的有效机制.     

辅助性T细胞及其细胞因子在重症肌无力中的作用

目的探讨辅助性T细胞及其相关细胞因子在全身型MG患者急性期发病中的作用。方法采用流式细胞术检测33例全身型MG患者和34例健康对照组外周血中Tfh细胞亚群CXCR5~+CD4~+T、CD45RO~+CXCR5~+CD4~+T、CD45RA~+CXCR5~+CD4~+T、ICOS~+CXCR5~+CD4~+T和PD-1~+CXCR5~+CD4~+T细胞占CD4~+T细胞的比例。采用流式液相多重蛋白定量(cell based assay,CBA)技术检测MG组及对照组血清中IL-17A、IFN-γ、IL-4、IL-21的含量。应用ELISA技术检测MG组及对照组血清中IL-22的含量。根据QMGs(the quantitative myasthenia gravis score,QMGs)对纳入研究的MG患者进行评分,QMGs反映了MG患者的病情严重程度。结果 MG组外周血中的循环Tfh细胞(ICOS~+CXCR5~+CD4~+T和PD-1~+CXCR5~+CD4~+T)较对照组增高(P=0.016,P0.001),且PD-1~+CXCR5~+CD4~+T细胞与MG患者病情严重程度正相关(r=0.405,P=0.019)。MG组血清IL-21、IL-17A、IFN-γ的含量较对照组升高,有统计学意义(P=0.007,P=0.016,P=0.007);MG组血清IL-4的含量较对照组略有增多,IL-22含量较对照组略有减少,但均无统计学意义。MG组IL-4含量QMGs呈负相关,差异具有显著性(r=-0.393,P=0.024)。结论 MG急性期ICOS~+和PD-1~+的循环Tfh细胞可能促进MG发病;IL-21、IFN-γ、IL-17A同样可能促进MG发病;IL-4可能对MG有保护作用。     

重症肌无力患者外周血调节性T细胞及B细胞激活因子受体的分析

目的 研究重症肌无力(MG)患者外周血多群调节性T细胞的水平及其B细胞表达B细胞激活因子受体(B cell-activating factor receptor,BAFF-R)的情况.方法 应用四色流式细胞仪检测61例MG患者与23名健康对照外周血调节性T细胞(CD4+ CD25 high Foxp3+、CD8+ CD28-、CD8+ CD122+)以及CD19+ BAFF-R+细胞的百分率.结果 MG组与健康对照组外周血CD4+ CD25 high Foxp3+ T细胞的百分率分别为32.12%±16.12%与65.15%±14.72%,MG组该群调节性T细胞的水平明显低于健康对照组(P＜0.01);两组CD8+ CD28-及CD8+ CD122+ T细胞的水平差异无统计学意义.此外,MG组外周血CD19+ BAFF-R+细胞的水平(10.57%±5.59%)显著高于健康对照组(5.38%±3.87%,P＜0.01).大剂量激素或大剂量激素加丙种球蛋白治疗后短期内可使MG组外周血CD4+ CD25 high Foxp3+调节性T细胞的百分率增加(P＜0.05).结论 MG患者Foxp3+的CD4+ CD25 high调节性T细胞的减少提示MG患者存在免疫和耐受的失衡,显示了T细胞的自身免疫性.在B细胞方面,MG患者外周血CD19+ B细胞上BAFF-R表达增高,提示其体内B细胞已处于易激活状态.     

重症肌无力患者血液T细胞亚群和T细胞功能

本文对一组重症肌无力病人血液T细胞亚群及外周血单个核细胞产生白细胞介素2的能力进行了测定。结果发现病人的OKT_8~+细胞减少,OKT_4~+/OKT_8~+比值增高,产生白细胞介素2能力降低,这些变化在全身型病人较眼肌型明显。本文结合文献讨论细胞免疫的变化在本病发病机理中的作用,并提出IL—2对本病进行免疫调节治疗的前景。     

滤泡辅助性T细胞在重症肌无力发病机制中的研究进展

重症肌无力是自身抗体介导的免疫性疾病,其发病机制与滤泡辅助性T细胞(Tfh)及其分泌的相关细胞因子密不可分。胸腺生发中心(GC)的发现对重症肌无力的研究意义重大,源于GC的Tfh细胞是辅助B细胞迁移、增殖、分化为浆细胞并产生高亲和力抗体的主要效应T细胞,在免疫调节过程中发挥核心作用。近年来,越来越多研究报道Tfh细胞参与重症肌无力发生的病理过程;同时,靶向或被动转移Tfh细胞的治疗策略及临床试验已成为相关研究热点。本综述围绕Tfh细胞的表型、分化与调节及其与重症肌无力发病机制研究的最新进展进行阐述。     

重症肌无力T细胞受体基因重排的初步研究

用Southern杂交方法检测了一组重症肌无力患者T细胞受体基因重排情况，结果示4例患者存在一条约9kb左右的异常条带，提示T细胞受体基因异常重排可能与重症肌无力发生及胸腺瘤相关。     

重症肌无力合并自身免疫病的临床研究

目的分析重症肌无力(MG)合并自身免疫病的种类、发病年龄和临床特点。方法回顾性分析作者医院2008-01-2012-01住院的MG患者,包括合并自身免疫病的MG患者的临床资料、影像学及实验室检查资料及治疗记录。结果共收集MG患者305例,合并自身免疫病1种或1种以上者28例(9.18%),其中男9例、女19例,性别构成与非合并免疫病者无统计学差异(P>0.05)。自身免疫病在MG之前发病者12例,平均(69.6±35.3)个月;在MG发病之后者14例,平均(72.4±38.4)个月;与MG同时发现2例;(1)MG合并自身免疫病组的MG发病年龄为(33.9±9.4)岁,与非合并自身免疫病患者的MG发病年龄〔(35.3±12.2)岁〕无统计学差异(P>0.05)。合并甲状腺功能亢进(甲亢)患者MG发病年龄(27.4±12.5)岁,较合并其他自身免疫病患者的MG发病年龄〔(41.6±10.3)岁〕和非合并自身免疫病患者(35.3±12.2岁)均低(均P<0.05)。(2)合并的自身免疫病中属甲亢最多(13例),其次为类风湿性关节炎(5例)、桥本甲状腺炎(4例)、吉兰-巴雷综合征(3例)。其中有3例合并2种自身免疫病,1例合并3种自身免疫病。(3)合并自身免疫病MG患者的Osserman分型:发病初期Ⅰ型13例,Ⅱa型3例,Ⅱb型10例,Ⅲ型2例;其中MG合并甲亢患者以Ⅰ型发病10例,超过合并其他自身免疫病MG患者(P<0.05)。结论 MG可合并多种神经系统或全身自身免疫病,以甲亢最多见。合并甲亢的MG患者中MG发病年龄较轻,以眼肌型多见。自身免疫病可在MG发病前、后或同时期出现。     

重症肌无力外周血调节性T细胞线粒体自噬异常的研究

目的探讨线粒体自噬对重症肌无力(myasthenia Gravis,MG)患者外周血调节性T细胞(CD4~+CD25~+regulatory T cell,Treg)功能的影响及关系。方法选择首次确诊、尚未接受治疗的15例MG患者,以15名健康人作为对照,分别采集外周血,以磁珠分选法获得Treg细胞,经流式细胞仪鉴定纯度后,分别通过透射电镜检测Treg细胞线粒体自噬情况、Western Blot法检测微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(microtubule associated protein light chain 3-Ⅱ,LC3-Ⅱ)的表达水平、JC-10荧光探针检测线粒体膜电位(以红色荧光细胞数/绿色荧光细胞数比值表示)变化、羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE,CFSE)检测Treg对正常CD4~+T细胞增殖抑制能力(荧光强度越强,增殖抑制能力越强)。结果与对照组比较,MG组电镜下线粒体自噬明显减少[(25.60±7.81)个、(19.20±5.49)个,t=-2.596,P0.05],且变形线粒体较多;MG组LC3-Ⅱ表达明显减少(0.450±0.137、0.334±0.124,t=-2.413,P0.05);MG组Treg细胞线粒体膜电位下降(2.153±0.537,1.726±0.494,t=2.126,P0.05);MG组CFSE检测平均荧光强度减弱(34.82±10.64、26.49±5.94,t=2.646,P0.05)。结论 MG患者有Treg细胞的线粒体自噬功能降低,这可能与其增殖抑制功能降低相关。     

重症肌无力T细胞受体基因重排的检测及其临床意义

目的胸腺病变情况与重症肌无力患者的治疗及预后密切相关，为了能早期诊断胸腺瘤。方法用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，分别以ＴＣＲ－α、β及γ为探针检测了一组重症肌力无力患者Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）基因重排。结果６例患者ＤＮＡ经ＥｃｏＲＩ酶切，与ＴＣＲ－α、β探针杂交时有一条异常的重排带。这６例患者已４例经手术证实为胸腺肿瘤。结论ＴＣＲ基因重排可能为早期诊断胸腺瘤提供帮助。     

重症肌无力患者外周血AIRE、Tfh细胞和Tfr细胞与病情严重性相关分析

目的探讨自身免疫性调节因子(AIRE)、滤泡辅助性T(Tfh)细胞和滤泡调节性T(Tfr)细胞与重症肌无力(MG)患者病情严重程度的相关性。方法收集2015-12—2016-4第四军医大学唐都医院收治的MG患者22例,根据临床表现分为全身型MG(GMG)和眼肌型MG(OMG);同期选取健康体检中心查体者10名作为健康对照。收集MG患者详细临床资料,包括美国MG协会(MGFA)分型及定量MG(QMG)评分。通过流式细胞术分析AIRE阳性细胞比例及Tfh/Tfr比值。结果 (1)AIRE表达在各组间比较差异具有统计学意义(P0.01)。GMG组和OMG组AIRE表达均较对照组降低(P0.01,P0.05),而GMG组与OMG组间比较差异无统计学意义(P0.05)。(2)Tfh/Tfr比值在各组间比较差异具有统计学意义(P0.01)。GMG组和OMG组Tfh/Tfr比值均高于对照组(P0.01,P0.05),且GMG组高于OMG组(P0.05)。(3)MG患者AIRE表达与MGFA分型及QMG评分呈负相关(r=-0.517,P0.05;r=-0.616,P0.01),Tfh/Tfr比值与MGFA分型和QMG评分呈正相关(r=0.761,r=0.581,均P0.01)。结论 AIRE、Tfh/Tfr比值与MG的病情严重程度有一定的相关性,并可能参与了MG的发病。     

树突状细胞与重症肌无力免疫耐受治疗的研究进展

重症肌无力(MG)是累及神经-肌肉接头处突触后膜上乙酰胆碱受体(AchR)的自身免疫性疾病,同时亦是迄今为止抗原抗体最为明确的自身免疫性疾病,患者细胞和体液免疫应答均存在异常,但MG确切的发病机制仍不完全清楚,它可能是一种由多基因调控、多种机制参与的复杂性疾病[1].     

调节性T细胞及其免疫抑制机制

调节性T细胞是T细胞的一个重要亚型,对维持机体免疫动态平衡具有重要作用。调节性T细胞有两种类型:天然发生的调节性T细胞和诱导产生的调节性T细胞,前者在胸腺中发育;后者由外周幼稚CD4+T细胞衍生而来。调节性T细胞可利用多种机制抑制免疫应答,这些抑制机制可概括为4种基本的"作用模式":通过抑制性细胞因子发挥抑制作用,通过细胞溶解发挥抑制作用,通过代谢阻断发挥抑制作用,通过调节树突状细胞的成熟或功能发挥抑制作用。文中将天然调节性T细胞和诱导的调节性T细胞的发育以及调节性T细胞的免疫抑制机制做一综述,并简略介绍调节性T细胞在缺血性脑血管病中的作用。     

重症肌无力免疫耐受治疗的研究进展(综述)

重症肌无力（MG）的发病本质就是由于自我耐受的破坏，导致针对乙酰胆碱受体的免疫应答异常。抗乙酰胆碱受体抗体的产生是T细胞依赖性的，乙酰胆碱受体特异性的T细胞就是MG特异性治疗的潜在靶位，随着MG免疫学研究的不断深入，其免疫耐受治疗将会特异地、有效地防止或阻断MG的发生与进展。     

重症肌无力发病机制的研究进展

重症肌无力 (myastheniagravis,MG)是一种神经肌肉接头 (neuromuscularjunction,NMJ)传递功能障碍的自身免疫性疾病,其发病机制尚未完全阐明。传统观点认为MG的发病与乙酰胆碱受体自身抗体(AChR Ab)介导的体液免疫密切相关,但最近发现NMJ处其他抗体、抗原特异性T细胞、细胞因子、调节性T细胞、遗传因素等在MG的发病中也扮演了重要的角色。一、体液免疫临床上发现大约 80%的MG患者血清中能检测到AChR Ab,称为血清阳性重症肌无力 (seropositivemyastheniagravis,SPMG),而另外 20%的MG患者体内不能检测到AChR Ab,即所谓血清…     

获得性自身免疫性重症肌无力

凡神经肌肉接头(NMJ)处突触后膜(PS)上乙酰胆碱受体(AChR)数量减少或功能减退,均可致活动后加重、休息后减轻等随意肌无力的临床表现,该病称为重症肌无力(MG)。MG病因众多,包括先天遗传、代谢障碍、中毒、药物(D-青霉胺等)、免疫障碍等。     

重症肌无力相关基因研究进展

重症肌无力(myasthenia gravis,MG)是一种细胞免疫依赖的、主要以乙酰胆碱受体抗体(AChRAb)介导的神经-肌肉接头处的自身免疫反应性疾病,其病因不明,可能由遗传因素和环境因素相互作用引起。     

NKT细胞活化对实验性自身免疫性重症肌无力的影响

目的选取NKT细胞刺激物α-GalCer,经不同时间点腹腔注射小鼠,使其激活NKT细胞,观察对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)临床表现及其相关免疫指标的影响,从而为治疗EAMG提供新的途径。方法建立C57BL/6小鼠EAMG的动物模型,选取刺激物α-GalCer腹腔注射,通过CD1d递呈引起Vα14+NKT细胞的激活,观察小鼠体重、临床表现及相关免疫指标的变化,探讨不同时间点NKT细胞激活对EAMG产生的效应。结果在C57BL/6小鼠,Vehicle组EAMG的发生率为90%,平均发病天数37±6;α-GalCer预防组疾病的发生率为30%,平均发病天数为51±9。结论a-GalCer提前免疫能激活NKT保护C57BL/6小鼠发生EAMG,该结果为EAMG和其他自身免疫病的防治提供了依据。     

调节性T细胞与胶质瘤免疫研究进展

调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)是一群具有抑制其他免疫细胞功能的负调控细胞,Treg细胞通过多种机制抑制CD4+T和CD8+T淋巴细胞、NKT细胞、B淋巴细胞、树突状细胞以及单核细胞/巨噬细胞等的分化和效应功能,是肿瘤免疫逃逸的关键因素;同时肿瘤细胞可以通过分化、扩增或招募Treg细胞有效地抑制抗肿瘤免疫,所以Treg细胞在肿瘤的发生、发展过程中发挥着极为重要的作用,是免疫治疗新的有效靶点。文章就其近年来在胶质瘤免疫领域的研究进展做一综述。