水通道蛋白-4在大鼠消化器官的表达与分布

目的探讨水通道蛋白-4在SD大鼠消化器官的表达与分布。方法动物麻醉处死后取胃、空肠、回肠、结肠、直肠、胰腺和肝脏等器官,常规进行脱水、固定、石蜡包埋、切片（4μm）后以链酶亲和素-生物素-过氧化物酶复合物法（SABC）检测水通道蛋白-4蛋白在上述组织中的表达。结果AQP4在正常SD大鼠消化道中的表达和分布具有选择性：食管和胃的上部基本不表达AQP4。从胃的中下部始见表达AQP4,集中于深部粘膜的基底部腺体。胃腺表达AQP4的细胞类型为壁细胞。十二指肠、空肠和回肠富舍AQP4,但少于胃部,AQP4在十二指肠、空肠和回肠出现的位置主要粘膜深部的腺隐窝。近端结肠的局部腺隐窝可见少量AQP4表达,远端结肠和直肠组未见AQP4表达。胰脏和肝胆亦可见微量AQP4表达。结论SD大鼠下段胃和小肠是AQP4主要表达的部位,近端结肠、肝胆和胰腺只微量表达AQP4。研究消化系统的疾病与AQP4的关系可能有助于我们进一步认识疾病的发病机制。     

胃癌组织中水通道蛋白1、微血管密度与细胞胀亡的关系及临床意义

目的：探讨胃癌组织中水通道蛋白1（AQP1）、微血管密度（MVD）与细胞胀亡的关系及临床意义。方法采用免疫组化法、蛋白印迹法检测55例胃癌、22例胃正常组织中AQP1的表达,Ⅷ因子相关抗原多克隆抗体标记血管内皮细胞法计数MVD,透射电镜观测细胞胀亡情况。随访并分析AQP1与胃癌患者预后的关系。结果胃癌组织中存在细胞胀亡;Ⅲ＋Ⅳ临床分期胃癌组织中的胀亡指数（OI）高于Ⅰ＋Ⅱ临床分期（P＜0.01）;淋巴结转移组OI明显高于无淋巴结转移组（P＜0.05）。AQP1表达强度与MVD呈显著正相关（P＜0.05）。在胃癌组织标本中,AQP1阳性表达率为58.2％,明显高于正常胃组织（P＜0.01）。胃癌伴淋巴结转移组AQP1表达水平明显高于无淋巴结转移组（P＜0.05）。多因素生存分析显示AQP1表达、有无淋巴结转移是预后的独立危险因素（P＜0.05）。结论细胞胀亡和AQP1表达与胃癌的血管生成、生物学行为密切相关;AQP1可以作为判断胃癌预后的临床指标。     

胃癌中水通道蛋白3的表达与淋巴结转移的关系

目的:探讨水通道蛋白3(AQP3)在胃腺癌不同分期中的差异表达与淋巴结转移的关系?方法:采用定量PCR?Western blot法对80例不同分期的胃腺癌组织及作为对照的癌旁非肿瘤组织中AQP3 mRNA和蛋白的表达分别进行检测,并与各临床病理分期中淋巴结转移情况进行分析?结果:AQP3在胃腺癌不同分期中的差异表达影响胃癌的淋巴结转移,有淋巴结转移的T1?T2?T3?T4期(UICC,2010)肿瘤组织中AQP3的表达明显高于无淋巴结转移者?结论:胃腺癌肿瘤组织中高表达的AQP3可能对患者淋巴结转移的发生有促进作用,因此AQP3有望成为预测胃腺癌转移和评估预后的重要指标,并可能是胃癌治疗靶点之一?     

水通道蛋白4和高迁移率族蛋白1在晚期胃癌中的表达

【目的】 研究晚期胃癌组织中水通道蛋白4(AQP4)和高迁移率族蛋白1(HMGB1)表达,探讨它们表达的临床意义【方法】 选择1999年11月至2005年6月在中山大学肿瘤医院接受FOLFOX或PLF方案化疗的Ⅳ期胃癌患者60例进行研究,胃癌组织病理蜡块切片,采用免疫组化方法检测其中AQP4和HMGB1蛋白表达情况并进行评分,Kaplan-Meier方法分析HMGB1表达与无进展生存时间(PFS)?总生存时间(OS)的关系【结果】 在60例已行FOLFOX或PLF方案治疗的胃癌患者标本中,3例腺癌标本中AQP4 阳性(5%),肿瘤旁相对正常的胃腺体表达全部强阳性(100%)HMGB1在18例标本中表达(30%)阳性,其中13例来自于FOLFOX治疗组(31%,13/42),5例来自于PLF组(31.3%,5/16),两组的阳性率无差异(P = 0.806)生存分析显示阳性与阴性表达的患者无进展生存期和总生存期差异无统计学意义,【结论】AQP4和HMGB1选择性在部分晚期胃癌组织中表达增加,它们在胃癌的发生,发展中的临床意义需进一步扩大样本研究     

水通道蛋白1、4在培养大鼠星形胶质细胞、BT325细胞及人脑胶质瘤组织中的表达

目的 水通道蛋白作为细胞膜特异性水转运蛋白在脑内分布广泛,参与脑内水平衡调节,与脑肿瘤、脑创伤等多种疾病导致的脑水肿有关.本实验主要研究水通道蛋白1、4在培养大鼠星形胶质细胞、人多形性胶质母细胞瘤系BT325细胞及人脑胶质瘤组织中的表达情况.方法 应用胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学染色鉴定培养大鼠星形胶质细胞及BT325细胞.应用反转录PCR法检测GFAP、AQP1及AQP4在不同组织细胞中的表达.结果 实验中培养大鼠星形胶质细胞及BT325细胞GFAP免疫细胞化学染色阳性.体外培养大鼠星形胶质细胞、人胶质母细胞瘤组织及对照组标本均有GFAP表达,同时也有AQP1及AQP4表达.BT325细胞只有GFAP表达,无AQP1及AQP4表达.结论 AQP1、4在培养大鼠星形胶质细胞及胶质瘤组织中均有表达,可能对脑功能的维持及肿瘤性脑水肿的发生、消散有重要影响.     

脑出血脑组织中水通道蛋白4的极性表达缺失

目的：观察脑出血（intracerebral hemorrhage,ICH）大鼠脑组织中水通道蛋白4（aquaporin 4,AQP4）的极性表达变化情况,以初步探讨其在出血性脑水肿中的作用。方法：SD大鼠随机分为sham组和ICH组,采用自体血注入法建立大鼠ICH动物模型,应用核磁共振成像检测血肿产生及发展情况,干湿重法检测脑水含量变化以及免疫荧光检测AQP4的极性表达变化情况。结果：ICH后1 d,血肿体积最大,脑水含量达到峰值,高达（79.769±0.710）%,差值具有统计学意义（P=0.000）;血肿周围组织中AQP4极性表达缺失,AQP4表达在星胶细胞胞体和突起上,而sham组中AQP4则极性表达在星胶细胞终足膜上。结论：ICH后血肿周围组织中AQP4极性表达缺失,后者可能促进了出血性脑水肿的发生。     

水通道蛋白-4在正常大鼠脊髓内的分布

目的: 明确正常大鼠脊髓内水通道蛋白-4(AQP4)的表达与分布,为进一步研究其生理功能提供理论依据. 方法: 采用AQP4 mAb,对正常SD大鼠脊髓的冰冻切片进行免疫组织化学染色,检测AQP4蛋白的表达水平. 结果: 免疫组织化学染色结果显示阳性着色细胞包括有胶质细胞、中央管室管膜上皮细胞、脊髓前角运动神经元、软脊膜上皮细胞,着色部位主要在细胞膜,其中在胶质细胞表现出一定的方向性,主要分布在与毛细血管内皮细胞接触的一侧. 结论: AQP4在正常大鼠脊髓内具有广泛的表达,在胶质细胞上其表达分布于与血脑屏障相关的毛细血管内皮细胞的一侧. 其表达的解剖分布提示AQP4在脊髓内主要参与中央管内水代谢以及神经组织间的水代谢调节.     

干扰水通道蛋白3对胃癌细胞增殖与凋亡的影响

目的:探究水通道蛋白3(AQP3)对胃癌细胞增殖与凋亡的影响及其可能机制。方法:通过RT-PCR、Western-blot实验检测胃癌细胞株中的AQP3表达水平;小干扰RNA构建AQP3低表达细胞系;CCK-8增殖实验和流式细胞术分别检测细胞增殖与凋亡水平;Western-blot检测细胞自噬水平,透射电镜观察自噬小体数目。结果:胃癌细胞AQP3表达水平较高;与干扰前相比,AQP3低表达细胞系中胃癌细胞增殖水平降低(P<0.05),凋亡水平提高(P<0.001),自噬标记蛋白LC3Ⅱ水平降低(P<0.001),P62表达水平上升(P<0.001)。结论:AQP3在胃癌细胞中高表达,干扰AQP3可通过降低自噬水平促进细胞凋亡,进而抑制胃癌细胞增殖,提示AQP3具有成为胃癌治疗分子靶点的潜能。     

水通道蛋白3、8和9的异常亚细胞分布参与大鼠酒精性肝病的发病

 目的 研究水通道蛋白(aquaporin, AQP) 3、8和9在大鼠酒精性肝病模型中的表达和亚细胞分布的情况。方法 将18只SPF级雄性SD大鼠随机分为3组:正常对照组,配对对照组和酒精造模组,每组各6只,分别给予正常啮齿类固体饲料、配对液体饲料和含酒精的液体饲料,喂养6周。通过免疫组化染色、Western blot、实时荧光定量PCR和免疫电镜等方法研究大鼠酒精性肝病动物模型中AQP3、8和9的表达水平及亚细胞分布情况。结果 AQP8、AQP9分布于毛细胆管膜、线粒体内膜等亚细胞结构。酒精摄入可以使大鼠肝脏细胞膜AQP8、AQP9的表达增加;减少AQP8在肝细胞毛细胆管膜和线粒体内膜上的分布并且增加AQP9在肝细胞毛细胆管膜上的分布;增加回肠AQP3和AQP8的膜浆表达比;而在结肠,慢性酒精摄入使AQP8和AQP9的膜浆表达比均下降。结论 AQP3、AQP8和AQP9在大鼠酒精性肝病模型中亚细胞分布异常可能参与酒精性肝病的发病过程。     

水通道蛋白4在肺腺癌细胞中的表达及其对肺腺癌细胞增殖与迁移的影响

目的研究水通道蛋白4(AQP4)在肺腺癌中的表达及其对肺腺癌细胞增殖与迁移的影响。方法收集20例经病理切片确诊的肺腺癌组织和4例癌周正常肺组织(距癌缘4～6cm,病理证实无肿瘤细胞),通过LSAB免疫组化法检测其中AQP4的表达。以APQ4-shRNA转染培养的肺腺癌细胞,通过Western blot法检测细胞中AQP4及E-cad-herin的表达;通过MTT法和Transwell小室法分别检测AQP4表达对肺腺癌细胞增殖与迁移的影响。结果 AQP4在肺腺癌组织中表达阳性率为55%(11/20),正常肺组织均为阴性。在肺腺癌细胞株中,AQP4均呈阳性表达且与E-cad-herin蛋白的表达呈负相关;AQP4的表达对肺腺癌细胞增殖无明显影响(P>0.05)。细胞迁移实验48h后,与对照组比较,AQP4-shRNA转染组细胞迁移显著减少(8.9%vs 14.8%,P<0.05)。结论 AQP4与肺腺癌的发生和迁移均相关;AQP4可能通过调节E-cadherin蛋白的表达而促进肺腺癌细胞的迁移。     

AQP5和AQP8在人结肠癌中的表达及意义

目的研究水通道蛋白5和水通道蛋白8在人结肠癌组织中的表达,初步探讨其在人结肠癌发生发展中的意义。方法采用免疫组织化学和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法,检测人结肠癌组织和癌旁组织中AQP5和AQP8的表达。结果 AQP5主要表达于人结肠癌组织中肿瘤细胞,癌旁正常组织基本没有表达;AQP8主要表达于癌旁正常组织,而在人结肠癌组织肿瘤细胞则基本没有表达。结论 AQP5在人结肠癌组织肿瘤细胞中高表达,AQP8在人结肠癌癌旁正常组织中高表达,二者在结肠癌组织和癌旁组织中的表达与肿瘤的TNM分期和淋巴转移相关,在人结肠癌的发生发展及转移过程中起重要作用。     

AQPs在宫颈鳞癌癌变过程中的表达及意义

目的研究水通道蛋白(aquaporins,AQPs)在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤样变(CIN)和宫颈鳞癌中的表达,分析其与宫颈鳞癌临床病理资料的相关性,探讨其在宫颈鳞癌病变中的可能作用及意义。方法免疫组化检测47例宫颈鳞癌、37例CIN、16例正常宫颈组织中AQPs的表达及分布。双重免疫组化染色法检测宫颈鳞癌中AQP1与VEGF,AQP3与VEGF,AQP8与VEGF的共同表达与分布。结果①AQP1在3组宫颈组织间质的微血管内皮细胞中表达;②AQP3、AQP4、AQP5和AQP8在正常宫颈鳞状上皮细胞、CIN异形细胞及宫颈鳞癌癌细胞胞质和(或)胞膜中表达;③AQP1在CIN的表达高于正常宫颈组织和宫颈鳞癌(P<0.05),在临床Ⅰ期宫颈鳞癌的表达高于临床Ⅱ期(P<0.05);④AQP3、AQP4、AQP5、AQP8在正常宫颈组织、CIN、宫颈鳞癌的表达逐渐增高;⑤AQP3在低分化组宫颈鳞癌中的表达高于中-高分化组(P<0.05);⑥AQP1和VEGF,AQP3和VEGF,AQP8和VEGF在宫颈鳞癌中共同表达。结论 AQP1、AQP3、AQP4、AQP5和AQP8在宫颈鳞癌癌变过程中起了一定的作用;AQP1、AQP3和AQP8可能参与宫颈鳞癌微血管的形成。     

水通道蛋白1、3在膀胱尿路上皮癌中的表达及临床意义

目的探讨膀胱尿路上皮癌中水通道蛋白1、3(AQP1、AQP3)的表达与分布,及其与组织学分级和病理分期之间的关系及临床意义。方法采用免疫组化S-P法、蛋白免疫印迹(Western-blot)法对60例膀胱尿路上皮癌组织及30例正常膀胱组织中AQP1及AQP3的表达进行检测,并分析与其不同组织学分级、不同病理分期和有无淋巴结转移的关系。结果 AQP1在膀胱尿路上皮癌组织及正常膀胱组织中主要表达在微血管的内皮细胞的细胞膜及细胞质中,AQP3主要表达在膀胱尿路上皮癌的癌细胞的胞膜及胞质中。免疫组织化学S-P法和Western blot法检测的结果基本一致。正常膀胱组织与不同分级的膀胱尿路上皮癌组织中AQP1及AQP3的蛋白表达量分别比较,差异均有统计学意义(P<0.01);正常膀胱组织与不同病理分期的膀胱尿路上皮癌组织中AQP1及AQP3的蛋白表达量比较,差异均有统计学意义(P<0.01);AQP1及AQP3在有淋巴结转移的膀胱癌组织中的表达量分别与无淋巴结转移的膀胱癌组织比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 AQP1和AQP3的表达与膀胱癌的组织学分级及病理分期有关,在膀胱癌形成及发展过程中起重要作用,对预测膀胱癌的侵袭性、分期及临床诊疗有指导意义。     

水通道蛋白1和血管内皮生长因子在宫颈鳞状上皮癌组织中的表达及相关性

目的:探讨水通道蛋白1(AQP1)和血管内皮生长因子(VEGF)在宫颈鳞状上皮癌组织中的表达及相关性。方法:应用免疫组织化学法检测41例宫颈鳞状上皮癌、55例宫颈上皮内瘤变(CIN)和22例正常宫颈组织中AQP1、VEGF的表达,探讨二者在宫颈癌组织中的表达及相关性。结果:AQP1在宫颈鳞状上皮癌、CIN的阳性率分别为90.24%、81.82%,均显著高于正常宫颈组织的40.91%(P<0.01);VEGF在宫颈鳞状上皮癌、CIN的阳性率分别为100.00%、96.36%,显著高于正常宫颈组织的63.64%(P<0.01);AQP1在宫颈鳞状上皮癌和CIN组织中的表达差异无统计学意义(P>0.05),而宫颈鳞状上皮癌组织中VEGF表达均明显高于CIN组织(P<0.01);AQP1、VEGF的表达与宫颈鳞状上皮癌患者的年龄和组织学分化程度间差异均无统计学意义(P>0.05);AQP1和VEGF的表达呈明显正相关关系(P<0.01)。结论:AQP1和VEGF在宫颈鳞状上皮癌和CIN组织中表达上调,可能与宫颈鳞状上皮癌的发生、发展有一定关系。     

AQP1、AQP2及AQP3在人腺性膀胱炎组织中的表达

目的：研究水通道蛋白（aquaporin,AQP）1、2、3在人腺性膀胱炎组织中的分布及表达情况。方法：取经尿道腺性膀胱炎电切手术切取的腺性膀胱炎组织及周围正常膀胱组织各30例,应用免疫组织化学S-P法检测AQP1、AQP2及AQP3的分布及表达，并通过计算机对染色结果进行灰度值测定。结果：在腺性膀胱炎组织中AQP1主要表达在微血管内皮细胞，免疫组化阳性指数35.947；AQP2主要表达在炎性膀胱黏膜上皮细胞的胞膜及胞质内，免疫组化阳性指数34.644；AQP3则呈阴性表达。AQP1在正常膀胱组织中主要表达于膀胱黏膜下微血管和小动脉的内皮细胞, AQP2和AQP3表达于膀胱黏膜上皮细胞的细胞膜及胞质中。AQP1、AQP2及AQP3在正常膀胱组织的免疫组化阳性指数分别为57.038、61.425及60.468，与在腺性膀胱炎组织中的表达比较差异有显著性（P<0.01）。结论：腺性膀胱炎时AQPs的表达量明显减低，炎症病变影响AQPs在膀胱组织中的的表达。     

水通道蛋白 1、血管内皮生长因子及微血管密度 在胃癌组织中的表达及临床意义

目的??探讨水通道蛋白 1（AQP1） 、血管内皮生长因子（VEGF） 、微血管密度（MVD）在胃癌组织中 的表达及 AQP1、VEGF、MVD 之间的相关性和临床意义。方法??选取郑州大学第二附属医院胃癌标本 79 例。每 例分别取癌组织和癌旁组织（距肿瘤边缘 <2?cm 处） ,采用免疫组织化学方法检测 AQP1、VEGF 与 MVD 在人 胃癌组织和癌旁组织中的表达,对 AQP1、VEGF 与 MVD 的表达及其与临床病理参数的关系进行分析。结果? AQP1、VEGF 在胃癌组织与癌旁组织比较,差异有统计学意义（ P ?<0.05） ,胃癌组织高于癌旁组织 ; MVD 在 胃癌组织的表达与癌旁组织比较,差异有统计学意义（ P ?<0.05） ,胃癌组织高于癌旁组织 ; AQP1、VEGF 及 MVD 与胃癌的分化、淋巴结转移、脉管癌栓及分期相关（ P ?<0.05） ; 胃癌组织中 AQP1 与 VEGF 的表达呈正 相关（ r =0.497, P ?<0.05） ; 在 VEGF 阳性表达的胃癌组织中, MVD 表达高于 VEGF 阴性表达的组织（ P ?<0.05） ,在 AQP1 阳性表达的胃癌组织中,MVD 表达高于 AQP1 阴性表达的组织（ P ?<0.05） 。结论??AQP1、VEGF、MVD 存在协同作用, 与肿瘤的发生、发展密切相关。     

Rac1在胃癌组织的差异表达及临床病理意义

目的研究Ras相关产物C3肉毒素底物1在胃癌组织中的差异表达,探讨其与胃癌生物学行为的关系。方法以Racl mRNA为标志基因,用实时定量PCR法检测34例胃癌组织、34例癌旁组织、7例胃腺瘤、7例正常胃组织中Racl mRNA差异表达情况。结果Racl mRNA在胃癌组织和癌旁组织中表达阳性,在胃腺瘤中表达弱阳性,而在正常胃组织中表达阴性;且在胃癌中的表达比在癌旁组织中表达的上调17倍,两者比较差异有显著性（P〈0．01）。结论Racl的表达、表达强度与胃肿瘤性质、胃癌的分化程度密切相关,为胃癌的基因治疗提供了新靶点。     

胃癌组织中MUC1表达的意义

目的:检测MUC1在胃癌及胃良性病变组织中的表达,探讨其在胃癌诊断和免疫治疗中的意义.方法:采用免疫组化方法检测58例胃癌及26例胃良性病变组织、10例胃正常组织中MUC1的表达.结果:胃癌组织中MUC1阳性表达46例,为深棕色或棕黄色颗粒,主要位于细胞核上;良性病变组织中4例可见弱阳性反应信号;正常胃组织中未见MUC1表达.MUC1在胃癌组织中的阳性表达率与胃良性病变组织及正常组织之间存在显著性差异(P＜0.05).MUC1基因表达与组织学分化及部位无关(P＞0.05);与组织浸润转移及与临床分期有关(P＜0.05).结论:MUC1在胃癌组织中的表达及分布特点可作为胃癌的鉴别诊断指标,有可能作为胃癌免疫治疗的靶分子.     

145例胃腺癌P21和P53免疫组化分析

目的：研究同一胃癌中癌基因和抑癌基因蛋白产物的表达。方法;应用免疫组织化学SP方法检测10例正常胃粘膜、10例萎缩性胃炎、10例肠上皮化生的胃壁组织和145例胃癌组织中P21和P53蛋白的表达水平。结果：10例正常胃粘膜、10例萎缩性胃炎、10例肠上皮化生的胃壁组织中未发现P21和P53。145例胃癌组织中P21和 P53的阳性检出率分别为55.2%和51.2%。表达阳性的P53定位于肿瘤核内,P21定位于细胞膜或细胞浆上。P21和P53的阳性表达率与胃癌的分化程度呈正相关。结论;检测P21和P53有助于评估胃癌的预后。     

慢性浅表性胃炎不同程度脾胃湿热证与胃黏膜水通道蛋白3、4基因表达的相关性

目的：探讨慢性浅表性胃炎（chronic superficial gastritis, CSG）不同程度脾胃湿热证与胃黏膜水通道蛋白（aquaporin, AQP）3、4基因表达的相关性。 方法：共纳入24例CSG患者,按脾胃湿热证不同程度分为轻、中、重度组,另选择8名健康人作为正常对照。胃镜下取胃体上部黏膜,液氮保存,荧光定量聚合酶链反应法检测胃黏膜AQP3和AQP4的基因表达。 结果：中、重度脾胃湿热证组AQP3和AQP4基因表达水平均高于正常对照组和轻度脾胃湿热证组（P〈0.05,P〈0.01）。重度脾胃湿热证组AQP3高于中度脾胃湿热证组（P〈0.05）。 结论：脾胃湿热程度不同,胃黏膜AQP3和AQP4基因表达亦不同,脾胃湿热程度与胃黏膜AQP3和AQP4基因表达相关,其表达会随着湿热程度的加重而升高。