造血因子对骨髓增生异常综合征患者c-kit受体的调控作用

ｃ ｋｉｔ原癌基因是干细胞生长因子 (ＳＣＦ)的受体基因 ,ｃ ｋｉｔ受体 (ＣＤ1 1 7)与其配体结合对造血干 祖细胞起支持作用 ,并发挥调节造血的作用[1 ] 。国外报道 ,正常骨髓单个核细胞ｃ ｋｉｔ受体表达率为 (4.0± 1.8) % [2 ] 。我们曾报道正常骨髓单个核细胞ＣＤ1 1 7表达率为 (3.0 4± 1.49) % ,并发现骨髓增生异常综合征 (ＭＤＳ)患者骨髓单个核细胞ｃ ｋｉｔ受体表达异常[3] ,这一异常是否与造血因子调控有关目前尚无报道。我们研究了ＳＣＦ、白细胞介素 3(ＩＬ 3)及红细胞生成素 (Ｅｐｏ)对ＭＤＳ患者骨髓单个核细胞ｃ ｋｉｔ受…     

表达Y568F/Y570F双位点突变型人c-kit受体对小鼠FDCP-1细胞增殖特性的影响

我们选择来源于正常小鼠骨髓的一种典型的早期造血祖细胞ＦＤＣＰ 1作为细胞模型 ,通过对稳定表达野生型和Ｙ5 6 8Ｆ Ｙ5 70Ｆ双位点突变型人ｃ ｋｉｔ受体的重组细胞株ｈｃ ｋｉｔ ＦＤＣＰ 1和ｈｃ ｋｉｔＤＭ ＦＤＣＰ 1生物学特性进行比较 ,研究ｈｃ ｋｉｔ受体近膜区第 5 6 8位和 5 70位酪氨酸磷酸化对ＦＤＣＰ 1细胞增殖的影响。材料和方法1　试剂　重组人ＳＣＦ购自Ｒ＆Ｄ公司 ,抗人ｃ ｋｉｔ受体单克隆抗体购自Ｎｅｏｍａｒｋｅｒｓ公司 ,ＦＩＴＣ标记的山羊抗小鼠ＩｇＧ购自邦定泰克公司 ,四甲基偶氮唑盐 (ＭＴＴ)和碘化丙锭 (ＰＩ…     

小鼠c-kit~＋Sca-1~＋和c-kit~＋Sca-1~－细胞代表不同分化阶段的造血干／祖细胞

为深入研究造血干细胞（ＨＳＣ）的生物学功能，根据表面标志，采用流式细胞仪分离和富集了小鼠骨髓中两类不同特征的ＨＳＣ亚群ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１＋和ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１－细胞。体外集落培养表明ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１＋细胞对ＩＬ－３或ＧＭ－ＣＳＦ单独刺激无反应，而ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１－细胞则可形成大小不等的细胞集落。多种造血生长因子［ＩＬ－３＋ＩＬ－６＋ＧＭ－ＣＳＦ＋Ｇ－ＣＳＦ＋Ｅｐｏ＋干细胞生长因子（ＳＣＦ）］联合可诱导ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１＋细胞形成大的细胞集落，但在培养１２天时尚无ＢＦＵ－Ｅ和粒、单核、红和巨核系细胞集落（ＣＦＵ－ＧＥＭＭ）形成；而同样条件下，ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１－细胞可形成ＢＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＥＭＭ以及其它各类集落。体内实验表明ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１＋细胞在培养８天时无脾集落（ＣＦＵ－Ｓ）形成，与ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１－细胞显著不同（Ｐ＜０．０１）。相反，ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１＋细胞包含了骨髓造血重建活性细胞，而ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１－细胞则缺乏。结果提示ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１＋细胞为早期的具重建长期造血功能的干细胞，而ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１－细胞则为相对分化后期的造血祖细胞。     

流式细胞术白血病免疫分型中CD45设门的重要性

免疫分型在急性白血病的诊断中起着重要作用 ,它具有特异性强、客观等优点 ,从而降低了急性白血病形态学的误诊率。但也应注意到 ,所用的试剂质量、标本处理及染色方法等对结果会产生很大的影响 ,如不进行监测有可能导致结果的失真。本文就流式细胞术 (ｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ ,ＦＣＭ )白血病免疫分型中ＣＤ45设门的重要性谈些体会。运用ＦＣＭ检测白血病细胞免疫表型普遍采用ＣＤ45 /ＳＳＣ双对数散点图 (ｄｏｔｐｌｏｔ)对幼稚细胞设门来分析其抗原表达情况。白血病标本在ＣＤ45 /ＳＳＣ双对数散点图上一般可见到三群细胞 ,即成熟淋…     

急性白血病诱导缓解治疗期间残留白血病检测的重要意义

现代联合化疗方案使急性白血病 (ＡＬ)的诱导缓解率得到了显著的提高 ,儿童急性淋巴细胞白血病 (ＡＬＬ)的完全缓解 (ＣＲ)率已达 95 %,成人ＡＬＬＣＲ率超过 75 %,急性髓系白血病 (ＡＭＬ)的ＣＲ率 70 %～ 80 %,但达骨髓ＣＲ(ｍＣＲ)后患者白血病复发仍是阻碍长期无病生存 (ＤＦＳ)的主要原因。采取个体化缓解后治疗策略提高ｍＣＲ患者残留白血病的根除率 ,使患者获得真正治愈是当前努力探索的方向。最近研究发现ＡＬ在诱导缓解期白血病细胞的清除速度 (ＣＳ)和清除程度 (ＣＤ)是制定个体化缓解后治疗策略的一个独立的重要参数。在儿童ＡＬ…     

应用荧光原位杂交技术筛选bcr基因探针及分析微小残留病

目的　定量检测慢性髓细胞白血病（ Ｃ Ｍ Ｌ） 造血干细胞移植（ Ｈ Ｓ Ｃ Ｔ） 后ｂｃｒ 基因重排。方法　应用荧光原位杂交（ Ｆ Ｉ Ｓ Ｈ） 技术,从 Ｃ Ｅ Ｐ Ｈ 酵母人工染色体（ Ｙ Ａ Ｃ） 文库的３ 个ｂｃｒ 相关候选克隆中筛选探针,并对７ 例造血干细胞移植后病人进行检测,同时进行细胞遗传学和逆转录聚合酶链反应（ Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ） 分析。结果　确定了定位于２２ｑ１１ ｂｃｒ 基因区域且可在 Ｐｈ 染色体阳性细胞中易位至９ｑ３４的 Ｙ Ａ Ｃ 克隆７６５ Ｅ３ ,应用该 Ｙ Ａ Ｃ Ｄ Ｎ Ａ 探针进行荧光原位杂交,发现７ 例病人中５ 例存在ｂｃｒ 易位阳性细胞（６ ％ ～９８ ％ ） ,常规 Ｇ 显带检出３ 例, Ｐ Ｃ Ｒ 检出６ 例。结论　 Ｆ Ｉ Ｓ Ｈ 可能成为白血病造血干细胞移植后疗效观察和微小残留病定量监测的重要手段。     

白血病患者WT1基因的表达及其与预后及多药耐药的关系

目的探讨ＷＴ１基因与白血病的预后、多药耐药性及细胞凋亡之间的关系。方法应用逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）方法测定６８例白血病患者及２３名正常人的ＷＴ１、ＭＲＰ及ｍｄｒ１基因的表达,同时采用免疫荧光流式细胞术（ＦＣＭ）观察了３２例急性髓系白血病（ＡＭＬ）患者抗凋亡基因ｂｃｌ２的表达。结果６８例白血病患者中３７例ＷＴ１基因表达阳性,２３名正常人ＷＴ１基因表达阴性。ＷＴ１基因表达阳性患者的完全缓解（ＣＲ）率低于表达阴性者（分别为５９．４６％和８７．１０％,Ｐ＝００１１）。ＷＴ１表达阳性患者的ＭＲＰ阳性率高于ＷＴ１表达阴性者（分别为５８．３３％和３２．２６％,Ｐ＝００３３）。联合ＷＴ１及ｂｃｌ２表达情况将ＡＭＬ患者分为高危、中危、低危三组,其ＣＲ率分别为３３３３％、４７．３７％及１００％,三组间差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。结论ＷＴ１基因的表达与白血病患者的化疗效果及预后密切相关,是影响白血病患者ＣＲ率的重要危险因素之一。ＷＴ１基因及ｂｃｌ２的共同表达情况可作为预测ＡＭＬ患者预后的重要指标     

异基因骨髓移植供者应用粒细胞集落刺激因子对急性移植物抗 …

目前,如何控制或减轻移植物抗宿主病(ＧＶＨＤ)的发生仍是骨髓移植治疗急性白血病亟待解决的课题。我们对异基因骨髓移植供者应用粒细胞集落刺激因子(ＧＣＳＦ)处理,对减轻急性ＧＶＨＤ发生取得较好的疗效,现将结果报告如下。病例和方法1　病例　1997年3月～1999年3月本院白血病行异基因骨髓移植患者37例,其中供者应用ＧＣＳＦ处理组24例。37例白血病患者中急性粒细胞白血病6例,急性淋巴细胞白血病5例,慢性粒细胞白血病13例(慢性期8例,加速期5例),平均年龄274岁(4～48岁)。供者平均年龄27.2岁,男性供者16名,女性供者8名。供者未用ＧＣＳＦ处…     

巨噬细胞集落刺激因子及其受体在造血细胞中的表达

目的研究异常造血时巨噬细胞集落刺激因子（ＭＣＳＦ）及其受体（ＭＣＳＦＲ）在细胞中的分布并探讨其临床意义。方法用ＭＣＳＦ、ＭＣＳＦＲ的单抗以卵白素生物素辣根过氧化物酶复合物免疫标记法（ＡＢＣ免疫酶标法）,测定其在６株血源细胞系,１４４例患者骨髓和１６０例患者外周血细胞中的表达。结果６株血源细胞系均有细胞ＭＣＳＦ和ＭＣＳＦＲ的表达。正常人骨髓和外周血细胞中未测出细胞ＭＣＳＦ和ＭＣＳＦＲ的表达。多种恶性和少数良性血液病患者骨髓和外周血细胞中可测出ＭＣＳＦ和ＭＣＳＦＲ的表达,其中急性非淋巴细胞白血病组的表达频率和积分值明显高于其他组（Ｐ＜０．０５）。ＭＣＳＦ、ＭＣＳＦＲ阳性细胞主要为粒系细胞（Ｍ４,Ｍ５亦以粒细胞为主）,单核系也较多见,红系和巨核系少见,未见阳性的淋巴细胞。阳性反应主要见于细胞膜和细胞浆,细胞核少见。结论异常造血时细胞ＭＣＳＦ、ＭＣＳＦＲ分布甚广,髓系白血病表达尤高,值得深入研究。     

小鼠c—kit^＋Sca—1^＋和c—kit^＋Sca—1^—l细胞代表不同分化阶段…

为深入研究造血干细胞的生物功能，根据表面标志，采用流式细胞仪分离和富集了小鼠骨髓中两类不同特征的ＨＳＣ亚群ｃ－ｋｉｔ＾＋Ｓｃａ－１＾＋和ｃ－ｋｉｔ＾＋Ｓｃａ－１＾－细胞。体外集落培养表明ｃ－ｋｉｔ＾＋Ｓｃａ－＾＋细胞对ＩＬ－３ＧＭ－ＣＳＦ单独刺激无反应，而ｃ－ｋｉｔ＾＋Ｓｃａ－１＾－细胞则可形成大小不等的细胞集落。     

造血干细胞分化相关基因的研究进展

造血干细胞 (ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃｓｔｅｍｃｅｌｌ,ＨＳＣ)是一群存在于造血组织 ,且具有自我更新及定向分化潜能的造血细胞 ,其具体的造血分子机制目前尚未完全明确。随着分子遗传学和分子生物学研究的迅猛发展 ,许多具有特异性调控造血干细胞功能及与细胞定向分化相关的主要基因被识别和克隆出来 ,如急性Ｔ淋巴细胞白血病 造血干细胞白血病基因 (Ｔ ｃｅｌｌａｃｕｔｅｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ ｓｔｅｍｃｅｌｌｌｅｕｋｅｍｉａ ,ＴＡＬ1 ＳＣＬ)、ＧＡＴＡ 2、Ｈｏｘ(ｈｏｍｅｏｂｏｘ)Ｂ4、ＦＩＫ2、ｃ ｍｐｌ、ＤＬｋ(ｄｅｌ…     

射频消融术后肌钙蛋白测定与心肌损伤的关系

近年来对心肌钙蛋白 (Ｔ或Ｉ)的研究非常活跃 ,但大多数的研究集中在急性心肌梗死 (ＡＭＩ)、不稳定型心绞痛 (ＵＡＰ)、心肌炎等方面 ,关于应用肌钙蛋白监测射频消融 (ＲＦＣＡ)术后心肌损伤的文献报道尚少。我们监测了 39例ＲＦＣＡ治疗的患者术后血清心肌钙蛋白Ｔ(ｃＴｎＴ)、心肌钙蛋白Ｉ(ｃＴｎＩ)、肌酸激酶同工酶 (ＣＫ ＭＢ)的动态变化 ,旨在比较这三项生化指标诊断轻微心肌损伤的灵敏度和特异性 ,同时了解ＲＦＣＡ引起心肌损伤的情况和影响因素。1　资料和方法1 1　研究对象　ＲＦＣＡ组 :39例接受ＲＦＣＡ患者 ,男 2 3例 ,女 16例…     

脑脊液可溶性白细胞介素2受体在中枢神经系统白血病中的检测与意

可溶性白细胞介素 2受体 (ＳＩＬ 2Ｒ)是白细胞介素 2 (ＩＬ 2 )介导的免疫反应的调节拮抗蛋白[1] ,在多种恶性血液病中均有异常表达 ,且其血清水平与病情严重程度及预后有关[2 ] 。作者动态检测了 2 5例急性白血病与 10例中枢神经系统白血病 (ＣＮＳＬ)患者的脑脊液 (ＣＳＦ)ＳＩＬ 2Ｒ水平 ,以探讨其相关关系与临床意义。1　临床资料1.1　对象　急性白血病 2 5例 ,男 15例 ,女 10例 ,年龄 15～ 5 6岁 ,中位数 33岁 ,其中急性淋巴细胞白血病 (ＡＬＬ) 14例 ,急性非淋巴细胞白血病 (ＡＮＬＬ)11例。急性白血病合并ＣＮＳＬ 10例 ,其中ＡＬＬ…     

细胞遗传学指标在急性髓性白血病预后判断中的应用及评价

本文综述了细胞遗传学指标对急性髓性白血病预后的影响。结果表明：核型中ｔ（８；２１）、ｔ（５；１７）、ｉｎｖ（１６）或ｄｅｌ（１６）、５号或７号染色体异常对预后有利，而ｔ（４；１１）对预后不利；多药耐药基因ＭＤＲ１及其相关蛋白Ｐ－糖蛋白或Ｐ－１７０对预后不利；基因及其相关蛋白中，Ｃ－ｍｙｃ和Ｒｂ基因对预后有利，而Ｂｃｌ－２基因、Ｐ５３突变基因、Ｃ－ｋｉｔ基因及其受体ＫＲ、Ｎ－ｒａｓ基因１３密码突变、     

DCC基因在白血病及骨髓增生异常综合征患者中的表达

ＤＣＣ基因位于人类染色体 1 8ｑ2 1 .3 ,在 88%结肠癌、直肠癌患者中 ,ＤＣＣ基因的表达明显减少或缺失。为了评价ＤＣＣ基因在白血病发病及骨髓增生异常综合征 (ＭＤＳ)转化为白血病的作用 ,我们检测了 3 1例白血病患者和 8例ＭＤＳ患者的ＤＣＣ基因表达情况。病例和方法1　病例　所有病例均来自本院儿科、血液内科。白血病患者 3 1例 ,年龄为 6个月至 73岁 ,其中 6个月～ 1 4岁 1 0例 ,1 5～ 73岁 2 1例 ;急性髓系白血病 (ＡＭＬ) 1 4例 ,急性淋巴细胞白血病 (ＡＬＬ) 1 0例 ,慢性髓细胞白血病 (ＣＭＬ) 7例。ＭＤＳ 8例 ,均按ＦＡＢ诊断…     

脑梗死患者血浆活化蛋白C抵抗、蛋白C和蛋白S活性的测定

活化蛋白Ｃ抵抗 (ａｃｔｉｖａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎＣｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ,ＡＰＣＲ)是目前已知的静脉血栓形成的最高危因素[1] ,80 %的ＡＰＣＲ是因子Ｖ (ＦＶ)基因点突变 (即Ｌｅｉｄｅｎ突变 )引起的遗传性ＡＰＣＲ ,另一部分ＡＰＣＲ则是由各种获得性原因导致的无ＦＶ基因突变的获得性ＡＰＣＲ。ＡＰＣＲ与动脉血栓形成的关系目前仍有争论。蛋白Ｃ( ｐｒｏｔｅｉｎＣ ,ＰＣ)、蛋白Ｓ(ｐｒｏｔｅｉｎＳ ,ＰＳ)是机体ＰＣ抗凝系统的重要组成部分 ,它们量或质的缺陷 (包括先天性和获得性 )都将导致机体抗凝功能的减退或丧失 ,与血栓形成…     

53例急性白血病患者还原性叶酸载体功能的测定

还原性叶酸载体 (ＲＦＣ)功能下降、甲氨蝶呤 (ＭＴＸ)聚谷氨酸合成减少、二氢叶酸还原酶活性增加是ＭＴＸ耐药的三大主要原因[1] 。ＲＦＣ是转运ＭＴＸ进入细胞使其产生抗肿瘤作用的首要环节[2 6] 。因而检测急性白血病 (ＡＬ)患者的ＲＦＣ功能 ,可部分反映白血病细胞对ＭＴＸ代谢的差异 ,为临床预测耐药、估计预后、指导白血病的个体化治疗提供一定的理论依据。病例和方法1　研究对象主要为本院 1998年 6月～ 1999年 9月收治的ＡＬ患者。选取白血病细胞比例大于 0 .70、细胞数大于 10 7及部分经二甲基亚砜 (ＤＭＳＯ)冷冻保存、复苏培养 …     

中期荧光原位杂交技术在t(8；21)白血病随访中的应用

ｔ(8 ;2 1) (ｑ2 2 ;ｑ2 2 )是Ｍ2 型急性髓系白血病 (ＡＭＬ)的特异性染色体重排 ,在分子水平上它导致ＡＭＬ1 ＥＴＯ融合基因形成 ,后者在ｔ(8;2 1)白血病发病中起重要作用且可用逆转录 聚合酶链反应 (ＲＴ ＰＣＲ)进行检测。ｔ(8;2 1)白血病经治疗获完全缓解 (ＣＲ)后患者骨髓细胞核型通常转为正常 ,而ＲＴ ＰＣＲ检测部分患者仍为阳性 ,最长可至 8年。因此 ,ｔ(8;2 1)白血病患者ＡＭＬ1 ＥＴＯ阳性并不一定意味着有白血病复发的风险[1 ] 。中期荧光原位杂交 (ＦＩＳＨ)是利用非同位素物质如生物素、地高辛或异硫氰酸荧光素 (ＦＩＴＣ)…     

以急性髓性白血病为终结的严重型先天性中性粒细胞减少症：疾病发展与粒细？

严重型先天性中性粒细胞减少（ＳＣＮ）是一种异质性疾病，家族史不一，有向骨髓增生异常综合症（ＭＤＳ）和急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）发展的倾向，在部分病人发现了Ｇ－ＣＳＦ－Ｒ基因突变点，这些无意突变导致了Ｇ－ＣＳＦ诱导成熟关键部位Ｃ末端胞浆部分的中断，Ｇ－ＣＳＦ－Ｒ基因突变的ＳＣＮ病更容易转变成ＡＭＬ，在此，简述Ｇ－ＣＳＦ－Ｒ缺陷是怎样导致中性粒细胞减少和白血病的。     

白细胞介素8及其受体在急性白血病的表达及其意义

目的探讨白细胞介素８（ＩＬ８）及其Ａ、Ｂ受体（ＩＬ８ＲＡ、ＩＬ８ＲＢ）的表达与急性白血病（ＡＬ）的分型、疗效及并发症的关系。方法用酶联免疫夹心法检测７７例初诊ＡＬ患者外周血ＩＬ８含量,用间接免疫荧光及流式细胞术检测骨髓单个核细胞（ＭＮＣｓ）表达ＩＬ８Ｒ,并检测了１５例ＡＬ完全缓解（ＣＲ）期脑脊液（ＣＳＦ）中ＩＬ８水平。结果ＡＬ患者外周血ＩＬ８水平高于正常人,其中急性髓系白血病（ＡＭＬ）高于急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）,Ｍ４、Ｍ５高于Ｍ１～Ｍ３,ＢＡＬＬ高于ＴＡＬＬ（Ｐ＜０．０５）。ＡＬＬ中ＩＬ８＞１００ｎｇ／Ｌ组比≤１００ｎｇ／Ｌ组疗效差（Ｐ＜０．０５）;约３６．３６％的ＡＬ患者ＩＬ８Ｒ（＋）,ＩＬ８Ｒ（＋）者的外周血白细胞计数及幼稚细胞比例显著高于ＩＬ８Ｒ（－）者（Ｐ＜０．０５）;ＣＲ期患者ＣＳＦ中ＩＬ８水平与治疗前比较,差异无显著性（Ｐ＞０．０５）,合并中枢神经系统白血病（ＣＮＳＬ）时明显升高。结论外周血和ＣＳＦ中ＩＬ８水平的检测及检测骨髓ＭＮＣｓ膜ＩＬ８Ｒ的表达有助于ＡＬ各亚型的鉴别及预后判断;ＣＮＳＬ发生时ＣＳＦ中ＩＬ８增高。