与乙型肝炎病毒preS1特异性结合的HepG2细胞膜受体样蛋白

本文对人肝癌细胞株ＨｅｐＧ２细胞株上与乙型肝炎病毒外周蛋白ｐｒｅＳ１特异性结合的膜受体样蛋白进行了研究。用麦芽糖结合蛋白－ｐｒｅＳ１－直链淀粉树脂亲和层析法，分离得到了与ｐｒｅＳ１特异性结合的ＨｅｐＧ２细胞的膜受体样蛋白质，并经抗ＭＢＰ－ｐｒｅＳ１的单克隆抗体Ｆ３５．２５结合Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ加以证实。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＰＡＧＥ结果显示，ＨｅｐＧ２细胞膜上存在四种不同的受体样蛋白：ＨＬ１，ＨＬ２，ＨＬ３和ＨＬ４，分子量分别为６８０００，６６０００，５１０００和４５０００．对ＨＬ１，ＨＬ２，ＨＬ３和ＨＬ４的氨基末端序列进行了分析。     

fas／apo—1,bcl—2蛋白在急性髓系白血病细胞的表达特点及意义

用免疫印迹（Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ）碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法（ＡＰＡＡＰ）分析了１９例急性髓系白血病（ＡＭＬ）骨髓细胞ｆａｓ／ａｐｏ－１，ｂｃｌ－２蛋白表达水平的变化，结果表明大部分ＡＭＬ骨髓过表达ｂｃｌ－２蛋白，部分病例表达ｆａｓ／ａｐｏ－１两者表达呈一定的负相关性，分析结果显示ｂｃｌ－２蛋白过表达所致的凋亡抑制状态是化疗耐药的主要机制之一，而ｆａｓ／ａｐｏ－１的表达是预后较好的特征。     

人支气管上皮细胞转化过程中MTS1/p16基因丢失的研究

目的观察人支气管上皮细胞系Ｍ转化过程中ＭＴＳ１／ｐ１６基因的缺失及Ｐ１６蛋白的表达情况。方法采用双色荧光原位杂交,免疫组织化学和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ技术。结果在早期ＭＰ１８细胞中没有发现ＭＴＳ１／ｐ１６基因的缺失,在较晚期的ＭＰ３６和ＭＰ９７细胞中ＭＴＳ１／ｐ１６基因均发生了缺失;免疫组织化学和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ的结果都表明,晚期Ｍ细胞ＭＰ１２０中Ｐ１６蛋白的表达水平比早期代数细胞ＭＰ２０明显下降。结论ＭＴＳ１／ｐ１６基因的功能失活在人支气管上皮细胞系Ｍ的转化过程中可能起重要作用。     

苦参总碱体外抗柯萨奇B病毒3型作用测定及其机理的初步研究

苦参总碱体外抗柯萨奇Ｂ病毒３型作用测定及其机理的初步研究陈福祥，等。中华实验和临床病毒学杂志１９９５；９（２）：１１５先用酸水浸泡、氯仿萃取等处理提取苦参总碱，然后通过微量细胞培养法，病毒蛋白质Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ，分析了不同浓度苦参总碱对病毒增殖...     

心肌梗塞大鼠心肌细胞、成纤维细胞对血管紧张素反应性的改变及Losartan和Captopril干预影响的研究

心肌梗塞大鼠心肌细胞、成纤维细胞对血管紧张素反应性的改变及Ｌｏｓａｒｔａｎ和Ｃａｐｔｏｐｒｉｌ干预影响的研究申景平１鲁忆南２李瑞峰１陈融１李莉１李爱玲１刘风美３（１山东医科大学病理生理教研室山东济南２５００１２２山东省胸科医院３山东邮电学院）心肌梗塞...     

冠心病患者血清中 CMV 抗体水平的研究

冠心病患者血清中ＣＭＶ抗体水平的研究赵丽１邵丽华２杨燕平３姜维林４黄涛５（１山东医科大学分子生物学实验室２山东医科大学卫生化学教研室３山东医科大学诊断学教研室４山东医科大学分析化学教研室５山东省卫生防疫站病毒室）我们用固相酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ...     

重组IL—1受体拮抗剂单克隆抗体的鉴定

采用点印迹法与Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ技术对ｒＩＬ－１ｒａ ＭｃＡｂｓ进行了鉴定。结果表明；ｒＩＬ－１ｒａ ＭｃＡｂ ２Ｅ４在点印迹中识别信号为阳性，经转移电泳后可在ＮＣ膜上特异性识别ｒＩＬ－１ｒａ，ＰｃＡｂ对照识别结果进一步表明Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ技术的高度敏感性及ＭｃＡｂ ２Ｅ４的高度特异性。     

供转导PDGF-A基因的高滴度逆转录病毒的制备

目的制备高滴度供转导血小板衍生生长因子Ａ链（ＰＤＧＦ－Ａ）基因的重组逆转录病毒,为体内、外深入研究该基因表达产物自分泌和旁分泌的生物学功能奠定基础。方法将人ＰＤＧＦ－ＡｃＤＮＡ片段插入含巨细胞病毒（ＣＭＶ）启动子序列的逆转录病毒ＧＩＮａ载体的多克隆位点中,将构建的重组质粒导入病毒包装细胞ＰＡ３１７中,经Ｇ４１８筛选并扩增,以病毒液感染ＮＩＨ３Ｔ３细胞,测病毒滴度,选择出抗性克隆,进行免疫组织化学检测,表达产物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析和３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测生物学活性。结果病毒滴度最高为１．４×１０５ＣＦＵ／ｍｌ;免疫荧光染色法和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ证实ＰＤＧＦ－ＡＡ的表达;抗性细胞条件培养基的细胞活性高达５１．２Ｕ／（１０６·ｄ）。结论供转导ＰＤＧＦ－Ａ基因的高滴度逆转录病毒得以制备,该基因获得有效表达,表达产物具有明显的致丝裂活性。     

大鼠肾脏系膜细胞转染人TGF-β1基因可增强MMP-2表达

目的　研究转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）对培养的大鼠肾小球系膜细胞（ＭｓＣ）基质金属蛋白酶２（ＭＭＰ２）表达的影响。方法　采用Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ将人ＴＧＦβ１基因转染培养的大鼠ＭｓＣ,经Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ鉴定其转染成功否;又分别应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ．Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ．酶谱分析法检测阳性表达人ＴＧＦβ１的ＭｓＣＭＭＰ２ｍＲＮＡ、蛋白及酶活性变化。结果　成功获得稳定过表达人ＴＧＦβ１的大鼠ＭｓＣ克隆（ＭＴＧ１）,该细胞克隆的ＭＭＰ２ｍＲＮＡ．蛋白表达及其酶活性均获增强。结论　ＴＧＦβ１可增强ＭｓＣＭＭＰ２ｍＲＮＡ、蛋白表达,并提高其酶活性,这为进一步阐明ＴＧＦβ１在肾小球硬化发生机制中的作用提供了重要的实验手段和依据。     

半枝莲碱Ａ对ＥＢ病毒阳性弥漫性大Ｂ细胞淋巴瘤增殖、凋亡及细胞周期的影响

目的　探讨半枝莲碱Ａ对ＥＢ 病毒阳性弥漫性大Ｂ细胞淋巴瘤（ＥＢ ｖｉｒｕｓ-ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｄｉｆｆｕｓｅ ｌａｒｇｅ Ｂ-ｃｅｌｌ ｌｙｍｐｈｏｍａ,ＥＢＶ＋ＤＬＢＣＬ）细胞株Ｆａｒａｇｅ细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法　将Ｆａｒａｇｅ细胞分为对照组和不同浓度半枝莲碱Ａ 处理组,采用ＣＣＫ ８法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布,ＲＴ-ｑＰＣＲ法检测半枝莲碱Ａ作用于Ｆａｒａｇｅ细胞后细胞周期蛋白Ｄ３（ｃｙｃｌｉｎＤ３）的ｍＲＮＡ 表达以及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测ｃｙｃｌｉｎＤ３蛋白表达。结果　ＣＣＫ ８结果显示,与对照组相比,半枝莲碱Ａ能够明显抑制Ｆａｒａｇｅ细胞增殖,差异有统计学意义（P＜０．０５）。流式细胞检测结果显示,半枝莲碱Ａ 诱导细胞凋亡呈剂量依赖性,且主要使细胞阻滞于Ｇ０／Ｇ１ 期。ＲＴ-ｑＰＣＲ 和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ结果显示,半枝莲碱Ａ 以剂量依赖形式使Ｆａｒａｇｅ细胞ｃｙｃｌｉｎＤ３的ｍＲＮＡ 和蛋白表达减少,差异具有统计学意义（P均＜０．０５）。结论　半枝莲碱Ａ 具有抑制Ｆａｒａｇｅ细胞增殖并诱导其凋亡的作用,可使细胞阻滞于Ｇ０／Ｇ１期,并可能通过下调ｃｙｃｌｉｎＤ３表达发挥抗肿瘤作用。     

三氧化二砷诱导人食管癌Ec109细胞凋亡伴随c—myc基因的降 …

探讨三氧化二砷对食管癌Ｅｃ１０９细胞系的生物学效应及细胞和分子机制。方法通过四氮唑还原法检测三氧化二砷对食管癌Ｅｃ１０９细胞系存在活率的影响,从形态观察,流式细胞仪分析、ＤＮＡ凝胶电泳、细胞凋亡原位检测（ＴＵＮＥＬ）研究三氧化二砷诱导食管癌Ｅｃ１０９细胞凋亡的情况,并以Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测基因表达。结果Ｅｃ１０９细胞经Ａｓ２Ｏ３处理后,存活率明显降低。光学显微镜下可见到明显的凋亡细胞,在细胞     

菱实抗癌活性的研究

菱实抗癌活性的研究张延岭１桑立红１施强２张恒华２王元书３解砚英３王艹凡３徐淑兰３（１山东医科大学分析化学教研室２济南市轻工业研究所３山东省医学科学院）文献报道〔１，２〕，菱有抗癌作用，为观察其抗癌活性，我们用菱实进行了抑瘤试验。１材料与方法１．１材料...     

CyclinD1在肠癌相关性研究

目的：了解ＣｙｃｌｉｎＤ１基因表达产物与大肠癌发生和进展的关系。方法：应用改良Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法和免疫组化法检测３３例肠道肿物及基俳 癌粘膜组织ＣｙｃｌｉｎＤ１基因产物的表达；并采用Ｌｕｚｅｘ－Ｆ图像分析仪对实验结果进行半定量分析。结果：（１）ＣｙｃｌｉｎＤ１基因产物在大肠癌组织、癌前病主吸非瘤粘膜组织有不同表达；（２）ＤｙｃｌｉｎＤ１过表达与大肠癌侵染深度、生物恶性度及淋巴转移率呈正相关，     

程序性细胞死亡与癌基因

程序性细胞死亡与癌基因张金萍１寻玉凤１综述高英茂２审校（１济宁医学院组织学与胚胎学教研室２山东医科大学）程序性细胞死亡（Ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｄｅａｔｈ，ＰＣＤ）或细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）是一种形态和生化特征明确的细胞主动死亡形式〔１，２〕...     

重组IL-1受体拮抗剂单克隆抗体的鉴定

采用点印迹法与Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ技术对ｒＩＬ－１ｒａＭｃＡｂｓ进行了鉴定。结果表明：抗ｒＩＬ－１ｒａＭｃＡｂ２Ｅ４在点印迹中识别信号为阳性（＋＋），经转移电泳后可在ＮＣ膜上特异性识别ｒＩＬ－１ｒａ（２０ｋｄ）；ＰｃＡｂ对照识别结果进一步表明Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ技术的高度敏感性及ＭｃＡｂ２Ｅ４的高度特异性。此株单抗的鉴定成功将有助于进一步认识ＩＬ－１的生物学活性，特别是在炎症疾病中的病理作用，以指导ｒＩＬ－１ｒａ治疗炎症的临床应用     

川芎嗪体内代谢产物的合成

川芎嗪体内代谢产物的合成刘新泳１葛蔚颖２徐丽君２张君仁１王海燕３潘淑菊１（山东医科大学１药物分析教研室２无机化学教研室３药学系９０级）川芎嗪（Ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｐｙｒａｚｉｎｅ，ＴＭＰ）是从活血化瘀中药川芎中提取的有效成分，目前，临床上已广泛用于...     

人血管内皮生长因子165的克隆和在大肠杆菌中的表达

克隆和在大肠杆菌中表达人血管内皮生长因子１６５（ＶＥＧＦ１６５）。方法利用ＰＣＲ的方法从胎脑ｃＤＮＡ库扩增得到人ＶＥＧＦ１６５的全长ｃＤＮＡ并测定其核酸序列。利用基因重组技术构建ＶＥＧＦ１６５的原核表达载体，并在大肠杆菌中进行表达，用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测表达产物。结果经测序表明，克隆的ＶＥＧＦ１６５与文献报道相符，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ结果表明经用ＩＰＴＧ诱导后，ＶＥＧＦ１６５在大肠杆菌中表达出。结论克隆和表达出ＶＥＧＦ１６５，为以后进一步研究ＶＥＧＦ１６５的功能奠定了基础     

结肠黑变病

结肠黑变病赵幼安１徐彩珍２靳大川１（山东医科大学１附属医院内科２病理解剖学教研室）结肠黑变病（ＭｅｌａｎｏｓｉｓＣｏｌｉ）以结肠固有膜内色素沉着为特征，国内报道较少。我院发现２例，现报告如下。１临床资料１．１一般资料例１女，５７岁。习惯性便泌１０余年...     

人类乳腺癌细胞抗药性和突变率差异的研究

为研究人类乳腺癌细胞抗药性和突变率的差异及产生机理，作者检测了同来源于ＭＤＡ－ＭＢ－４３５的人类乳腺细胞Ｌ－２和Ｂｒ－１的突变率和对药物ＰＡＬＡ的敏感性，并用流式细胞仪测定两细胞株经ＰＡＬＡ处理后细胞周期分布的变化，用ＤＮＡ碎片法研究细胞凋亡，及用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ测定Ｐ５３蛋白的表达，结果显示，Ｌ－２和Ｂｒ－１细胞的突变率和对ＰＡＬＡ的敏感性存在巨大差异，经ＰＡＬＡ处理后，两细胞株皆表现出细     

降脂保肝方对高脂血症大鼠血脂、一氧化氮及血栓素B_2的影响

降脂保肝方对高脂血症大鼠血脂、一氧化氮及血栓素Ｂ２的影响（研究简报）张文高１李瑞峰２陈雨振３管昌益１胡维诚２刘玉梅２阎晓梅２杜艳芝２姬广臣１叶向荣１江巍１马学盛１１山东中医药大学２５００１４２山东医科大学２５００１２３山东中医药大学附属医院２５００１...