温阳活血退黄方对阴黄证大鼠肝细胞凋亡及bcl-2和bax蛋白表达的影响

目的：观察温阳活血退黄方对阴黄证大鼠肝细胞凋亡，相关调控基因bcl—2、bax蛋白表达的影响。方法：72只大鼠随机分为6组：正常对照组，阴黄证模型组，阳黄对照组，阴黄证模型加温阳活血退黄方高、低剂量组，菌陈术附汤组。采用TUNEL和免疫组化法检测大鼠肝细胞凋亡和bcl—2、bax蛋白表达。结果：阴黄模型组大鼠肝细胞凋亡程度明显高于阳黄模型组及正常对照组(P＜0．01)，温阳活血退黄方高剂量组肝细胞凋亡程度明显低于阴黄模型组(P＜0．05)。温阳活血退黄方高、低剂量组肝组织bcl—2蛋白表达明显高于阴黄模型组(P＜0．0l，＜0．05)，且其bax蛋白表达明显低于阴黄模型组(P＜0．01，＜0．05)，体现较好量效关系。结论：温阳活血退黄方可能通过促进bcl—2蛋白表达抑制bax蛋白表达阻断阴黄证大鼠肝细胞凋亡，可能是其治疗阴黄证的机制之一。     

木贼正丁醇萃取物对高脂血症大鼠血管内皮黏附分子表达的影响

目的研究木贼正丁醇萃取物对高脂血症大鼠血脂及主动脉内皮细胞黏附功能的影响。方法选用雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、病理模型组、吉非罗齐组及木贼正丁醇治疗组。复制食饵性动脉粥样硬化早期动物模型,用木贼萃取物预防性给药,以吉非罗齐为阳性药对照。实验9 w,检测血脂,流式细胞术定量检测主动脉内皮细胞ICAM-1、VCAM-1的表达及凋亡率,光镜下观察主动脉形态学变化。结果木贼萃取物组血清TG、VLDL水平较模型组显著下降(P<0.05),内皮ICAM-1表达较模型组明显下降(P<0.05),VCAM-1有下降趋势(P>0.05),凋亡率显著下降(P<0.05);形态学显示木贼萃取物组主动脉内皮损伤程度较模型组减轻。结论木贼正丁醇萃取物可保护血管内皮,降低内皮细胞黏附分子表达,阻止动脉粥样硬化早期炎症反应的发生。     

木贼提取物对大鼠动脉粥样硬化早期血管平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

目的研究木贼正丁醇提取物对大鼠动脉粥样硬化（AS）早期主动脉平滑肌细胞增殖及凋亡的影响。方法选用雄性SD大鼠，随机分为正常对照、模型、阻性药对照及提取物组。复制食饵性AS早期模型，同时给予提取物预防性给药。以吉非罗齐为阳性药对照。实验9w，观察主动脉壁病理形态学变化，流式细胞术定量检测主动脉壁平滑肌增殖及凋亡率。结果木贼正丁醇提取物组平滑肌凋亡率明显高于模型组（P〈0．01），增殖指数低于模型组（P〈0．01）。结论木贼正丁醇提取物可促进AS早期平滑肌凋亡，抑制其增殖，具有阻断AS早期病变进展的作用。     

两种木贼提取物对动脉粥样硬化早期模型大鼠平滑肌凋亡及BCl-2、Caspase-3表达的调控

目的研究木贼正丁醇提取物及提取剩余物对动脉粥样硬化(AS)早期大鼠主动脉平滑肌细胞凋亡率及Bcl-2、Caspase-3表达的影响。方法雄性SD大鼠随机分为正常对照、模型、阳性药、提取物及提取剩余物组。复制食饵性AS早期模型,用木贼提取物、提取剩余物分别预防性给药,以吉非罗齐为阳性药对照。9w后,观察主动脉壁病理学变化,流式细胞术定量检测主动脉壁平滑肌细胞凋亡率及Bcl-2、Caspase-3的表达。结果木贼正丁醇提取物及提取剩余物组的凋亡率明显高于模型组(P<0.01);Bcl-2低于模型组(P<0.01);Caspase-3高于模型组(P<0.01)。结论木贼正丁醇提取物及提取剩余物通过控制AS早期主动脉壁平滑肌细胞Bcl-2、Caspase-3表达,促进平滑肌细胞凋亡,阻止AS的进程。     

辐射对前列腺增生组织中bcl-2和bax表达的影响及临床意义

目的 探讨前列腺增生组织中bcl—2和bax的表达以及β射线内照射对bcl—2和bax表达的影响。方法 应用免疫组织化学法检测9例正常前列腺(NP)、15例良性前列腺增生(BPH)及35例实施^90Sr／^90Yβ射线照射后前列腺增生组织中bcl—2和bax的表达。结果 NP和BPH上皮组织bcl—2阳性表达均高于间质(P＜0．01)；BPH组织上皮和间质中bcl-2表达阳性串高于NP(P＜0．01)；NP上皮细胞中bax表达高于BPH(P＜O．05)；BPH上皮和问质细胞中bcl—2表达高于bax(P＜0．01)；NP上皮和问质中bcl—2与bax表达无显著差异(P＞0．05)。与对照组相比，应用^90Sr／^90Yβ射线内照射4、7、15d后BPH上皮和间质中bcl—2明显下降，bax阳性细胞率明显升高(P＜0．01)。结论 bcl-2和bax与前列腺细胞凋亡的调节有关，β射线能使前列腺组织中bcl—2和bax含量发生变化，促使前列腺细胞凋亡。     

Bcl-2和Bax凋亡调控基因在缺碘子代大鼠海马神经细胞中的表达

目的探讨凋亡相关基因bcl鄄2、bax在缺碘大鼠海马神经细胞中的表达。方法复制缺碘大鼠动物模型,采用免疫组化方法检测bcl鄄2、bax基因表达。结果缺碘子代大鼠较同龄正常组大鼠海马神经细胞bax表达增多,分别为51.83±2.54和12.57±2.09;bcl鄄2表达减少,分别为14.82±0.79和58.97±2.80,两组间比较,差异有非常显著意义(P< 0.01)。结论缺碘所致海马神经细胞凋亡增加,与凋亡调控基因bax表达增强,bcl鄄2表达减少有关。     

克纤胶囊对大鼠肝损伤细胞凋亡的影响

目的：观察克纤胶囊对大鼠急性肝损伤细胞凋亡的影响。方法：将70只大鼠分为7组，除正常对照组外另6组分别以生理盐水、大黄Zhe虫胶囊、联苯双酯、克纤胶囊低剂量、中剂量、高剂量灌胃，每日1次，连续3天后。再用末端脱氧核等效转移酶介导生物素化脱氧尿嘧啶缺口末端标记(TUNEL)法到定大鼠肝细胞凋亡，免疫组织化学法测定大鼠肝细胞bcl-2基因表达水平。结果：四氯化碳造模大鼠细胞凋亡指数明显升高，bcl—2基因表达水平降低，其他5组凋亡指数比较差异有显著性意义(P＜0．01，P＜0．05)，尤以克纤胶囊高剂量组为最明显。结论：克纤胶囊有抗凋亡及调控bcl—2基因表达水平的作用。     

依那普利对肝组织bax和bcl-2基因表达的影响

目的探讨血管紧张素转化酶抑制剂（ACEI）依那普利（Ena）对大鼠肝纤维化的防治作用及其部分机制，及对肝组织bax和bcl-2基因表达的影响。方法以四氯化碳（CCl4）诱导形成大鼠肝实质损伤性肝纤维化模型。大鼠分为空白对照组、模型对照组、预防组及治疗组。除空白对照组外，其余各组大鼠均皮下注射40％CCl4橄榄油混合液，每3日1次，共10周。预防组同时给予Ena灌胃。治疗组则在造模第5周给予Ena灌胃。对肝组织标本炎症及纤维化程度进行评价，并用RT—PCR技术观察Ena对肝组织bax和bcl-2基因表达的影响。结果Ena高剂量预防及高剂量治疗组肝组织炎症和纤维化程度较模型对照组显著减轻（P〈0．01）。Ena高剂量预防及高剂量治疗组肝组织bax基因表达显著弱于模型对照组（P〈0．01），bcl-2基因表达显著强于模型对照组（P〈0．01），bax／bcl-2基因表达比值和肝纤维化程度呈显著直线正相关（P〈0．01）。结论Ena能有效防治大鼠肝纤维化，抑制促凋亡基因bax的表达，促进抑凋亡基因bcl-2的表达，是其可能机制之一。bax／bcl-2基因表达比值与肝纤维化程度正相关。     

木贼有效部位抑制氧化低密度脂蛋白诱导的内皮细胞凋亡及LOX-1、NOX4mRNA的表达

目的探讨木贼有效部位对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC-ECV304)凋亡抑制作用的可能机制。方法体外ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞损伤,用木贼有效部位进行干预。采用流式细胞术检测细胞凋亡率;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测内皮细胞血凝素样ox-LDL受体1(LOX-1)m RNA、NADPH氧化酶4(NOX4)m RNA及Caspase-3 m RNA表达。结果与模型组比较木贼有效部位干预后细胞凋亡率明显下降(P0.05),LOX-1 m RNA、NOX4m RNA及Caspase-3 m RNA表达明显下调(P0.01)。结论木贼有效部位可能通过抑制LOX-1m RNA及NOX4 m RNA的表达,实现对凋亡相关基因的调控来减少内皮细胞的凋亡。     

大肠腺瘤中细胞凋亡和增殖相关基因的表达与意义

目的：探讨大肠腺瘤中细胞凋亡和增殖相关基因的表达与意义。方法：用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的TUNEL法缺口末端标记和免疫组化技术，检测45例大肠腺瘤组织细胞的原位凋亡（AI）、原位增殖（KI）及bcl-2、bax基因表达；并设立20例正常大肠粘膜和40例大肠癌为对照组，探讨细胞凋亡和细胞增殖在大肠癌早期发生中的作用。结果：正常结肠粘膜有少量的bcl-2、bax和ki－67（用KI表示）表达及少量凋亡细胞存在，但无异常表达。大肠腺瘤中bcl-2表达和KI明显增加，与正常组相比P均＜0.05；AI和bax表达轻度增加，与正常相比P＜0.05。bax与AI表达呈正相关（P＜0.01），bcl－2和bax及AI呈负相关。大肠癌中bcl-2表达和KI表达虽增加，但与腺瘤相比无统计学差异P＞0.05；大肠癌组织中AI和bax表达明显增加且与腺瘤组相比P＜0.05。结论：大肠癌发生早期即腺瘤中就有细胞凋亡调控基因及增殖基因的表达异常，且以抗凋亡基因bcl-2和增殖基因表达占主导地位。该基因的表达异常可能是大肠癌发生的一个较早期分子标志；细胞凋亡增加和bax表达异常可能是大肠癌发生的一个相对较早期分子生物学事件。早期检测抗细胞凋亡基因和增殖基因，有助于对大肠癌早期发生的评估。     

人剪切修复基因D介导ox-LDL促进HUVEC凋亡作用

目的探讨人剪切修复基因D(XPD)是否介导氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)促进人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡。方法以ox-LDL建立HUVEC凋亡模型。用脂质体将XPD-siRNA转染HUVEC,给予ox-LDL处理。实验分6组:空白对照组;阴性对照siRNA组;XPD-siRNA组;ox-LDL组;ox-LDL+阴性对照siRNA组;ox-LDL+XPDsiRNA组。MTT测定细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期;用RT-PCR和Western blot检测XPD、Bax和Bcl-2的表达。结果建立HUVEC凋亡模型ox-LDL的最佳浓度为100 mg/L。与阴性对照siRNA组相比,XPDsiRNA组的细胞凋亡率明显下降(P0.05),存活率明显增加(P0.01),G0/G1期细胞减少(P0.05)、S期细胞增加(P0.05),XPD、Bax表达降低(P均0.05),Bcl-2表达增高(P0.05);与空白对照组相比,ox-LDL组细胞凋亡率明显增加(P0.01),细胞存活率下降(P0.05),G0/G1期细胞增加(P0.05)、S期细胞明显减少(P0.01),XPD、Bax表达升高(P均0.05),Bcl-2表达降低(P0.05);与ox-LDL+阴性对照siRNA组相比,ox-LDL+XPD-siRNA组细胞凋亡率下降(P0.05),细胞存活率明显增加(P0.01),G0/G1期细胞减少(P0.05)、S期细胞增加(P0.05),XPD、Bax表达降低(P均0.05),Bcl-2表达增高(P0.05)。结论 XPD能介导ox-LDL促进HUVEC凋亡作用。     

莱菔硫烷对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的:探讨莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用。方法:H9C2心肌细胞随机分为3组:正常对照组、缺氧/复氧组(H/R组)和SFN预处理组(10μmol/L SFN预处理细胞12 h后,进行缺氧/复氧处理)。采用倒置显微镜观察各组细胞形态及凋亡程度,CCK8法检测各组H9C2心肌细胞存活率,Western blot法检测血红素氧化酶1(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO1)、Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。结果:与正常对照组相比,H/R组和SFN预处理组心肌细胞存活率均降低(P均0.01),HO-1、NQO1、Bcl-2和Bax蛋白表达水平及Bcl-2/Bax均升高(P均0.01)。与H/R组相比,SFN预处理组的细胞生长状态较好,细胞存活率明显提高[(76.00±0.52)%对(55.73±0.43)%,P0.01],HO-1(3.24±0.01对1.86±0.01,P0.01)、NQO1(1.67±0.01对0.95±0.01,P0.01)和Bcl-2(0.70±0.00对0.48±0.01,P0.01)蛋白表达水平及Bcl-2/Bax(1.22±0.01对0.56±0.00,P0.01)均明显升高,Bax蛋白表达水平明显降低(0.57±0.00对0.85±0.01,P0.01)。结论:SFN对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤有保护作用,可能与促进HO-1、NQO1、Bcl-2蛋白表达,抑制Bax蛋白表达有关。     

大鼠脑缺血半暗带神经元蛋白表达和凋亡的动态变化研究

目的观察大鼠局灶性脑缺血再灌注后缺血半暗带神经元蛋白表达和凋亡的动态变化。方法 48只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组8只和模型组40只,模型组又根据缺血再灌注时间分为6、24、48 h和3、5 d 5个时间点,各时间点8只。免疫组织化学法观察各组大鼠脑缺血半暗带神经元Bcl-2及Bax蛋白表达,TUNEL法观察相应区域神经元凋亡的动态变化。结果与假手术组比较,模型组大鼠缺血再灌注6 h Bcl-2、Bax阳性细胞明显增加,随时间延长,Bcl-2阳性细胞逐渐下降,48 h最低;而Bax阳性细胞则逐渐增加,于48 h达到高峰;Bcl- 2/Bax比值变化趋势与Bcl-2阳性细胞相一致;各时间点均可见神经元凋亡,48 h达高峰(P<0.01)。相关分析显示,神经元凋亡与Bax蛋白表达呈正相关(r=0.352,P<0.05),与Bcl -2和Bcl-2/Bax比值呈负相关(r=-0.517,r=-0.529,P<0.01)。结论大鼠脑缺血半暗带存在大量神经元凋亡,其机制可能与Bcl-2/Bax比值失衡有关。     

特发性肺纤维化患者上皮细胞促凋亡及抗凋亡信号表达

目的 探讨促凋亡信号和抗凋亡信号在特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)发生中的意义.方法 应用末端原位杂交和免疫组织化学技术,检测12例IPF患者的肺活检组织和10例正常对照肺组织肺泡和支气管上皮细胞凋亡情况及P53、P21、Bax和Bcl-2蛋白表达的变化.结果 IPF患者肺组织的肺泡和支气管上皮细胞凋亡率明显上调(U=0.0,P＜0.01),肺泡和支气管上皮细胞中P53、P21、Bax蛋白表达上调(U=5.0～35.5,P值均＜0.05),肺泡和支气管上皮细胞中Bcl-2蛋白表达下调(U值分别为12.0、18.0,P＜0.01).相关分析结果表明,肺泡和支气管上皮细胞P53、P21、Bax蛋白表达与其凋亡率之间均呈显著正相关(r值为0.436～0.806,P值均＜0.05),肺泡和支气管上皮细胞Bcl-2蛋白表达与其凋亡率之间均呈显著负相关(r值为-0.715～-0.699,P值均＜0.01).结论 肺纤维化时肺泡和支气管上皮细胞凋亡率增高,P53、P21、Bax蛋白表达增强,Bcl-2蛋白表达减弱,这些因素在肺纤维化的发生和发展中起重要作用.     

APP17肽对脑缺血大鼠记忆能力及海马Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的研究APP17肽对脑缺血大鼠记忆能力及海马Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。方法采用双侧颈总动脉结扎方法制备前脑缺血致血管性痴呆大鼠模型,将大鼠随机分为假手术组、手术组和治疗组,每组24只,并观察APP17肽的保护作用,采用Morris水迷宫检测记忆能力,免疫组织化学检测海马Bcl-2和Bax蛋白表达。结果手术组与假手术组比较,记忆能力明显下降(P<0.01),Bcl-2和Bax免疫阳性细胞数增多(P<0.01),治疗组较手术组记忆功能改善明显(P<0.01)。Bcl-2免疫阳性细胞数明显增多(P<0.01),Bax免疫阳性细胞数明显减少(P<0.01)。结论APP17肽可能通过调节Bcl-2和Bax蛋白表达来抑制细胞凋亡,从而改善脑缺血大鼠的记忆能力。     

补肝散对感染血吸虫小鼠肝损伤后肝组织Bcl-2、Bax水平的影响

目的:观察补肝散干预感染血吸虫小鼠肝损伤模型后,对肝组织凋亡相关基因Bcl-2和Bax蛋白表达水平的影响,探讨补肝散对肝损伤的防护作用机制.方法:选择健康8周龄雄性昆明小白鼠108只,随机分为5组,将血吸虫尾蚴(18条/只)经小鼠腹部皮肤攻击感染造模,每组定期随机抽取6只小鼠,处死后留取其肝脏左叶,置于10％中性甲醛(用PBS配)固定,免疫组化法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达水平.结果:①Bcl-2、Bax表达在模型组小鼠肝组织中的阳性率均明显升高,与正常组比较差异有显著性意义(P＜0.05),Bcl-2/Bax比值下降(P＜0.05);②补肝散组与模型组相比小鼠Bel-2表达升高差异有显著性意义(P＜0.05),Bax表达升高差异无显著性意义(P＞0.05),Bcl-2/Bax比值增高差异有显著性意义(P＜0.05).结论:补肝散可促进Bcl-2表达,使Bcl-2/Bax比值上调,减少肝细胞的凋亡,进而防护血吸虫性小鼠肝损伤,发挥抗纤维化的作用.     

丝胶对2型糖尿病大鼠胰岛细胞凋亡的保护作用

目的观察丝胶对2型糖尿病大鼠胰岛细胞凋亡的保护作用。方法雄性SD大鼠36随机分为3组:正常对照组、糖尿病模型组和丝胶治疗组。链脲佐菌素(STZ,25 mg/kg,连续3 d)腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型;待模型成功建立后,丝胶治疗组大鼠给予丝胶灌胃(2.4 g.kg-1.d-1)35 d。免疫组织化学染色观察胰岛β细胞Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果与正常对照组大鼠相比,模型组大鼠胰岛β细胞Bax蛋白的表达明显升高(P<0.01),Bcl-2蛋白的表达明显降低(P<0.01);与模型大鼠相比,丝胶治疗组大鼠胰岛β细胞Bax蛋白的表达明显降低(P<0.01),Bcl-2蛋白的表达明显升高(P<0.01)。结论丝胶可通过上调胰岛β细胞Bcl-2蛋白的表达、下调胰岛β细胞Bax蛋白的表达,抑制2型糖尿病大鼠胰岛细胞凋亡,对糖尿病时胰岛细胞损伤具有一定的保护作用。     

银杏叶提取物对兔动脉粥样斑块Bcl-2和Bax表达的影响

目的 观察银杏叶提取物对家兔动脉粥样斑块Bcl-2和Bax表达的影响.方法 将40只家兔随机分为正常对照组、模型组、立普妥组和银杏叶提取物组,对比观察各组家兔斑块面积大小及斑块Bax和Bcl-2的表达.结果 银杏叶提取物组和立普妥组动脉粥样斑块面积低于模型组(P<0.01);免疫组织化学染色显示,模型组平滑肌细胞内Bcl-2和Bax的阳性细胞表达与正常对照组相比增高(P<0.05),立普妥组和银杏叶提取物组平滑肌细胞、泡沫细胞Bax的阳性细胞表达下调,Bcl-2的阳性细胞表达轻度上调,银杏叶提取物组Bax/Bcl-2降低.结论 银杏叶提取物可通过下调Bax/Bcl-2表达而抑制细胞凋亡,减少内皮细胞受损,从而抑制动脉粥样硬化的发生.