IL-27通过STAT3信号通路改善脂多糖诱导的小鼠急性肺炎

目的：探讨IL-27通过调控STAT3信号通路在脂多糖（LPS）诱导的小鼠急性肺炎中的作用。方法：32只雄性小鼠随机分为正常对照组、LPS组、LPS+IL-27组、LPS+IL-27抗体组,每组8只。麻醉处死后取小鼠肺脏,HE染色观察各组小鼠肺组织损伤情况;qRT-PCR检测各组小鼠肺组织及血清中STAT3、SOCS3的mRNA表达水平;Western blot检测各组小鼠肺组织中STAT3、p-STAT3、SOCS3的蛋白表达水平;采用ELISA法分别检测肺组织匀浆及血清中TNF-α、IL-1β、IL-10、TGF-β1的表达水平。免疫组织化学及Western blot检测TNF-α、IL-1β在肺组织中的蛋白表达。结果：HE染色结果发现,正常对照组,LPS组和LPS+IL-27抗体组肺泡结构被破坏,肺泡壁弥漫性增厚,有明显的炎性细胞浸润;LPS+IL-27组病理改变较LPS组明显减轻,炎性细胞浸润减少。与正常对照组比,LPS组和LPS+IL-27抗体组小鼠肺组织STAT3、p-STAT3蛋白表达水平显著升高（P＜0.05）;LPS+IL-27组较LPS组和LPS+IL-27抗体组显著降低（P＜0.05）,LPS+IL-27组SOCS3表达水平显著高于LPS+IL-27抗体组（P＜0.05）。各组小鼠肺组织及血清TNF-α、IL-1β表达水平较正常对照组均显著升高（P＜0.05）;LPS+IL-27组TNF-α、IL-1β表达水平较LPS组和LPS+IL-27抗体组显著降低（P＜0.05）;LPS组和LPS+IL-27抗体组IL-10表达水平均显著高于正常对照组（P＜0.05）;LPS+IL-27组IL-10、TGF-β1的表达水平均显著高于LPS+IL-27抗体组（P＜0.05）。免疫组织化学结果显示,与正常对照组比,LPS组和LPS+IL-27抗体组TNF-α阳性表达主要表达在细胞浆中,IL-1β阳性表达主要表达与细胞膜与细胞浆中,Western blot结果发现TNF-α、IL-1β在肺组织中均呈高表达（P＜0.05）;LPS+IL-27组TNF-α、IL-1β的表达水平较LPS组和LPS+IL-27抗体组显著降低（P＜0.05）。结论：外源性IL-27可能通过抑制STAT3信号通路相关蛋白磷酸化水平改善LPS诱导的小鼠急性肺炎。     

骨髓间充质干细胞移植对大鼠肺动脉高压的治疗作用

目的：通过手术建立大鼠肺动脉高压模型,探讨采用骨髓间充质干细胞（MSCs）对肺动脉高压的治疗作用,阐明其可能机制。方法：分离、培养并鉴定MSCs。48只大鼠随机分为对照组、模型组、低剂量MSCs（MSCL）和高剂量MSCs（MSCL）组,除对照组外,其余各组大鼠通过腹主动脉-下腔静脉分流术制备大鼠肺动脉高压模型,8周后MSCL和MSCH组大鼠注入相应剂量（3×10⁵和6×10⁵个）MSCs,模型组大鼠注入等量生理盐水。6周后,测定大鼠右心室收缩压（RVSP）、平均右室压（MRVP）、平均肺动脉压（MPAP）和右心室系数（VDI）;采用试剂盒检测大鼠血清和肺组织中一氧化氮（NO）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平;Q-PCR法测定大鼠肺组织中NADPH mRNA表达水平;HE染色法观察大鼠肺组织形态表现。结果：成功分离鉴定原代MSCs,MSCs分离纯度>85%。治疗结束后,与对照组比较,模型组大鼠RVSP、MRVP、MPAP和VDI明显升高（P<0.05）;与模型组比较,MSCL和MSCH组大鼠MRVP和MPAP明显下降（P<0.05）,MSCH组大鼠RVSP和VDI明显下降（P<0.05）。与对照组比较,模型组大鼠血清及肺组织中NO和TNF-α水平明显升高（P<0.05）;与模型组比较,MSCL和MSCH组大鼠肺组织中的NO和TNF-α水平明显降低（P<0.01）,MSCH组大鼠血清中NO和TNF-α水平明显降低（P<0.05）。与对照组比较,模型组大鼠NADPH mRNA表达水平明显升高（P<0.01）;与模型组比较,MSCH组大鼠NADPH mRNA表达水平明显降低（P<0.01）。MSCL和MSCH组大鼠的肺组织结构损伤明显减轻,同时肺壁未见明显增厚。结论：MSCs具有治疗肺内高压的作用,并且可以抑制NO和TNF-α的产生,其作用机制与抑制NADPH基因表达有关。     

卡介菌多糖核酸免疫治疗结核病小鼠的实验研究

目的 观察卡介菌多糖核酸（BCG-PSN）对结核分枝杆菌感染小鼠的免疫保护作用及其免疫学机制。方法 将BALB／c小鼠48只随机分成BCG—PSN免疫治疗组和结核菌感染对照组,每组24只。两组小鼠制成结核分枝杆菌感染模型。感染后1周,每天分别腹腔内注射BCG—PSN（10mg／kg）或生理盐水（10mL／kg）,连续7d。感染后3周和4周每组处死12只小鼠,检测小鼠体重以及肺、脾脏湿重,观察肺脏病理改变,取肺、脾组织进行结核菌培养和菌落计数,用real—time PCR法测定肺、脾组织IFN-γmRNA、IL-10mRNA和IL-4mRNA的表达。结果 感染后4周,治疗组小鼠体重和脾脏重量高于对照组,肺脏重量低于对照组,且肺部病变较轻。感染后3周和4周,治疗组小鼠肺、脾组织结核菌落均低于对照组,小鼠肺组织IFN-γmRNA表达与对照组无差别,IL-10mRNA和IL-4mRNA的表达低于对照组。感染后3周,治疗组小鼠脾组织IFN-γmRNA表达与对照组相似;感染后4周,脾组织治疗组脾组织IFN-γmRNA的表达高于对照组。感染后3周和4周,IL-10mRNA和IL-4mRNA的表达低于对照组。结论 BCG—PSN可减轻结核病小鼠体重下降,减少结核病小鼠肺和脾脏结核菌数量,并增强Th1型免疫反应。     

宫颈癌患者血清和癌组织中NF-κB及TNF-α蛋白的表达及其意义

目的：探讨不同宫颈病变患者血清和宫颈组织中核因子（NF-κB）及肿瘤坏死因子α（TNF-α）蛋白的表达,阐明其生物学意义和早期联合诊断的价值。方法：对100例有宫颈癌病变高危因素的患者（宫颈炎37例、宫颈内瘤变39例和宫颈癌24例）抽取静脉血同时行阴道镜检。采用ELISA方法检测血清及镜检宫颈组织中NF-κB和TNF-α蛋白的含量;采用RT-PCR法检测宫颈组织中NF-κB及TNF-α的mRNA表达水平;采用免疫组织化学方法检测宫颈组织中NF-κB及TNF-α的蛋白表达;结合临床病理特点进行分析。结果：宫颈内瘤变及宫颈癌患者血清及镜检组织中NF-κB和TNF-α含量明显高于宫颈炎患者（P<0.01）,宫颈癌患者其含量明显高于宫颈内瘤变患者（P<0.01）;宫颈内瘤变和宫颈癌患者宫颈组织中NF-κB和TNF-α mRNA及其蛋白表达水平明显高于宫颈炎患者（P<0.01）,且宫颈癌患者宫颈组织中其表达水平明显高于宫颈内瘤变患者（P<0.01）。宫颈炎、宫颈内瘤变及宫颈癌患者宫颈组织中NF-κB与TNF-α含量呈正相关关系（r=0.69,P＜0.05）。结论：NF-κB和TNF-α均可独立作为早期诊断宫颈癌前病变及宫颈癌的标记物,二者的正相关性使得联合检测可提高宫颈癌的早期诊断率。     

大黄素治疗重症急性胰腺炎肺损伤机制研究

目的 探讨大黄素（EMO）治疗重症急性胰腺炎肺损伤（SAPLI）的机制。方法 2014年6月-2015年12月选取SPF级健康雄性SD大鼠90只,采用随机数字表法将大鼠分为假手术组（SHAM组,n=30）、SAPLI组（n=30）、EMO组（n=30）。SAPLI组和EMO组大鼠胆胰管逆行注射4%牛磺胆酸钠建立SAPLI模型,SHAM组大鼠胆胰管逆行注射等体积0.9%氯化钠溶液。EMO组于造模后1 h腹腔注射EMO,SAPLI组及SHAM组注射等体积0.9%氯化钠溶液。治疗后24 h,SAPLI组死亡11只大鼠,EMO组死亡4只大鼠。检测肺湿重/干重及组织病理学评分、髓过氧化物酶（MPO）水平、血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平、白介素（IL）-6水平、IL-10水平、调节性T细胞（Treg）表达率、叉头翼状螺旋转录因子（Foxp3）mRNA表达水平。结果 SAPLI组、EMO组大鼠肺湿重/干重、组织病理学评分高于SHAM组（P＜0.05）;EMO组大鼠肺湿重/干重、组织病理学评分低于SAPLI组（P＜0.05）。SAPLI组、EMO组大鼠MPO水平高于SHAM组（P＜0.05）;EMO组大鼠MPO水平低于SAPLI组（P＜0.05）。SAPLI组、EMO组大鼠TNF-α、IL-6水平均高于SHAM组,IL-10水平均低于SHAM组（P＜0.05）;EMO组大鼠TNF-α、IL-6水平均低于SAPLI组,IL-10水平高于SAPLI组（P＜0.05）。SAPLI组、EMO组大鼠Treg表达率、Foxp3 mRNA表达水平均高于SHAM组（P＜0.05）;EMO组大鼠Treg表达率、Foxp3 mRNA表达水平高于SAPLI组（P＜0.05）。结论 EMO具有治疗SAPLI的作用,其可能是通过增加Treg表达率及其功能活性,降低MPO、TNF-α、IL-6水平,升高IL-10水平,从而对肺组织起到保护作用。     

雾化吸入灭活草分枝杆菌对小鼠哮喘模型IL-17F表达的影响

目的：探讨雾化吸入灭活草分枝杆菌治疗小鼠支气管哮喘（哮喘）模型对白细胞介素17F（IL-17F）表达的影响.方法：雄性BALB/c小鼠24只,按数字随机表法分为3组,每组8只：分别为对照组、模型组、治疗组.建立OVA致敏的小鼠哮喘模型,以雾化吸入灭活草分枝杆菌治疗哮喘小鼠.取肺组织经HE染色,光镜下观察肺组织结构及病理改变;ELISA法检测肺泡灌洗液（BALF）和血清中IL-17F浓度;采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）的标准曲线法,测定小鼠肺组织IL-17F mRNA的表达情况.结果：小鼠BALF中IL-17F浓度均高于血清中IL-17F浓度;模型组BALF中IL-17F浓度明显高于对照组和治疗组（P＜0.01）;治疗组BALF中IL-17F浓度较模型组有所减少,但仍高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.01）.模型组和治疗组小鼠血清中IL-17F浓度高于对照组（P＜0.01）,治疗组较模型组小鼠血清中IL-17F浓度减少,但差异无统计学意义（P＞0.05）.模型组小鼠肺组织IL-17F mRNA的相对表达量显著高于对照组和治疗组（P＜0.01）.治疗组肺组织IL-17FmRNA的表达与对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）.结论：小鼠哮喘模型气道炎症与IL-17F高表达有关,雾化吸入灭活草分枝杆菌减轻哮喘小鼠气道炎症,并下调IL 17F表达.     

TNF-α和明胶酶在病毒性心肌炎中的动态变化

目的：探讨TNF-α和明胶酶MMP-2、MMP-9在病毒性心肌炎（VMC）中的动态变化及其意义。方法：6周龄近交系雄性Balb/c小鼠随机分为对照组（n=35）和感染组（n=60）,分别给予PBS和含10-5.69 TCID50/mL的CVB3液0.1 mL注射,分别在第4、第10、第21、第30天各随机取8只小鼠处死并取血和心脏标本。Reed-Muench法测定接种病毒滴度;HE染色后光镜观察心肌组织病理学改变;免疫组织化学法、Western blot和实时荧光定量PCR法分别检测心肌组织MMP-2、MMP-9蛋白及其mRNA的表达;ELISA法检测血清TNF-α的浓度变化。结果：与对照组比较,感染组血清TNF-α浓度明显升高（P＜0.05）,心肌组织MMP-2和MMP-9蛋白及其mRNA表达均显著增高（P＜0.05）。MMP-2、MMP-9表达与心肌病理积分、TNF-α浓度均呈正相关。结论：在小鼠CVB3心肌炎中TNF-α及其下游产物MMP-2和MMP-9水平上调,可能参与VMC的病理生理过程。     

甲型流感病毒感染后粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子对M1样气道单核细胞/巨噬细胞极化的影响

目的探究甲型流行性感冒（流感）病毒感染后粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）对M1样气道单核细胞巨噬细胞极化的影响。方法选取雄性NC/Nga小鼠（8周龄）60只,随机分成甲型流感病毒感染组（对照组,n=30）和GM-CSF过表达组（过表达组,n=30）。评估2组甲型流感感染的发病率和病死率,测定诱导GM-CSF的过表达及纯化对小鼠呼吸力学参数和支气管肺泡灌洗蛋白质（BAL）的影响;观察巨噬细胞的单核细胞分离、分化和极化;利用PCR法测定M1样气道单核/巨噬细胞极化标记基因的表达。结果过表达组的发病率低于对照组（P<0.05）;过表达组的病死率低于对照组（P<0.05）。对照组的呼吸力学参数<过表达组（P<0.05）;对照组的压力容积（PV）曲线的曲率<过表达组（P<0.05）;对照组呼吸系统总阻力和组织或外围气道阻力>过表达组（P<0.05）。过表达组细胞因子CCL17、CXCL9和MMP12的BAL蛋白表达水平高于对照组（P<0.05）。对照组的组织中CD11b+标记气道单核细胞/巨噬细胞极化高于过表达组（P<0.05）。提示正常组织中巨噬细胞以M2型为主,减少炎症反应。对照组中巨噬细胞M1样mRNA水平较高,其中TNF-α、MCP-1、IL-6 mRNA表达水平高于过表达组（P<0.05）。结论 GM-CSF过表达改善了甲型流感病毒感染对肺力学的影响,抑制M1样气道单核细胞/巨噬细胞极化则提示极化以M2样为主,减少炎症反应。     

厄贝沙坦对病毒性心肌炎慢性期小鼠心肌组织中periostin表达的影响及其抗心肌纤维化作用机制

目的:探讨厄贝沙坦对病毒性心肌炎(VMC)慢性期小鼠心肌组织中periostin表达及心肌纤维化的影响,阐明其抗心肌纤维化的可能机制。方法:以柯萨奇病毒B3（CVB3）感染40只BALA/c小鼠建立VMC慢性期动物模型,21只模型小鼠随机分为模型组（n=11）和厄贝沙坦组（n=10）,另选10只BALA/C小鼠作为对照组。模型组和对照组小鼠给予自来水(1 mL/d),厄贝沙坦组小鼠给予厄贝沙坦50 mg/kg/d,60 d后检测3组小鼠左室舒张末期内径（LVEDd）和左室收缩末期内径（LVEDs）,并计算左室射血分数缩短率（FS）;ELISA法检测各组小鼠血清血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ）浓度,对3组小鼠的心脏切片行MASSON染色,计算心肌胶原容积分数（CVF）;应用RT-PCR法对TGF-β1和periostin在小鼠心肌组织中的表达水平进行半定量分析。结果:与对照组比较,模型组小鼠LVEDd和LVEDs显著升高（P<0.01）,FS显著下降（P<0.01）,血清AngⅡ浓度、CVF、TGF-β1 mRNA和periostin mRNA表达均显著升高（P<0.01）;与模型组比较,厄贝沙坦组LVEDd和LVEDs降低（P<0.05）,FS升高（P<0.05）,血清Ang Ⅱ浓度无明显差异（P>0.05）,CVF、TGF-β1 mRNA和periostin mRNA表达水平下降（P<0.05）。结论:厄贝沙坦具有抗VMC慢性期小鼠心肌纤维化的作用,其作用机制可能是通过抑制心肌组织中TGF-β1表达,进而减少periostin表达水平而实现的。     

Caspase-3在小鼠肿瘤恶病质肌肉蛋白消耗中的作用

目的：探讨半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase-3）在小鼠肿瘤恶病质状态下骨骼肌中的表达,阐明Caspase-3与细胞凋亡及肿瘤恶病质骨骼肌蛋白消耗的关系。方法：小鼠结肠腺癌Colon26（CT26）细胞接种BALB/c小鼠诱导肿瘤恶病质模型为肿瘤组,同时设对照组,每组24只。每天监测各组小鼠体质量,并分别在第8、14和20天各处死8只小鼠,检测小鼠左侧腓肠肌组织质量、纤维横切面积、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）水平和Caspase-3蛋白表达水平及腓肠肌细胞凋亡率。结果：第14天肿瘤组小鼠出现恶病质症状,去瘤体质量下降大于对照组小鼠体质量的20%(P<0.05),小鼠进入肿瘤恶病质期。与同期对照组比较,随着接种细胞时间的延长,肿瘤组小鼠体质量、去瘤体质量、腓肠肌组织质量及纤维横切面积均减小（P<0.05）,TNF-α、IL-6水平和Caspase-3蛋白表达水平及骨骼肌细胞凋亡率均显著升高（P<0.05）。Caspase-3蛋白表达水平与腓肠肌质量及横切面积呈负相关关系（r=－0.716,P<0.05;r=－0.694,P<0.05）,与TNF-α和IL-6水平呈正相关关系（r=0.742,P<0.05;r=0.675,P<0.05）。结论：Caspase-3可能是肿瘤恶病质促进骨骼肌组织蛋白消耗的关键性因子。     

哮喘小鼠肺脏组织肾素-血管紧张素系统相关组分表达 及AT1R拮抗剂对其影响

目的：探讨肾素-血管紧张素系统（RAS）与哮喘发生的关系,为哮喘发病机制的研究和治疗提供理论依据。方法：复制小鼠哮喘模型,小鼠分为对照组、模型组、坎地沙坦低剂量组及高剂量组,采集小鼠血清,测量血清中血管紧张素Ⅱ (AngⅡ)与血管紧张素Ⅰ(AngⅠ)的含量;通过Western blotting和RT-PCR观察RAS中血管紧张素原(AGT)、血管紧张素转换酶(ACE)、血管紧张素Ⅱ 1型受体（AT₁R）和2型受体（AT₂R）在各组小鼠肺组织中的表达。结果：模型组小鼠血清AngⅡ含量较对照组增高（P<0.05）,坎地沙坦组与模型组比较无明显变化（P>0.05）。各组小鼠血清中AngⅠ含量比较差异无统计学意义（P>0.05）。模型组小鼠AT1R和ACE蛋白表达较对照组明显增加（P<0.05）,坎地沙坦组AT₁R表达与模型组比较明显降低(P<0.05),ACE无明显变化（P>0.05）。AT₂R蛋白表达各组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。模型组小鼠ACE mRNA表达较对照组明显增加（P<0.05）,坎地沙坦组与模型组比较差异无统计学意义（P>0.05）。模型组小鼠AT1R mRNA表达较对照组明显增加（P<0.05）,坎地沙坦组较模型组明显降低（P<0.05）。模型组AT2R mRNA较对照组明显降低（P<0.05）,坎地沙坦组较模型组明显增加（P<0.05）。各组AGT mRNA表达无明显变化（P>0.05）。  结论：在小鼠哮喘发病过程中,RAS活化参与了哮喘的发病过程,并且AT₁R拮抗剂坎地沙坦可以逆转ACE、AT₁R和AT₂R表达的改变。     

芪蛭降糖胶囊对糖尿病大鼠胰岛素抵抗的作用及其机制

目的：探讨芪蛭降糖胶囊(QJ)对糖尿病大鼠胰岛素抵抗(IR)的作用,阐明其药物作用的分子药理机制。方法：100只Wistar大鼠采用高脂饮食联合注射链脲佐菌素（STZ）的方法复制2型糖尿病大鼠模型。将建模成功大鼠随机分为模型组（DM）,参芪降糖颗粒阳性对照组（SQ）,芪蛭降糖胶囊低（QJL）、中 (QJM)和高剂量组(QJH),同时设立正常对照组（NC）。芪蛭降糖胶囊低、中和高剂量组药物浓度分别为0.34、0.68和1.35 g?kg-1;参芪降糖颗粒药物浓度为0.27 g?kg-1。大鼠建模成功后,给予相应浓度药物干预治疗8周。经药物干预后,应用血糖检测仪及全自动生化分析仪测定大鼠空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FINS）、胰岛素抵抗指数（IRI）和脂质代谢相关生化指标,Real Time PCR法测定肝脏组织中胰岛素受体底物1（IRS-1）、磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）和葡萄糖转运体4（GLUT4）基因的mRNA表达水平,ELISA法测定血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）和脂联素（ADPN）水平。结果：与正常对照组比较,模型组大鼠FBG、FINS和IRI显著升高（P<0.05或P<0.01）;血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）和低密度脂蛋白（LDL）水平显著升高（P<0.05）,血清高密度脂蛋白（HDL）水平显著降低（P<0.05）;肝脏组织中IRS-1、PI3K和GLUT4基因的mRNA表达水平显著下降（P<0.05）,血清TNF-α水平显著升高（P<0.05）,血清ADPN水平显著降低（P<0.05）。与模型组比较,芪蛭降糖胶囊低、中、高剂量组及参芪降糖颗粒阳性对照组大鼠FBG和IRI显著降低（P<0.01）;芪蛭降糖胶囊中、高剂量组及参芪降糖颗粒阳性对照组FINS显著降低（P<0.05）;芪蛭降糖胶囊中剂量组及参芪降糖颗粒阳性对照组血清TC、TG和LDL水平显著降低（P<0.05或P<0.01）,HDL水平显著升高（P< 0.05）;肝脏组织中IRS-1、PI3K和GLUT4基因的mRNA表达水平显著上调（P<0.05）;芪蛭降糖胶囊中、高剂量组及参芪降糖颗粒阳性对照组血清TNF-α水平显著降低（P<0.05）,血清ADPN水平显著升高（P<0.05）。结论：芪蛭降糖胶囊具有改善糖尿病大鼠IR的作用,其作用机制与改善糖脂代谢、影响胰岛素信号传导通路有关。     

糙皮侧耳碱提水溶性多糖对肿瘤的抑制作用及其机制

目的：研究糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)碱提水溶性多糖对肿瘤的抑制作用,并探讨其作用机制。方法：通过碱液提取、乙醇沉淀、联合脱蛋白和柱层析方法,分离得到粗皮侧耳碱提水溶性多糖WPOP-N1;BalB/C小鼠前肢腋皮下注射S-180肉瘤细胞建立肿瘤小鼠模型,将60只雌性小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、环磷酰胺阳性对照组（30 mg/kg）、WPOP-N1 低、中和高剂量组（100、200和400 mg/kg）,每组10 只。除正常对照组外,在每只小鼠的前肢腋皮下注射S-180肉瘤细胞悬液,对照组小鼠给予生理盐水,模型对照组小鼠给予脂多糖10 mg?L-1。采用ELISA法检测各组小鼠血清TNF-α水平,评价WPOP-N1对巨噬细胞吞噬作用,NO和TNF-α水平的影响。结果： WPOP-N1低、中和高剂量组小鼠瘤质量分别为（2.38±0.55）、（1.79±0.64）和（1.37±0.51）g,均低于正常对照组［（3.71±0.81）g］（P<0.05）;WPOP-N1低、中和高剂量组抑瘤率分别为35.8%、51.8%和63.1％;WPOP-N1中、高剂量组荷瘤小鼠血清TNF-α水平高于正常对照组（P<0.05或P<0.01）;腹腔巨噬细胞的吞噬能力高于正常对照组（P<0.05或P<0.01）;WPOP-N1低、中和高剂量组小鼠腹腔巨噬细胞分泌NO和TNF-α水平升高（P<0.05）,并具有剂量效应。结论： WPOP-N1具有显著的体内肿瘤抑制作用,其作用机制可能是活化巨噬细胞分泌NO和TNF-α,并增强巨噬细胞的吞噬能力。     

实验性肺纤维化小鼠IL-1和TNF-α的动态表达及其意义

目的：探讨博莱霉素致肺纤维化小鼠各时期支气管肺泡灌洗液（BALF）及肺组织中白细胞介素1(IL-1)和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的mRNA表达规律及其意义。方法：40只雄性昆明种小鼠,随机分为对照组(n=10)和实验组（n=30）。分别于生理盐水和博莱霉素（5 mg•kg^-1）一次性气管内灌注后第3、7、14、28和56天行支气管肺泡灌洗并处死小鼠,取支气管肺泡灌洗液和肺组织,应用RT-PCR法测定其中的IL-1 mRNA和TNF-α mRNA相对转录水平。结果：①BALF中,实验组IL-1 mRNA和TNF-α mRNA表达均高于对照组（P<0.05）,且实验组中两者的表达高峰均在第14天。②肺组织中,实验组IL-1 mRNA和TNF-α mRNA表达水平均高于对照组（P<0.01）,且实验组中两者表达高峰分别在第7和14天,此后逐渐下降,但仍然保持高于正常水平表达。结论：IL-1 mRNA和TNF-α mRNA表达高峰时相均在肺纤维化发病早期,因此推断其在致肺纤维化损伤中发挥重要作用,并依IL-1 mRNA和TNF-α mRNA表达水平可判断病变发展进程和活动性。     

黄芪联合胰岛素对糖尿病大鼠胰岛素抵抗的作用及其机制

［摘 要］ 目的:探讨黄芪联合胰岛素对糖尿病大鼠胰岛素抵抗的作用,并阐明其作用机制。方法:链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病大鼠模型,将诱导成功的糖尿病大鼠随机分为模型组(DM)、黄芪组(RA)、黄芪联合胰岛素组（RA+Ins）和胰岛素组(Ins),同时设立正常大鼠为对照组（Control）。对照组和DM组大鼠无任何处理因素;RA组大鼠给予每日黄芪灌胃;Ins组大鼠每日胰岛素注射;RA+Ins组大鼠给予黄芪灌胃和胰岛素注射。8周后测定大鼠空腹血糖(FBG)值和空腹胰岛素(FINS)水平。腹主动脉取血,检测大鼠血清丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活力、肿瘤坏死因子α（TNF-α）含量及大鼠骨骼肌胰岛素受体底物-1（IRS-1）和p38MAPK的表达水平。结果：DM组、RA组、Ins组和RA+Ins组大鼠FBG水平显著高于对照组（P<0.05）,RA组、Ins组和RA+Ins组大鼠FBG水平显著低于DM组（P<0.05）,Ins组和RA+Ins组大鼠FBG水平显著低于RA组（P<0.05）,并且RA+Ins组大鼠FBG水平高于Ins组（P<0.05）。Ins组、RA+Ins组大鼠FINS水平显著高于对照组、DM组和RA组（P<0.01）,RA+Ins组大鼠FINS水平显著低于Ins组（P<0.01）。DM组、RA组、Ins组和RA+Ins组大鼠血清MDA含量显著高于对照组（P<0.05）,RA组、Ins组和RA+Ins组大鼠血清MDA含量明显低于DM组（P<0.05),RA组和Ins组大鼠血清MDA含量明显高于RA+Ins组（P<0.05）。DM组、RA组、Ins组和RA+Ins组大鼠SOD活力显著低于对照组（P<0.05）,RA组、Ins组和RA+Ins组大鼠血清SOD活力显著高于DM组（P<0.05),RA组和Ins组大鼠血清SOD活力显著低于RA+Ins组（P<0.05）。DM组、RA组、Ins组和RA+Ins组大鼠血清TNF-α含量显著高于对照组（P<0.05）,RA组、Ins组和RA+Ins组大鼠血清TNF-α含量明显低于DM组（P<0.05）,RA+Ins组大鼠血清TNF-α含量明显低于RA组和Ins组（P<0.05)。DM组、RA组、Ins组和RA+Ins组大鼠IRS-1表达低于对照组（P<0.05）,RA+Ins组大鼠IRS-1表达高于DM组、RA组和Ins组（P<0.05)。DM组、RA组、Ins组和RA+Ins组大鼠p38MAPK表达高于对照组（P<0.05),RA+Ins组大鼠p38MAPK表达低于DM组、RA组和Ins组（P<0.05)。结论：黄芪联合胰岛素明显改善了糖尿病大鼠氧化应激及胰岛素抵抗状态,并且疗效优于单纯胰岛素的应用。     

灵芝多糖对荷膀胱癌T24细胞小鼠化疗后腹腔巨噬细胞的影响及相关免疫机制研究

目的 探讨灵芝多糖对荷膀胱癌T24细胞小鼠化疗后腹腔巨噬细胞免疫功能的影响。方法 2012年5月-2014年10月建立荷膀胱癌T24细胞小鼠模型15只,采用随机数字表法分为3组：0.9%氯化钠溶液组、顺铂组、顺铂+灵芝多糖组,每组5只。分别以0.9%氯化钠溶液、0.9%氯化钠溶液、灵芝多糖灌胃18 d,以0.9%氯化钠溶液、顺铂、顺铂腹腔注射5 d。收集小鼠腹腔巨噬细胞,采用流式细胞仪检测腹腔巨噬细胞对异硫氰酸荧光素-右旋糖酐（FITC-dextran）的吞噬能力,以FITC-dexran阳性率表示;采用酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测腹腔巨噬细胞白介素1（IL-1）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达水平;采用荧光定量PCR（RT-PCR）检测腹腔巨噬细胞IL-1 mRNA和TNF-α mRNA表达水平。结果 顺铂+灵芝多糖组小鼠FITC-dextran阳性率较顺铂组升高4.5%;顺铂+灵芝多糖组小鼠CD11b-FITC阳性率和CD68-FITC阳性率分别较顺铂组升高11.5%和13.4%,但均未能达到0.9%氯化钠溶液组巨噬细胞中阳性率。3组小鼠腹腔巨噬细胞IL-1、TNF-α表达水平及IL-1 mRNA、TNF-α mRNA表达水平比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;其中顺铂组和顺铂+灵芝多糖组小鼠腹腔巨噬细胞IL-1、TNF-α表达水平及IL-1 mRNA、TNF-α mRNA表达水平较0.9%氯化钠溶液组降低（P＜0.05）;顺铂+灵芝多糖组小鼠腹腔巨噬细胞IL-1、TNF-α表达水平及IL-1 mRNA、TNF-α mRNA表达水平较顺铂组升高（P＜0.05）。结论 灵芝多糖能够提高荷膀胱癌T24细胞小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬作用,从而提高机体的免疫功能,其机制可能与增强IL-1和TNF-α的表达水平有关。     

参红补血颗粒对血虚证小鼠肾脏组织中EPO mRNA和骨髓组织中GM-CSF mRNA表达水平的影响

目的：观察参红补血颗粒（SHBXG）对血虚证模型小鼠肾组织中促红细胞生成素（EPO）mRNA和骨髓组织中粒细胞集落刺激因子（GM-CSF）mRNA表达水平的影响,探讨SHBXG对血虚证小鼠的保护作用及其机制。方法：乙酰苯肼（APH）和环磷酰胺（CTX）联合应用复制血虚证小鼠模型。60只小鼠分为空白对照组,模型组,复方阿胶浆组,低、中和高剂量SHBXG组;每组10只。连续给药14 d后,收集小鼠血清、肾脏及骨髓组织。血液分析仪检测各组小鼠血液中红细胞（RBC）、血红蛋白（HGB）、红细胞比容（HCT）、白细胞（WBC）及血小板（PLT）水平,ELISA法检测各组小鼠血清中EPO和GM-CSF水平,RT-PCR法检测各组小鼠肾脏组织中EPOmRNA及骨髓组织中GM-CSF mRNA的表达水平。结果：血液分析仪检测,与模型组比较,复方阿胶浆组和各剂量SHBXG组小鼠血液中RBC、HGB、HCT和PLT水平明显升高（P<0.05或P<0.01）,复方阿胶浆组和高剂量SHBXG组小鼠血液中WBC水平明显升高（P<0.05）。ELISA法检测,与模型组比较,复方阿胶浆组、各剂量SHBXG组小鼠血清中EPO和GM-CSF水平明显升高（P<0.05）。RT-PCR法检测,与模型组比较,复方阿胶浆组、中和高剂量SHBXG组小鼠肾组织中EPO mRNA和骨髓组织中GM-CSF mRNA表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01）。结论：SHBXG可以改善血虚证小鼠血虚症状,其机制可能与提高小鼠肾组织中EPO mRNA和骨髓组织中GM-CSF mRNA的表达水平有关联。     

IL-17在子痫前期患者胎盘组织和外周血中的表达

目的  探讨白细胞介素-17 (IL-17)和Th17细胞与子痫前期发病的关系。方法  选取32例重度子痫前期患者为子痫前期组,30例正常晚期妊娠孕妇为对照组。采用实时定量PCR方法检测两组胎盘组织IL-17 mRNA 表达水平;酶联免疫吸附试验双抗体夹心（ELISA）法检测外周血血清IL-17、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的浓度。结果子痫前期组胎盘IL-17 mRNA表达量较对照组升高（P＜0.05）;子痫前期组外周血血清IL-17、IL-6、TNF-α水平均高于对照组（P＜0.01、P＜0.05、P＜0.01）;子痫前期组外周血中IL-17与IL-6的表达水平呈正相关（r=0.402,P＜0.05）。结论  IL-17和Th17细胞介导了子痫前期的发生,其过程可能与IL-6和TNF-α的参与有关。     

硫化氢对高脂诱导的非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脏炎性反应的作用

目的 观察硫化氢（H2S）对非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠炎性因子水平的影响,探讨H2S防治NASH的可能机制。方法 2013年1月-2014年7月选用SPF级雄性SD大鼠60只,按照随机数字表法分为对照组、NASH模型组、硫氢化钠（NaHS）干预组,各20只。对照组给予普通饲料,NASH模型组给予高脂饲料,NaHS干预组给予高脂饲料的同时腹腔注射H2S供体NaHS（56 mg·kg-1·d-1）,对照组和NASH模型组每日腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液。8周后处死所有大鼠,留取静脉血及肝脏组织。检测血清及肝脏生化指标〔血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）﹑天冬氨酸氨基转移酶（AST）、三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）及肝脏组织TG、TC〕﹑血浆及肝脏组织H2S水平、肝脏组织氧化应激指标〔丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）〕;HE染色观察肝脏组织病理学变化;检测肝脏组织肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素6（IL-6） mRNA表达水平及肝脏组织TNF-α、IL-6、核因子κB抑制因子α（IκBα）、核因子κB p65（NF-κB p65）表达水平。结果 NASH模型组和NaHS干预组血清ALT、AST、TG、TC水平及肝脏组织TG、TC水平均高于对照组,且NaHS干预组以上指标均低于NASH模型组（P＜0.05）。NASH模型组血浆H2S水平和肝脏组织H2S水平均低于对照组及NaHS干预组（P＜0.05）。与对照组比较,NASH模型组和NaHS干预组肝脏组织MDA水平升高,SOD水平降低（P＜0.05）;与NASH模型组比较,NaHS干预组MDA水平降低,SOD水平升高（P＜0.05）。与对照组比较,NASH模型组肝脏组织结构紊乱,呈弥漫性脂肪变性、肝细胞灶性坏死,并可见淋巴细胞和中性粒细胞浸润;NaHS干预组肝脏组织脂肪变性、坏死及炎性反应程度较NASH模型组明显减轻。NASH模型组和NaHS干预组肝脏组织TNF-α、IL-6 mRNA表达水平和TNF-α、IL-6表达水平均高于对照组,且NASH模型组以上指标均高于NaHS干预组（P＜0.05）。与对照组比较,NASH模型组和NaHS干预组细胞质IκBα表达水平均降低,细胞核NF-κB p65表达水平均升高（P＜0.05）;与NASH模型组比较,NaHS干预组细胞质IκBα表达水平升高,细胞核NF-κB p65表达水平降低（P＜0.05）。结论 H2S能够有效改善NASH大鼠肝脏组织病理变化,并抑制炎性反应,这可能是H2S发挥治疗作用的机制之一。     

地塞米松对哮喘小鼠Th17细胞因子IL-17表达的影响

目的 初步探讨地塞米松对哮喘小鼠肺组织中Th17细胞因子IL-17的影响及其机制.方法 采用卵清蛋白致敏方法建立支气管哮喘小鼠模型,Balb/c小鼠30只随机分为对照组、哮喘组、地塞米松治疗组各10只.采用EUSA检测小鼠肺泡灌洗液、IL-17水平;HE染色评价各组小鼠气道炎症程度;RT-PCR检测肺组织IL-17、RORγtmRNA表达水平.免疫组织化学方法检测肺组织RoRγt脚蛋白表达水平.结果 哮喘组小鼠肺组织RORγt、IL-17mRNA和蛋白水平均高于对照组(P<0.01),地塞米松治疗组RORγt、IL-17mRNA和蛋白水平均低于哮喘组(P<0.05).结论 地塞米松可抑制哮喘小鼠肺组织RORγt表达,阻止Th17的分化,从而减少IL-17的分泌,减轻哮喘气道炎症反应.