Biolog技术监测淡豆豉发酵炮制过程中微生物种类动态变化

目的:监测淡豆豉发酵炮制过程中微生物种类的动态变化,为揭示淡豆豉炮制机制提供参考。方法:采用Biolog微生物自动鉴定系统对从不同发酵时间点淡豆豉样品中分离出的优势细菌、酵母菌和霉菌进行鉴定。结果:在整个发酵炮制过程中,枯草芽孢杆菌为主要优势细菌。发酵第3天优势细菌以枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌为主,优势霉菌为黄曲霉、寄生曲霉,优势酵母菌是汉氏德巴利氏酵母。发酵第6天细菌种类增多,出现了枯草芽孢杆菌、松鼠葡萄球菌、抗辐射不动杆菌、铅黄肠球菌,霉菌为寄生曲霉,酵母菌为汉氏德巴利氏酵母、瘦果红酵母和白吉利丝孢酵母A。"再闷"3 d优势细菌为枯草芽孢杆菌、赫氏埃希菌,优势霉菌为黑曲霉,优势酵母菌为瘦果红酵母。"再闷"15 d优势细菌为枯草芽孢杆菌和产酸克雷伯菌,未见霉菌出现,酵母菌以海隐球酵母和罗伦隐球酵母占优势。结论:淡豆豉发酵炮制过程中出现了微生物菌群此消彼长的动态变化,枯草芽胞杆菌作为优势菌种始终参与。     

靖边县2008-2009年糕点微生物检测结果分析

目的：了解靖边县食品生产厂家所生产的糕点类食品微生物指标现状,为卫生监督人员在卫生监督执法和卫生评价时提供科学依据.方法：按GB/T4789.24抽取靖边县城区18家食品生产厂家104份糕点类食品样品进行细菌菌落总数、大肠菌群、沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、霉菌和酵母菌计数检验,按GB7099-2003进行评价.结果：共检测糕点类食品样品104份,其中96份微生物指标符合国家标准,合格率为92.31%,不合格样品主要是菌落总数、霉菌和酵母计数超过国家标准,该类产品均为小型家庭作坊生产.结论：应加强对食品生产厂家特别是小型家庭作坊的卫生监督监测和卫生状况的整改.     

糖肾灵对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用的实验研究

1实验材料 1.1实验动物SPF雄性SD大鼠60只,体重170±75g,华中科技大学同济医学院动物实验中心提供(动物合格证:鄂检证字第2002023)1.2实验用药链脲佐菌素(Streptocin,STZ),美国Sigma公司产品.中药复方糖肾灵由黄芪15g、西洋参5g、地黄12g、麦冬12g、丹参12g按该份量比例组成,其水煎剂浓缩后为0.6g/ml.     

两种品系外燥小鼠对细菌攻击敏感性的评价研究

目的研究模拟外燥条件下BABL/C小鼠(BABL/c)和昆明种小鼠(KM)对细菌攻击敏感性的影响。方法 50只BABL/c(SPF)和50只(SPF)KM随机各分为常温常湿1组、常温常湿2组、常温燥组、温燥组、凉燥组,每组各10只。小鼠按文献造模后第7天常规经鼻滴种金黄色葡萄球菌悬液(108cfu/ml)0.1ml/只且第2天重复1次,常温常湿1组以生理盐水代替细菌悬液。各组于接种后第5天行气管与肺组织病理、肺细菌数(BQ)测定。结果与两种品系小鼠常温常湿组比较,温燥组、凉燥组气管纤毛缺损与腺体化生,肺泡瘀血、水肿伴炎性浸润;常温燥组BQ分别是对照组的2.67倍和4.67倍、温燥组为10.95倍和9.15倍、凉燥组为16.54倍和14.02倍;凉燥组BQ显著高于温燥组(P<0.05),且KM各组BQ高于BALB/c。结论温燥犯肺致受邪部位津液骤伤,凉燥之凉更伤肺阳,合以细菌攻击,两邪相感则致气道"纤毛-黏液毯"御邪屏障受损,细菌与毒素加重肺津输布失司,炎性之物滞凝并酿生痰饮而致肺细菌数剧增,且昆明种小鼠较BABL/c小鼠更为敏感与其体质相关,并益于选择合适的实验动物品系以建立外燥小鼠动物模型。     

乌梅丸降血糖作用的机理探讨

1材料 1.1动物昆明种小鼠104只,体重20～30g,雌雄各半,由江西中医学院动物房提供. 1.2药物及其处理①消渴丸购自江西省南昌市黄庆仁栈药店,批号:ZZ-5445-粤卫药准字(1994)第111146号,由黄芪、地黄、天花粉、格列本脲(即优降糖,每10丸含量为2.5mg)组成.将消渴丸配成0.25%水溶液,稍加热,搅拌,使充分溶解,制得消渴丸溶液.②乌梅丸乌梅丸原方改为汤剂,使每毫升含生药0.6g,制得乌梅丸煎剂.     

天然脑活素的记忆改善效果及其分子机理研究

目的:研究中药古方强记汤及天然脑活素对记忆障碍动物模型在记忆改善方面的作用效果;并运用转基因技术进一步验证天然脑活素对学习记忆分子开关CREB基因表达的促进作用。方法:将强记汤及天然脑活素分别以29.3g/kg和18.6g/kg的量每日经口灌胃给予SPF级小鼠,连续5d,第6天给药1h后制备成记忆障碍模型,第7天给药0.5~1h后分别用跳台法和避暗法测试记忆成绩;另用不同剂量(50g/mL和150g/mL)天然脑活素水煎液处理大鼠大脑B104CNS神经细胞,以荧光素酶方法检测CREB表达水平。结果:强记汤及天然脑活素水煎液对动物记忆障碍模型小鼠记忆成绩中的潜伏时间、错误次数与模型对照组比较均有统计学意义(P<0.01);而且天然脑活素的改善效果明显优于原方(P<0.01);不同剂量天然脑活素水煎液CREB表达水平与对照组比较有统计学意义(P<0.01),且有剂量反应关系。结论:中药古方强记汤及天然脑活素对实验动物被动回避反应能力的记忆获得、记忆保持及记忆再现均有的改善作用,能显著增加在B104CNS神经元细胞中CREB基因的表达。     

炒杜仲对兔蛛网膜下腔出血后脑干中ET-1和eNOS的影响

目的:探讨炒杜仲对兔蛛网膜下腔出血后脑干中ET-1和e NOS表达的影响及其意义。方法:日本大耳白兔96只,随机分为模型组、法舒地儿组(3mg/kg)、杜仲组(2.15g/kg、4.3g/kg),每组24只,采用枕大池二次注血法建立蛛网膜下腔出血模型。在造模后的第3天、第5天、第7天、第10天,每次6只兔按Endo标准进行神经功能评分,免疫组化法动态检测脑干中ET-1和e NOS的表达。结果:取脑时发现枕大池和基底动脉周围有血凝块。4组动物都出现神经功能障碍,但杜仲组(4.3g/kg)评分最低;法舒地儿组、杜仲组(2.15g/kg)评分低;与模型组比较第3天、第5天、第7天差异有统计学意义。在各时间点与模型组比较,法舒地儿组、杜仲组(2.15g/kg、4.3g/kg)脑干中ET-1表达的平均光密度值明显降低,而e NOS表达的平均光密度值明显增高,且第3天、第5天、第7天差异有统计学意义。结论:炒杜仲能降低兔蛛网膜下腔出血后脑干中ET-1表达,而增加e NOS的表达,改善实验动物的神经功能障碍。     

抑喘胶囊对烟熏引起小鼠慢性支气管炎模型的影响

材料与方法 1.实验材料 1.1实验动物昆明种小鼠,体重20～22g,清洁级,批号为DB11/019.1-02,京动管质字(1994)第079号,中国药品生物制品鉴定所医学实验动物中心提供. 1.2实验药物抑喘胶囊:0.44g/粒(相当生药4.9759g),由北京中医药大学中药学院制剂室提供,批号为991103.将抑喘胶囊中的药物从胶囊取出,分别配制成7.52%、3.79%、1.88%,均按0.25ml/10g体重给药.     

凉燥致病机制的实验研究

目的研究凉燥对小鼠的主要致病机制。方法216只无特定病原体级(SPF)昆明小鼠随机分为常温常湿组(A组),常温燥组(B组),凉燥组(C组),每组72只。在模拟凉燥条件下造模,第7天与第14天检测气道与皮肤组织病理、气管纤毛运动、气道液分泌(RS)与气道液IgG抗体(IgG-R)、血液流变学、细菌攻击实验与气管细胞bcl-2基因、bax基因表达。结果与A组相比,C组第14天气管、肺与皮肤病变明显,肺细菌数增高,IgG-R增高,第7天RS降低(P<0.01),血液流变学影响不明显,但气管细胞bcl-2基因表达下降。结论凉燥伤肺、伤津,致气道"纤毛-黏液毯"局部御邪屏障受损;肺津凝滞于肺,以致宣输失司则皮肤失养。本结果为凉燥致病提供实验资料。     

双黄连糖浆解热作用研究

目的 验证自制剂双黄连糖浆解热的药理作用.方法 24只日本大耳白兔随机分为双黄连糖浆低剂量组、高剂量组、模型对照组.按生药剂量计,低剂量组(2 g/kg)、高剂量组(4 g/kg)灌胃给药2天,模型对照组灌胃同体积蒸馏水,第3天测正常肛温后给各组实验兔经耳静脉注射细菌内毒素(10 EU/kg),制作发热模型,0.5小时...     

止血一类新药Halase的长期毒性试验

目的:观察Halase连续重复给药后,对实验动物产生的毒性反应及其严重程度.方法:采用Beagle犬,每组6只,雌雄各半,试验分为4组,即Halase高、中、低剂量(1.2 U/kg、0.6 U/kg和0.3 U/kg)组和对照组,连续静脉注射给药14天;每组有2条犬停药后再观察14天.结果:整个试验过程中动物无一例死亡;给药时间,犬注射部位未见刺激反应,犬的行为活动正常,未见消化道、呼吸道异常症状;在给药中期(第7天)、给药结束(第14天)以及停药恢复期(停药后第14天),给药各组犬的血液学指标、血清生化学检查指标、心电图检测指标和尿液常规检测指标与对照组比较,均无显著性差异;各组犬在给药结束和恢复期末与对照组比较,组织学检查无显著性差异.结论:在试验剂量范围内(0.3～1.2 U/kg),未观察到Halase静脉注射对Beagle犬的毒性反应.     

上海地区10种中药饮片微生物污染情况研究

目的考察上海地区生产的10种中药饮片微生物污染情况。方法参考《中国药典》2015年版第3公示稿微生物相关检查方法,对94份样品进行微生物计数、耐热菌计数和7种致病菌的检查,初步了解各类中药饮片的生物负载水平。结果样品需氧菌总数计数结果介于10~108 CFU/g,霉菌和酵母菌总数计数结果介于10~107 CFU/g,耐胆盐革兰阴性菌(MPN法)和耐热菌的检出率分别为22.3%(21/94)和76.6%(72/94),有1批样品检出大肠埃希菌(100N103 MPN/g)。样品中均未检出沙门菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、志贺氏菌(GB 4789.5)和溶血性链球菌(GB 4789.11)。按《欧洲药典》8.0版、《日本药典》16版和《美国药典》37版相关限度标准判断,本实验考察的中药饮片样品中微生物项目不合格率分别为5.3%、18.1%和23.4%。结论中药饮片极易受到多种微生物的污染,需要开展更深入的风险评估工作,完善中药饮片检验方法和评价标准,降低患者用药风险。     

机械推拿经络腧穴对大鼠臂丛神经损伤恢复作用的机理探讨

1材料与方法1.1动物健康远交系雄性Wistar大鼠30只,体重(160±10)g,由黑龙江中医药大学实验动物中心提供。1.2臂丛神经损伤模型制备首先常规麻醉、固定、剪毛、消毒。选择右侧锁骨下皮肤剪开约1.5cm,游离皮下组织及相应肌群和筋膜,用眼科显微止血钳(尖端上下各套一塑料外膜,防止过度损伤神经鞘膜)钳夹臂丛神经前束1次,1扣,持续30秒,消毒缝皮。待7天切口愈合后分别治疗。1.3分组处理方法(1)机械振动治疗组(10只):仰卧位固定,用自制压力测定振动棒钝尖端以(15±20)Gf力持续振动(频率2次/s,振幅2mm),在臂丛神经损伤处及相当人的“曲池”、“合…     

茯真菌胶囊对小鼠酒精性肝损伤的保护作用

目的 研究茯真菌胶囊对小鼠酒精性肝损伤的保护作用.方法 实验设0.15 g/kg、0.30 g/kg、0.45 g/kg 3个剂量组及空白对照组、肝损伤模型对照组.试验第30天模型组及各剂量组一次灌胃给予50%乙醇14 mL/kg,空白对照组给予等量的蒸馏水,禁食16h称重后处死动物.检测肝组织丙二醛(MDA)、还原型...     

秦菊滴眼液治疗家兔实验性结膜炎的实验研究

目的 观察中药制剂秦菊滴眼液对实验性结膜炎的治疗效果.方法 采用结膜下埋线的方法,造成家兔结膜的炎症,使用含生药0.42 g/ml、0.21 g/ml和0.105 g/ml的秦菊滴眼液进行治疗,以溶剂为阴性对照,珍珠明目滴眼液为阳性对照.治疗前、治疗后第7天、第14天观察记录结膜病变和角膜病变情况.结果 治疗后第14天,0.42 g/ml秦菊滴眼液组和珍珠明目滴眼液组的结膜病变轻于溶剂对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);0.42 g/ml秦菊滴眼液组和珍珠明目滴眼液组的治愈率高于溶剂组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 0.42 g/ml秦菊滴眼液对家兔实验性结膜炎有治疗作用.     

坤泰胶囊对SD大鼠生育力和早期胚胎毒性的研究

目的 观察坤泰胶囊(熟地黄、黄连、白芍、黄芩、阿胶、茯苓)对SD大鼠生育力及早期胚胎发育的影响.方法 雌鼠于交配前2周连续给予坤泰胶囊成品粉溶液至妊娠第7日.低剂量组2.5 g/kg、中剂量组5.0 g/kg、高剂量组10.0 g/kg,对照组给予双蒸水.试验期间每天观察大鼠一般情况.测定雌鼠的质量、摄食量.于妊娠第14天解剖雌鼠,记录孕鼠的怀孕子宫质量、黄体数、着床数、吸收胎数、活胎数和死胎数.记录雌鼠交配率和妊娠率.结果 与对照组相比,坤泰胶囊成品粉低、中、高剂量组雌鼠怀孕第0～第14天的质量、怀孕雌鼠黄体数、着床数、活胎仔数、吸收胎数、胎窝总质量、卵巢质量、子宫质量、胚胎死亡率、雌鼠平均性周期天数和平均性周期数、交配率、雌动物受孕率差异无统计学意义.结论 本实验条件下,坤泰胶囊成品粉在10.0g/kg剂量下,对SD雌性大鼠无明显生育力和早期胚胎毒性.     

细菌攻击对外燥小鼠气道与肠道分泌及免疫功能的影响

目的:观察细菌攻击对外燥小鼠肺细菌数(BQ)、呼吸道液黏多糖(RS)、肠液黏多糖(IS)、血清IgG(IgG-S)与呼吸道液IgG(IgG-R)的影响.方法:72只SPF级昆明种小鼠随机分为4组:常温常湿组、常温燥组、温燥组和凉燥组,每组18只,第7天各组随机取9只经鼻滴种金黄色葡萄球菌0.1ml(1×108cfu/ml).接种细菌后第5、6天分别检测上述指标.结果:各外燥组小鼠BQ高于常温常湿组,以凉燥组为甚(P＜0.01);RS与IS低于常温常湿组(P＜0.05或P＜0.01);温燥组IgG-S增高但IgG-R低于其他各组(P＜0.01).结论:温燥相兼细菌攻击加重肺津生成障碍、免疫功能降低而损及"正气",致其肺部易为细菌生长;凉燥相兼细菌攻击可致肺津减少,且凉伤肺阳,气道御邪失职而细菌生长更甚.     

不同剂量细辛水煎液对大鼠肝、肾、肺毒性的影响

目的：观察不同剂量的细辛水煎液对SD大鼠肝、肾、肺组织形态及肝、肾功能的影响，探讨细辛的肝、肾、肺毒性。方法：50只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组、低剂量组、中剂量组、极高剂量组，每组各10只，正常组灌胃生理盐水，其余各组分别灌胃给予3、6、12、24 g/kg细辛水煎液，连续28 d。分别于实验第7、14、21、28天尾静脉取血，检测血清ALT、AST、CRE、BUN水平，第28天处死动物，取肝、肾、肺组织采用HE染色法观察组织形态。结果：中剂量组(6 g/kg)大鼠肺泡壁轻度增厚，伴少量炎性细胞浸润；高剂量组(12 g/kg)大鼠第14、28天血清ALT水平显著升高(P<0.05)，第28天血清AST水平显著升高(P<0.05)，肝组织细胞颗粒变性，局部血管周围可见淋巴细胞灶性浸润，肾组织少量炎性细胞浸润，肺组织肺泡壁中度增厚，大量淋巴细胞炎性浸润；极高剂量组(24 g/kg)大鼠第14、21天血清ALT水平显著升高(P<0.01,P<0.05)，第14、21、28天血清ALT水平显著升高(P<0.05,P<0.01)，第7、21天血清BUN水平显著升高(P<0.05)，肝组织细胞颗粒变性，胞质疏松淡染呈颗粒状，局部血管周围淋巴细胞灶性浸润，肾组织少量炎性细胞浸润伴中等量的集合管扩张，肺组织肺泡壁增厚，大量淋巴细胞炎性浸润，局部支气管内上皮细胞脱落。结论：6～24 g/kg细辛水煎液可诱导不同程度的肺损伤，12～24 g/kg细辛水煎液可诱导不同程度的肝、肾损伤。     

中药对大肠埃希菌抗生素耐药性逆转作用的实验研究

目的:探讨三黄汤、黄连解毒汤和五味消毒饮三种汤剂对ESBLs阳性E.coli恢复对抗生素敏感性的可能性及逆转机制。方法:用纸片扩散法和双纸片协同法筛选产ESBLs的E.coli,用试管二倍稀释法确定三种中药方剂的MIC,选取低于MIC的不同浓度在规定时间下培养耐药E.coli,测定各中药不同浓度的逆转效果和最佳逆转浓度。提取ESBLs并测定酶活性和含量。结果:三黄汤在0.2g/ml24h,黄连解毒汤在0.1g/ml24h,五味消毒饮在0.3g/ml24h的逆转效果最佳,但与克拉维酸(30μg/ml)比较有显著性差异(P<0.05)。结论:中药能够通过抑制ESBLs的活性和减少产量达到逆转细菌耐药性。     

复方枸骨阴道泡腾栓治疗外阴阴道假丝酵母菌病的药效学研究

目的 探讨复方枸骨阴道泡腾栓治疗外阴阴道假丝酵母菌病的有效性.方法 选用大鼠进行阴道内接种白色假丝酵母菌构建外阴阴道假丝酵母菌病模型,将造模成功大鼠随机分为3组,实验组用复方枸骨阴道泡腾栓进行治疗,阳性对照组用达克宁栓治疗,阴性对照组用复方枸骨阴道泡腾栓基质治疗.接种后第3天开始阴道内局部给药,1次/d,连续7 d.接种后第2,6,11天分别取大鼠阴道灌洗液进行真菌载量分析、涂片镜检,并取其阴道组织进行病理学检查.结果 至接种后第11天,实验组大鼠的真菌载量显著低于阴性对照组[(1.02±0.45)×10<'4> VS(12.24±1.61)×10<'4>CFU/ml,P<0.01],与阳性对照组差异无显著性;涂片镜检,实验组大鼠的假菌丝量显著少于阴性对照组(P<0.01),与阳性对照组差异无显著性;阴道组织病理学检查,实验组及阳性对照组黏膜水肿较轻,炎性细胞浸润较少,且阴道腔、黏膜层假菌丝消失.结论 复方枸骨阴道泡腾栓新制剂用于治疗大鼠外阴阴道假丝酵母菌病是有效的,研究结果为下一步临床开发应用奠定了基础.