植物药有效成分β-蜕皮激素抑制血管内皮细胞的凋亡

目的:分析昆虫变态激素β-蜕皮激素是否能抑制血管内皮细胞的凋亡。方法:实验于2003-09/2006-03在南方医科大学病理生理实验室完成。人内皮细胞株ECV-304消化后制成单细胞悬液,接种至无菌培养管(2mL/管)。分为3组:①空白对照组。②模型组:包括40,80,160mmol/L亚砷酸钠3个剂量组。③实验组:包括160mmol/L亚砷酸钠 50,200,800mg/Lβ-蜕皮激素3个剂量组。培养24h后测定相关指标,应用流式细胞术测定内皮细胞的凋亡细胞数及平均通道荧光值,取平均通道荧光值对数,对数值越大,氧化水平越高。结果:①40,80,160mmol/L亚砷酸钠模型组的血管内皮细胞凋亡率均显著高于对照组(16.70±3.56)%,(26.80±2.48)%,(54.30±11.06)%,(7.67±2.42)%(P<0.01)。②50mg/L和200mg/Lβ-蜕皮激素实验组的血管内皮细胞凋亡率均显著低于160mmol/L亚砷酸钠模型组(P<0.01),但800mg/Lβ-蜕皮激素实验组显著高于160mmol/L亚砷酸钠模型组(P<0.05)。③40,80,160mmol/L亚砷酸钠模型组血管内皮细胞的氧化水平均显著低于对照组(P<0.01),50,200mg/Lβ-蜕皮激素实验组能使氧化水平有所升高,800mg/Lβ-蜕皮激素实验组能使氧化水平有所降低,但与亚砷酸钠模型组相比,差异无显著性意义穴P>0.05雪。结论:亚砷酸钠可剂量依赖地诱导内皮细胞凋亡;β-蜕皮激素能影响亚砷酸钠诱导的内皮细胞凋亡,但具体剂量关系值得进一步分析。     

血游离脂肪酸对血管内皮细胞凋亡的影响

临床流行病学研究显示，胰岛素抵抗综合征（IRS）患者发生心肌梗塞及脑血管意外的危险性较普通人群增高2倍以上。胰岛素抵抗综合征包括一组致动脉硬化症群，如：肥胖、高血压、糖耐量减低、2型糖尿病、脂代谢紊乱、纤溶活性异常等。已经证实，在肥胖、糖耐量减低、2型糖尿病患者血浆中游离脂肪酸（FFA）水平明显高于正常人。     

活化蛋白C抑制血管内皮细胞凋亡的机制研究

目的 观察活化蛋白C(activated protein C,APC)对线粒体凋亡途径相关调节因子的影响,以阐述其抑制血管内皮细胞凋亡作用的可能机制.方法 人脐静脉血管内皮细胞与脂多糖(1μg/mL)孵育诱导细胞凋亡模型后,分别给予APC(10 ng/mL或50 ng/mL)建立药物治疗组,另设立对照和凋亡模型组,24 h后取材,RT-PCR和Western blotting检测Bcl-2,Bax,P53和Caspase 3 mRNA及蛋白表达.结果 不同剂量APC治疗组与凋亡模型组比较P53,Bax和Caspase 3 mRNA和蛋白表达下调,Bcl-2 mRNA和蛋白表达上调,尤以APC 50 ng/mL治疗组为显著(P<0.05).结论 APC可能参与调节Caspase 3依赖性的线粒体凋亡途径相关因子的表达,发挥抑制LPS诱导的血管内皮细胞凋亡,从而为APC制剂在感染性疾病中的使用提供了理论基础.     

激光照射诱导兔血管平滑肌细胞、内皮细胞凋亡的观察

目的 观察510.6nm激光照射后兔血管平滑肌细胞。内皮细胞凋亡率的变化规律,比较激光对两种细胞诱导凋亡的选择性作用,为临床应用激光防止再狭窄提供实验依据。方法 用照射剂量分别为100 mW/cm~2×500 s,100 mW/cm~2×1 000 s,150 mW/cm~2×1 000 s,200 mW/cm~2×500 s和200 mW/cm~2×1 000 s的铜蒸气激光照射兔腹主动脉,用 DNA末端标记法(TUNE)检测血管平滑肌细胞、内皮细胞的凋亡率。结果 经激光照射后,各激光组血管平滑肌细胞凋亡率分别为 21.2％,24.5％,30.8％,37.3％和 34.5％,对照组为3.4％,各激光组与对照组比较,差异均有显著性意义(P<0.05);各激光组内皮细胞凋亡率分别为1.0％,2.0％,2.0％,2.5％和3.1％,对照组为2.6％,各激光组与对照组间差异均无显著性意义(P>0.05)。结论 功率密度 100mW/cm~2以上的激光照射,可诱导兔在体血管平滑肌细胞凋亡,且凋亡率高,同等剂量的激光照射对内皮细胞的凋亡率无明显影响。     

利用流式细胞仪检测肾小球内皮细胞凋亡

利用流式细胞仪检测肾小球内皮细胞凋亡于力方王建中陈香美傅博本课题为国家自然科学基金资助项目作者单位：１００８５３北京，解放军总医院肾病科，解放军肾脏病中心和重点实验室对于细胞凋亡的检测，目前主要采用光镜、电镜以及ＤＮＡ电泳［１］等方法。本文利用流式细...     

雷帕霉素对血管内皮细胞凋亡及增殖、迁移、成血管能力的影响

目的:探讨雷帕霉素(rapamicin)对内皮细胞凋亡及增殖、迁移、成血管能力的影响.方法:培养脐静脉内皮细胞并分组,将浓度为0、1、10、100 ng/mL的rapamycin与内皮细胞作用24 h,DAPI染色观察凋亡细胞核形态变化.CCK8法检测内皮细胞的增殖能力,transwell小室检测迁移能力,并在倒置显微镜下检测细胞的成血管能力.结果:10、100 ng/mL rapamycin能明显抑制内皮细胞增殖能力(P<0.01).同时rapamycin (1 ～100 ng/mL)能抑制内皮细胞的迁移能力(P<0.01).rapamycin处理组和对照组相比,DAPI染色可见更显著的细胞凋亡形态学改变.100 ng/mL rapamycin作用组与对照组相比,能明显降低细胞成血管能力(P<0.01).结论:rapamycin可以诱导内皮细胞发生凋亡并抑制其增殖、迁移和成血管能力.     

川芎嗪对花生四烯酸诱导血管内皮细胞凋亡的保护作用

目的：研究川芎嗪对花生四烯酸(160μmol／L)诱导的血管内皮细胞损伤和凋亡的保护作用及其机制。方法：MTT法检测细胞存活率，比色法测LDH释放率和细胞MDA含量，Hoechst33258荧光染色观察细胞核形态变化并测定凋亡率，琼脂糖凝胶电泳检测DNA降解。结果：川芎嗪(0．25，1．00mmol／L)能浓度依赖性抑制花生四烯酸引起的细胞存活率下降(t=2．52，3．14，P&;lt;0.05)，并降低细胞LDH释放率和MDA含量(t=3．27，5．88和t=4．64～7．41，P&;lt;0.05)。花生四烯酸处理24h后的细胞呈现典型的凋亡核固缩表现，凝胶电泳显示DNA凋亡梯带。川芎嗪(0.25～1．00mmol／L)能降低其凋亡率。结论：川芎嗪对花生四烯酸引起的内皮细胞损伤和凋亡具有保护作用，其机制可能与其抗脂质过氧化作用有关。     

VEGF反义RNA促骨髓瘤细胞凋亡及抑制内皮细胞形成血管作用的体外研究

本研究探讨血管内皮细胞生长因子（VEGF）反义RNA对人多发性骨髓瘤细胞系U266增殖、凋亡及内皮细胞ECV304体外血管形成的影响和以VEGF反义RNA进行多发性骨髓瘤（MM）基因治疗的可行性。将VEGF121反向克隆入真核表达质粒pIRES2-EGFP构建重组质粒AS-VEGF，酶切、测序鉴定。用此真核表达重组质粒转染人骨髓瘤细胞系U266，G418筛选获得阳性克隆。RT-PCR、Westernblot法分别检测阳性克隆中VEGFmRNA和蛋白的表达；利用MTT法、流式细胞术检测转染细胞增殖、凋亡的变化；利用基质胶中内皮细胞ECV304的网络形成检测血管形成。结果表明：获得了携带反义VEGF基因的真核表达重组质粒AS-VEGF；VEGF121反义RNA部分阻断了U266细胞中VEGF的表达，转染重组质粒的U266细胞VEGFmRNA和蛋白表达都较对照组细胞有明显减少，细胞的增殖受到抑制，凋亡增加。转染重组质粒的细胞培养上清在基质胶中作用ECV304细胞后的血管形成较对照组亦有明显减少。结论：VEGF反义RNA可以下调VEGF表达，从而抑制骨髓瘤细胞系U266增殖，增加其凋亡并抑制血管形成。     

出血性蛇毒诱导血管内皮细胞凋亡的成分及作用机制研究进展

出血性蛇毒能专一性诱导血管内皮细胞(vascular endothelial cells，VEC)凋亡，研究人员已从中分离出5种VEC凋亡诱导成份，其中2种为L—aa氧化酶类，3种属于金属蛋白酶／解整联蛋白家族。研究证实前者可通过氧化VEC细胞膜上的L—leu产生H2O2而诱导其凋亡，后者则通过干扰膜整联蛋白与其配体的结合而使VEC凋亡。在由蛇毒诱导的VEC凋亡过程中，p53和bcl-2基因表达增加，且bcl-2的mRNA被剪辑成2条。已证实锚定依赖性信号分子αvβ3和磷脂信号分子PC-PLC参与该过程的信号转导。对该领域进一步研究，有望从蛇毒中纯化出或人工构建出专一地诱导肿瘤血管细胞凋亡的成分。本文总结了出血性蛇毒方面的研究进展。     

血管内皮细胞生长因子165基因对创伤性脑损伤细胞凋亡的影响

目的 研究外源性血管内皮细胞生长因子(vascular endthelial growth factor,VEGF)基因治疗创伤性脑损伤(traumatic brain injury.TBI)后细胞凋亡的变化,了解外源性VEGF基因对TBI损伤组织的保护作用.方法 创伤性脑损伤大鼠模型建立后经损伤处脑皮质注入腺病毒(adenovirus,Ad)为载体的VEGF-165基因(Ad-VEGF-165),通过RT-PCR和Western blot检测脑伤后6 h,24 h,3 d,7 d,14 d时间点的VEGF-165在损伤局部的表达改变;采用原位凋亡(TUNEL)标记法动态测定Ad-VEGF-165基因治疗TBI后细胞凋亡的改变.结果 外源性Ad-VEGF-165导入损伤局部脑组织后,VEGF mRNA和蛋白质水平均有稳定的表达,并且其表达水平显著高于外伤组和质粒对照组.荧光显微镜下基因治疗组的细胞凋亡在伤后24 h,3 d,7 d与创伤组比较有显著的减少(对照组:4.17±0.73;TBI组,24 h:47.18±6.01,3 d:79.44±11.23;TBI+VEGF组,24 h:28.72±5.31,54.18±7.66;P＜0.05),细胞凋亡与VEGF的关系密切(P＜0.05).结论 大鼠创伤性脑损伤后外源性VEGF基因能够在一定时间对脑损伤组织起到显著保护作用.     

同型半胱氨酸和晚期糖基化终产物影响血管内皮细胞凋亡的协同效应

目的:观察两种尿毒症毒素同型半胱氨酸和晚期糖基化终产物是否协同影响血管内皮细胞的凋亡程度。方法:实验于2006-01/03在中南大学湘雅三医院中心实验室完成。①参考Makita的报道体外制备晚期糖基化终产物,将牛血清白蛋白50g/L、D-葡萄糖0.5mol/L、磷酸盐缓冲盐液0.2mol/L(pH7.4)和蛋白酶抑制剂用0.22μm滤膜过滤除菌,37℃孵育60d。采用荧光分光光度分析法鉴定。晚期糖基化终产物修饰的牛血清白蛋白中晚期糖基化终产物含量为90.52U/mg。②将不同浓度的同型半胱氨酸和晚期糖基化终产物单独或联合作用于人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞,分为空白对照组;同型半胱氨酸干预组(分别加入0.05,0.1,0.5,1.0,5.0mmol/L的同型半胱氨酸);同型半胱氨酸 晚期糖基化终产物联合干预组(分别加入0.05,0.1,0.5,1.0,5.0mmol/L的同型半胱氨酸和终浓度为50mg/L的晚期糖基化终产物)。③采用Hoechst染色和流式细胞技术检测细胞凋亡程度。结果:①Hoechst33258染色检测内皮细胞凋亡结果:同型半胱氨酸 晚期糖基化终产物联合干预组在0.05～5.0mmol/L各个浓度较对照组和单纯同型半胱氨酸组都有明显差别(P<0.01)。②流式细胞仪检测内皮细胞凋亡结果:联合干预组总凋亡率为(15.31±2.14)%,早期凋亡率为(9.16±1.38)%,均显著高于同型半胱氨酸或晚期糖基化终产物单独干预组(P<0.01)。结论:同型半胱氨酸和晚期糖基化终产物对血管内皮细胞的凋亡具有协同诱导作用。     

α-硫辛酸对兔血管内皮细胞的保护作用

目的:研究α-硫辛酸(alpha-lipoie acid,α-LA)对高脂血症新西兰兔血管内皮细胞氧化损伤的保护作用.方法:24只新西兰大白兔根据不同喂养方案分为正常组、造模组、硫辛酸组,然后分别检测各组兔的甘油三酯(triglyceride,TC)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、一氧化氮(nitric oxide,NO)水平.结果:24只兔全部进入结果分析.造模组的血清TC、TG、LDL-C水平均显著高于正常组(P<0.01),HDL-C显著低于正常组(P<0.01).硫辛酸组的血清TC、TG、LDL-C水平均显著低于造模组(P<0.01),HDL-C无明显变化(P>0.05).造模组的SOD和NO含量显著低于正常组(P<0.01),而MDA含量显著高于正常组(P<0.01).硫辛酸组的SOD和NO含量高于造模组(P<0.01),而MDA含量显著低于造模组(P<0.01).结论:α-LA具有预防动脉粥样硬化的作用,其机制可能与清除超氧阴离子,降低氧化应激对血管内皮细胞的氧化损伤有关.     

黄芪总黄酮对尿毒症患者血清诱导的内皮细胞凋亡的影响

目的探讨黄芪总黄酮(TFA)对尿毒症患者血清诱导的内皮细胞凋亡的影响。方法收集22例健康志愿者和25例规律血液透析的尿毒症患者血清。以人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)为研究对象,设立对照组(细胞同步化后加入健康志愿者血清)和尿毒症组(细胞同步化后加入尿毒症患者血清)。细胞同步化前6h,在尿毒症组的一部分细胞中加入0.5、1.0、2.0mg/mL TFA预先进行干预,分别得到低剂量组、中剂量组、高剂量组细胞。细胞培养24h后,于显微镜下观察细胞形态;MTT法检测细胞增殖活力;黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性;硝酸还原酶比色法测定一氧化氮(NO)水平;彗星实验法检测细胞DNA损伤;TUNEL法检测细胞凋亡。结果与对照组比较,尿毒症组细胞增殖活力、SOD活性、NO水平均降低(P<0.01),DNA拖尾率、细胞凋亡指数(AI)均升高(P<0.01);与尿毒症组细胞比较,不同剂量干预的各组细胞增殖活力均增加(P<0.05),NO水平均升高(P<0.01);与尿毒症组比较,中剂量、高剂量组SOD活性增加(P<0.05),DNA损伤拖尾率降低(P<0.05)。结论 TFA可减少尿毒症患者血清诱导的内皮细胞凋亡,其可能机制与抗氧化应激有关。     

胰岛素对烧伤血清诱导血管内皮细胞凋亡的影响及机制

目的 探讨胰岛素对烧伤血清诱导血管内皮细胞凋亡的影响及相关机制.方法 体外常规培养内皮细胞系ECV304,随机分为正常对照组(n=6),体积分数15%(V/V)正常大鼠血清培养;烧伤血清刺激组(n=6),体积分数15%(V/V)自制烧伤大鼠血清培养,血清采自背部30%TBsAIII 烫伤大鼠模型;胰岛素处理组(n=6),体积分数15%(V/V)自制烧伤大鼠血清中加入10-7M/L胰岛素培养;刺激6 h后采用原位末端标记法(TUNEL)观察内皮细胞凋亡、免疫组织化学染色和蛋白印迹法枪测抗凋亡蛋白bcl-2及eNOS的蛋白表达变化,数据以表示,均数比较采用单凶素方差分析,以P<0.05为差异具有统计学意义.结果 与正常对照组比较,烧伤血清促进内皮细胞捌亡(18.5%±3.1%),免疫组化染色bcl-2平均吸光度低(0.14±0.02),蛋白印迹实验显示bel-2(0.36 4±0.12)和p-eNOS(0.55±0.28)表达降低(P<0.01).相对十烧伤血清刺激组,胰岛素处理组细胞凋亡显著减少(9.6 4±2.8%),免疫组化染色bcl-2平均吸光度升高(0.21±0.03),蛋白印迹实验显示bcl.2(0.94 4-0.25)和p-eNOS(0.89±0.16)表达明显恢复(P<0.01).eNOS在各组中无明显变化.结论 胰岛素明显抑制烧伤血清诱导下的内皮细胞凋亡并增加扰凋亡蛋白bcl-2的表达,此作用町能与eNOS的磷酸化有关.     

川芎嗪对花生四烯酸诱导血管内皮细胞凋亡的保护作用

目的:研究川芎嗪对花生四烯酸(160μmol/L)诱导的血管内皮细胞损伤和凋亡的保护作用及其机制。方法:MTT法检测细胞存活率,比色法测LDH释放率和细胞MDA含量Hoechst33258荧光染色观察细胞核形态变化并测定凋亡率,琼脂糖凝胶电泳检测DNA降解。结果:川芎嗪(0.25～1.00mmol/L)能浓度依赖性抑制花生四烯酸引起的细胞存活率下降(t=2.52～3.14,P<0.05),并降低细胞LDH释放率和MDA含量(t=3.27～5.88和t=4.64～7.41,P<0.05)。花生四烯酸处理24h后的细胞呈现典型的凋亡核固缩表现,凝胶电泳显示DNA凋亡梯带。川芎嗪(0.25～1.00mmol/L)能降低其凋亡率。结论:川芎嗪对花生四烯酸引起的内皮细胞损伤和凋亡具有保护作用其机制可能与其抗脂质过氧化作用有关。     

真核表达载体血管内皮生长因子转染血管内皮细胞及对新生血管形成的影响

背景:血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)能与存在内皮细胞表面的特异性受体结合,刺激体内新生血管形成,但在体内半衰期极短,在移植局部难以维持足够的浓度,限制了其临床应用.目的:观察VEGF与增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent,EGFP)共表达载体转染对大鼠血管内皮细胞形成新生血管的影响.设计、时间及地点:随机分组设计、对照动物实验,于2004-09/2005-01在中国医科大学附属第一医院器官移植实验室完成.材料:30只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为3组,每组10只.质粒pIRES2-EGFP/VEGF165由第四军医大学提供.方法:采用层析法大量提取pIRES2-EGFPNEGF165质粒,采用阳性脂质体法进行转染,计数1×106血管内皮细胞植入雄性Wiser大鼠肾被膜下.实验组:植入转染质粒pIRES2-EGFP/VEGF165的内皮细胞:空白转染组:植入转染质粒pIRES2-EGFP的内皮细胞:对照组:植入正常大鼠血管内皮细胞.主要观察指标:①转染72 h后观察EGFP及VEGF表达情况.②流式细胞仪检测转染效率.③植入后14 d苏木精-伊红染色观察植入血管内皮细胞处组织形态学变化.结果:30只大鼠均进入结果分析.①荧光显微镜下实验组内皮细胞有特异性的EGFP表达.②流式细胞仪分析转染效率为13.06%.③实验组血管内皮细胞胞核和胞浆中均有VEGF表达.反转录-聚合酶链反应显示实验组大鼠血管内皮细胞中有人源化VEGF165基因在mRNA水平表达.④移植后14 d.实验组大鼠肾被膜下可见成团的新生毛细血管网形成,而对照组及空白转染组虽血管内皮细胞仍存活,但未形成明显血窦.结论:转染VEGF基因是促进内皮细胞早期(14d内)形成新生血管的有效途径.     

血管平滑肌细胞凋亡与阿托伐他汀的干预效应

目的:观察阿托伐他汀对血管平滑肌细胞凋亡的影响,并探讨凋亡抑制因子Survivin蛋白表达的意义。方法:实验于2004-04/2005-03在医学遗传学国家重点实验室中南大学湘雅二医院中心实验室完成。①取培养五六代的5只1月龄健康雄性大鼠主动脉中层平滑肌细胞,进行干预前于六孔培养板中放置无菌盖玻片,细胞长满盖玻片的90%时开始干预,分为4组进行干预:正常对照组:培养的平滑肌细胞未用阿托伐他汀干预;阿托伐他汀0.1μmol/L组:用浓度为0.1μmol/L的阿托伐他汀干预培养的平滑肌细胞;阿托伐他汀1.0μmol/L组:用浓度为1.0μmol/L的阿托伐他汀干预培养的平滑肌细胞;阿托伐他汀10.0μmol/L组:用浓度为10.0μmol/L的阿托伐他汀干预培养的平滑肌细胞。②分别于干预后6,12,24,48,72h采用Hoechst33258荧光染色观察血管平滑肌细胞凋亡情况;用免疫组化法检测血管平滑肌细胞凋亡抑制因子Survivin蛋白表达情况。③组间差异比较采用t检验。结果:①荧光染色检测血管平滑肌细胞凋亡结果显示,阿托伐他汀干预培养的大鼠血管平平滑肌细胞后,随干预时间延长和用药浓度增加,平滑肌细胞凋亡增加。阿托伐他汀干预72h后,血管平滑肌细胞凋亡率:阿托伐他汀0.1,1.0,10.0μmol/L组明显高于正常对照组(11.1%,27.2%,50.5%,3.8%,P<0.01),各组间两两比较差异明显(P<0.01)。②培养的血管平滑肌细胞Survivin因子表达情况:阿托伐他汀干预24h,血管平滑肌细胞凋亡抑制因子Survivin蛋白表达下降,干预48h～72h,血管平滑肌细胞Survivin因子未见表达。结论:①阿托伐他汀可诱导血管平滑肌细胞凋亡,其凋亡率呈时间和剂量依赖性。②阿托伐他汀致血管平滑肌细胞凋亡的作用可能与其下调凋亡抑制因子Survivin蛋白的表达有关。     

血管平滑肌细胞凋亡与阿托伐他汀的干预效应

目的：观察阿托伐他汀对血管平滑肌细胞凋亡的影响,并探讨凋亡抑制因子Survivin蛋白表达的意义.方法：实验于2004-04/2005-03在医学遗传学国家重点实验室中南大学湘雅二医院中心实验室完成.①取培养五六代的5只1月龄健康雄性大鼠主动脉中层平滑肌细胞,进行干预前于六孔培养板中放置无菌盖玻片,细胞长满盖玻片的90%时开始干预,分为4组进行干预：正常对照组：培养的平滑肌细胞未用阿托伐他汀干预;阿托伐他汀0.1μmol/L组：用浓度为0.1μmol/L的阿托伐他汀干预培养的平滑肌细胞;阿托伐他汀1.0μmol/L组：用浓度为1.0 μmol/L的阿托伐他汀干预培养的平滑肌细胞;阿托伐他汀10.0 μmol/L组：用浓度为10.0μmol/L的阿托伐他汀干预培养的平滑肌细胞.②分别于干预后6,12,24,48,72 h采用Hoechst 33258荧光染色观察血管平滑肌细胞凋亡情况：用免疫组化法检测血管平滑肌细胞凋亡抑制因子Survivin蛋白表达情况.③组间差异比较采用t检验.结果：①荧光染色检测血管平滑肌细胞凋亡结果显示,阿托伐他汀干预培养的大鼠血管平平滑肌细胞后,随干预时间延长和用药浓度增加,平滑肌细胞凋亡增加.阿托伐他汀干预72 h后,血管平滑肌细胞凋亡率：阿托伐他汀0.1,1.0,10.0 μmol/L组明显高于正常对照组（11.1%,27.2%,50.5%,3.8%,P＜0.01）,各组间两两比较差异明显（P＜0.01）.②培养的血管平滑肌细胞Survivin因子表达情况：阿托伐他汀干预24 h,血管平滑肌细胞凋亡抑制因子Survivin蛋白表达下降,干预48 h～72 h,血管平滑肌细胞Survivin因子未见表达.结论：①阿托伐他汀可诱导血管平滑肌细胞凋亡,其凋亡率呈时间和剂量依赖性.②阿托伐他汀致血管平滑肌细胞凋亡的作用可能与其下调凋亡抑制因子Survivin蛋白的表达有关.     

传统及改良纱布包裹冻存法对人血管内皮细胞保护的比较

背景：传统的细胞冻存多采用4,-20℃放置的阶梯式降温方法,程序复杂且浪费时间。目的：比较传统法与改良冻存法对血管内皮细胞的保护效果。方法：将常规培养的人血管内皮细胞用胰酶消化后,用配置好的冻存液（10%二甲基亚砜、体积分数60%胎牛血清、30%DMEM无血清培养基）调整浓度,将细胞悬液吸入冻存管,分组干预：实验组以纱布包裹,并直接投入-80℃冰箱;对照组按常规冻存法,4℃冰箱和-20℃冰箱分别预冷30min和1h后放入-80℃冰箱。1个月后快速复苏冻存细胞。结果与结论：复苏后实验组细胞存活率及生长曲线与对照组比较差异无显著性意义;复苏后实验组细胞贴壁率、形态学变化及增殖能力明显优于对照组。说明改良的纱布包裹法优于传统的细胞冻存法,且更加方便快捷。