肟类药物对塔崩等神经性毒剂抑制的大鼠脑AChE的体外重活化作用

系统地研究了肟类药物对塔崩抑制的大鼠脑AChE的体外重活化作用,并与梭曼、沙林和VX进行了比较。结果表明,沙林和VX抑制的AChE较易被药物重活化,而塔崩和梭曼抑制的AChE则较难。37℃、pH7.2条件下,塔崩抑制的大鼠脑AChE可浓度依赖性地被TMB_r和LuH_6重活化,2-PAM在高浓度下也有一定作用,但HI-6在所用3个浓度下均无重活化。通过降低抑制温度成功地建立了未老化的梭曼膦酰化AChE模型。药物试验表明,未老化的梭曼膦酰化大鼠脑AChE可被高浓度(1mmol/L)HI-6重活化,而不被2-PAM、TMB_4及LuH_6重活化。提示药物自身内在活性在重活化作用中的重要性。TMB_4和LuH_6对塔崩磷酸化AChE有较强重活化,而对未老化梭曼膦酸化AChE无重活化,HI-6则相反,对未老化梭曼膦酰化AChE重活化效果好,而对塔崩磷酰化AChE无重活化作用。塔崩和梭曼膦酰化AChE在未老化以前对药物的响应就有所不同,毒剂残基的空间效应可能起重要作用。     

肟类胆碱酯酶重活化剂进入脑的探讨

肟类胆碱酯酶重活化剂目前常用的有氯磷定(PAM)、双磷定(TMB_4)和双复磷(L(?)H-6)。它们是季铵化合物,水溶性大,脂溶性小,其穿透血脑屏障的能力,及在中枢神经系统重活化被有机磷酸酯抑制的胆碱酯酶的作用一直有争论,至今仍是一个比较活跃的研究课题。1976年BodorN.等合成了氯磷定的前体(Prodrug)Pro-2-PAM·Cl(二氢氯磷     

肟类重活化剂对抗氧化乐果抑制离体大鼠膈肌的研究

在离体大鼠膈神经－膈肌标本（膈ＮＭＰ）上观察了和的肟类重活化剂氯磷定碘磷定、双复磷和ＨＩ－６对抗氧化氯对标本的抑制作用，发现４种药物在对抗氧化乐果抑制离体大鼠膈ＮＭＰ的作用中均有对中毒酶的重活化作用，其强弱排序为：双复磷〉氯磷定、碘磷定〉ＨＩ－６。ＨＩ－６具有较强的直接生理对抗作用。     

胆碱酯酶持续抑制下乙酰胆碱含量及拟胆碱能药物敏感性的变化

梭曼中毒难以防治的关键问题是胆碱酯酶(ACHE)磷酰化后很快老化,不易重活化。迄今为止尚未找到有效的重活化剂。值得注意的是,梭曼抑制 AChE 的程度与中毒症状的轻重有时并不呈现平行关系。如:中毒大鼠的症状有轻有重而 AChE 的抑制程度相似,或者症状业已消失但 AChE 仍被持续抑制。在人,梭曼急性中毒经阿托品及氯磷啶治疗后第三天即可起床活动而10天后红血球 AChE 仍抑制88%。众所周知,中毒后     

不同复方药剂对沙林染毒兔的救治研究

目的探讨不同抗胆碱能化合物联合氯解磷定对沙林染毒兔的救治效果,为药物联合应用的合理救治方案提供依据。方法通过测定几种抗胆碱能化合物与氯解磷定单独或者联合应用对沙林染毒兔的防护比率,并结合动物救治过程中体内乙酰胆碱酯酶（AChE）和丁酰胆碱酯酶（BChE）活性恢复情况,确定疗效较好的可与氯解磷定联合应用的抗胆碱能化合物。结果阿托品、盐酸戊乙奎醚、氯解磷定单独应用时对中毒兔的防护比率均小于1.20;不同种类抗胆碱能药物与氯解磷定联合应用时,3种盐酸戊乙奎醚联合其他药物的防护比率均较2种阿托品联合其他药物的防护比率高,前者对动物的防护比率为3.68～3.80,后者对动物的防护比率为2.30～2.56。采用盐酸戊乙奎醚和贝那替秦与氯解磷定联合应用对沙林重度染毒兔的疗效为77.8%。结论采用盐酸戊乙奎醚和贝那替秦与氯解磷定联合应用对沙林染毒兔有较好的救治效果。     

梭曼抗毒剂HGG类化合物定量构效关系的研究

梭曼膦酰化胆碱酯酶很易脱烷基,发生老化,一般肟类重活化剂较难使之重活化。近年来,合成了大量肟基取代的不对称双吡啶季铵盐,其中一些化合物对抗梭曼中毒有效。至于构效关系方面的分析,一般只涉及定性讨论。在一系列肟类双吡啶季铵盐研究中发现,对抗VX、沙林及梭曼中毒,肟基取代在吡啶环2-位上要比取代在4-位的化合物有较高的抗毒效价。为此,文献报道的双吡啶季铵盐大都属于2肟取代的化合物。对于第2个吡啶环上取代基位置,Moksimovic等指出3-取代的化合物比4-位异构体     

HI-6对人与哺乳动物终板梭曼抑制的乙酰胆碱酯酶重活化作用的比较

HI-6是迄今双吡啶肟类中抗梭曼效果较好的药物,它主要的作用是使梭曼抑制的乙酰胆碱酯酶(ACHE)早期重活化。但是Wolthuis等研究HI-6对大鼠、豚鼠、狗及人离体肋间肌梭曼中毒肌接头传递功能的恢复作用中,提出:HI-6对上述三种动物肌肉的梭曼中毒都有对抗作用,而对人的肌肉仅能对抗沙林而不能对抗梭曼;经Smith等的分析,认为HI-6不能重活化人体肌肉中梭曼抑制的AChE,仅见到肌接头传递功能的适应性恢复。本研究的目的是比较不同种属哺乳动物呼吸肌终板的梭曼中毒酶被HI-6重活化作用的差别,试图说明HI-6对人体组织中梭曼抑制的AChE重活化作用的特点。     

不同母核结构重活化剂的重活化作用机理研究

不同母核结构重活化剂的重活化作用机理研究罗春元，孙曼霁，杨进生（军事医学科学院毒物药物研究所）本文通过人红细胞ＡＣｈＥ实验，对Ｈ系双吡啶肟类，苄基单吡啶肟类及ＰＡＭ类三种不同母核结构的重活化剂的２位和４位脂异构体对梭曼，塔崩，沙林和ＶＸ四种毒剂抑制的...     

有机磷化合物体外全血胆碱酯酶检测方法学研究

目的建立一种在体外快速测定乙酰胆碱酯酶（AChE）活性的方法,为有机磷毒剂中毒的诊断及救治提供依据。方法用改良的5,5-连硫代-双-2-硝基苯甲酸（DTNB）法测定AChE活性,以兔全血作为酶源进行方法学研究,并用不同种属动物全血进行了适用性考察,用SPECTRA MAX 190读板机测定412 nm处光密度的变化即可测定AChE活性。结果不同动物全血40倍稀释后作为酶源较为合适,批内差异为0.44%～0.67%,批间差异为1.03%～2.27%,该方法适用于兔、比格犬、豚鼠和猴全血AChE测定。梭曼和沙林对兔全血AChE活性抑制具有明显的量效关系。结论该方法简便、易行,适用于不同种属动物全血AChE活性的测定。     

HI-6与几种肟类药水解反应平衡的探讨

本文报道有机磷毒剂中毒酶重活化剂HI-6和氯磷定、双复磷在pH2～8缓冲水溶液中水解反应平衡的探讨结果。它表明在pH3.0以下的水溶液中,氯磷定和双复磷加热水解到一定程度后各自与其水解产物之间形成可逆平衡。在pH4.0以上的溶液中水解平衡不再存在,继续水解。而HI-6药,在pH2～8缓冲液中,水解随着加热时间的延长一直在继续进行,并未观察到HI-6与水解产物之间有可逆平衡存在。故认为氯磷定和双复磷水溶液比HI-6水溶液稳定。另外,观察到HI-6初始浓度对该药的水解速度和水解平衡没有影响。     

Development of forensic diagnosis of acute sarin poisoning

On March 20, 1995, the Tokyo subway system was subjected to a horrifying terrorist attack with sarin gas (isopropyl methylphosphonofluoridate) that left 12 persons dead and over 5000 injured. In order to diagnose the definite cause of death of the victims, a new method was developed to detect sarin hydrolysis products in the erythrocytes and formalin-fixed cerebella from four victims of sarin poisoning. Sarin-bound acetylcholinesterase (AChE) was solubilized from the specimens of sarin victims and digested with trypsin. The sarin hydrolysis products bound to AChE were released by alkaline phosphatase digestion. The digested sarin hydrolysis products were subjected to trimethylsilyl derivatization and detected by gas chromatography-mass spectrometry. Sarin hydrolysis products were detected in all sarin poisoning victims.     

热应激复合敌敌畏中毒对小鼠全血乙酰胆碱脂酶和组织抗氧化能力的影响

目的研究热应激复合有机磷敌敌畏（O,O-dimethyl-O-2,2-dichlorovinylphosphate,DDVP）中毒对小鼠全血乙酰胆碱酯酶活性及组织脂质过氧化的影响。方法将54只小鼠随机分为对照组、热应激组和热应激复合DDVP中毒组。实验舱相对湿度控制在（60±5）%,对照组小鼠置于24℃环境下1 h,热应激组小鼠置于38或40℃的热环境下1 h。有机磷中毒组小鼠经腹腔注射给予9或15 mg/kg DDVP,对照组给予等量生理盐水。30 min后,取全血测量乙酰胆碱酯酶（AChE）活性,取心、脑和肝组织匀浆,测量其超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量和羟自由基（.OH）抑制能力。实验期间观察小鼠一般情况,记录实验前后小鼠体质量。结果热环境（38或40℃）暴露使小鼠烦躁不安,活动量明显增加,摄水量降低,体质量减轻。与不同环境温度暴露的对照组相比,热应激复合DDVP中毒组小鼠全血AChE活性和心、脑和肝组织SOD活性和羟自由基抑制能力均明显下降（P〈0.05）,而MDA含量明显升高（P〈0.05）。热应激和DDVP中毒对上述指标的影响有交互作用。结论在本实验条件下,热应激和DDVP中毒对小鼠乙酰胆碱酯酶有显著的抑制作用,同时可引起组织脂质过氧化增强,提示氧化应激机制与高热复合DDVP中毒的加重效应有关。     

宾赛克嗪对胆碱酯酶抑制剂中毒所致呼吸衰竭和循环衰竭时混合型酸中毒的影响

目的研究胆碱酯酶抑制剂（ChEI）梭曼中毒导致犬发生进行性循环衰竭时酸中毒生化参数指标的变化及新型抗毒剂宾赛克嗪的干预作用。方法 14只杂种犬,雄性,体质量12～15 kg。随机分为循环衰竭组和呼吸衰竭组,每组7只。动物称重、麻醉后,进行气管插管,给予人工正压呼吸。将导管置入左心室、股动脉及股静脉,通过八导电生理记录仪,连续记录心功能及动脉压变化。开始梭曼累积染毒,方法为每次肌肉注射1/3 LD梭曼（1 LD=10μg/kg）,每10 min追加1次。呼吸衰竭组以氧分压（PaO2）〈60 mmHg,二氧化碳分压（PaCO2）〉50mmHg、氧饱和度（SO2）〈90%为标准,在犬达呼吸衰竭标准后,立刻用宾赛克嗪0.1 mg/kg肌肉注射进行抢救。循环衰竭组以平均动脉血压降至45 mmHg为标准,在循环衰竭维持约6 h后使用宾赛克嗪0.1 mg/kg静脉注射进行抢救。检测两组梭曼染毒前、后及抢救后动脉血指标变化。以梭曼染毒前各指标为对照组,染毒后实验结果用SAS 6.12软件进行自身对照t检验分析。结果犬染毒1 h发生呼吸衰竭时,机体pH值由染毒前的7.290±0.040降低到7.150±0.050水平,PaCO2、PO2由染毒前的（42.6±3.6）和（92.0±6.4）mmHg改变为（56.1±6.5）和（38.4±9.3）mmHg,发生显著性差异（P〈0.01）,使用宾赛克嗪抢救6 h后,与呼吸衰竭酸中毒时相比pH值升高至7.290±0.110,恢复到染毒前水平,反映酸碱失衡的指标在2 h内均发生显著性改变（P〈0.05）。犬染毒2 h发生循环衰竭时,pH值由染毒前的7.345±0.064降低到6.956±0.022,且呈显著性下降（P〈0.01）,使用宾赛克嗪救治后,平均动脉血压、pH值分别升高到76 mmHg、7.185±0.029水平（P〈0.01,n=3～7）,反映酸碱失衡的指标部分有显著性差异。结论 ChEI梭曼中毒诱发犬发生呼吸与循环衰竭时产生酸中毒,使用宾赛克嗪药物抢救后,在酸中毒的早期可得到明显改善作用,后期则能够有效地控制恶化的程度。     

慢性肾功能不全血磷、PTH与桡动脉硬化的相关性

目的 探讨血磷、甲状旁腺素(PTH)与慢性肾功能不全(CRI)4～5期患者桡动脉硬化的关系.方法 CRI 4～5期患者62例,根据血磷水平分为两组,50例血磷水平≥1.48 mmol/L为A组50例,12例血磷水平＜1.48 mmol/L为B组;根据PTH水平分为C、D组,39例PTH≥88 pg/ml为C组,23例PTH＜88 pg/ml为D组.分析比较各组透析术前年龄、病程、血磷、血钙、PTH、甘油三脂(TG)、胆固醇(CHO)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、血肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、体重指数(BMI)、血压(BP)及术后桡动脉病变评分(RAAG),分析血磷、PTH等与患者桡动脉硬化的相关性.结果 4组间TG、CHO、LDL、HDL、Cr、BUN、BMI、BP水平差异无统计学意义(P＞0.05);A、B组间和C、D组间比较,血磷、PTH、病程、钙磷乘积、动脉硬化评分有统计学差异(P＜0.05或P＜0.01);多元回归分析显示,高PTH、高血磷与RAAG有显著相关性(r=0.781,0.214,P＜0.01),血磷与PTH无明显相关性(P＞0.05).结论 CRI 4～5期患者桡动脉硬化与高PTH、高血磷水平密切相关,控制血PTH、血磷水平可降低CRI患者桡动脉硬化的风险.     

GF和沙林的家兔整体透皮吸收

目的：比较ＧＦ和沙林的家兔整体透皮吸收特点。方法：ＧＦ和沙林在家兔皮肤染毒后,于不同时间采血测定全血乙酯胆碱酯酶活力,用Ｌｏｇｉｔ方法算出抑制５０％ＡＣｈＥ活力所需时间。将１ｍｇ／Ｌ浓度的毒剂,以０．５ｍｌ／ｍｉｎ的输液速度静脉途径中毒,不同时间采血测定ＡＣｈＥ活力,同法算出抑制５０％ＡＣｈＥ时进入体内的毒剂量。由此推算出毒剂的透皮速率。结果：ＧＦ和沙林在皮肤的延搁期均在１ｍｉｎ以内。ＧＦ的透皮速     

西宁市1541例门诊患者空腹血糖和糖化血红蛋白状况及相关性分析

目的：探讨西宁市部分门诊患者就诊时血糖状况,分析其空腹血糖（FPG）和糖化血红蛋白（GHb A1c）间相关性。方法：选取我院2013年1月1—2013年6月30日同时化验FPG和GHb A1c的门诊患者1 541例,按就诊疾病及人群不同进行分类统计FPG和GHb A1c值,并检测两者的相关性。结果：患者FPG均值（8.7±4.5）mmol/L,≥7.0mmol/L占51.5%（794/1 541）;GHb A1c均值（7.4±3.4）%,≥6.5%占45.6%（702/1 541）。糖尿病（DM）患者FPG和GHb A1c均值分别为（10.9±4.7）mmol/L、（9.2±3.4）%,非DM患者（6.2±2.5）mmol/L、（5.5±2.0）%,差异均有统计学意义（P〈0.01）。DM患者FPG≥7.0mmol/L和GHb A1c≥6.5%分别为79.3%（635/801）和70.3%（563/801）,非DM患者为21.2%（159/740）和18.8%（139/740）,差异均有统计学意义（P〈0.01）。FPG对GHb A1c总体相关系数（r）=0.64（P〈0.01）,DM患者r=0.49（P〈0.01）,非DM患者r=0.53（P〈0.01）,体检人员r=0.83（P〈0.01）。结论：西宁市部分就诊人员血糖状况堪忧,以DM患者为甚;FPG和GHb A1c相关性在器质性疾病患者中不明显,而与体检人员中相关性较好。     

No promising antidote 25 years after the Tokyo subway sarin attack: A review

On the battlefields of Syria, many innocent civilians have been killed or injured by sarin poisoning. In Malaysia in February 2017, a North Korean man was assassinated with VX at Kuala Lumpur International Airport. In the face of such threats, a more effective antidote against organophosphonate acetylcholinesterase (AChE) inhibitors is needed, one that can freely penetrate into the central nervous system (CNS) through the blood–brain barrier (BBB). In the 1995 Tokyo subway sarin attack, which produced more than 6,000 victims, 2-pyridinealdoxime methiodide was the most commonly used antidote in hospitals, but it was unable to prevent CNS damage and no other oximes have been approved for use in Japan. Ultimately, 12 people died, and many victims had severe neurological injuries or sequelae. Although more than 25 years have passed since the incident, progress has been slow in the development of a new antidote that can penetrate the BBB, restore AChE activity in the CNS, and definitely prevent brain injury. From the perspectives of countering terrorism and protecting innocent people from nerve agent attacks, the search for nerve agent antidotes should be accelerated with the goals of improving both survival and quality of life. This review gives an overview of a series of our studies on the development of a new antidote since the Tokyo subway sarin attack and emphasizes that there is unfortunately still no promising antidote for saving the CNS in Japan.