骨质疏松性骨损伤愈合过程中细胞生长因子的动态表达

目的:从分子水平上探讨细胞生长因子转化生长因子-β1(TGF-β1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在骨质疏松大鼠骨损伤愈合过程中的表达水平及其相互作用.方法:3月龄雌性大鼠64只,以去卵巢方法建立骨质疏松大鼠模型,分为骨质疏松组(OVX组)32只和假手术组(SX组)32只.运用实时荧光定量PCR检测TGF-β1、bFGF在OVX和SX组大鼠骨组织中的表达水平.结果:(1)OVX组和SX组组内骨损伤后不同时间点TGF-β1、bFGF表达水平的差别具有统计学意义(P<0.01).5d开始逐渐升高,15 d时达到高峰,30d时同落到低水平.(2)OVX组TGF-β1、bFGF mRNA的表达水平均低于同时期SX组的水平.结论:TGF-β1、bFGF在骨损伤后存在约4周的周期性表达,并且于骨质疏松性骨损伤处表达减少,这是其愈合质量下降的重要因素.TGF-β1、bFGF的表达趋势类似,提示它们之间可能存在某种协同作用.     

大鼠颈总动脉球囊损伤后凋亡相关基因p53、bcl-2表达的研究

目的探讨大鼠颈总动脉球囊损伤后凋亡相关基因p53、bcl-2表达的变化规律。方法将40只SD雄性大鼠随机分为2组,对照组8只;实验组32只,每个时间点8只（2、7、14、28天）,制备大鼠颈总动脉球囊导管扩张损伤模型,采用RT—PCR方法检测损伤后不同时间点动脉壁凋亡相关基因p53、bcl-2的表达丰度。结果对照组p53和bcl-2基因均表达;实验组P53在损伤后第2天表达量明显减少,而后渐增至14天达高峰,在28天时表达量有所下降,但仍较对照组为高;而BCL-2在损伤后表达量逐渐减少,在14天时最低,28天时有所回升。结论在动脉球囊损伤后p53和bcl-2基因的表达符合细胞增殖凋亡规律,可作为动脉内膜损伤后血管平滑肌细胞凋亡研究的一个指标。     

川芎嗪对膝骨性关节炎大鼠软骨下骨中miR-20b/VEGF和BMP2/Smad1通路的影响

目的:研究川芎嗪对膝骨性关节炎(KOA)模型大鼠软骨下骨中微小核糖核酸miR-20b/血管内皮生长因子(VEGF)和骨形态发生蛋白2(BMP2)/Smad1通路的影响,并探讨川芎嗪防治KOA的作用机制。方法:取健康雄性SD大鼠18只,随机分为正常对照组、模型组、川芎嗪组,每组6只。对后两组大鼠通过膝关节腔注射4%木瓜蛋白酶溶液建立KOA模型。末次注射后第2天起,川芎嗪组大鼠灌胃川芎嗪混悬液(100 mg/kg)2 m L,正常对照组、模型组大鼠灌胃等体积生理盐水,每天1次,连续6周。给药结束后,暴露大鼠双侧膝关节软骨进行大体情况观察。截取大鼠膝关节,进行切片和苏木精-伊红(HE)染色,在显微镜下观察组织病理学变化,并采用改良的Mankin’s评分进行组织学评分。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测大鼠软骨下骨组织中VEGF、BMP2、Smad1的mRNA表达和miR-20b表达水平;采用Western Blot法检测VEGF、BMP2、Smad1的蛋白表达水平。结果:模型组和川芎嗪组大鼠的膝关节均出现不同程度的软骨损伤;与正常对照组比较,模型组大鼠膝关节软骨组织Mankin’s评分显著升高(P<0.01);软骨下骨组织中BMP、Smad1的m RNA和蛋白表达以及miR-20b表达水平均显著降低,VEGF的mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,川芎嗪组大鼠关节软骨组织Mankin’s评分显著降低(P<0.01);软骨下骨组织中BMP、Smad1的mRNA和蛋白表达以及miR-20b表达水平均显著升高,VEGF的mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:川芎嗪能修复KOA模型大鼠损伤的关节软骨,其机制可能是通过上调软骨下骨中miR-20b表达水平,促进VEGF mRNA降解继而抑制VEGF蛋白的表达,同时激活BMP-2/Smad1信号通路而实现的。     

IL-28B在实验性肺纤维化小鼠肺组织内的动态表达

目的:探讨白介素28B(IL-28B)在肺纤维化发病中的表达及意义.方法:健康昆明种小鼠48只,随机分成实验组和对照组,每组24只.实验组:气管内一次性注人生理盐水稀释的博来霉素(5 mg/kg);对照组:气管内注人生理盐水0.06～0.07mL.分别于给药后第7、14、21、28天,每组各处死小鼠6只.无菌操作下取出小鼠肺组织,病理学方法观察各阶段肺内炎症及纤维化程度;检测肺组织内羟脯氨酸的含量,Western blot检测肺内IL-28B的蛋白表达.结果:实验组肺组织病理切片按时间顺序呈现由肺泡炎至纤维化动态改变,实验组肺泡炎和纤维化程度均高于对照组(均P<0.01).实验组肺组织内羟脯氨酸在第14～28天明显高于对照组(P<0.01).实验组第7、14、21天的IL-28B的蛋白表达也高于对照组(P<0.05或P<0.01);IL-28B表达高峰在第14天,此后逐渐下降,第28天时表达水平与对照组差异无统计学意义(P>0.05).结论:IL-28B在致肺纤维化损伤中发挥重要作用,检测IL-28B的水平对肺纤维化的早期诊断有帮助.     

雌激素影响急性大鼠脊髓损伤后细胞凋亡的相关性实验研究

目的 在建立大鼠脊髓损伤模型基础上,观察不同时间点雌激素对脊髓胶质细胞,神经元凋亡的影响,以期为临床急性脊髓损伤的治疗提供理论依据.方法 健康成年大鼠72只,随机分为两组,其中单纯损伤组(单纯打击损伤)36只,雌激素组(手术加雌激素)36只.脊髓损伤动物模型的制备:用自制Allen打击器25gcm致伤力撞击脊髓,制成脊髓损伤动物模型.雌激素组每日肌注雌激素(100μg/kg)直至处死,单纯损伤组仍每日肌注生理盐水0.5ml直至处死.组织切片的制备:脊髓损伤后1d、3d、5d、8d、14d、21d共6个时间段分批处死动物.4%多聚甲醛心肌灌注固定24h,切取每只大鼠T5～T13节段脊髓组织,常规制成切片,给于Bcl-2检测,TUNEL原位末端标记.检测大鼠脊髓损伤后细胞凋亡的情况.脊髓损伤后2周给予Gale评分及斜板维持试验.结果 Bcl-2蛋白检测:在脊髓损伤后的第1天,脊髓组织即开始较高表达Bcl-2蛋白.单纯损伤组Bcl-2高峰发生在损伤后3天,而雌激素组伤后8天达到高峰,此时Bcl-2蛋白不仅表达在神经细胞中,更多的在胶质细胞中大量表达,且此状态一直维持到伤后14天才开始下降,伤后21天仅少量表达(P＜0.05).TUNEL原位标记检测:单纯损伤组24小时已出现不少阳性细胞,以胶质细胞为主,3～8天达到高峰,此后逐渐回落,但21天时仍有阳性细胞,应用雌激素治疗后,凋亡细胞明显减少(P＜0.05).脊髓损伤后2周Gale评分及斜板维持率雌激素组优于单纯损伤组(P＜0.01).结论 雌激素在脊髓损伤中通过改善微循环,促进Bcl-2蛋白的表达,清除氧自由基,抗氧化作用能够抑制脊髓损伤早期神经细胞和胶质细胞的凋亡,从而减轻脊髓继发性损伤,促进脊髓神经功能的恢复.所以脊髓损伤后早期应用雌激素配合其它药物阻止神经细胞和胶质细胞的凋亡可能有助于减轻脊髓损伤的损害程度,促进脊髓神经功能的恢复,为SCI的治疗提供一个新的途径.     

消骨痛汤对骨关节炎大鼠TGFβ1和BMP2表达观察

目的：观察中药方剂消骨痛汤对骨关节炎（OA）大鼠模型中软骨和滑膜中转化生长因子β1（TGFβ1）和骨形成蛋白2（BMP2）的表达。方法将40只Wistar大鼠随机分为4组,每组10只。正常对照组不予干预,其余3组采用膝关节腔内注射木瓜蛋白酶的方法建立骨关节炎大鼠模型,造模2周后开始给药,分别给予生理盐水（模型组）、双氯芬酸钠（西药组）和中药消骨痛汤（中药组）,灌胃8周后取软骨及滑膜标本。用免疫组化方法检测TGFβ1和BMP2在软骨和滑膜中的蛋白表达。结果模型组和西药组软骨、滑膜中TGFβ1、BMP2水平低于中药组和正常组,差异均有统计学意义（P＜0．05）。中药组和正常组TGFβ1和BMP2水平差异无统计学意义（P＞0．05）。结论消骨痛汤能上调OA大鼠软骨和滑膜中TGFβ1和BMP2的蛋白表达。     

下颌前导后大鼠髁突软骨Runx2的表达研究

目的 观察大鼠下颌持续功能前导后髁突软骨中Runt相关转录因子2(Runx2)的表达,探讨Runx2在大鼠下颌前导后髁突软骨不同部位改建中可能发挥的作用.方法 40只35 D龄雄性SD大鼠随机分为实验组和对照组,各为20只,实验组大鼠24 h戴自制功能性矫治器引导下颌前伸,对照组不做处理,在试验后第3、7、14、28天时每组处死大鼠5只,采用免疫组化方法观察髁突软骨中Runx2的表达情况.结果 实验组Runx2的表达在实验后第7、14、28天与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);实验组髁突后部区域Runx2的表达与前部和中部比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Runx2可能参与了下颌骨髁状突骨改建过程;下颌前导后髁突软骨不同部位软骨的改建可能不同.     

99mTc标记的抗心肌肌钙蛋白I单克隆抗体在心肌损伤大鼠体内的分布

目的 研究99mTc标记的抗心肌肌钙蛋白I单克隆抗体(AcTnIMA)在实验性心肌损伤大鼠体内的分布,探讨99mTc-AcTnIMA是否可以作为心脏放射免疫显像剂.方法 第一批大鼠实验组:20只急性心肌损伤大鼠注射99mTc-AcTnIMA 0.2mci,分别于注射后2、4、6、8h处死(每次5只),取血液、肝、脾、肾、正常肌肉、肺、心脏,计算每克组织计数占总注入计数的百分比(ID%/g)及心-肺ID%/g比(HLR);药物对照组:20只急性心肌损伤大鼠注射99mTc标记的非特异性免疫球蛋白(N-IgG)0.2mci,处死方法同实验组.取肺及心脏,计算ID%/g及HLR;空白对照组:20只正常大鼠注射99mTc-AcTnIMA 0.2mci,处理方法同药物对照组.第二批50只心肌损伤大鼠分别于发生心肌损伤后2、4、6、8、12、24h,3、5、10、15d分10次静脉注射99mTc-AcTnIMA 0.2mci(每次5只),注射后4h处死,计算出ID%/g及HLR.结果 损伤心肌摄取99mTc-AcTnIMA为特异性摄取,摄取的高峰时间为4h;损伤心肌摄取99mTc-AcTnIMA与损伤发生时间无关.结论 99mTc-AcTnIMA有望作为心脏放射免疫显像剂诊断心肌损伤.     

辛伐他汀对rhBMP-2诱导大鼠异位成骨作用的影响

目的在重组人骨形态发生蛋白-2（rhBMP-2）诱导异位成骨过程中,局部应用不同浓度的辛伐他汀（SIM）,探讨SIM对rhBMP-2诱导成骨的作用。方法 SD大鼠分3组。A组：高剂量实验组;B组：低剂量实验组;C组：对照组。将复合体植入大鼠股后部肌袋中,术后15d、30d、60d对实验大鼠进行大体观察、生化检测。结果大体观察：各组组织块均随着时间延长而变硬,范围变大。A、B、C三组组织标本AKP含量均于术后30d达到峰值。第15天A组、B组AKP含量显著低于C组AKP含量;第30天,A组AKP含量明显低于C组和B组;B、C两组间则无明显差别;第60天,各组间AKP含量均无明显差别,且含量均较低。结论辛伐他汀与rhBMP-2之间在促进异位成骨方面不具有协同作用;高浓度辛伐他汀可明显抑制rhBMP-2的促进成骨作用。     

左乙拉西坦对癫痫大鼠海马组织中GFAP及5-HT2A受体表达的影响

目的:通过建立氯化锂-匹罗卡品(Li-PILO)诱导的癫痫大鼠模型,观察左乙拉西坦(LEV)对癫痫大鼠海马组织中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及5-羟色胺2A(5-HT2A)受体动态表达的影响,进一步阐明左乙拉西坦的抗癫痫机制。方法:108只Wistar大鼠随机分为4组:生理盐水组(NS)24只、左乙拉西坦对照组(LEV)24只、模型组(Li-PILO)30只、模型组+左乙拉西坦组(Li-PILO+LEV)30只,分别给予LEV组和Li-PILO+LEV组大鼠LEV 200 mg/kg每日1次灌胃,连续28d。采用RT-PCR方法分别在第7天、第14天、第28天动态检测大鼠海马组织中GFAP和5-HT2A受体的表达。结果:(1)各组大鼠海马组织中GFAP表达水平:与NS组比较,Li-PILO组大鼠海马组织中GFAP在第7天、第14天、第28天表达水平显著升高(P<0.05),且随时间延长升高更明显;与Li-PILO组比较,Li-PILO+LEV组GFAP表达水平明显降低(P<0.05)。(2)各组大鼠海马组织中5-HT2A受体表达水平:LEV对照组与NS组比较差异无统计学意义(P>0.05);与NS组比较Li-PILO组在第7天时表达水平降低,且随时间延长降低水平越明显,即在第14天、第28天5-HT2A受体表达水平明显降低(P<0.05);与Li-PILO组比较,Li-PILO+LEV组5-HT2A受体在第7天、第14天、第28天表达水平明显升高(P<0.05)。结论:LVE的抗癫痫作用可能与通过上调5HT-2A受体的表达及抑制GFAP的表达有关,但具体作用机制还需进一步探讨。     

左乙拉西坦对致痫大鼠海马组织中BMP4表达的影响

目的：建立氯化锂－匹罗卡品幼年大鼠癫痫模型,观察左乙拉西坦对癫痫海马组织中骨形成蛋白（BMP4）表达的影响,以探讨左乙拉西坦的抗癫痫作用机制。方法：将116只21d龄Wistar雄性大鼠随机分为4组,其中空白对照组（NS组）24只、左乙拉西坦对照组（LEV对照组）24只、氯化锂一匹罗卡品模型组（PILO组）34只、氧化锂一匹罗卡品模型＋左乙拉西坦治疗组（LEV治疗组）34只。PILO组和LEV治疗组大鼠首先给予腹腔注射氯化锂（125mg／kg）进行诱导,16h后腹腔注射硫酸阿托品（1mg／kg）,30min后再以匹罗卡品（60mg／kg）腹腔注射,如果没有癫痫发作,可在半小时后,再次腹腔注射匹罗卡品15rag／kg,直至充分点燃建立癫痫模型。其中,LEV治疗组,每日给予左乙拉西坦200mg／kg,连续3周进行灌胃治疗,并分别于1周,2周,3周,处死各组大鼠,并通RT--PCR的方法分别检测及观察海马组织中BMP4表达的变化。结果：PILO组与NS对照组相比,BMP4的表达增加,第1周达高峰（P〈0．01）,第2周、第3周BMP4表达逐渐下降,但较NS对照组仍高表达（P〈0．05）,LEV治疗组与PILO对照组相比,BMP4表达逐渐降低（P〈0．05）,LEV对照组与NS对照组无统计学意义（P〉0．05）。结论：癫痫发作后BMP4表达增加,提示BMP4与癫痫形成密切相关,左乙拉西坦可能通过抑制海马组织中BMP4表达而发挥抗癫痫发作。     

Egr-1诱骗性寡脱氧核苷酸对大鼠动脉损伤后bFGF表达的影响

目的观察Egr-1诱骗性寡脱氧核苷酸(decoy ODN)对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响。方法RT-PCR法测定血管壁组织的bFGF表达,采用Western-blot方法测定血管组织bFGF蛋白含量,以观察Egr-1诱骗性脱氧核苷酸对大鼠颈总动脉损伤后bFGF表达的影响。结果decoy ODN作用后,bFGFmRNA各时间点蛋白条带灰度减弱,bFGFmRNA表达减少。结论decoyODN可能是通过特异性抑制bFGF的表达,达到减轻新生内膜厚度,预防再狭窄的目的。     

佐剂性关节炎大鼠骨密度及滑膜OPG/RANKL蛋白的改变

目的观察佐剂性关节炎大鼠的骨密度及踝关节OPG和RANKL蛋白的表达。方法取SD大鼠,制成佐剂性关节炎模型,设正常组、模型1组、模型2组。观察各组大鼠造模后第7、14、21、28天不同时间点的关节炎指数。第21天处死模型1组全部大鼠;第28天处死正常组和模型2组的全部大鼠,分别检测取大鼠整体右侧胫骨和距胫骨远端约1cm为兴趣区的骨密度,同时取双侧踝关节滑膜Western-blotting法检测OPG/RANKL蛋白的表达。结果模型1组,模型2组和正常组比较,各时间点关节炎指数积分差异均有统计学意义(P<0.01)。模型1组大鼠兴趣区的骨密度较正常组低(P<0.01);模型2组大鼠兴趣区的骨密度较模型1组和正常组均显著降低(P<0.01);3组大鼠整体右侧胫骨骨密度值无明显差异。模型1组,模型2组的OPG蛋白表达与正常组差异均有统计学意义(P<0.01)。模型1组的RANKL蛋白表达与正常组无差异,而模型2组的与正常组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论佐剂性关节炎大鼠在造模后第21天存在胫骨远端骨丢失,第28天该病变更为加重,而同时整体胫骨的骨密度均未发生明显变化。造模后第21天和28天大鼠关节滑膜的OPG蛋白表达降低。造模后第28天大鼠滑膜的RANKL蛋白高于正常。     

Angiopoiesis and bone regeneration via co expression of the hVEGF and hBMP genes from an adeno-associated viral vector in vitro and in vivo

Aim:

To investigate the therapeutic potential of adeno-associated virus (AAV)-mediated expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) and bone morphogenetic protein (BMP).

Methods:

Four experimental groups were administered the following AAV vector constructs: rAAV-hVEGF₁₆₅-internal ribosome entry site (IRES)-hBMP-7 (AAV-VEGF/BMP), rAAV-hVEGF₁₆₅-GFP (AAV-VEGF), rAAV-hBMP-7-GFP (AAV-BMP), and rAAV-IRES-GFP (AAV-GFP). VEGF₁₆₅ and BMP-7 gene expression was detected using RT-PCR. The VEGF₁₆₅ and BMP-7 protein expression was determined by Western blotting and ELISA. The rabbit ischemic hind limb model was adopted and rAAV was administered intramuscularly into the ischemic limb.

Results:

Rabbit bone marrow-derived mesenchymal stem cells (BMSCs) were cultured and infected with the four viral vectors. The expression of GFP increased from the 7th day of infection and could be detected on the 28th day post-infection. In the AAV-VEGF/BMP group, the levels of VEGF165 and BMP-7 increased with prolonged infection time. The VEGF₁₆₅ and BMP-7 secreted from BMSCs in the AAV-VEGF/BMP group enhanced HUVEC tube formation and resulted in a stronger osteogenic ability, respectively. In rabbit ischemic hind limb model, GFP expression increased from the 4th week and could be detected at 8 weeks post-injection. The rAAV vector had superior gene expressing activity. Eight weeks after gene transfer, the mean blood flow was significantly higher in the AAV-VEGF/BMP group. Orthotopic ossification was radiographically evident, and capillary growth and calcium deposits were obvious in this group.

Conclusion:

AAV-mediated VEGF and BMP gene transfer stimulates angiogenesis and bone regeneration and may be a new therapeutic technique for the treatment of avascular necrosis of the femoral head (ANFH).     

孕鼠叶酸缺乏对幼鼠肺发育及叶酸结合蛋白1基因的影响

目的 探讨孕鼠叶酸缺乏对幼鼠肺发育及其叶酸结合蛋白1基因(Folbp1)的影响.方法 成熟雌性36只SD大鼠随机均分为A组(缺乏叶酸饲料的实验组)和B组(添加叶酸饲料的对照组),2周后与成熟SD雄性大鼠交配,生后7d处死新生大鼠,留取肺组织标本.HE染色观察病理改变,实时荧光定量RT-PCR技术检测Folbp1 mRNA表达.结果 与B组比较,A组肺组织结构 紊乱,肺泡数量明显减少,肺间隔明显增宽,肺泡、孔腔形状较不规则,肺组织结构明显被破坏.A组肺组织中Folbp1 mRNA相对表达量低于B组(561.21±73.53 vs.1095.73±95.88)(P＜0.05).结论 孕期叶酸缺乏会降低Folbp1基因表达,从而可能导致幼鼠肺发育形态异常,造成肺发育成熟障碍.     

Effects of doxycycline on the development of bone damage caused by prednisolone in rats

The aim of the present study was to investigate the effects of doxycycline on the development of bone damage caused by prednisolone in rats. The experiments were carried out on male WAG rats (200-260 g), divided into 2 control and 6 experimental groups receiving prednisolone (5 mg/kg im daily) or/and doxycycline (100 mg/kg po daily) for 2 or 4 weeks. The animals were sacrificed on the 15th or 29th day of the experiment and the following characteristics were examined: mass, length, mechanical properties, mineral and calcium content in the tibia and femur, width of endosteal and periosteal osteoid, endosteal and periosteal transverse growth, transverse cross-section area of the diaphysis and of the marrow cavity in the tibia, width of epiphyseal cartilage and width of trabeculae in the femur. Prednisolone caused features of osteopenia (inhibition of bone formation and intensification of bone resorption), which were stronger after 4 weeks of the experiment. Doxycycline administered alone for 2 or 4 weeks intensified the processes of bone formation and resorption. Doxycycline to some degree attenuated the influence of prednisolone on rat bones.     

血栓调节蛋白在肺动脉高压大鼠中的表达

目的 观察血栓调节蛋白(TM)在肺动脉高压模型大鼠表达的变化,以探讨其在肺血管重塑中的作用。方法 利用野百合碱(MCT)诱导大鼠肺高压动物模型,右心导管法测定大鼠肺动脉压力,用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测不同时间点大鼠血浆TM水平,采用逆转录定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织中TM mRNA表达水平。结果实验第14天肺动脉压力开始升高,第21天明显升高,以第28天为最高。模型组大鼠血浆TM浓度在第7天时有升高,第14天时明显升高,与对照组有显著差异;第21天开始下降,第28天下降显著,与对照组相比有显著差异。模型组大鼠肺组织中TM mRNA水平在第7天时即开始表达减少,第14天时表达明显减少,以28天时表达最低。结论 血栓调节蛋白在肺动脉高压时表达减少,可能在肺动脉高压发病机制中发挥重要作用,提示肺动脉高压时需要适当抗凝治疗。     

美洛昔康对骨形态发生蛋白9诱导间充质干细胞骨向分化的抑制作用

目的 探讨美洛昔康对骨形态发生蛋白9(BMP 9)诱导间充质干细胞成骨分化的影响。方法 用BMP 9编码序列的重组腺病毒感染C3H10T1/2细胞,并同时加入美洛昔康5, 10和20 μmol·L^-1对BMP9的作用进行干预。采用化学发光法检测第5天、第7天和第9天的碱性磷酸酶(ALP)活性, RT-PCR方法分别于第9天和第11天检测骨钙蛋白mRNA表达以及第1天、第3天和第5天Dlx-5 mRNA表达, 于第14天和第20天采用茜素红S染色法检测钙盐沉积。另用荧光素酶报告质粒检测BMPR-Smad信号的转录活性。结果 与正常C3H10T1/2细胞组相比,第5~第9天BMP9组ALP活性明显增加(P<0.01),但加入美洛昔康5, 10和20 μmol·L^-1后,ALP活性随美洛昔康浓度增加而明显降低(P<0.05)。与正常C3H10T1/2细胞组相比,BMP9组骨钙蛋白素和Dlx-5 的mRNA表达水平及钙盐沉积明显增加,美洛昔康则明显抑制BMP9诱导的骨钙蛋白素和Dlx-5 mRNA的表达及钙盐沉积(P<0.05)。BMP9促进C3H10T1/2细胞中BMPR-Smad报告质粒的荧光素酶活性增加(P<0.01), 美洛昔康能够抑制BMP9对BMP-Smad信号的活化作用(P<0.05)。结论 美洛昔康对BMP9诱导的间充质干细胞成骨化有明显的抑制作用,其机制可能与抑制BMP-Smad信号激活有关。     

大鼠肺纤维化过程中转化生长因子-β1在不同肺组织中的表达变化及意义

目的观察转化生长因子-β(TGFβ-1)在博莱霉素(BLM)所诱导的肺纤维化大鼠肺泡灌洗液中的动态变化及其意义。方法 BLM制成大鼠肺间质纤维化模型,观察组13只大鼠气管注入BLM 0.2~0.3m l,对照组5只大鼠气管注入等量生理盐水,并将各组动物处死后提取肺组织及支气管肺泡灌洗液(BALF)进行病理定量分析,检测BALF中TGFβ-1的水平变化。结果观察组TGFβ-1水平高于对照组,第7、14天比较差异有统计学意义(P<0.01)。TGFβ-1在观察组成纤维细胞(Fb)和肺泡巨噬细胞(AM)中表达于实验第7天显著增强,于实验第14天达到高峰,至第28天有所降低,但明显高于对照组(P<0.05或P<0.01)。结论 TGFβ-1在肺纤维化中及其病理发生发展过程中均发挥重要作用。