鹿茸多肽-PLGA复合膜促进大鼠周围神经再生

目的：研究鹿茸多肽-PLGA复合膜对周围神经损伤修复的促进作用。方法：将Wistar大鼠一侧后肢坐骨神经切断,2个实验组(n=18)大鼠分别用15 mg·g^-1和3 mg·g^-12种浓度剂量型的鹿茸多肽-PLGA复合膜包裹神经缝合口,对照组(n=18)只做外膜缝合。分别在术后第2、4及6周,观察神经吻合口与周围组织黏连情况;测定小腿三头肌最大诱发电位;对吻合口周围的神经组织,分别行HE和Luxol fast blue染色;电镜观察神经纤维的再生情况。结果：在术后各观测时间点,实验组动物足底、足趾均无溃疡,神经吻合处与周围组织仅有轻度黏连,在术后6周时较2周时黏连明显减轻;术后2周时,坐骨神经支配的小腿三头肌诱发电位恢复率（%）测定结果,高剂量组为9.07±1.44,低剂量组为8.02±1.41,对照组为2.52±1.83,用药组恢复率明显高于对照组（P<0.01）,高剂量组较低剂量组高（P<0.05）;术后6周时,坐骨神经支配的小腿三头肌诱发电位恢复率（%）测定结果,高剂量组为49.87±9.69,低剂量组为50.11±6.11,对照组为30.31±6.32,用药组恢复率明显高于对照组（P<0.01）,高剂量组较低剂量组高（P<0.05）,而且术后6周时恢复率明显高于术后2周时（P<0.05）;再生有髓纤维计数、直径、截面积恢复率（%）,术后2周时,高剂量组19.56±5.87、35.35±3.23及20.68±3.21,低剂量组14.43±1.73、 20.78±2.10及15.83±2.31,对照组9.56±l.97、8.32±10.65及4.64±1.36;术后6周时,高剂量组80.22±5.14、78.31±4.32及80.12±3.45,低剂量组72.66±5.31、73.45±2.56及64.06±5.10,对照组58.98±1.58、51.22±2.54及56.14±3 78,用药组恢复率明显高于对照组（P<0.01）,高剂量组较低剂量组高（P<0.05）,而且术后6周时恢复率明显高于2周时（P<0.05）;电镜下用药组比对照组、高剂量用药组比低剂量用药组有髓纤维成熟明显,且术后6周时较术后2周更加明显。结论：鹿茸多肽-PLGA复合膜可提高大鼠周围神经损伤修复后的疗效。     

鹿茸多肽药理作用的研究进展

鹿茸是鹿科动物梅花鹿或马鹿雄鹿未骨化密生茸毛的幼角,具有免疫增强、神经保护、生殖促进、抗骨质疏松、抗衰老、抗肝纤维化和抗关节炎等多种功效.本文对鹿茸多肽的药理作用及未来展望进行综述.     

鹿茸多肽对大鼠软骨细胞增殖的影响

目的：探讨鹿茸多肽（PAP）对大鼠软骨细胞体外增殖的影响。方法：采用二次酶消化法获得大鼠关节软骨细胞进行传代培养并对第四代细胞进行药物干预,利用MTT比色、免疫组化检测增殖细胞核抗原（PCNA）、流式细胞术检测细胞周期等方法来检测各代次大鼠软骨细胞和药物干预后第四代软骨细胞的增殖情况。结果：大鼠软骨细胞随传代培养,MTT比色显示增殖呈下降趋势,免疫细胞化学检测PCNA表达减少,流式细胞术显示细胞增殖指数下降;PAP可以抑制这一趋势,促进传代培养的细胞增殖能力。结论：PAP对传代培养的大鼠软骨细胞的增殖能力有明显促进作用。     

鹿茸多肽药理学活性的研究进展

鹿茸多肽是鹿茸的主要活性成分,具有保护神经、促进生殖功能、保护软骨组织、增强免疫力、保护心肌细胞和血管内皮细胞、预防急性肝损伤、抗炎及抑制肿瘤细胞生长的作用.本文将从以上几方面的作用展开叙述,希望对鹿茸多肽药理作用的进一步研究提供参考.     

几丁糖—胶原复合膜促进周围神经再生的实验研究

目的 探索周围神经损伤修复的新方法。方法 在大鼠坐骨神经损伤模型上,应用几丁糖－胶原复合膜缝制成神经导管分别套接5mm、10mm神经缺损及直接端端吻合组,以单纯端端吻合组为对照。术后4、8、12周进行大体观察、神经电生理测试、组织学检查和图像分析。结果 5mm间隙组的神经再生质量与对照组相似,10mm间隙组的神经再生质量稍差,直接吻合组包膜后可防止神经瘤的形成。术后12周几丁糖－胶原复合膜有明显的降解吸收。结论 几丁糖－胶原复合膜神经导管可用来修复周围神经损伤。     

鹿茸多肽口含片的制备

目的:研制鹿茸多肽口含片,利用崩解时限严格控制产品的质量,为鹿茸多肽提供一种新的应用途径。方法:以崩解时间为指标,通过单因素考察得出口含片的最佳处方。结果:制得的口含片的崩解时间符合规定。结论:工艺简单,质量可控,服用方便。     

失交感神经支配对周围神经再生影响的实验研究

目的观察失交感神经支配对周围神经损伤后再生的影响。方法切除大鼠一侧颈中交感神经节,切断并吻合双侧正中神经。于手术后1、2、4、8周,分别检测双侧趾浅屈肌复合动作电位(CMAP)、正中神经感觉神经活动电位(SNAP)、吻合口以远的有髓纤维计数和超微结构观察,趾浅屈肌最大肌收缩力及其肌肉湿重等指标,对上述指标进行双侧比较。结果各组动物实验侧的各项指标(19.9μV±2.7μV、11.8mV±1.7mV)均低于对照侧(25.1μV±1.8μV、18.0μV±1.0μV)(均P<0·05)。超微结构观察结果与实验检测指标相符。结论去交感神经支配不利于周围神经损伤后再生,周围神经营养血管的基础紧张被消除导致神经失营养可能是重要原因。交感神经对失神经支配的骨骼肌可能具有营养和保护作用。     

“补阳还五汤”对周围神经再生影响的实验研究

为探索中药对周围神经再生的影响,２０只成年ＳＤ大鼠随机均分成实验组和对照组,切除双侧坐骨神经中段的一部分,神经断端间距６ｍｍ。用硅胶管桥接神经的两断端,术后实验组动物连续灌服“补阳还五汤”４周,对照组动物常规饲养。结果显示,术后４、１６周,实验组再生神经冲动传导潜速率比对照组明显快（Ｐ＜０．０１）,同期再生神经内血管面积的图像分析,实验组明显大于对照组（Ｐ＜０．００１）;超微结构观察发现,实验组再生轴突内有较多的线粒体。提示“补阳还五汤”通过改善再生神经血液循环,调节能量代谢,可促进周围神经再生     

PLGA神经诱导管的制作及其神经再生诱导作用

目的观测制备的聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物[Poly(DL-lactide-co-glycolide)PLGA]管的神经再生诱导作用.方法采用大鼠坐骨神经缺损模型观察以两种构成比不同[(85:15)或(50:50)]的聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物制备的PLGA管的神经再生诱导作用.结果(1)体内神经桥接情况下,硅胶管促发有明显的纤维组织增生,并形成包囊包裹于管壁,而两种PLGA管组未见类似现象;(2)与硅胶管组相似,PLGA(85:15)管能够顺利完成坐骨神经缺损桥接作用,再生神经电生理及组织学评价显示两组无明显差异,而PLGA(50:50)管体内神经桥接4周时即出现破裂,不能为坐骨神经桥接提供良好的支持作用.结论与硅胶管及PLGA(50:50)管相比,PLGA(85:15)管能够提供良好的神经再生诱导作用,而且由于其并物反应小、生物相容性佳,生物降解率适当,是一种良好的周围神经组织工程材料.     

神经外膜斜面缝合对周围神经再生的实验研究

目的 设计一种新的神经缝合方式-神经外膜斜面缝合技术,并对其疗效进行初步的实验研究.方法 选取SD大鼠32只,根据术后取材时间的不同,随机分成2、4、6、8周四个时间组,每组8只,左侧行神经外膜斜面缝合,右侧行90°角神经外膜缝合,分别于术后2、4、6、8周时作神经电生理检查及组织学检查.结果 神经外膜斜面缝合侧与90°角神经外膜缝合侧比较,诱发电位潜伏期缩短,波幅升高,有髓神经纤维数均增多.经配对t检验,P值均<0.05;四个时间组之间比较,随着时间的延长,运动诱发电位的潜伏期缩短,波幅升高,有髓神经纤维数升高.结论 周围神经损伤后,在神经缺损<2.5 cm时,行神经端端吻合时,以神经外膜斜面缝合为宜,其神经再生速度、质量均优于传统的90°角神经外膜缝合.     

Biological effect of velvet antler polypeptides on neural stem cells from embryonic rat brain

Background Velvet antler polypeptides (VAPs), which are derived from the antler velvets, have been reported to maintain survival and promote growth and differentiation of neural cells and, especially the development of neural tissues. This study was designed to explore the influence of VAPs on neural stem cells in vitro derived from embryonic rat brain. Methods Neural stem cells derived from E12-14 rat brain were isolated, cultured, and expanded for 7 days until neural stem cell aggregations and neurospheres were generated. The neurospheres were cultured under the condition of different concentration of VAPs followed by immunocytochemistry to detect the differentiation of neural stem cells. Results VAPs could remarkablely promote differentiation of neural stem cells and most neural stem cells were induced to differentiate towards the direction of neurons under certain concentration of VAPs. Conclusion Neural stem cells can be successfully induced into neurons by VAPs in vitro, which could provide a basis for regeneration of the nervous system.     

周围神经细胞外基质在神经再生中的研究进展

细胞外基质（extracellular matrix,ECM）是指自然发生沉积在细胞周围的大分子物质,其为细胞提供结构支撑和黏附位点,并在细胞黏附、迁移、增殖、分化和基因表达中起重要的信号传递作用.周围神经细胞外基质成分主要包括胶原（Ⅰ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ）、层粘连蛋白、纤连蛋白、硫酸软骨素及其他神经因子,其组成和特点表现出了细胞外基质成分作为神经修复材料的优越性.本文对周围神经来源的细胞外基质在构建组织工程神经方面的研究进展进行综述.     

Experimental studies on peripheral nerve regeneration enhanced by nerve growth factor

Summary The effect of exogenous nerve growth factor(NGF) examined on the neural repair of adult rabbit sciatic nerve was evaluated in the present study. A nerve regeneration chamber was created by suturing the proximal and distal ends of a transected sciatic nerve into a silicone chamber, A gap of 6 mm in chamber was left after removal of a 3mm piece of nerve in the distal ends and insertion of the proximal andl distal stumps into the chamber. Animals were operated on bilaterally, one side of the chamber was filled with a 1 mg/ml NGF/normal saline(NS) (experimental)and the contralateral side with NS(control). The regenerated nerves from within the silicone chamber were dissected and fixed 1 to 5 weeks following surgery for histological studies at both the light microscopic and ultrastructural levels. The NGF chamber showed a more mature regenerated nerve based on a larger diameter of the regenerated nerve trunk, a great number of axons, and thicker myelin sheaths. The project was supported by National Natural Science Foundation of China.     

鹿茸多肽对人骨髓间充质干细胞BMP-2和Runx2表达的影响

目的:探讨鹿茸多肽(VAP)对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)中骨形态发生蛋白2(BMP-2) 和骨特异性转录因子2(Runx2)基因和蛋白表达的影响,阐明其对骨合成及hBMSCs向成骨细胞方向分化的作用机制。方法:体外培养的hBMSCs分为对照组和5、10、15、20 g·L^-1 VAP组,通过检测各组hBMSCs中碱性磷酸酶(ALP)活性,确定体外用药最佳药物浓度;CCK-8法检测对照组和10 g·L^-1 VAP组hBMSCs增殖情况;荧光定量 PCR 法与Western blotting法测定对照组和10 g·L^-1 VAP组hBMSCs中BMP-2和Runx2基因与蛋白的表达。结果:VAP各组细胞中ALP活性均高于对照组,其中以10 g·L^-1 VAP组细胞中ALP活性最高(P<0.01);CCK-8法,10 g·L^-1 VAP组hBMSCs增殖率明显高于对照组(P<0.05),VAP诱导培养第9天hBMSCs增殖率最高,且进入平台期,之后hBMSCs的增殖率开始下降;荧光定量 PCR和Western blotting检测,10 g·L^-1 VAP组hBMSCs中BMP-2和Runx2基因及蛋白表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:VAP能够提高hBMSCs中ALP活性,促进hBMSCs增殖分化,上调hBMSCs中BMP-2及其下游Runx2基因和蛋白的表达,这可能是VAP对hBMSCs骨形成及骨代谢影响的分子调控机制之一。     

血小板源性生长因子B在损伤周围神经再生中的作用

目的：观察血小板源性生长因子B（PDGF-B）在损伤大鼠坐骨神经中的表达,旨在阐明其在末梢神经再生中的作用。 方法：分别构建大鼠坐骨神经切割伤和碾压伤模型,应用免疫组织化学S-P法检测PDGF-B的表达。结果：两类损伤模型中,损伤近端神经和再生轴突PDGF-B的表达均增强。两类损伤模型均可见损伤神经远端的雪旺氏细胞PDGF-B表达量明显增加,在碾压伤模型中,随着轴突-雪旺氏细胞关系的恢复,PDGF-B表达水平下降,并最终恢复正常;在切割伤模型中,二者关系不能恢复,PDGF-B减至极低水平。 结论：坐骨神经损伤后PDGF-B的表达增强在末梢神经再生中发挥重要作用。     

免疫抑制对大鼠周围神经损伤再生的影响

目的:探讨免疫抑制治疗对周围神经损伤再生的影响.方法:49只SD大鼠随机分为7组,每组7只,分别为空白对照组、坐骨神经钳夹、横断、缺损损伤动物模型免疫抑制治疗组以及各自生理盐水对照组.各损伤免疫抑制治疗组大鼠术后腹腔内注射免疫抑制剂环磷酰胺,生理盐水对照组大鼠腹腔内注射生理盐水.术后采用足迹分析、电生理以及组织形态学观察评价神经再生和功能恢复的情况;采用免疫组化方法检测损伤局部自身免疫反应状况.结果:神经损伤后免疫抑制治疗组神经功能指数优于生理盐水对照组,电生理(神经传导速度)和组织形态观察显示免疫抑制治疗组神经功能恢复优于生理盐水对照组.免疫组化结果表明免疫抑制治疗使神经损伤局部免疫球蛋白沉积明显少于生理盐水对照组.结论:免疫抑制治疗可减轻周围神经损伤后发生的自身免疫反应,从而改善了周围神经损伤后再生的微环境,促进了神经的再生.     

不同小间隙影响周围神经再生电生理的实验研究

利用周围神经具有的营养及趋化性，找出周围神经断裂后自行修复的最佳间隙。选用Ｗｉｓｔａｒ大白鼠４０只随机分为４组。将其双侧坐骨神经切断并部分切除，实验侧分别留有３．０，５．０，７．０和１０．０ｍｍ的间隙，用同种异体鼠的大血管分别套接坐骨神经的两端对照组神经切断后直接吻合。８周后行各组实验侧、对照侧活体坐骨神经电生理测定，通过神经干复合动作电位峰值（ＮＡＰ）、振幅积分（ＮＡ－ＰＡ）评估周围神经再生情况。结果表明３．０，５．０ｍｍ小间隙神经再生最佳；７．０ｍｍ神经再生差；１０．０ｍｍ神经再生更差。小间隙有利于周围神经再生，最佳间隙３．０～５．０ｍｍ。     

大鼠PDLLA/FK506复合神经套管模型脊髓背角c-fos的表达

目的：建立大鼠PDLLA/FK506（外消旋聚乳酸/FK506）复合套管坐骨神经再生模型,观察大鼠坐骨神经再生过程中行为学、痛阈以及脊髓背角c-fos表达的改变,研究大鼠PDLLA/FK506复合套管外周神经再生模型中神经病理痛的变化.方法：雄性Wistar大鼠40只,体质量180～200g,随机分成2组,每组20只,A组为坐骨神经损伤PDLLA/FK506套管修复组; B组为假手术组.术后27d起检测行为学、机械刺激阈值、热缩足反射时间及c-fos表达计数.结果：A组术后27d后机械痛阈和热缩足反射潜伏期与B组相差明显,有统计学意义（P〈0.05）.A组术侧L4～5脊髓背角与B组相比较,背角浅层c-fos计数增多,有统计学意义（P〈0.05）.A组组内c-fos、机械痛阈和热缩足反射潜伏期45d与27d比较均有统计学意义（P〈0.05）.结论：大鼠PDLLA/FK506复合套管外周神经再生模型中神经再生过程中诱发脊髓背角浅层c-fos表达,同时出现再生神经支配区域的神经病理痛和疼痛相关行为.     

异体羊膜复合神经生长因子桥接周围神经缺损的实验研究

目的 :探讨同种异体羊膜材料复合应用神经生长因子替代神经材料桥接周围神经缺损的可行性。方法 :4 8只健康SD大鼠制备坐骨神经缺损模型 ,随机分为 4组 ,即自体神经原位移植组 (A组 )、异体神经移植应用环孢菌素A(CSA) 5mg/(kg·d) 5周组 (B组 )、异体羊膜材料桥接缺损复合应用神经生长因子组 (C组 )、单纯异体神经移植组 (D组 )。 6只Wistar大鼠取双侧坐骨神经作为供体。于术后 12周取移植段神经行光镜、电镜形态学观察 ,测定神经运动诱发电位潜伏期、神经运动诱发电位峰值、神经传导速度和振幅积分、腓肠肌最大收缩力 ,再生轴突计数及髓鞘厚度测定。结果 :12周时A、B、C组的各项检测指标明显优于D组 (P <0 0 5 ) ,A、B、C 3组间差异无显著性 (P >0 0 5 ) ,再生神经形态与功能恢复良好。结论 :对于长段周围神经缺损 ,应用异体羊膜复合神经生长因子进行桥接可以有效促进神经再生及功能恢复