抗-HCV初、复检不同试剂检测对比分析

为了提高血液质量 ,保证献血者和受血者的安全 ,按照卫生部《供血者体格检查标准》的要求 ,每袋血液的抗 - HCV必须经过初检和复检 ,确认抗 - HCV阴性后方可用于临床。目前国内的抗 - HCV酶免试剂稳定 ,但是不同厂家在抗原包被上有所差异 ,所以在灵敏度上也有差异。下面笔者对两种不同的试剂检测抗 - HCV的结果分析报告如下。1　对象和方法1.1　对象　街头无偿献血者血样标本 95 15人份。1.2　方法　 1仪器 :Wellwash MK2洗板机 ,Wellscan MK3酶标仪 (芬兰产 )。 2方法 :血清抗 - HCV检测 ,初检试剂盒由洛阳华美公司提供 ,复检试剂…     

抗-HCV分片段酶联免疫确认试剂对EUSA试剂组合的应用

丙型肝炎病毒(HCV)抗体是采供血机构的检测项目之一.目前血液筛查所采用的第3代HCV总抗体酶联免疫吸附试剂,由于抗原的组合、来源及含量等差异,导致不同厂家试剂的测定结果差异较大.卫生部规定,必须采用两种不同厂家的试剂进行初、复检,以尽可能保证输血安全.如何选择初、复检试剂,以最大程度地减少假阴性血液的漏检是抗-HCV检测工作的关键.我们应用HCV分片段酶联免疫确认试剂盒对4种国产抗.HCV ELISA试剂盒进行了组配实验,报道如下.     

不同洗板次数对检测抗—HCV的影响

抗 - HCV检测的原理是酶联免疫吸附试验 (EL ISA)中的间接方法 ,其中试验过程中要经过 2次洗板。有时试验过程中个别批号连续出现花板 ,怀疑是洗板的问题 ,为排除此原因 ,作者采用不同样品探讨洗板次数对检测抗 - HCV的 OD值的影响 ,现报告如下。1　材料和方法1.1　材料　抗 - HCV EIA试剂盒 (国内某著名试剂厂家 ) ;RSP2 0 0全自动加样器 (瑞士 Tecan公司 ) ;BEP (德国 Behring公司 )。1.2　方法　取有代表性的 6个样品 ,除每次洗板次数不同外 ,其余按抗 - HCV试剂盒说明书操作。2　结果不同的洗板次数对检测抗 - HCV的 OD值…     

两厂家试剂检测血液抗-HCV的必要性探讨

根据卫生部颁布的《血站管理办法》献血者血液检查标准的要求 ,对献血者血液检测抗 HCV时 ,要用两厂家试剂进行初检和复检 ,二次检验抗 HCV均阴性表明检验合格。抗 HCV检验主要应用酶联免疫法 (ELISA法 ) ,统计结果证明 ,目前国产抗 HCV酶免疫试剂的厂间差异较大 ,主要是抗原片段包被上有所不同。为进一步了解应用两种不同厂家试剂检验抗 HCV的必要性和可信度 ,对初复检二次检验结果进行统计分析 ,并采用RT PCR技术对两厂家 (ELISA法 )试剂检测抗 HCV阳性样本进行HCVRNA检测 ,现将结果报告如下。材料与方法1　样本来源　…     

两种试剂检测抗—HCV不同结果的分析

为了保证临床输血安全，检测丙型肝炎抗体是十分必要的。根据《献血者健康检查标准》对于初、复检血液要用两个不同厂家的试剂检测。我站用两种不同厂家的ELISA试剂盒检测抗－HCV，发现出现不同结果的现象，现报告如下：１材料和方法１．１对象：２０００年３～１２月街头无偿献血者５３７４例，年龄１８～５０周岁，血标本离心后检测。１．２方法：采用ELISA方法。１．３试剂：两种检测HCV抗体ELISA试剂盒均为国产试剂，称为１号试剂和２号试剂，均有国家生产批准文号，中国生物检定所批批检报告书并贴有防伪标签。１．４质控血清…     

不同试剂检测献血者抗-HCV结果的分析

卫生部《血站管理办法》规定 ,献血者血液化验初复检用同一试剂厂家生产的试剂。但使用不同厂家的试剂 ,其检测结果也不尽相同。对此 ,笔者对济宁地区 2 0 0 1年无偿献血者用两种试剂对其血清抗 HCV检测 ,对不一致的阳性标本再做HCV RNA测定 ,结果分析如下。1　材料与方法1 1　标本来源　 2 0 0 1年济宁地区无偿献血者血液标本312 10份 ,按常规进行血清分离。1 2　材料　AT 2、FAME(瑞士哈美顿公司 ) ,LD 10B离心机 ,(北京医用离心机厂产 ) 2 4 0 0型水浴式PCR扩增仪 (美国PE公司生产 )。 2种抗 HCV试剂盒 (以下简称试剂A和试剂…     

计划无偿献血与自愿无偿献血人群血液安全性指标检测结果比较

为探讨献血模式改变对提高输血安全性的意义 ,笔者比较分析了 5 5 4 1 0例上海市区 2 0 0 2年 3～ 5月同期计划无偿献血 (初筛 )与自愿无偿献血人群的血液安全性检测指标 ,现将结果报告如下。材料与方法1　检测对象　 2 0 0 2年 3～ 5月上海市区的献血者5 5 4 1 0人 ,其中自愿无偿献血者 1 2 32 9人 ,计划无偿献血者 (初筛 ) 430 81人。2　试剂与仪器　 HBs Ag、抗 - HCV、抗 - HIV的检测均采用上海科华生物技术有限公司 ELISA试剂盒 ,HBs Ag试剂盒的批号为 2 0 0 1 1 1 2 5、2 0 0 1 1 2 0 7;抗 - HCV试剂盒的批号为 2 0 0 1 1 0 0…     

抗-HBc阳性HBsAg阴性献血者乙型肝炎病毒感染性分析

尽管我国血站严格按照卫生部规定筛查HBsAg,但输注HBsAg阴性血液后仍难免输血后乙型肝炎(PTHB)发生［1］。为探讨PTHB发生的原因,确保血液质量,预防PTHB,笔者采用免疫-套式聚合酶链反应技术,检测了抗-HBc单阳性、抗-HBc/抗-HBs双阳性的HBsAg阴性血液的HBV DNA,以便为血站是否有必要在献血者中加作抗-HBc筛查提供一些科学依据,报告如下。 1 材料与方法 1.1 标本及试剂来源共收集自1998年10月～1999年9月合格的玉林市公民献血者血样1008份(重复者剔除),均为经过献血前初筛和献血后复检合格的血液。初筛和复检项目有HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、梅毒、ALT,使用试剂产自华美、厦门新创、中山、上海荣盛,初复检均使用不同厂家,其中检测HBsAg试剂盒由厦门新创科技有限公司和华美生物工程公司出品,灵敏度≤lng/ml。血样离心后将血浆分装两组试管,其中一组用于检测抗-HBc滴度和抗-HBs,另一组于－20℃保存以便供PCR检测。 1.2 抗-HBc及抗-HBs检测应用ELISA法(华美生物工程公司试剂盒,用芬兰MULTISKANMS型酶标仪判读),严格按试剂盒说明书操作检验,血浆用生理盐水作倍比稀释至1∶128以测定抗-HBc滴度。 1.3 HBV DNA检测应用PCR法(PCR仪为美国PerKin-Elmer公司的9600型DNA扩增仪,免疫-套式HBV PCR试剂盒由北京燕宇分子生物研究所出品),操作按说明书进行,扩增产物EB染色后于260nm波长观察结果;每次PCR检测均设正常人血清及HBV DNA阳性血清各1份作对照,首次PCR检测阳性标本均复检2次,2次复检至少有1次阳性者方判PCR阳性,2次复检均为阴性者判为阴性。 1.4 数据处理用χ2检验分析两组标本中HBV DNA检出率的差异性。     

抗-HCV酶免试剂用于血站血液筛查的效果评价

目的 对目前国内血站采用的抗—HCV酶免试剂进行效果评价，为血站合理选用抗—HCV筛查试剂提供参考依据。方法 对不同厂家抗-HCV酶免试剂检测阳性标本分别用抗—HCV确认实验及逆转录—巢式PCR(RT—nPCR)技术进行检测，并对结果进行比较分析。结果 不同厂家抗—HCV酶免试剂对HCV的C区和NS5区抗体检测结果的差异无显性；但对NS3和NS4区抗体检测结果的差异有显性。结论 血站应根据不同抗—HCV试剂对HCV不同区段抗体的检出特性合理选择初复检试剂。     

抗HCV抗体灰区样本的处置方案和产生原因分析及临床提示

目的探讨抗丙型肝炎病毒(HCV)抗体灰区样本产生的原因和处置方案及临床提示。方法采用5种国产试剂[4种试剂为间接酶联免疫吸附试验(ELISA)、1种试剂为双抗原夹心法]和1种进口试剂(化学发光法)检测血清中抗HCV抗体,结果不一致且在灰区范围内的样本再用重组免疫印迹法(RIBA)检测确认,并对RIBA测定结果为不确定的样本用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)测定HCV RNA。对12例处于窗口期的特殊样本分析HCV RNA的拷贝数和基因型。结果除F试剂外,其他5种抗HCV抗体检测试剂的复检阴性符合率均≥90%;复检阳性符合率随着初检S/CO值的增大而增高,当S/CO值15.01时,6种抗HCV抗体检测试剂的复检阳性符合率均95%。采用6种抗HCV抗体检测试剂分别检测36例灰区样本,单种试剂检测的假阴性率为27.8%~94.4%;2种国产试剂随机组合后检测的假阴性率为8.3%~61.1%;2种国产试剂加进口试剂组合后假阴性率降至5.6%~22.2%;2种国产试剂加国产双抗原夹心法试剂组合后假阴性率降至2.2%~13.9%。6种试剂检测12例特殊样本抗HCV抗体的结果为阴性或部分处于厂家规定的灰区范围内,RIBA确认结果为阴性或不确定,而HCV RNA为弱阳性。12例特殊样本中有8例RNA基因分型为1b型,4例为无分型。结论对于抗HCV抗体检测试剂灰区结果,建议至少采用2种不同的初筛试剂组合对样本进行复检;必要时可引入双抗原夹心法或进口试剂作为复检的补充。为减少窗口期样本的漏检,建议将HCV RNA检测作为补充试验。     

两种不同的KIR基因分型方法的对比研究

目的 探讨常用的序列特异性引物-PCR(PCR-SSP)及流式序列特异性寡核苷酸探针(Flow-rSSO)杂交方法在杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)框架基因分型结果中的符合率和准确性.方法 随机选择2011年6月77例深圳造血干细胞捐献者的外周血样,分别用PCR-SSP及Flow-rSSO商品化试剂盒进行KIR框架基因定型,分别通过凝胶电泳图及HLA Fusion 2.0 Research软件分析法,分析结果的一致性.对初检结果不一致的样本,采用同一厂家、不同批号的商品化试剂盒进行复检,并采用美国国立卫生研究院癌症研究所KIR PCR-SSP方法进行检测.结果 77例样本中,75例完全一致,另2例(2.6％) KIR2DL2的结果不一致,PCR-SSP方法对KIR 2DL2的初检、复检检测结果均为阴性,但用Flow-rSSO Lot#004批号试剂盒检测结果为阳性.更换新的Flow-rSSO Lot# 005批号试剂盒复检,结果与PCR-SSP方法的检测结果相一致.结论 为保证KIR基因分型的准确性,开展KIR基因分型的室内、室间质控工作至关重要.     

合肥地区无偿献血者丙型肝炎病毒区段抗体表达模式分析

目的探讨无偿献血者丙型肝炎病毒(HCV)各区段抗体表达规律及模式,为明确各区段抗体在疾病诊断及预后分析中的可能价值提供依据。方法采用一种国产HCV抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂对34 609例无偿献血者的187份HCV抗体阳性反应标本进行复检,复检阳性标本均进行重组免疫印迹(RIBA)确证试验,并对结果进行统计学分析。结果无偿献血者中HCV抗体ELISA初筛阳性反应率为5.40‰,RIBA复检结果显示阳性率为0.69‰,不确定比率为0.78‰,ELISA假阳性率为3.92‰,S/Co比值与RIBA试验结果呈正相关性;阳性结果中以抗Core阴性、抗NS3-1阴性、抗NS3-2阳性、抗NS4阳性、抗NS5阴性模式出现频率最高,NS4区段抗体检出率最高,为95.8%,而NS3-2区段抗体检出率则为87.5%;不确定结果中,以抗NS3-2出现频率最高,为66.7%,其次为抗NS4区段,不确定结果中仅见2份抗Core抗体阳性,未见NS5区段抗体的检出。结论采用RIBA试验作为HCV感染的诊断标准,本地区献血者人群中HCV感染率为0.69‰。抗NS3-2和NS4抗体可以作为早期诊断指标,证实NS5区段抗体在无偿献血的感染HCV患者的标本中检出频率较低。     

输血前四项血清学指标检测3475例分析

了解输血前患者血清学四项指标的感染情况,保证患者和医疗机构及医务人员的切身利益,有效避免因输血引起的医疗纠纷,同时有助于患者的诊治,有助于医护人员诊治过程中的隔离防护,避免自身感染。对输血前患者进行乙肝表面抗原(HB sA g)、丙肝抗体(抗HCV)、艾滋病抗体(抗H IV)和梅毒非特异性抗体(TRU ST)检测。1临床资料1.1一般资料2007-01/2007-12我院住院及门诊拟输血患者3 475例,其中男2 038例,女1 437例,年龄2~79岁。1.2方法本组均于输血前采集静脉血3 m l送检。用EL ISA法检测HB sA g(上海科华生物技术有限公司试剂盒)、抗HCV(上海科华生物技术有限公司试剂盒)、抗H IV(北京万泰生物药业股份有限公司试剂盒),TRU ST(上海荣盛生物技术有限公司试剂盒)检测梅毒非特异性抗体,TRU ST阳性者用TPPA(珠海丽珠试剂有限公司试剂盒)做确认试验,各试验均严格按照使用说明书操作。2结果HB sA g阳性236例(6.79%),抗HCV阳性64例(1.84%),抗H IV初筛阳性1例,后经省疾控中心确认为阳性,TRU ST阳性18例(0.52%),经TPPA...     

27916名无偿献血者抗-HCV抗体情况的调查分析

丙肝的传染源是病人和HCV无症状携带者。携带HCV的供血人员作为传染源意义更大。国外输血后肝炎中丙肝占 90 %以上 ,输血后肝炎的发病率为 2 - 2 0 %。我国输血后肝炎中丙肝占 6 0 -80 % ,而输血后丙肝的发病率为 2 - 3 4%。所以 ,对无偿献血者抗 -HCV抗体调查 ,是控制和预防HCV传播的重要手段之一。材料与方法1 2 0 0 0年 1月至 2 0 0 2年 1 2月 ,参加无偿献血者 2 791 6人。2 抗 -HCV试剂盒 (英科新创科技有限公司、华美生物工程公司 )均在有效期内使用 ;全自动酶免分析系统 (瑞士费米 1 6 2 0型 ) ;按试剂盒说明书 ,做抗 -HC…     

酶结合物效价下降引起抗-HCV检测失控原因分析

20 0 2年 6月 ,笔者检测抗 -HCV时 ,先后出现 3次失控现象 ,均为阳性对照和质控物 OD值低于要求 ,经过对仪器、人员、试剂、质控物的排查 ,发现是由于试剂盒保存不当引起酶结合物失效 ,为引起同行和试剂厂家重视 ,报告如下。材料与方法1　检测对象　绍兴市无偿献血者。2　试剂与仪器　抗 -HCV检测试剂为国内某厂家生产 ,经中国药品生物检定所批批检定 ,批号 2 0 0 2 0 0 2 2 0 ,HCV 2NCU质控物由卫生部临检中心提供 ,批号 0 2 0 2 ,以上各种试剂均在有效期内使用 ;TECANRSP-1 5 0全自动加样器(瑞士 TECAN公司 ) ,TECAN全自动洗…     

丙型肝炎病毒（HCV）携带献血者及丙型肝炎（HC）患者HCV基因分型检测

丙型肝炎病毒 (HCV)具有高度变异性 ,以其核酸序列不同可将其分为不同的型 ,不同型之间的流行特点、致病性、相应的治疗方法及预后情况存在差异。我们采用套式 RT- PCR法对HCV携带献血者及 HC患者进行基因分型检测 ,以了解本地区不同人群 HCV基因型流行情况。1　对象和方法1.1　对象　本中心无偿献血者抗 - HCV检测阳性血样 ,HC患者 (平均年龄 4 7岁 )样品由河南省人民医院检验科提供 ,经荧光定量 PCR检测 HCV阳性。1.2　试剂　献血者抗 - HCV EL ISA(酶联免疫实验 )检测试剂 :初检为北京万泰公司产 ,复检美国强生 ORTHO公…     

实时荧光定量PCR筛查献血者HCVRNA的初步研究

目的比较核酸扩增技术(NAT)和血清学酶联免疫试验(ELISA)对献血者丙型肝炎病毒(HCV)筛查的符合率。方法用实时荧光定量PCR方法对ELISA初、复检抗-HCV均为阳性的献血者血浆和抗-HCV阳性的丙型肝炎患者血浆作HCV RNA检测。结果①36例初、复检抗-HCV均为阳性的献血者血浆为HCV RNA13例阳性,答合率36.11%,31例抗-HCV阳性的丙型肝炎患者血浆的HCV RNA检测为24例阳性,符合率77.42%,两者符合率有显著性差异(χ2=11·49,P<0·005);②前述37例HCV RNA阳性血浆分别与23份初、复检抗-HCV和HCV RNA均为阴性的血浆混合后HCV RNA检测仍为阳性。且其中1例阳性血浆用上述阴性血浆100倍稀释后检测仍为阳性;③70,000例沈阳地区初、复检抗-HCV阴性献血者血浆样本NAT混合法筛查均为阴性。结论NAT可作为血清学ELISA法的补充用于对献血者血液HCV的常规筛查。     

无偿献血469份不合格血液原因分析

实行无偿献血以来 ,血液质量得到明显提高。但其中仍然有相当数量的不合格血液。本站 2 0 0 1年 1月 1日～ 2 0 0 1年 6月 30日期间有 7362人无偿献血 ,其中 469份为不合格血样 ,现分析如下。材料与方法1　用两种不同厂家试剂对 7362份无偿献血者血液进行初复检 ,包括 :血型、Hb、ALT、HBs Ag、抗 -HCV、抗 - HIV、梅毒 ( Hb、血型不在统计之内 )。2　 HBs Ag、抗 - HCV、抗 - HIV应用酶联免疫诊断法 ( EL ISA) ,试剂由上海科华、厦门新创、北京万泰、河南理利、珠海亚利提供。ALT应用赖氏法 ,试剂由上海荣盛提供。梅毒应用酶…     

4种丙型肝炎病毒荧光定量试剂可比性分析

目的了解不同厂家HCV-RNA定量检测试剂盒测定结果的可比性。方法采用RT-PCR技术对4种HCV-RNA试剂精密度(批内、批间)、线性、阳性检出率、试剂间可比性进行评价。结果本方法评价表明各厂家试剂盒批内变异系数(CV)均小于10%、批间变异系数(CV)均小于12%、线性r>0.97、阳性检出率均大于81%、试剂间结果相关性均r<0.60。结论不同试剂盒检测结果稳定,但不同厂家试剂盒间可比性差,不利于丙型肝炎患者在不同医院诊治,各试剂厂家需建立溯源体系,统一标准。     

联合进口与国产试剂检测献血者抗-HCV的必要性分析

目的　探讨5种不同厂家酶免疫试剂的灵敏度和联合应用的必要性。方法　将2 0份抗 HCV阳性标本按1∶10 0～1∶15 0 0不同倍数进行稀释,用5种进口与国产酶免疫试剂检测不同稀释倍数抗 HCV阳性标本。结果　2 0份阳性标本经5种不同厂家试剂检测,结果均为阳性,无一漏检。随着2 0份血样稀释倍数增加,阳性标本检出数和检出阳性标本的试剂数逐渐减少,当稀释倍数达到1∶110 0～1∶130 0时,国产与进口试剂在灵敏度上的差异有显著性(P <0 .0 1)。结论　献血者初复检宜分别选用灵敏度不同的国产和进口试剂联合检测,以确保检测结果的可靠性。