自主研发的毛囊单位样结构可移植假发的组织相容性及长期移植效果的实验研究

摘要：目的研发出携带同种异体毛发的毛囊单位样假发可移植物, 观察其植入后的组织相容性及长期移植的稳定性,探
索其工业化生产并应用于临床的可能。方法将人发和医用聚丙烯按毛囊单位样结构挤压成型,并加工成毛囊单位样假
发可移植物。移植于新西兰大白兔,通过HE和电镜扫描观察聚丙烯及人发的组织相容性及长期移植效果。结果移植后
早期可见轻度炎症反应细胞浸润于聚丙烯和人发周围,并伴有局部上皮细胞增生。移植后1年仍保持良好的组织相容
性,未发现人发的降解。假发一年脱落率为（4.1±4.0）%,毛发仿真外观效果好。结论同种异体人发及聚丙烯均具有良好
的组织相容性,移植后外观效果好,脱落率低,具有工业化生产并应用于临床的潜能。
     

人发角蛋白人工肌腱(HHKAT)组织相容性的实验研究

目的：研究人发角蛋白人工肌腱(HHKAT)植入大白兔体内的组织相容性。方法：取18只新西兰大白兔在兔的右侧臀大肌埋入人发角蛋白人工肌腱(HHKAT)，左侧埋入正常人发(NHH)。术后2w，8w，12w比较兔两侧的局部反应及组织学变化。结果：植入人发角蛋白人工肌腱侧的局部反应、组织反应较正常人发侧弱：取10个高倍镜下炎症细胞(淋巴细胞、异物巨细胞、巨噬细胞)的平均数比较，有统计学意义。结论：人发角蛋白对机体制激性较小，是一种组织相容性良好的人工材料。     

壳聚糖生物膜生物降解和组织相容性的实验研究

用新型医用生物材料壳聚糖制生物膜，并在小鼠体内进行了降解性和组织相容性实验。初步结果表明，壳聚糖膜无明显膨胀性，具有较好的生物降解性和组织相容性，６０ｄ膜生物降解为３６．７％～４０．４％。随着壳聚糖分子量减小，降解速度加快；以蟹壳为材料的壳聚糖膜，其组织相容性好于虾壳为材料的，有希望用作牙周组织引导再生术中的生物膜。     

国产聚乙烯醇树脂组织相容性的实验研究

目的观察国产聚乙烯醇树酯(PVA)植入家兔背部肌肉后的不同时间材料周围的组织反应情况。方法大耳家白兔10只，在其脊柱一侧背部植入国产PVA，另一侧植入进口PVA，观察术后1、4、12、26、52周材料周围的组织反应情况。结果肉眼观察植入部位无皮下和肌肉组织异常病变，组织病理学检查结果符合国家规定的组织反应程度指标。结论国产PVA的组织相容性良好。     

壳聚糖生物膜生物降解和组织相容性的实验研究

用新型医用生物材料壳聚糖制生物膜，并在小鼠体内进行了降解性和组织相容性实验，初步结果表明，壳聚糖膜无明显膨胀性，具有较好的生物降解性和组织相容性，６０ｄ膜生物降解为３６．７％～４０．４％，随着壳聚糖分子量减小，降解速度加快，心蟹壳为材料的壳聚糖膜，其组织相容性好于虾壳为材料的，有希望用作牙周组织引导再生术中的生物膜。     

人发角蛋白人工肌腱材料的组织相容性

①目的　探讨人发角蛋白人工肌腱材料的组织相容性及其生物特性。②方法　行鼠脊柱两侧埋植试验，对不同埋植物引起的局部反应进行比较。对６８例接受了人发角蛋白人工肌腱材料移植的病人进行观察、随访，了解其切口愈合及肢体功能恢复情况。对２３ 例行人发角蛋白人工肌腱移植病人进行术前及术后的免疫学指标检测并进行比较。③结果　埋植试验显示，人发角蛋白人工肌腱材料对机体组织的刺激性小于正常人发（ｔ＝ ３．８０３～７．６０５，Ｐ＜ ０．０５）。６８ 例病人中６２ 例切口一期愈合，随访发现仅有２ 例术后功能无明显改善，有效率为９７．１％ ．２３例病人手术前后的免疫学指标无明显变化（ｔ＝ ０．０１～１．３３，Ｐ＞ ０．０５），与对照组比较差异也无显著性（ｔ＝ ０．０２～２．０１，Ｐ＞ ０．０５）。④结论　人发角蛋白人工肌腱材料对机体的刺激性小，具有良好的组织相容性。     

脑动脉瘤组织相容性抗原表达的实验研究

为探讨颅内动脉瘤发生破裂的机制,我们对平滑肌细胞组织相容性抗原的表达与动脉瘤发生和破裂之间的关系进行了研究。一、对象与方法1.对象:18例颅内囊性动脉瘤全部在神经外科手术夹闭瘤颈后切除瘤体获得标本。患者年龄27～60岁,平均465岁;男10例,女8例;有破裂出血史者12例(破裂组),无出血史6例(未破裂组);动脉瘤直径0.6～5ｃｍ,平均1.68ｃｍ。对照组为尸检获得的4个正常颅底Ｗｉｌｌｉｓ环血管分叉。2.方法:所有标本均经10%甲醛溶液固定,石蜡包埋,5μｍ切片。免疫组织化学染色采用过氧化物酶(ＰＯＤ)和碱性磷酸酶(ＡＫＰ)标记二抗的双染法。…     

中国汉族人群造血干细胞移植无关供体组织相容性抗原相合概率的研究

随着组织相容性抗原 (ＨＬＡ)分型、移植物抗宿主病(ＧＶＨＤ)预防等方法和技术的不断完善和发展 ,无关供体造血干细胞移植愈来愈受到重视 ,而无关供体造血干细胞的移植有赖于骨髓供体登记体系和脐带血干细胞库的建立 ,为了给选择建立合适规模的骨髓供体登记体系和脐带血干细胞库提供理论依据 ,我们根据中国汉族人群ＨＬＡ Ａ、Ｂ、ＤＲ位点基因频率及单倍体分布进行了我国汉族人群骨髓和脐带血干细胞移植中无关供体ＨＬＡ相合概率的研究。一、对象与方法1 对象 :10 5份外周血标本ＨＬＡ Ａ、Ｂ位点分型结果 ,取自 1997年 12月～ 1999年 8月…     

人类胰岛细胞移植中的组织相容性关系

目的 研究人类胰岛细胞移植当中供受者的HLA配型和胰岛细胞存活的关系。方法 将已知HLA配型的胰岛细胞分别加入到HLA配型组和误配组的血液当中去，观察混合培养1h后的血液当中血小板、中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞变化，以及1h和24h培养后观察活性胰岛细胞的数量变化。结果 人类胰岛暴露于未经抗凝的人类血中，人类胰岛将诱发迅速血小板激活和消耗，中性粒细胞和单核细胞也被消耗，加入肝素后这种反应明显减轻。胰岛细胞在经过24h培养后HLA配型组的存活要比误配组明显提高。结论 胰岛细胞移植入血后，将引发血细胞在胰岛细胞周围的类似炎症反应；HLA配型有助于提高移植后胰岛细胞的存活。     

PBS/PLA胸骨可降解材料组织相容性实验研究

目的通过与聚乳酸(polylactic acid,PLA)进行对比,了解聚丁二酸丁二醇类聚酯[poly(butyl succinate),PBS]/聚乳酸(PLA)合金材料植入动物体内后组织相容性情况。方法选取60只SPF级SD大鼠,按随机数字表法分为4组:Sham组、PBS/PLA组、PBS组和PLA组,每组15只。每只大鼠背部做1个切口,PBS组植入单纯PBS材料,PBS/PLA组植入PBS/PLA合金材料,PLA组植入PLA材料,Sham组切开皮肤后立即缝合,不做其他处理。植入后1、4、8、12、16周后,实验组切取包裹材料的皮下组织,对照组切取切口处皮下组织。主要观察指标:观察切口大体表现;HE染色后光学显微镜观察组织中性粒细胞、淋巴细胞浸润程度和毛细血管密度;Masson染色观察材料周围纤维包裹程度;TUNEL法光镜观察材料对皮下组织凋亡情况。结果第1、4、8、12、16周结果提示PBS/PLA组与PBS组和PLA组相比,3组材料引起的局部炎性细胞浸润和淋巴细胞相似,组织急慢性炎症反应无明显差异;纤维包裹程度PBS/PLA组介于PBS组和PLA组之间(P<0.05);对于材料引起的局部组织细胞凋亡反...     

影响陕北地区毛囊移植术患者 毛囊成活率的因素分析

目的 探讨影响陕北地区毛囊移植术患者毛囊成活率的因素。方法 选取2012 年1 月-2015 年12 月该院接受毛囊移植术治疗的陕北地区秃发患者152 例。根据患者毛囊移植术术后毛囊成活率分为毛囊成活率 ≥ 90% 组（96 例）和毛囊成活率<90% 组（56 例）。比较两组性别、年龄、体重指数（BMI）、吸烟史、嗜酒史、 头皮切口方向、毛囊种植密度、睾酮、二氢睾酮、脱氢异雄酮、雄烯二酮、肾上腺素使用剂量、毛囊分离质量、 毛囊存放区温度、毛囊体外保存液、毛囊离体时间、毛囊单位体外培养模型、术后激光治疗情况及术后米诺 地尔使用情况等。结果 毛囊成活率≥ 90% 组雄激素水平低于毛囊成活率<90% 组（P <0.05）;0.2 ～ 0.3 ml 肾上腺素使用剂量、0 ～ 4℃毛囊存放区温度、使用该中心保存液、0 ～ 2 h 得毛囊离体时间、保留组织的单 根毛发毛囊单位体外培养模型、术后使用激光治疗及术后使用米诺地尔的毛囊成活率≥ 90% 组秃发患者比例 更高（P <0.05）。睾酮水平偏高、二氢睾酮水平偏高、脱氢异雄酮水平偏高、雄烯二酮水平偏高、未使用该 中心毛囊体外保存液、去除组织的单根毛发毛囊单位体外培养模型、术后未激光治疗及术后未使用米诺地尔 不利于陕北地区毛囊移植术患者毛囊成活（P <0.05）。结论 陕北地区毛囊移植术患者毛囊成活率与其雄激素 水平、毛囊体外保存液、单根毛发毛囊单位体外培养模型、激光治疗及米诺地尔使用等因素密切相关,临床 医师应密切注意。     

大鼠生后发育期皮肤和毛囊中角蛋白14的研究

目的 研究大鼠新生和幼年期的皮肤和毛囊中角蛋白14的mRNA的分布和含量的变化。方法 生后第1至49天Wistar大鼠分为32组，测定毛发周期，并用放射标记的原位杂交方法（in situ hybridization,ISH）对皮肤和毛囊石蜡切片上角蛋白14mRNA的分布进行了研究和半定量分析。结果 大鼠的第1毛发周期明显短于第2周期，和小鼠同期相比也有差别；角蛋白14mRNA主要见于表皮基底/基上层和毛囊上部外根鞘等部位的角质形成细胞及皮脂腺细胞等，其他区域及细胞无角蛋白14mRNA阳性信号检见。结论 大鼠新生和幼年期皮肤和毛囊中角蛋白14mRNA的表达与在成人和人胚胎皮肤中的规律有一定差异。     

毛囊内黑素细胞研究进展

黑素母细胞,即黑素前体细胞,起源于神经嵴,部分迁移到毛囊,在毛囊内进一步分化成产色素的黑素细胞。毛囊内包含存在于外根鞘的、可作为黑素细胞“贮库”的未分化的黑素母细胞,以及毛球部有活性的黑素细胞。毛囊黑素细胞数目、寿命、黑素生成活性与毛发生长周期紧密结合在一起。灰发是由于毛囊内黑素干细胞不能完全维系所致。     

在双层皮肤替代物中诱导毛囊形成的初步研究

目的探索人毛乳头细胞和外根鞘细胞在双层皮肤替代物中诱导毛囊形成的可能性。方法用毛乳头细胞和与外根鞘细胞构建复方壳多糖双层皮肤替代物,观察其体外和大白鼠移植后的组织学特征。结果体外毛乳头细胞和外根鞘细胞构建的皮肤替代物表皮细胞排列更紧密、角化突出,真皮内可见与表皮相连的上皮细胞柱及球形膨大细胞团。但移植后未见肯定的毛囊样结构形成。结论目前的细胞培养技术尚不能在双层皮肤替代物中诱导毛囊形成。     

去细胞羊膜负载毛囊干细胞修复裸鼠全层皮肤缺损

目的 利用去细胞羊膜负载毛囊干细胞修复裸鼠全层皮肤缺损。方法 体外分离和培养人毛囊干细胞,取经慢病毒介导的绿色荧光蛋白（pGC FU-GFP-Lentiviru）标记后第4代毛囊干细胞接种于去细胞羊膜上;负载后第7天,HE染色光学显微镜观察细胞黏附生长情况。于18只C57BL/6裸鼠背部制作全层皮肤缺损创面,并根据不同的处理方式分为实验组（将负载毛囊干细胞的去细胞羊膜植入裸鼠全层皮肤缺损创面）、去细胞羊膜移植+干细胞注射组（将去细胞羊膜覆盖创面后羊膜下注射5×106毛囊干细胞）和去细胞羊膜移植组（去细胞羊膜单独移植）,每组6只。分别于移植后第7、14、21、28天,测量各组创面面积并计算创面收缩率。移植后第28天,荧光显微镜观察创面组织绿色荧光蛋白（GFP）表达,HE染色光学显微镜观察新生皮肤结构特征。结果 去细胞羊膜负载毛囊干细胞后第7天,HE染色光学显微镜观察发现,细胞连接成片状覆盖于去细胞羊膜表面。实验组和去细胞羊膜移植+干细胞注射组移植后各时点的创面收缩率均显著小于去细胞羊膜移植组（P<0.05）。移植后第28天,荧光显微镜观察显示实验组创面表皮层GFP表达阳性;HE染色光学显微镜观察发现实验组创面组织表皮层明显增厚,有类似毛囊样结构生成。结论 去细胞羊膜负载毛囊干细胞可用于修复裸鼠全层皮肤缺损。     

去细胞羊膜负载毛囊干细胞修复裸鼠全层皮肤缺损

目的利用去细胞羊膜负载毛囊干细胞修复裸鼠全层皮肤缺损。方法体外分离和培养人毛囊干细胞,取经慢病毒介导的绿色荧光蛋白（pGC FU-GFP-Lentiviru）标记后第4代毛囊干细胞接种于去细胞羊膜上;负载后第7天,HE染色光学显微镜观察细胞黏附生长情况。于18只C57BL/6裸鼠背部制作全层皮肤缺损创面,并根据不同的处理方式分为实验组（将负载毛囊干细胞的去细胞羊膜植入裸鼠全层皮肤缺损创面）、去细胞羊膜移植＋干细胞注射组（将去细胞羊膜覆盖创面后羊膜下注射5×106毛囊干细胞）和去细胞羊膜移植组（去细胞羊膜单独移植）,每组6只。分别于移植后第7、14、21、28天,测量各组创面面积并计算创面收缩率。移植后第28天,荧光显微镜观察创面组织绿色荧光蛋白（GFP）表达,HE染色光学显微镜观察新生皮肤结构特征。结果去细胞羊膜负载毛囊干细胞后第7天,HE染色光学显微镜观察发现,细胞连接成片状覆盖于去细胞羊膜表面。实验组和去细胞羊膜移植＋干细胞注射组移植后各时点的创面收缩率均显著小于去细胞羊膜移植组（P〈0.05）。移植后第28天,荧光显微镜观察显示实验组创面表皮层GFP表达阳性;HE染色光学显微镜观察发现实验组创面组织表皮层明显增厚,有类似毛囊样结构生成。结论去细胞羊膜负载毛囊干细胞可用于修复裸鼠全层皮肤缺损。     

横断毛囊体外再生的形态学研究

目的：研究毛囊横断后再生的条件，探索毛囊干细胞的初步定位．方法：将人头皮分离成游离的毛囊，共进行了8批横断毛囊培养，每批培养毛囊约30根，每批分3组，从不同位置(紧贴毛球、毛囊下1／3处、毛囊下1／2处)横断毛囊后进行培养，观测毛囊的生长情况及形态学改变．结果：紧贴毛球上方或在毛囊下1／3横断，上段毛囊大部分可以再生出新毛球样结构，毛囊可继续生长，上段毛囊平均生长长度分别为0．78mm和0．67mm，可生长比例分别为75％和70％；在毛囊下1／2横断，上段毛囊可生长比例仅为12．5％，明显低于前两组(P＜0．01)．结论：在一定位置横断毛囊，上段的毛囊细胞可以发生增殖分化，毛囊可以继续生长，并再生出新的毛球样结构，表明上段毛囊是其干细胞所在地．     

毛囊细胞移植法诱导毛囊的初步研究

目的 构建一个可靠有效的移植毛囊细胞诱导毛发发育的模型,以治疗脱发.方法 取自愿捐献的成人头皮标本,联用显微分离与免疫磁珠法获得人毛囊干细胞;消化法获得毛乳头细胞.培养后混合植入裸鼠皮下,观察毛囊形成情况.结果 在裸鼠的皮肤切片中可以看到较为完整的毛囊结构形成.结论 毛囊细胞移植法可以在体内诱导出毛囊样结构,为将来治疗脱发奠定了基础.

Abstract：

Objective To establish a convenient and reliable method for inducing hair regeneration by follicular cell implantation for the treatment of alopecia. Methods The human hair follicle stem cells were separated and purified by micromanipulation and magnetic cell sorting, and human scalp dermal papilla cells were isolated by enzyme digestion. The two cells were mixed and implanted subcutaneously in nude mice to observe the regeneration of the hair follicles. Results Formation of intact hair follicle-like structures was observed in the skin sections of the recipient nude mice. Conclusion Follicular cell implantation can induce hair follicle-like structures in nude mice, which provides a means for efficient hair regeneration for treatment of hair loss.     

汗腺剥脱时保护浅层毛囊对腋臭术后皮片坏死的影响

目的探讨汗腺剥脱的同时注意保护浅层毛囊对预防腋臭术后皮片坏死的效果。方法根据腋毛区范围大小,在腋窝中部顺皮肤皱襞分别设计1～2条长2～3 cm的切口,皮下分离腋毛区及区外1 cm区域,去除汗腺,尽量保护浅层毛囊,保留真皮下血管网,切口间断缝合,皮片引流,弹性绷带适当加压包扎。结果本组共51例102侧,术后切口均一期愈合,未发现切缘糜烂及皮片坏死,随访0.5～1年,瘢痕不明显。结论汗腺剥脱的同时注意保护浅层毛囊可有效预防腋臭术后皮片坏死,提高手术效果。