ELISA双抗原夹心法与TRUS法检测梅毒抗体的比较

梅毒是由梅毒螺旋体 ( Treponema Pallidum,TP)感染引起的性传播性疾病 ,可侵犯全身多种器官 ,产生多种症状和体征 ,危害程度极高。梅毒可通过性传播、胎盘传播 ,也可经血液传播 ,因此 ,做好血液的梅毒安全性检查 ,提高梅毒的检出率对于控制梅毒蔓延极为重要。本站应用 EL ISA双抗原夹心法试剂作为血液梅毒抗体的检测试剂 ,使检出率作者单位 :32 30 0 0　浙江省丽水市中心血站大为提高 ,现以 TPHA确诊试剂为参考 ,将 ELISA双抗原夹心法试剂与 TRUST法试剂检测梅毒及非梅毒血清标本的结果报告如下。材料与方法1　材料1 .1　试剂 :E…     

ELISA双抗原夹心法在梅毒检测中的重要性分析

梅毒是由苍白螺旋体(Treponema pallidum，TP)感染引起的性传播疾病，也是血液传播性疾病之一。由于快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)和甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)为非特异性血清试验，敏感性与特异性有一定的局限性，在一期和晚期梅毒的阳性率只有53％～85％。为保证血液质量，预防梅毒经输血传播，我们对初检TRUST阴性、复检酶联免疫吸附试验(ELISA)阳性标本做TP抗体血凝试验(TPPA)，并对3种方法作一比较。     

ELISA双抗原夹心法检测梅毒的应用研究

梅毒是经输血(包括血制品)和性接触传播的一种传染病,其病原体是梅毒螺旋体,其危害性在性病之中仅次于艾滋病。目前国内外血站采用非特异性血清试验来筛选梅毒,国内常用的试剂盒：勾甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)和快速血浆反应素试验环状卡片试验(RPR),主要是检测螺旋体在破坏组织时释放的一种抗原性物质——心拟脂刺激机体产生的具有抗体性质的反应素。     

双抗原夹心ELISA检测抗HCV总抗体

目的建立检测抗HCV抗体的双抗原夹心ELISA法,评价其可行性。方法将与His或GST融合表达的HCV基因工程抗原,分别用作ELISA的包被和酶标记抗原,建立用于抗HCV总抗体检测的双抗原夹心ELISA。用此方法检测1 968份临床血清标本,并以间接ELISA(北京万泰试剂)与之对照;此外,用套式RT-PCR检测部分血清的HCV RNA。结果有1 761份血清2种ELISA检测均为阴性,有190份血清均为阳性,两种方法符合率为99.1%;有17份血清的检测结果不相符,间接法阳性而本法阴性的14份,其中HCV RT-PCR阳性1份;本法阳性而间接ELISA阴性的3份,其中RT-PCR阳性2份。双抗原夹心ELISA与间接ELISA的敏感性分别为99.48%、98.96%,特异性分别为99.94%、99.27%。结论新研制的检测抗HCV总抗体的双抗原夹心ELISA具有较高的敏感性和特异性,值得作进一步的深入研究。     

梅毒螺旋体多表位抗原的改构及在双抗原夹心检测梅毒抗体中的应用

[目的]研制用于包被和标记重组梅毒螺旋体表位抗原，建立双抗原夹心酶联免疫检测梅毒抗体。[方法]利用计算机Godlkey软件分析梅毒螺旋体基因，确立优势抗原表位(rTpN17-TpN15-TpN42-TpN47)，并分别克隆表达四个抗原，然后将四个抗原串联成一个嵌合表达蛋白用于包被，在此抗原的末端连接4个赖氨酸，作为辣根过氧化物酶标记用梅毒抗原，建立双抗原夹心检测梅毒抗体。[结果]在一端连接4个赖氨酸梅毒抗原活性高于未加赖氨酸的抗原，梅毒抗原标记辣根过氧化物酶的ELISA双抗原夹心法与TPHA法阳性符合率为97．5％，特异性明显好于TRUST、间接ELISA法。[结论]改进的梅毒抗原标记辣根过氧化物酶用于双抗原夹心检测梅毒抗体获得了满意的结果。     

ELISA双抗原夹心法与TRUST法检测梅毒抗体的比较及血清学分析

梅毒是由梅毒螺旋体(breponema pallidum,TP)感染引起的性传播性疾病,也是血液传播性疾病之一.提高梅毒抗体的检出率对于扼制梅毒经输血传播极为重要,本站使用ELISA双抗原夹心法试剂作为血液梅毒抗体的普检试剂,检出率大为提高,现以TPHA确诊试剂为参考,将ELISA双抗原夹心法试剂与对比TRUST法试剂检测若干梅毒及非梅毒血清标本的结果报告如下.     

双抗原夹心ELISA法检测抗念珠菌烯醇化酶抗体

目的建立检测抗念珠菌烯醇化酶(Eno)特异性抗体的双抗原夹心ELISA法,并进行临床应用评价。方法用基因工程制备的重组Eno作为包被抗原和酶标抗原,通过棋盘滴定法对双抗原夹心ELISA法的反应条件进行优化,对方法的敏感性、特异性和精密度进行考察。用双抗原夹心ELISA法测定291例住院患者(侵袭性念珠菌病114例,念珠菌定植82例,细菌感染患者95例)以及200名健康人血清,并与本实验室前期自建的间接ELISA法检测抗Eno抗体的结果进行比较。结果双抗原夹心ELISA法工作条件为:Eno抗原包被浓度为0.5μg/m L,酶标抗原1∶4 000稀释;封闭液为含50 g/L脱脂奶粉的PBS-T,待测血清稀释度为1∶100。患者血清检测结果显示,批内变异系数(CV)分别为6.8%、7.4%和5.9%;不同批次重复测定15次,其批间CV分别为10.1%、9.6%和12.4%。重组抗原对血清中相应抗体的阻断率为92.2%。通过ROC曲线确定cut off值吸光度(A)为0.209。检测侵袭性念珠菌病(invasive candidiasis,IC)的敏感性和特异性分别为81.6%(93/114)和94.4%(356/377),敏感性高于检测抗Eno抗体的间接ELISA法(81.6%vs 76.1%)。结论建立了双抗原夹心ELISA法检测抗念珠菌Eno特异性抗体,可提高IC的诊断率,具有临床应用价值。     

TRUST 与 TP-ELISA、TPPA法在献血者血液检测中的分析

本站于 2 0 0 0年 7月～ 2 0 0 1年 5月对体检合格和全血 HBs Ag金标法检测为阴性的供血者共采血 1 0 2 5 2人份 ,根据国家《献血员健康标准》用两种不同厂家生产的试剂分别进行全项检测 ,其中梅毒检测采用 TRUST法 (甲苯胺红不加热血清试验 ) ,检测呈阳性反应 2 4份。再用两种不同厂家生产的 TP- ELISA双抗原夹心法和 TPPA(梅毒螺旋体明胶凝集试验 )对 TRUST呈阳性反应的 2 4份标本和两种不同厂家 TRUST法检测均呈阴性的 66份标本进行检测 ,现将结果报告如下。材料与方法1　试剂 TRUST分别由厦门新创科技有限公司、上海荣盛…     

TRUST法和ELISA法检测梅毒结果比较

梅毒是由梅毒螺旋体（TP）感染引起的一种性传播疾病，也是血液传播性疾病之一。目前检测梅毒螺旋体的试验方法主要有：快速血浆反应素试验（RPR）、甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）和梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA）、梅毒螺旋体胶乳颗粒凝集试验（TPPA）、梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验（TP－ELISA）。笔者对我们在临床梅毒检测中用TRUST法检测的若干阳性标本和阴性标本用ELISA法复检，并用TPHA法确诊对照。现报告分析如下。１资料与方法１．１标本３０例TRUST阳性标本和５０例TRUST阴性标本均来自我院门诊与住院…     

ELISA双抗体夹心法检测尿中游离轻链及初步临床应用

游离轻链能自由通过肾小球基底膜，在肾小管被重吸收回血循环，正常人尿中仅有极少量轻链。多发性骨髓瘤、肾功能不全、肾炎、糖尿病及肝硬化等疾病时，尿中游离轻链含量均有不同程序升高，故尿轻链检测对上述疾病的诊断，尤其是糖尿病肾病的早期辅助诊断有较大的临床意义［１］。１材料和方法１．１标本来源待测标本均来自本院确诊的住院病人及体检正常的健康人，并于－２０℃低温保存。１．２试剂及仪器兔抗人游离ｋ，λ轻链抗体购自Ｂａｃｋｍａｎ公司，酶标记的抗体购自Ｔｈｅ Ｂｉｎｄｉｎｇ ＳｉｔｅＬｉｍｉｔｅｄ，Ｅｎｇｌａｎｄ。…     

人血浆凝血因子V双抗体夹心ELISA测定

目的 建立一种新的双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA），以测定人血浆凝血因子V（FV）抗原含量。方法 采用兔抗人FV抗体为包被抗体，FV单抗为检测抗体，首次对中国正常人（n=26)和一个遗传性FV缺乏家系的有关成员血浆中的FV抗原进行了检测。结果 所建方法线性范围广、特异性强、灵敏度高、重复性好，与FV活性测定有很好的相关性；正常人血浆FV抗原呈偏态分布；FV缺乏家系纯合子血浆FV抗原量只有正常人的2％，证实该家系为I型遗传性FV缺乏症。结论 该法是一种较好的FV蛋白定量测定法，可以对FV缺乏症进行辅助诊断和分型。     

白念珠菌烯醇化酶双抗体夹心ELISA检测方法的建立

摘要：目的：建立检测白念珠菌烯醇化酶（enolase, Eno）的双抗体夹心ELISA法,并试用于几种真菌培养上清液的检测。 方法：将抗白念珠菌Eno单抗作为包被抗体,辣根过氧化物酶标记的羊抗Eno抗体作为检测抗体,用方阵滴定法确定包被抗体和酶标抗体浓度,建立检测Eno的ELISA法,对方法的精密度、特异性、最低检测限等指标进行评价。用该法检测白念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌、近平滑念珠菌、季也蒙念珠菌、新生隐球菌和酿酒酵母等不同真菌培养上清中Eno水平。 结果：Eno浓度为20 ng/mL和5 ng/mL时,批内和批间变异系数(CV)分别为6.61%、9.19%和6.98%、13.81%;最低检测限为1.25 ng/mL。本法可从白念珠菌37 ℃培养24 h后的上清中检出Eno,Eno含量与白念珠菌菌丝含量呈正相关。本法对近平滑念珠菌有微弱交叉反应,与热带念珠菌、光滑念珠菌、季也蒙念珠菌、新生隐球菌和酿酒酵母均无交叉反应。 结论：建立的检测白念珠菌Eno的双抗体夹心ELISA方法有较好的特异性,可用于评价Eno检测在侵袭性白念珠菌感染中的诊断价值。     

人血浆凝血因子V双抗体夹心ELISA测定

目的建立一种新的双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA),以测定人血浆凝血因子V(FV)抗原含量.方法采用兔抗人FV抗体为包被抗体,FV单抗为检测抗体,首次对中国正常人(n=26)和一个遗传性FV缺乏家系的有关成员血浆中的FV抗原进行了检测.结果所建方法线性范围广、特异性强、灵敏度高、重复性好,与FV活性测定有很好的相关性;正常人血浆FV抗原呈偏态分布;FV缺乏家系纯合子血浆FV抗原量只有正常人的2%,证实该家系为Ⅰ型遗传性FV缺乏症.结论该法是一种较好的FV蛋白定量测定法,可以对FV缺乏症进行辅助诊断和分型.     

双抗原夹心与间接ELISA法检测抗HCV对比研究

[目的]用研制的双抗原夹心ELISA法试剂与间接ELISA法试剂对比检测抗HCV。[方法]利用基因重组技术表达的HCV多表位抗原分别包被和标记，收集献血员样本，二种国产（试剂A，B）及雅培间接抗HCV试剂同时检测，对一种试剂单独阳性和3种试剂检测均为阳性的样本，再用研制的双抗原夹心法进行检测。[结果]试剂A检测单独阳性的样本12份，试剂B单独检测阳性20份样本中，双抗原夹心检测为阴性 ；而三家试剂检测均为阳性9份样本，双抗原夹心检测均为阳性。[结论]双抗原夹心检测抗HCV特异性较间接法好，灵敏度二者相当。     

人血清apoM的ELISA检测方法评价

目的 建立并评价检测人血清载脂蛋白M(apo M)浓度的双抗体夹心ELISA法.方法 用抗apo M单克隆抗体作包被抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗apo M单克隆抗体作酶标记抗体,建立检测apo M的双抗体夹心ELISA法.检测483例体检健康者的血清apo M浓度,建立本实验室的参考值.结果 线性范围为31....     

双抗体夹心ELISA法检测嗜酸性粒细胞阳离子蛋白

目的 制备嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(eosinophilia cationic protein,ECP)双抗体夹心ELISA法检测试剂盒.方法 葡萄球菌A蛋白亲和层析法纯化抗ECP单克隆抗体,过碘酸钠法进行抗ECP多克隆抗体HRP标记,制备ELISA试剂盒,进行条件优化和实验效能评价,检测过敏性皮肤病患者ECP水平.结果...     

Antigen capture ELISA for platelet antibody detection: choice of conjugate influences assay result

The performance of an anti-IgG/A/M and two anti-IgG alkaline phosphatase (AP) conjugates in a commercial antigen capture ELISA (ACE) were compared for their ability to detect antibodies to human platelet antigens (HPAs) contained in 11 sera. Three anti-HPA-1a and one anti-HPA-3a were not detected by the anti-IgG/A/M conjugate, but both anti-IgG conjugates detected all HPA antibodies as a consequence of increased sensitivity in detecting specific antibody binding. This increase varied from 10% to 500%, depending on the serum being tested. The increased sensitivity in some instances was also accompanied by an apparent increase in nonspecific binding, as measured by activity against irrelevant glycoproteins that should not have been recognized by the relevant HPA antibodies in the sera in question. Hence, anti-IgG conjugates would appear to be preferable for detecting platelet-reactive antibodies in many clinical situations; however, the choice of anti-IgG conjugate should be made judiciously (and appropriately validated), in order to avoid false positive results arising from increased nonspecific binding, which may otherwise be erroneously attributed to the presence of auto-antibodies in the serum under investigation.