急性心肌梗死猝死者心肌细胞凋亡与Bcl-2和Bax基因蛋白表达的关系

目的　探讨Bcl 2和Bax基因蛋白在冠心病心脏性猝死 (SCD)者心肌细胞凋亡中的作用 ,为冠心病生物治疗提供理论依据。　方法　用凋亡原位末端标记检测 (TUNEL)法检测 16例SCD者和 10例心脏正常其它原因死亡者心肌细胞凋亡 ,用免疫组化法检测Bcl 2和Bax基因蛋白在心肌细胞中表达水平 ,并探讨其相互关系。　结果　SCD者梗死区心肌细胞凋亡数 (5 4 6 87± 132 10 )个 /10 0 0个 (2 18～ 794个 10 0 0个 ) ,明显高于正常对照组 (36 5 2± 2 1 86 )个 /10 0 0 (12～ 87个 10 0 0个 ) (P <0 0 5 ) ;SCD猝死者梗死区心肌细胞中Bax蛋白表达阳性细胞数为(4 2 3 6 3± 12 8 76 )个 10 0 0个 ,明显高于正常对照组 (16 2 0± 2 4 72 )个 10 0 0 (P <0 0 5 ) ,且与梗死区心肌细胞凋亡数成明显的正相关性 (P <0 0 5 ) ;Bcl 2蛋白表达阳性细胞为 (35 35± 4 1 4 6 ) /10 0 0个 ,明显低于正常对照组 (10 1 10±72 2 4 )个 10 0 0个 (P<0 0 5 ) ,且与梗死区心肌细胞凋亡数呈明显负相关 (P <0 0 5 ) ;梗死区心肌细胞内Bax与Bcl 2蛋白表达数之间呈明显的负相关 (P <0 0 5 )。不同支数冠状动脉病变猝死者梗死区心肌细胞的凋亡数 1支者(4 13 38± 14 5 88)个 10 0 0个 ,2支者 (6 5 8 37± 95 15 )个 /10 0 0     

骨髓细胞移植对心肌梗死后大鼠心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的调节

目的　观察骨髓单个核细胞 (BM MNCs)移植对心肌梗死 (MI)后恢复期心肌细胞凋亡及心功能的影响 ,并探讨其可能机制。方法　通过结扎左冠状动脉前降支制成MI模型。 2周后第二次开胸在心外膜下梗死区及周边区多点注射BM MNCs混悬液 2 0 0 μl(5× 10 6 个细胞 )。经超声心动图测定左室射血分数 (EF)、短轴缩短率 (FS)等指标。采用DNA缺口末端标记法 (TUNEL)检测心肌细胞凋亡 ,免疫组化法检测Bcl 2、Bax蛋白在心肌细胞中表达水平。结果　术后 4周 ,移植组EF、FS值均高于对照组 (P <0 0 5 ) ;8周时EF、FS值升高达 2 2 4 %、2 8 1% (P <0 0 5 )。TUNEL结果显示心肌细胞凋亡指数在移植组明显低于对照组 (4周 :0 0 94 6± 0 0 17vs 0 173± 0 0 18,P <0 0 5 ;8周 :0 0 916± 0 0 14vs 0 182± 0 0 15 ,P <0 0 5 )。免疫组化结果表明 ,移植组Bcl 2蛋白表达高于对照组 (4周 :12 6 6± 3 37vs 5 6 8± 2 5 3,P <0 0 5 ;8周 :13 0 8± 3 0 87vs 5 0 2± 1 91,P <0 0 5 ) ;Bax蛋白表达则降低 (4周 :11 4 8± 3 134vs 2 0 12± 3 91,P <0 0 5 ;8周 :9 98± 3 0 3vs 2 2 74± 3 12 ,P <0 0 5 )。结论　骨髓单个核细胞移植可抑制MI后心肌细胞凋亡的发生 ,从而保护心功能 ,其机制可能与对Bcl 2、     

普罗布考对心肌梗死大鼠心肌组织Bcl-2和Bax表达及氧化应激的影响

背景 心肌梗死后心肌细胞凋亡与氧化应激有关,普罗布考为脂溶性强抗氧化剂,实验证明具有保护心肌细胞的作用,该药保护心肌细胞的作用是否通过调控细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax目前尚不清楚.目的 研究普罗布考对心肌梗死大鼠心肌组织Bcl-2和Bax表达及氧化应激的影响.方法 将心肌梗死后24 h存活大鼠41只随机分为2组:盐水组(5 mL/d,n=20),普罗布考组[60 mg/(kg·d),n=21],灌胃给药;另设假手术组(n=12)作对照.分别于心肌梗死后6周:导管法测定左室有创血流动力学指标,TUNEL法检测非梗死区心肌细胞凋亡;RT-PCR的方法观察心肌组织Bcl-2及Bax mRNA表达的变化;Western blot检测心肌Bcl-2及Bax蛋白表达;比色法测定心肌组织氧化代谢指标.结果 (1)与假手术组相比,所有心肌梗死大鼠均出现显著的Bcl-2 mRNA及蛋白表达降低,Pax mRNA及蛋白表达与心肌细胞凋亡指数显著升高(P均＜0.01).与盐水组相比,普罗布考组心肌组织Bcl-2 mRNA及蛋白表达显著升高,Bax mRNA及蛋白表达及心肌细胞凋亡指数显著降低(P均＜0.01);(2)与假手术组相比,所有心肌梗死大鼠心肌组织均出现显著的MDA升高,SOD、TAOC含量及SOD/MDA比值降低(P均＜0.01);与盐水组相比,普罗布考组MDA显著下降,SOD、TAOC含量及SOD/MDA均升高(P均＜0.01);心肌细胞凋亡指数与TAOC、SOD/MDA比值呈负相关(P均＜0.01).结论 心肌梗死后心肌细胞凋亡增加,普罗布考治疗可以抑制心肌细胞凋亡,降低心肌梗死后心肌组织的氧化应激.     

实验性急性心肌梗死中Bax和Bcl-2基因对心肌细胞凋亡的调控

目的 探讨急性心肌梗死（AMI）中Bax和Bcl-2基因对心肌细胞凋亡的调控作用。方法 新西兰兔48只，随机分为不结扎冠状动脉的正常对照组及结扎冠脉后1h，2h,3h,4h,6h,8h,12h共7组。TUNEL法检测梗死区心肌细胞凋亡，免疫组化法检测Bax和Bcl-2蛋白在心肌细胞中的表达水平。结果 急性心肌梗死心肌细胞凋亡数在冠脉结扎后1h开始增多，4h达高峰，以后逐渐下降，12h己降至正常。有Bax蛋白表达的阳性心肌细胞数与心肌细胞的凋亡数呈正相关，有Bcl-2蛋白表达的阳性心肌细胞数与心肌细胞的凋亡数呈负相关。结论 AMI免梗死区心肌细胞存在明显的凋亡现象，且受Bax蛋白上调、Bcl-2蛋白质下调，两作用相反，共同调节有着心肌细胞的凋亡。     

急性心肌梗死心肌细胞中Bax和Bcl-2基因的mRNA表达量及其与凋亡的关系

目的 :探讨急性心肌梗死心肌细胞中Bax和Bcl 2基因的mRNA表达量及其与凋亡的关系。方法 :新西兰兔 4 8只 ,随机分为不结扎冠状动脉的正常对照 (oh)及结扎冠状动脉后 1h ,2h ,3h ,4h ,6h ,8h及 12h共8组。TUNEL法检测梗死区心肌细胞凋亡 ,逆转录PCR法检测Bax和Bcl 2基因在心肌细胞中的mRNA表达量 ,探讨它们之间的相互关系。结果 :兔梗死区心肌细胞凋亡千分率在冠状动脉结扎后 1h开始增多 ,4h达高峰 ,其后逐渐下降 ,到 12h降至正常。Bax基因mRNA的表达量在冠状动脉结扎后 2h开始升高 ,4h达高峰 ,持续 6h后逐渐下降 ,至 12h接近正常。Bcl 2基因mRNA表达量在冠状动脉结扎后 2h开始明显下降 ,4h达最低点 ,持续 2h后开始回升 ,到 12h时已恢复到比正常高的水平。两种基因mRNA表达量的对数值之间呈负相关 ,心肌细胞凋亡数与Bac/Bcl 2基因mRNA比值呈正相关。结论 :兔梗死区心肌细胞存在明显的凋亡现象 ,Bax基因使其上调、Bcl 2基因使其下调 ,Bax/Bcl 2基因mRNA表达比值调控细胞凋亡     

银丹心脑通软胶囊对大鼠急性心肌梗死后Bcl-2、Bax水平的影响

目的探讨银丹心脑通软胶囊对急性心肌梗死(AMI)大鼠Bcl-2、Bax水平的影响。方法结扎冠脉前降支建立AMI模型,将造模成功大鼠随机分为模型组、银丹心脑通大剂量组(1.6 g·kg-1·d-1)、银丹心脑通小剂量组(0.8 g·kg-1·d-1)、阳性药对照卡托普利组(5 mg·kg-1·d-1)各12只,假手术组10只。术后第2天开始灌胃给药,模型组与假手术组给予同等剂量生理盐水,连续4 w。RT-PCR检测非梗死区心肌Bcl-2、Bax mRNA的表达,TUNEL法计算心肌细胞凋亡指数。结果与模型组比较,各给药组的凋亡指数及左室梗死范围明显降低(P<0.05),左心室非梗死区Bax mRNA的表达明显减少(P<0.05),Bcl-2 mRNA的表达明显增加(P<0.05)。结论银丹心脑通软胶囊能够降低AMI后心肌细胞凋亡指数,减少梗死面积,减少左心室非梗死区Bax mRNA的表达,上调Bcl-2 mRNA的表达,提示银丹心脑通软胶囊可通过抑制凋亡通路Bax/Bcl-2改善梗死后心肌细胞凋亡。     

CD151对小型猪急性心肌梗死心肌细胞凋亡和Bax/Bcl-2蛋白的影响

目的:探讨腺相关病毒介导的CD151在小型猪急性心肌梗死(AMI)后对心肌细胞凋亡和Bax/Bcl-2蛋白的影响。方法:建立猪AMI模型,随机分为4组,分别给心肌内注入腺相关病毒介导的GFP基因(rAAV-GFP组)、腺相关病毒介导的CD151基因(rAAV-CD151组)、腺相关病毒介导的反义CD151基因(rAAV-an-tiCD151组)、假手术组(Control组)。AMI后2个月处死,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,WesternBlot法检测各组CD151、Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果:凋亡指数,rAAV-CD151组(3.3±0.4)小于rAAV-GFP组(9.2±1.3)及rAAV-antiCD151组(10.1±1.5)(P<0.05);rAAV-CD151组略多于Control组(2.4±0.8),2组差异无统计学意义,rAAV-CD151组CD151表达高于其他组,Bax/Bcl-2(1.13±0.11)较rAAV-GFP组(3.21±0.12)及rAAV-antiCD151组(3.53±0.09)明显降低(P<0.05),与Control组(0.93±0.04)比较差异无统计学意义...     

心肌梗死后抑郁大鼠心肌细胞Bax/Bcl-2的变化及意义

目的 研究抑郁对心肌梗死大鼠心肌细胞Bax/Bcl-2的影响及意义.方法 将SD雄性大鼠随机分为4组:正常组、抑郁组、心肌梗死组(心梗组)和心肌梗死后抑郁组(模型组).通过结扎冠状动脉和28天慢性不可预测性温和应激分别建立心肌梗死(以下简称心梗)和抑郁模型,造模成功后行糖水消耗实验及旷场实验评价大鼠行为学改变,将大鼠心脏取材后应用Western blot技术检测心肌Bax、Bcl-2蛋白表达.使用Bax/Bcl-2比值评估心肌细胞凋亡.结果 心梗组、抑郁组及模型组大鼠糖水偏爱百分比、旷场实验中总行程、运动速度、直立次数较正常组比均明显降低(P＜0.05),其中模型组与正常组各项指标的比较分别为(41.04 ±3.25)％与(72.32 ±8.33)％,(18.17 ±5.94)m与(70.85±6.64) m,(3.03±0.99) cm/s与(11.81 ±1.11)cm/s,(15.13 ±1.73)次与(7.13±1.73)次,差异均有统计学意义(P＜0.05).心梗组、抑郁组及模型组大鼠心脏Bax/Bcl-2比值均明显高于正常组(P＜0.05),且模型组大鼠最明显.结论 心梗和抑郁均可致大鼠心肌细胞凋亡,抑郁加重心梗后心肌细胞凋亡,凋亡机制可能为心梗与抑郁的共病机制之一.     

肉桂醛对RSV宿主细胞Bcl-2蛋白和Bax蛋白表达的影响

目的探讨肉桂醛对呼吸道合胞病毒(RSV)感染的宿主细胞Hela细胞Bcl-2蛋白和Bax蛋白表达的影响。方法 RSV感染宿主Hela细胞后,选用不同浓度肉桂醛在不同作用方式下进行干预,采用免疫荧光方法检测Bcl-2和Bax蛋白的表达量。结果与病毒对照组相比,给药组的Bcl-2表达量增加,Bax表达量降低(P<0.05);从蛋白的表达量可以看出肉桂醛在病毒直接灭活、吸附作用阶段对RSV有杀灭抑制作用。结论肉桂醛在有效浓度范围内通过对感染病毒细胞凋亡通路Bcl-2蛋白、Bax蛋白的影响,对RSV有杀灭作用。     

冠心病猝死者心肌细胞凋亡与Bcl-2和Bax基因蛋白表达及其意义

目的 :探讨Bcl 2和Bax基因蛋白在冠心病心脏性猝死 (SCD)者心肌细胞凋亡中的作用 ,为冠心病生物治疗提供理论依据。方法 :用TUNEL法检测 16例SCD者和 10例心脏正常其它原因死亡者心肌细胞凋亡 ,用免疫组化法检测Bcl 2和Bax基因蛋白在心肌细胞中表达水平 ,并探讨其相互关系。结果 :①SCD者梗死区心肌细胞凋亡数明显高于正常对照组 ,P <0 .0 5 ;不同支数冠状动脉病变猝死者梗死区心肌细胞凋亡数均明显高于正常对照组 ,且与病变支数成明显正相关 ,P <0 .0 5。②SCD者梗死心肌细胞中Bax蛋白表达阳性细胞数明显高于正常对照组 ,P <0 .0 5 ,且与梗死区心肌细胞凋亡数及冠状动脉病变支数呈明显正相关 ,P <0 .0 5。Bcl 2基因蛋白表达则与之相反 ,梗死区心肌细胞Bcl 2基因蛋白表达明显低于正常对照组 ,P <0 .0 5 ,且与梗死区心肌细胞凋亡数、冠状动脉病变支数呈明显负相关 ,P <0 .0 5。结论 :SCD者梗死心肌细胞存在明显的凋亡现象 ,且受Bax蛋白与Bcl 2基因蛋白下调影响 ,Bax蛋白与Bcl 2蛋白共同调节心肌细胞凋亡 ,诱导心肌细胞表达Bcl 2将可能成为探索心肌生物治疗措施的新途径     

老年急性心肌梗死猝死者心肌细胞凋亡与p53和Bcl—2蛋白表达的相关性研究

目的探讨p53和Bcl-2蛋白在老年急性心肌梗死(AMI)猝死者心肌细胞凋亡中的作用.方法用TUNEL法检测15例猝死者和10例心脏正常的车祸死亡者的心肌细胞凋亡,用免疫组化法检测p53和Bcl-2蛋白在心肌中的表达水平,并探讨它们之间的相互关系.结果 TUNEL法发现,猝死者梗死区的心肌细胞凋亡千分数老年组(663.00±117.12‰)明显高于正常对照(34.30±20.68‰)(P=0.00);p53蛋白表达阳性千分率(462.12±237.58‰)明显高于正常对照者(39.45±24.67‰)(P=0.000),且与梗死区心肌细胞凋亡数成明显的正相关性(r为0.701,P＜0.005);Bcl-2蛋白表达阳性率(40.83±31.29‰)明显低于正常对照(120.76±66.67‰)(P=0.0037),且与梗死区心肌细胞凋亡数成明显的负相关性(r为-0.840,P＜0.001);梗死区心肌细胞内p53和Bcl-2蛋白表达数之间呈明显的负相关性(r=-0.829,P＜0.001).结论 AMI猝死者梗死区心肌细胞存在明显的凋亡现象,且受p53蛋白上调、Bcl-2蛋白下调,两者相反调节其凋亡.     

急性心肌梗死患者发病6 h内C反应蛋白水平对预后的预测价值

目的评价急性心肌梗死(AMI)发病6 h内的C反应蛋白(CRP)水平对直接经皮冠状动脉介入治疗(PCI)后近期预后的预测价值.方法76例首次前壁AMI患者于发病6 h内测定血浆CRP水平,分为A组(CRP≥3 mg/L,20例)和B组(CRP<3 mg/L,56例),所有患者均接受PCI治疗.每例均随访6个月并复查冠状动脉造影(CAG)行定量CAG分析(QCA),比较两组患者入院期间和6个月随访时主要恶性心血管事件(MACE,急性支架内再闭塞、再梗死、靶血管重建、心源性死亡)的发生率及再狭窄率.结果两组间一般临床资料无统计学意义.A组住院期间MACE发生率明显多于B组(25.00% ∶ 0%,P<0.01),6个月随访CAG最小管腔直径(MLD)明显小于、晚期丢失明显高于B组[(1.80±0.57)∶(2.23±0.31) mm,(0.96±0.37)∶(0.51±0.18) mm,均P<0.05],再狭窄率A组明显高于B组(41.18% ∶16.07%,P<0.05).且经多因素相关分析AMI发作后6 h内CRP≥3 mg/L是住院期间MACE的惟一独立预测因子(OR=6.98,P<0.01).结论AMI发作后6 h内CRP水平对直接PCI术后的近期和远期临床预后有一定的预测价值.     

高敏C反应蛋白与急性心肌梗死后并发心房颤动的关系

目的分析急性心肌梗死(AMI)并发心房颤动(AF)患者的临床特征,探讨高敏C反应蛋白(hs-CRP)水平与AMI并发AF之间的关系。方法连续入选27例AMI并发AF患者构成AF组,选取每例前后相继入院的2例AMI患者,共54例构成非AF组。人院开始治疗前取静脉血,采用免疫比浊法检测hs-CRP水平,比较两组患者基线临床资料。结果与非AF组比较,AF组hs-CRP水平较高[(12±7)mg/L比(8±5)mg/L,P=0.001],年龄较大[(70±8)岁比(62±13)岁,P=0.002],左心室射血分数(LVEF)较低[(48%±9%)比(57%±10%),P=0.001],血肌酐水平较高[(113±72)μmol/L比(82±24)μmoL/L,P=0.039)]。多因素Logistic回归显示,hs-CRP(OR=1.12,95% CI 1.01～1.23,P=0.025),年龄(OR=1.07,95% CI 1.00～1.13,P=0.036)和LVEF(OR=0.90,95% CI0.85～0.97,P=0.003)是AMI并发AF的独立预测因子。结论 hs-CRP升高与AMI并发AF呈正相关,早期检测hs-CRP水平可预测AMI后发生AF的风险。     

急性心肌缺血大鼠诱生型一氧化氮合酶的检测

目的 观察诱生型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide sythase,iNOS)蛋白在心肌梗死后早期大鼠心脏的表达变化.方法 将12只大鼠随机分为心肌梗死组和假手术组.采用开胸结扎冠状动脉左前降支的方法建立心肌缺血模型,用免疫组织化学方法检测大鼠心肌梗死后24 h缺血心脏iNOS蛋白颗粒的表达.结果 在大鼠冠状动脉结扎后24h,梗死周围区心肌组织细胞出现大量iNOS蛋白表达,与假手术组相比差异有统计学意义(P＜0.01)假手术组未见iNOS蛋白表达.结论 正常心肌组织无iNOS蛋白表达,心肌梗死后早期缺血心肌组织检测到大量iNOS蛋白表达.     

热休克蛋白70对供心细胞Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的探讨热休克蛋白70(HSP70)对大鼠供心心肌细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法Wistar大鼠18只,分为两组:对照组(C,n=9),腹腔注射生理盐水0.5ml,24h后取离体心脏灌注HTK心脏保护液,4℃保存3h后建立Langendorff离体心脏灌注模型,灌注KH液2h;实验组(E,n=9)腹腔注射重酒石酸去甲肾上腺素(溶于生理盐水中)3.1μmol/kg(0.53mg/kg),腹腔注射24h后取离体心脏,处理方法同C组。运用免疫组化SP法测定心肌HSP70含量、Bcl-2、Bax蛋白的含量以及相关生化指标并进行统计学处理。结果HSP70含量E组(17.78±1.82)较C组(5.22±1.05)明显增高(P<0.01),Bcl-2的表达E组(41.88±5.09)较C组(31.36±3.27)明显增多(P<0.01),Bax的表达E组(22.61±3.49)较C组(40.52±4.17)明显减少(P<0.01),Bcl-2/Bax比值E组(1.86±0.11)较C组(0.77±0.01)明显增高。生化指标E组明显优于C组。结论心肌HSP70高表达对供心具有明显的保护效应,其促进心肌抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,减少促凋亡蛋白Bax表达,增加Bcl-2/Bax比率,以此抑制心肌细胞凋亡,从而发挥其对供心心肌细胞保护作用。     

急性心肌梗塞二周康复程序的疗效和预后

目的 :研究二周康复程序的疗效和预后。方法 :2 4例无合并症急性心肌梗塞病人人实行二周康复程序 ,随访 6～ 12个月。结果 :3例于住院第 7天出院 ,其余患者平均住院 13天 ,住院期间均无严重合并症 ,随访期死亡 1例 ,有劳累性心绞痛 1例 ,其余情况良好。结论 :无严重合并症的 AMI患者二月康复程序安全可行     

急性心肌梗死延迟再灌注后心肌细胞凋亡与bcl-2和bax基因mRNA表达的研究

目的:探讨犬实验性心肌梗死延迟再灌注(LR)后对梗死周边缺血区心肌细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2和baxmRNA表达的影响。方法:健康成年杂交犬28只全麻下常规开胸暴露冠状动脉后随机分为3组:假手术(SHAM)组(8只),急性心肌梗死(AMI)组(10只),LR组(10只)。SHAM组仅行左冠状动脉前降支下穿过丝线而不结扎冠状动脉,AMI组行左冠状动脉前降支高位永久结扎,LR组在高位结扎左冠状动脉前降支6h后松解结扎线予以再灌注6h。共有23只犬模型制作成功。各组犬均于术后12h处死,采集心肌标本。使用脱氧脲核苷酸缺口末端标记法检测心肌细胞凋亡,计算心肌细胞凋亡指数(AI)。逆转录聚合酶链反应法检测心肌细胞中bcl-2和baxmRNA表达水平,以β-actin作为内参照。结果:LR组心肌细胞AI较AMI组明显减少(P<0.05)。与SHAM组相比,bcl-2和baxmRNA在AMI组和LR组的表达均升高(P<0.01),但bcl-2mRNA在该2组间差异无统计学意义(P>0.05);而baxmRNA在AMI组的表达较LR组明显增高(P<0.05)。结论:AMI后LR可以减少梗死周边缺血区心肌细胞凋亡,其机制可能与降低心肌细胞baxmRNA的表达有关。