棉酚对SCE大鼠睾丸支持细胞的影响

为了更进一步观察棉酚对睾丸支持细胞的影响,本实验利用了SCE 大鼠动物模型,以组织学和组织化学方法观察服棉酚组及对照组的SCE 大鼠睾丸。服棉酚3周时,实验组仅有支持细胞的曲细精管直径比对照组小,但其横断面上支持细胞核计数却比对照组多,此时实验组睾丸支持细胞的琥珀酸脱氢酶活性也比对照组弱。服棉酚10天或3周的实验组睾丸支持细胞的脂类含量比对照组多,非特异性酯酶、酸性磷酸酶的活性也比对照组强。实验结果表明,支持细胞的改变是在棉酚的直接作用下发生的。本文提示,棉酚之所以能干扰生精过程是与其影响支持细胞的功能有关。     

~3H-α-氰基丙烯酸正丁酯在大鼠体内的吸收、分布和排泄的实验研究

文本采用~3H 标记输精管绝育粘堵剂α-氰基丙烯酸正丁酯(俗称“504”),测定其在大鼠体内的吸收,分布和排泄,实验结果表明血液中放射性药量极低,到51天时未再测出放射性药物。在给药以后3天可测出脏器组织少量含放射性药量,至3个月后,绝大多数脏器未再测出放射性药量。经尿和粪的排泄实验,观察到~3H-504少量被大鼠机体吸收后能较快排出。在埋有~3H-504的右侧输精管局部,在整个实验观察期间,放射性残留量均保持在93—98%,说明~3H-504在机体内无长期蓄积作用。     

十一酸睾酮与棉酚合用对雄大鼠生育力的影响

本研究探讨十一酸睾酮(TU)与醋酸棉酚(G)序列使用对雄大鼠生育力的影响。SD 雄大鼠肌注TU 12mg/kg 共3次,9/10鼠生育力下降至零(P<0.001),附睾精子密度和活率明显下降(P<0.001);然后胃饲G 12mg/kg·d,每周6日,共3个月。使雄鼠可维持在不育状态,无论在注射TU 或胃饲G 期间,大鼠体重增长如常。停用棉酚3周后,10鼠中6只生育力恢复,停用5周后10鼠生育力全部恢复。二药合用可减少各自的用药量,因TU 所致睾丸体积缩小及单用棉酚引起的不良反应的均可有所减轻,为降低二药的副作用提供了一条可能的途径。     

棉酚对大鼠子宫内膜及主要脏器超微结构的影响

本文探讨棉酚作大鼠宫内一次性注射以达到抗早孕目的的同时,观察子宫内膜及内脏细胞的超微结构变化。21只大鼠分实验组和对照组,给药后于不同时间取样作电镜观察。结果显示棉酚对子宫内膜上皮细胞、腺细胞及蜕膜细胞均有不同程度的损伤。但这些损伤引起的超微结构变化,多数是可逆的,可逐步修复的,对内脏细胞基本无毒性反应。根据实验结果结合以往工作,证明棉酚通过一次性宫内给药是一种较安全、有效的抗早孕方法。     

醋酸棉酚与米索前列醇对离体培养的大鼠黄体细胞和人蜕膜细胞的影响

醋酸棉酚和米索前列醇对体外培养大鼠黄体细胞和人蜕膜细胞都有明显的损伤作用，呈现量-效相关性。棉酚单用对黄体、蜕膜细胞的LD50分别为1．27±0．09μg／ml和3．06±0．23μg／mg；但与来索5μg／ml（在黄体细胞），10μg／ml（在人蜕膜细胞）合用时，LD50分别降至0．89±0．25μg／ml和1．88±026μg／ml；与单用棉酚相比，有显著性差异。单用米索对黄体、蜕膜细胞的LD50各为14．29±1．29μg／ml和24．37±4．49μg／ml；但与棉酚0．5μg／ml（在黄体细胞），1．0μg／ml（在蜕膜细胞）合用时，分别下降为8．79±2．18μg／ml和17.29±1．56μg／ml，与单用米索相比，均有统计学差异，显示两药合用的协同效应。     

大鼠宫内用棉酚抗早孕后对后代遗传学效应的研究

本文对10只孕7天(胚泡着床后2天)大鼠宫腔内一次性注入醋酸棉酚完全抗早孕后再次生育的子代,及8只孕鼠宫腔内一次注入醋酸棉酚部分抗早孕后产出的子代(F_1),及由此子代繁殖的孙代鼠(F_2),进行骨髓细胞染色体畸变率及胎肝血细胞微核率检测。结果表明,用醋酸棉酚抗早孕后再生育的F_1及用药后部分抗孕产出的F_1及F_2,与对照组相比,均无显著差异(P>0.05)。表明醋酸棉酚作为宫内一次性抗生育药物作用后对后代是安全的。     

醋酸棉酚对大鼠成熟卵泡的颗粒细胞产生雌二醇及孕酮功能影响的离体观察

给30天幼龄大鼠皮下注射12IU 孕马血清,48小时后采集发育成熟的卵泡颗粒细胞进行离体培养,并在培养基中加入不同浓度的醋酸棉酚,以观察醋酸棉酚对卵巢甾体激素合成功能的影响。结果发现,棉酚对颗粒细胞分泌孕酮的能力以及对hCG 促进颗粒细胞生成孕酮的能力均有抑制作用。这种抑制作用随棉酚剂量的增加及作用时间的延长而增强。但同样剂量的棉酚对颗粒细胞利用睾酮转化为雌二醇的能力无明显抑制作用。这提示棉酚对颗粒细胞内孕酮生物合成系统有直接抑制作用,而对芳香化酶的活性似无明显干扰作用,表明棉酚对卵巢内甾体激素合成功能的抑制具有选择性。此外,本实验还发现,hCG 的作用在未被完全阻断时,能不同程度地削弱棉酚对颗粒细胞分泌孕酮功能的抑制作用。     

醋酸棉酚对小鼠生殖细胞染色体的影响

本文报道了成熟的ICR 雄性小鼠,每日灌服醋酸棉酚0、1、2.5、5、7.5、10、20、30、40、50毫克/公斤,连续19天后,进行生殖细胞的染色体畸变和SCE 频率的观察。精原细胞的SCE 率检测结果表明,除了20—50毫克/公斤体重/日(临床剂量的50—125倍)高剂量组与对照组比较有显著差异(P<0.005)外,其他用药组与对照组之间不存在明显的差异(P>0.05)。精原细胞和精母细胞染色体异常率的检测表明,各用药组和对照组之间均无明显差异(P>0.05)。结果提示:常用的小剂量棉酚似不具有明显的生殖细胞遗传物质损伤效应。由此推断,停药恢复生殖能力后,对子代可能也不会有明显的影响,但是不可忽视高剂量棉酚引起精原细胞SCE 率的增加。     

新生鼠卵巢FOXO3a表达水平与卵母细胞凋亡的相关性初步研究

目的:探讨新生大鼠卵巢中FOXO3a(forkhead box groupO)转录因子表达水平与卵母细胞凋亡的相关性。方法:取出生后2d、3d、8d、15d龄大鼠的卵巢,用免疫组化方法观察FOXO3a、caspase-3在卵巢组织中的定位及表达水平,且用TUNEL技术检测卵巢内卵母细胞的凋亡变化。结果:FOXO3a在新生大鼠部分卵母细胞巢内的卵母细胞核内高表达,而在卵泡发育启动后,FOXO3a则从卵母细胞的核内逐渐转移至胞浆。而在次级和成熟卵泡的卵母细胞内,FOXO3a仅出现在胞浆内。≤8d龄大鼠卵巢的部分卵母细胞核内或胞核、胞浆内可检测到caspase-3表达,2d、3d龄大鼠部分卵母细胞核内高表达。TUNEL染色与caspase-3结果相似,2d龄大鼠卵巢的卵母细胞阳性率最高。结论:生后2d大鼠卵巢的卵母细胞存在一个凋亡高峰期;在原始卵泡形成前,FOXO3a在部分卵母细胞核内高表达,并与卵母细胞的凋亡率呈一致性。     

FOXO3a转录因子参与调控新生大鼠卵母细胞凋亡的实验研究

目的:探讨新生大鼠卵巢卵母细胞的凋亡是否与FOXO3a(forkhead box group O)转录因子在细胞核内高表达有关。方法:取新生1d、2d、3d、4d雌性SD大鼠卵巢,用免疫组织化学方法检测FOXO3a与其靶分子促凋亡蛋白BIM的表达变化;TUNEL化学染色观察新生大鼠卵巢中卵母细胞凋亡状况;再用免疫组织荧光联合TUNEL荧光检测技术观察FOXO3a和其靶分子BIM表达水平与卵母细胞凋亡的关系。结果:免疫组织化学结果显示,FOXO3a在一些卵母细胞巢内和原始卵泡的卵母细胞核内高表达,其阳性率在出生后1-2d较高,随后逐渐下降。与FOXO3a相似,BIM也是在一些卵母细胞巢内和原始卵泡的卵母细胞中高表达,阳性率变化规律也与FOXO3a一致。凋亡细胞主要见于卵母细胞巢内和原始卵泡的卵母细胞中,其凋亡率变化与FOXO3a阳性率变化一致。免疫组织荧光联合TUNEL荧光检测结果表明,FOXO3a(核内)与BIM高表达的卵母细胞正是凋亡的卵母细胞。结论:FOXO3a转录因子参与新生大鼠卵巢中卵母细胞巢内卵母细胞和原始卵泡卵母细胞的凋亡调控。     

来曲唑对大鼠子宫内膜α_vβ_3和HOXA10表达的影响

目的:探讨应用来曲唑促排卵对大鼠围着床期子宫内膜整合素αvβ3和HOXA10表达的影响。方法:将60只Wistar雌鼠随机等分为3组:来曲唑组(letrozole,LE组),克罗米芬组(clomiphenecitrate,CC组),生理盐水组(NS组),分别进行促排卵。用免疫组化法观察大鼠围着床期子宫内膜腺上皮整合素αvβ3的表达变化;应用RT-PCR和Westenblot方法观察大鼠围着床期子宫内膜HOXA10表达情况。结果:LE组大鼠子宫内膜αvβ3表达与NS组无差异(P>0.05),但LE组显著高于CC组(P>0.01);NS组HOXA10表达高于LE组(P>0.05),LE组HOXA10表达高于CC组(P>0.01)。结论:来曲唑促排卵对大鼠子宫内膜容受性的抑制作用比克罗米芬小,有可能成为较为合适的促排卵药物之一。     

雌激素跨膜受体GPR30介导子宫内膜癌中IL-6/STAT3炎症信号通路的激活

目的:探讨新型雌激素跨膜受体GPR30对子宫内膜癌中IL-6/STAT3炎症信号通路的调节作用。方法:将子宫内膜癌细胞系Ishikawa、KLE分为5组:对照组、E2组、G1组(GPR30特异性激动剂)、E2+G15组(GPR30特异性抑制剂)、G1+G15组。应用转染技术下调Ishikawa和KLE细胞中GPR30的表达后,分别给予E2和G1作用。Western blot法检测各组细胞中STAT3的蛋白表达水平;ELISA法检测细胞培养上清中IL-6的含量。结果:Ishikawa、KLE细胞系中E2组和G1组的STAT3蛋白及IL-6表达水平均显著高于对照组、E2+G15组、G1+G15组(P<0.05)。GPR30稳定下调后,E2+RNAi组和G1+RNAi组中STAT3蛋白与IL-6表达上调均被阻断(P<0.05)。结论:E2和G1能促进子宫内膜癌细胞中IL-6/STAT3的表达,GPR30的表达下调和阻滞剂能抑制E2和G1诱导的子宫内膜癌细胞IL-6/STAT3的表达。GPR30可通过激活IL-6/STAT3炎症通路而在子宫内膜癌组织中发挥重要作用。