Caco-2细胞模型在天然药物吸收研究中的应用

目的Caco-2细胞模型为经典的口服药物体外吸收模型。此文介绍了Caco-2细胞模型的来源与特点,综述了Caco-2细胞模型在天然药物吸收研究中的应用现状,并对Caco-2细胞模型在天然药物研究中的应用前景进行了探讨。     

Caco-2细胞在药物研究中的应用进展

目的Caco-2细胞模型特征及其在药物研究中的应用。方法概述了近年来Caco-2细胞模型在药物吸收机制、高通量筛选、药物相互作用、代谢及在药物剂型开发中应用情况。结果Caco-2细胞模型与整体吸收具有良好的相关性,可预测药物在体内的吸收、代谢规律。结论Caco-2细胞模型是药物体外研究的良好工具。     

口服胰岛素脂质体吸收的细胞学机制

目的:在细胞水平研究胰岛素脂质体的口服吸收机制.方法:以Caco-2模型为小肠上皮细胞模型.在不同浓度下进行通透实验,研究动力学机制;用ELISA方法评价小肠黏膜胞内途径吸收药物的能力;用EDTA、维拉帕米处理细胞,研究胞旁途径,以及P-糖蛋白的外排作用.结果:脂质体可以促进胰岛素的吸收;药物的吸收机制不是简单的被动扩散;药物可以从胞内途径、胞外途径通透;维拉帕米对药物的外排作用不显著;药物作用、通透作用对Caco-2细胞单层完整性的改变是暂时的.结论:脂质体包裹的胰岛素可以通过胞内途径、胞外途径吸收.     

Caco-2细胞模型的应用进展

Caco-2细胞是预测药物在人小肠吸收的一种重要模型,但由于其与生俱来的不足,其应用曾受到一定限制.近年来,随着细胞生物学和分子生物学的发展,Caco-2细胞模型得到了长足的发展,不仅克服了原始模型的局限性,而且拓宽了在药物研究与开发领域的应用.本文拟将Caco-2细胞模型在药品食品研究中的最新应用进展做一综述.     

Caco-2细胞模型在药物研究中的应用

近年来,利用人结肠癌上皮细胞Caco-2（Human cocloncarcinoma cell lines）模型在药物研究方面取得了令人鼓舞的进展。由于药物透过Caco-2单细胞层的体外过程与药物口服后在肠中的吸收和代谢有良好的相关性,该模型已广泛用于药物在吸收、转运、代谢等方面的研究,现就Caco-2细胞模型在药物研究中的应用作一综述。     

隐丹参酮在Caco-2细胞模型中的吸收机制

目的 研究隐丹参酮在Caco-2细胞模型中的吸收机制。方法 用Caco-2细胞单层模型研究隐丹参酮的双向转运，并考察时间、药物浓度及抑制剂对隐丹参酮吸收的影响。用高效液相色谱法检测药物浓度，计算其表观渗透系数。结果 隐丹参酮在Caco-2细胞模型中，从单层细胞层顶端到基底端的转运大于基底端到顶端的转运，随时间和浓度的增加，药物吸收呈饱和趋势，且可被其结构类似物丹参酮Ⅱ。竞争性抑制。结论 隐丹参酮在Caco-2细胞模型中的吸收主要是由载体介导的主动转运，且该主动转运的载体位于Caco-2细胞单层的顶端。     

Caco-2细胞模型在药物体外研究中的应用

Caco-2细胞模型是一种筛选药物离体口服特性的模型,已广泛用于评价药物在小肠的吸收特性和各种转运机制的研究.现综述Caco-2细胞单层模型的基本特点及其在药物的小肠吸收、代谢以及高通量筛选等方面的应用.     

Caco-2细胞模型在药物吸收研究中的应用

Caco-2细胞(thehumancoloncarcino-maline)模型是最近十几年来国外广泛采用的一种研究药物肠吸收的体外模型,它具有如下优点:与动物试验相比,培养细胞要比培养动物更省时更经济;可测定药物的细胞摄取及胯膜转运;Caco-2细胞内有药物代谢酶,可在有代谢状况下测定药物的胯膜转运;Caco-2细胞易于培养且生命力强;Caco-2细胞来源是人结肠癌细胞,同源性好;可用于区分肠腔内不同吸收途径的差别。1.Caco-2细胞模型建立Caco-2细胞适宜在37℃、含5%CO2的环境中培养,采用DMEM培养基,且在培养基中应含有10%胎牛血清、1%非必需氨基酸、1%谷氨酰胺和青…     

矢车菊黄素在Caco-2细胞模型中的吸收机制研究

目的 研究矢车菊黄素（centaureidin）在Caco-2细胞单层模型中的吸收机制。方法 以HPLC分析矢车菊黄素浓度,用Caco-2 细胞单层模型评价吸收时间、药物浓度、介质pH值、抑制剂等对矢车菊黄素吸收的影响,研究矢车菊黄素的吸收机制,计算表观渗透系数（apparent permeability coefficient, Papp）。结果 药物的吸收与药物浓度和吸收时间正相关;弱酸性介质条件下有利于药物的吸收;2,4-二硝基酚（DNP）对药物吸收无影响,但异博定（verapamil）可增加药物的吸收;从肠腔侧到基底侧的转运小于基底侧到肠腔侧的转运。结论 矢车菊黄素在Caco-2细胞模型中的吸收主要是被动转运,受P-糖蛋白的外排作用。     

Caco-2细胞模型的改良研究进展

目的:总结近年来Caco-2细胞模型的改良研究进展,以便于广大研究者能在实际研究中更合理地利用该细胞模型。方法:查阅近十年来国内外对Caco-2细胞模型进行改良研究的文献,总结对Caco-2细胞模型进行的改良方法。结果与结论:针对Caco-2细胞局限性的改进工作已经广泛开展,其中包括通过基因重组、基因敲除或化学物质诱导改变细胞内代谢酶和转运蛋白表达,通过细胞共培养或加入黏蛋白来增加黏液层,缩短培养周期,增加药物溶解性和减少非特异性结合等。这些改良使该模型能更好地模拟体内生理条件,使其在研究药物的吸收、代谢及高通量筛选中能发挥越来越重要的作用。     

药物肠吸收的研究方法进展

药物在肠内的吸收过程,是决定口服药物生物利用度的重要因素。科学的肠吸收研究方法可以让我们了解肠上皮细胞和肠内酶对药物吸收的影响,并获得药物在肠道的吸收动力学参数、有效吸收部位、吸收机制、影响吸收的因素等信息。本文对外翻肠囊法、Caco-2细胞模型法、MDCK细胞模型法、平行人造膜通透性测定法、肠灌流法、血管插管法等几种方法,就模型自身及应用作一综述。     

Cac0-2细胞系及其在药物吸收、代谢中的应用

由于小肠的生理结构适用于药物吸收,所以口服给药是最广泛、最方便的给药途径之一,因此研究药物在肠道的吸收与代谢就显得十分必要.目前用于药物吸收的实验方法主要有:在体肠回流法,肠襻法,分离肠粘膜法、外翻囊法等[1].由于这些方法存在采用动脉组织及其它一些局限性,近年来人们尝试使用人肠细胞培养系统来研究药物在肠道的吸收和代谢,以快速筛选口服药物.Caco-2细胞模型被认为是目前最好的体外吸收模型,可用于快速评估新药的细胞渗透性、阐明药物转运的途径、评价提高膜通透性的方法、确定被动扩散的药物最合适的理化性质和评估新药的潜在毒性作用等,成为药物吸收研究的必备手段.本文就Caco-2细胞及其应用作一简要介绍.     

千层纸素A在Caco-2细胞模型中的吸收机制研究

目的研究千层纸素A在Caco-2细胞模型中的吸收机制。方法 MTT实验考察千层纸素A在Caco-2细胞中的安全浓度范围,再利用Caco-2细胞单层模型研究千层纸素A的双向转运机制,以转运量及表观渗透系数(Papp)为指标,考察时间、浓度、pH和P-gp抑制药维拉帕米对其吸收的影响。结果千层纸素A在Caco-2细胞模型中的转运与时间和浓度呈正相关;并受pH值影响,P-gp抑制药维拉帕米对其转运无影响,从单层细胞层顶端(AP)到基底端(BL)的转运与基底端到顶端的转运大致相同。结论千层纸素A在Caco-2细胞模型中的吸收是被动转运。     

蜕皮甾酮在Caco-2细胞模型中的摄取和跨膜转运研究

目的以Caco-2细胞单层模型,首次研究了蜕皮甾酮的口服吸收与转运特性。方法采用普通Caco-2细胞模型、表达活性CYP3A4酶的Caco-2细胞模型,分别从AP→BL方向和BL→AP方向研究蜕皮甾酮的摄取和跨膜转运规律。结果蜕皮甾酮在2种模型中的表观渗透系数(Papp)在0.1×10-6～1×10-6cm.s-1之间,药物吸收情况为1%～10%;在4 h的实验过程中,4种浓度蜕皮甾酮的ER值均小于1.5。结论研究表明,蜕皮甾酮主要以被动扩散的方式被细胞摄取和转运,其跨膜转运特性未受到CYP3A4-介导机制的影响。     

盐酸赛庚啶在Caco-2细胞中吸收转运的研究

目的 研究盐酸赛庚啶在Caco-2细胞模型中的吸收机制。方法 建立Caco-2细胞体外吸收模型,通过测定荧光黄透过率、安替比林和普萘洛尔的渗透系数、地高辛的外排率验证Caco-2细胞吸收模型的成功建立。采用LC-MS/MS法测定盐酸赛庚啶在膜两侧的浓度,计算渗透系数和外排率。结果 Caco-2模型建立成功,采用LC-MS/MS法可以准确测定缓冲体系中盐酸赛庚啶的浓度。结论 盐酸赛庚啶的渗透系数随药物浓度的变化而变化,且与转运方向有关,可能为P-gp和BCRP的底物。     

槲皮素及其纳米脂质体在Caco-2细胞的吸收特性研究

目的研究黄酮类化合物槲皮素及其纳米脂质体在Caco-2单层细胞模型中的吸收特性,探讨其纳米脂质体促进槲皮素吸收的作用及机制。方法采用乳化蒸发-低温固化法,制备槲皮素纳米脂质体;采用高效液相色谱法和酶标仪分别测定Caco-2细胞对槲皮素原料、槲皮素普通脂质体和槲皮素纳米脂质体的吸收。结果 Caco-2细胞对槲皮素纳米脂质体的吸收效果较佳,槲皮素原料和槲皮素普通脂质体吸收量均随着槲皮素浓度的增加而呈线性关系,而槲皮素纳米脂质体非呈线性关系。结论槲皮素制备成为纳米脂质体能促进槲皮素在Caco-2细胞模型中的吸收。槲皮素原料和槲皮素普通脂质体在Caco-2细胞模型上的吸收为被动扩散,而槲皮素纳米脂质体为被动扩散和主动转运混合方式。     

绿原酸跨细胞转运机制研究

目的利用Caco-2和MDCK细胞单层模型研究绿原酸(chlorogenic acid,CGA)的跨细胞转运过程及其机制。方法①Caco-2和MDCK细胞单层模型建立:Caco-2、MDCK细胞分别按密度1×105、5×104个细胞/cm2接种到Milli-cell-CM culture plate inserts上培养,待细胞单层达到一定致密程度后进行透过实验。②透过实验:用M2e酶标仪测定CGA在不同方向、不同浓度下的跨细胞转运情况并计算累积透过量。结果在两种细胞模型上CGA均有不同程度的双向跨细胞转运(吸收和分泌),P-gp抑制剂维拉帕米能明显减少CGA的分泌。结论CGA跨细胞转运同时存在吸收和分泌的动力学过程。P-gp部分参与CGA的分泌机制。     

LC-MS测定雷公藤甲素及其在Caco-2细胞上的转运特征

目的：建立体外模拟体内肠道细胞的Caco-2细胞Transwell模型,以此研究雷公藤甲素在Caco-2细胞模型上的跨膜转运特征。方法：采用聚酯碳酸酯膜连续培养Caco-2细胞21天,形成致密的单层细胞模型。然后对影响雷公藤甲素在Caco-2细胞模型上转运特征的因素包括浓度、时间及跨膜转运蛋白（P-糖蛋白,多药耐药蛋白,乳腺癌耐药蛋白）进行考察;同时采用LC-MS对溶液中的雷公藤甲素的含量进行测定。结果：雷公藤甲素主要以主动转运的方式进行吸收,且随着时间和药物浓度的增加,转运量明显增加。结论：雷公藤甲素在Caco-2细胞上转运存在一定的浓度及时间依赖性,且P-gp介导雷公藤甲素在Caco-2细胞上转运。     

应用计算机和体外模型对系列化合物透膜性质进行早期快速评价结果的比较分析

目的:分别应用评价化合物透膜吸收性质的计算机及体外模型对系列化合物进行评筛,比较几种模型方法的相关性.方法:以军事医学科学院毒物药物研究所设计合成的晚期糖基化终产物(advanced glycosylation end products,AGEs)裂解剂系列化合物为研究对象,分别利用计算机、人工膜(the Parallel Arti-ficial Membrane Permeation Assay,PAMPA)及Caco-2 cell模型进行评价,并对3种模型的评价结果进行比较.结果:VolSurf软件模型库虚拟筛选结果与Caco-2细胞进行体外筛选结果的相关系数(r2)为0.549 2,VolSurf 虚拟预测与PAMPA体外筛选相关性为0.753 1,PAMPA体外筛选结果与Caco-2细胞体外筛选结果的相关系数为0.685 7.结论:由于计算机及体外模型的方法各有优势及不足,在药物研发的不同阶段应用不同的模型进行筛选评价是完全必要且可行的.     

麦冬多糖MDG-1在Caco-2细胞模型中转运机制研究

目的研究麦冬多糖抗心肌缺血活性成分MDG-1在Caco-2细胞模型中转运机制。方法以Caco-2细胞作为转运研究模型,分别测定改变转运方向,使用P糖蛋白(P-gp)外排泵专属抑制剂维拉帕米(verapam il),以及改变给药浓度各种条件下,MDG-1的跨细胞转运情况。结果麦冬多糖MDG-1的分泌转运(BL-AP)的表观渗透系数Papp并未数倍于吸收转运(AP-BL),两者相近,同时P-gp抑制剂维拉帕米加入与否对麦冬多糖MDG-1转运没有影响;在考察的系列药物浓度范围内,MDG-1的转运随着药物浓度的增加而呈线性增加。结论麦冬多糖MDG-1在Caco-2细胞模型中的转运机制很可能是以被动扩散为主,并且以未降解的药物形式转运,无P-gp外排泵参与。