急性髓系白血病患者骨髓细胞c-Myc基因的表达及其临床意义

目的 研究急性髓系白血病（AML）患者骨髓细胞c-Myc基因的表达及其临床意义。方法 选取2018年9月—2020年9月新疆医科大学第一附属医院143例初治AML患者为研究对象。对照组来自20名志愿者的正常骨髓样本。采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测AML患者骨髓细胞中c-Myc基因的表达,分析其与临床特征及疗效的关系;采用Sanger测序法检测AML患者C-kit 8/17、NPM1、FLT3-TKD/ITD、CEBPa基因突变情况。影响因素的分析采用单因素Cox和多因素逐步Cox回归模型。结果 初治AML患者的c-Myc基因相对表达量高于对照组（P <0.05）。143例AML患者中基因突变患者98例,检出率为68.5%(98/143)。c-Myc基因表达与CEBPa基因突变呈正相关（r=0.174,P=0.037）。c-Myc基因高表达组2个疗程的完全缓解率为40.0%(36/90),c-Myc基因低表达组为77.4%(41/53)。单因素和多因素逐步Cox回归分析结果显示,c-Myc基因高表达和染色体核型分析异常的AML患者有较差的无事件生存和总生存期。结...     

急性髓性白血病多药耐药基因的表达及其临床意义

目的 探讨急性髓性白血病（AML）多药耐药基因mdrl表达与临床耐药和化疗疗效的关系。方法 应用反转录－聚合酶链反应（RT－PCR）,检测30例AML患者骨髓和10名正常人外周血单个核细胞中mdrl基因的表达。结果 正常对照组均为阴性表达。AML初治组mdrl阳性率为26.32%,而复发难治组mdrl阳性率为81.82%,两组之间存在明显差异（P＜0.01)。初治组中mdrl阳性患者的首次完全缓解率（20.00%)明显低于mdrl阴性患者的首次完全缓解率（85.71%)（P＜0.01)。结论 AML的mdrl基因过度表达与临床耐药密切相关,是判断疗效及预后的一个重要指标。     

SHP-1与c-kit基因在慢性髓系白血病中表达水平的研究

目的探讨造血细胞磷酸酶（SHP-1）基因、c-kit基因在慢性髓系白血病患者中的表达及其与白血病转化和预后的关系。方法用半定量逆转录-聚合酶链反应法检测SHP-1 mRNA、c-kit mRNA分别在慢性髓系白血病慢性期、急变期及正常对照组中的表达。结果慢性期和急变期SHP-1 mRNA的表达均低于正常对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）,慢性期和急变期比较差异无统计学意义（P〉0.05）。慢性期和急变期c-kit mRNA的表达均高于正常对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）,急变期c-kit mRNA的表达均高于慢性期,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 SHP-1基因与c-kit基因可作为判断慢性髓系白血病患者转归及预后的指标。     

Evi1基因在急性髓系白血病中的表达及意义

目的　探讨急性髓系白血病 (AML)中Evi1基因的表达及意义。方法　应用半定量RT -PCR方法检测了HEL白血病细胞系 (Evi1阳性细胞株 )、94例AML(初治 49例 ,复发 2 3例 ,缓解 2 2例 )患者及 10名正常对照Evi1基因的表达。结果　① 10名正常人骨髓单个核细胞中无Evi1mRNA的表达 (阴性 ) ,HEL细胞系Evi1阳性。②AML患者Evi1基因总的阳性表达率为 18.1% (17/94) ,M5型未见表达 ,M1～M4各型的阳性率无差异 (P >0 .0 5)。AML初治、复发、完全缓解的Evi1基因阳性率分别为 2 6.5%、17.4%、4.5% ,各组间无明显差异 (P >0 0 5)。③AML初治患者中Evi1阳性表达者首次完全缓解 (CR1)后缓解持续时间短于Evi1阴性表达者 (P <0 0 1) ,早期病死率 (确诊后 3个月内死亡 )明显升高 (P <0 .0 1)。结论　Evi1基因在AML的发病中可能起一定作用 ,可作为判断AML预后不良的一个指标     

急性髓系白血病AML1/ETO融合基因检测及其临床意义

目的 了解急性髓系白血病中AML1／ETO融合基因表达情况及相关临床意义。方法 应用RT-PCR技术检测159例初发未治急性髓系白血病患者骨髓单个核细胞（MNC）AML1／ETO融合基因及R显带技术检测染色体,并对部分病人进行追踪检测及随访。结果 159例未经选择的初发急性髓系白血病病人中,31例（19．5％）有t（8;21）（q22;q22）易位,36例（22．6％）表达AML1／ETO融合基因,所有t（8;21）阳性的病人均存在AML1／ETO融合基因。AML1／ETO融合基因阳性病人缓解率为80．6％（29／36）,高于阴性病人（M,除外）的60．2％（56／93）;AML1／ETO阳性病人经治疗后转阴并持续阴性者预后好,而持续阳性者预后差,由阴性转阳性者可预示复发。14例持续缓解超过18个月的病人AML1／ETO融合基因仅1例为阳性。结论 （1）RT—PCR法检测AML1／ETO mRNA敏感、快速,定期检测可监测微小残留病变。（2）单次PCR法扩增AMLl／ETO融合基因优于巢式PCR法。     

急性髓系白血病患者BAALC的表达及其临床意义

目的:检测急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者BAALC(brain and acute leukemia,cytoplasmic)基因的表达并探讨其临床意义。方法:收集93例初诊AML患者(研究组)和36例非恶性血液病患者(对照组)骨髓,应用实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RQ-PCR)法检测骨髓单个核细胞中BAALC转录本水平。采用ROC曲线根据其表达水平对AML患者再次分组并比较组间临床参数的异同,分析其临床意义。结果:AML患者BAALC表达水平明显高于对照组(P<0.001)。AML患者的BAALC表达水平根据临界值2.107(ROC曲线敏感度51%、特异性100%)分为高表达组和低表达组。两组患者的性别、年龄、外周血白细胞计数、血小板计数、血红蛋白含量和基因突变差异无统计学意义(P>0.05),但FAB分型、WHO分型、不同核型以及染色体危险程度分型差异有统计学意义(P<0.05),BAALC高表达组原始细胞计数明显高于低表达组(P<0.001)。BAALC高表达组治疗后完全缓解率低于BAALC低表达组(P=0.087);BAALC高表达组患者总体生存时间明显低于BAALC低表达组(P=0.031),正常核型AML患者中BAALC高表达组总体生存时间也明显低于低表达组(P=0.043)。结论:BAALC高表达是AML患者预后不良的影响因素,可作为AML辅助诊断的参考标志。     

HLX基因的表达与急性髓系白血病相关性

目的 研究HLX表达水平与AML的临床变量及AML不同危险度分层的相关性。方法 应用实时荧光定量PCR方法检测32例初治AML患者骨髓单个核细胞中HLX表达量,分析其与患者FAB分型、血象、骨髓原始细胞、分化程度及AML不同危险度分层关系。结果 初治AML患者HLX表达量在AML-M₃中明显降低（P<0.01）,AML-M₅中明显升高（P<0.05）;HLX表达水明与骨髓原始细胞数呈负相关（P<0.01）,与外周血血小板水平呈正相关（P<0.05）,且AML-M₃ HLX表达量与外周血白细胞水平呈正相关（P<0.05）,AML-M₅ HLX表达量与外周血白细胞水平呈负相关（P<0.05）;AML-M₅组中分化不良组HLX表达水平明显高于分化良好组,（P<0.05）,病例组及非M₃组初治AML患者中,低危组与中危组HLX表达水平差异无统计学意义（P>0.05）。结论 HLX表达水平在部分亚型（如AML-M₅）中表达升高,且在不同的FAB分型中有差异。该基因与白血病细胞的增殖、分化和成熟相关。本研究暂无证据表明HLX在不同AML危险度分层中有差异,仍需进一步实验研究。     

急性髓系白血病CTNNA1基因的表达及临床意义

目的：研究急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）患者钙黏蛋白相关蛋白（α—catenin,CTNNA1）基因的表达情况并探讨其临床意义。方法：应用实时定量PCR（qRT-PCR）法检测25例非恶性血液病患者（对照组）和92例初诊AML患者（观察组）中CTNNA1基因的表达水平,并分析其与临床参数的相关性。结果：观察组中51例（51／92,55．43％）存在CTNNA1低表达,而对照组未发现CTNNA1低表达（0．00％）,两组比较,差异有统计学意义（,=17．152,P〈0．001）;CTNNA1表达水平与AML患者的年龄、性别、外周血白细胞计数、血小板计数、血红蛋白含量、FAB分型、核型分组之间均无相关性（P均〉0．05）。ROC曲线分析表明CTNNA1表达水平能有效鉴别观察组和对照组,AUC=0．806。观察组中CTNNA1低表达的患者化疗后完全缓解率高于对照组,但差异无统计学意义（x^2=2．476,P=0．142）。4例初诊AML患者在获得完全缓解后CTNNA1表达水平均较治疗前有所升高。结论：CTNNA1基因低表达可能是AML中的一个常见分子事件,检测其表达可用于AML患者的辅助诊断和疾病状态监测。     

急性髓系白血病GLIPR1基因甲基化及其表达

目的：检测GLIPR1基因在急性髓系白血病（AML)细胞株和AML患者骨髓细胞中的甲基化状态和表达水平,探讨其表达水平与启动子甲基化的关系。 方法：以5株白血病细胞株, 以及54例治疗前AML患者骨髓、48例急性淋巴细胞胞白血病（ALL）患者骨髓、40例慢性粒细胞白血病（CML）患者骨髓、35例对照骨髓和8例治疗后完全缓解AML患者骨髓为样本,采用RT-PCR检测GLIPR1 mRNA表达水平,采用甲基化特异PCR（MS-PCR）方法检测GLIPR1基因甲基化状态,并对GLIPR1 mRNA表达水平与其甲基化状态进行相关性分析。 结果：GLIPR1基因在AML细胞株中的表达水平低于CML急性变细胞株和ALL细胞株,而前者甲基化水平高于后者。5-aza-2dC处理细胞后,GLIPR1基因在AML细胞株中的表达水平明显上调,而在CML急性变细胞株和ALL细胞株中的表达水平上调不明显。GLIPR1基因在AML骨髓中的表达水平（0.38±0.20）明显低于ALL骨髓（0.76±0.18）、CML骨髓（0.80±0.14）和对照骨髓（0.85±0.12）,在完全缓解AML骨髓中的表达水平明显高于治疗前AML骨髓（0.78±0.13 vs. 0.36±0.20）;而ALL和CML骨髓中的表达水平与对照骨髓比较无明显差异(P＞0.05）。GLIPR1基因在AML骨髓的甲基化阳性率(81.5%)明显高于ALL骨髓（37.5%)、CML骨髓（27.5%)和对照骨髓（14.3%),在完全缓解AML骨髓中的甲基化阳性率明显低于治疗前骨髓(12.5% vs. 75.0%);而在ALL和CML骨髓中的甲基化阳性率与对照骨髓比较无明显差异(P＞0.05）。GLIPR1基因在AML骨髓中的表达水平与其甲基化呈负相关。结论：GLIPR1基因在AML中表达下调或缺失及启动子甲基化可能是导致GLIPR1基因表达沉默的原因,GLIPR1基因表达和甲基化水平对判断AML患者的疗效有一定意义。     

Wnt3基因在急性髓系白血病中的表达及意义

目的研究Wnt3基因在急性髓系白血病（AML）患者中的表达及其意义。方法应用实时定量PCR（real—timePCR）方法检测10名正常人、40例AML患者中Wnt3基因的表达。结果10例正常人中检测到较低水平Wnt3基因的表达;Wnt3基因在AML患者中的表达水平增高,AML缓解后Wnt3基因的表达水平较初诊时明显降低;Wnt3的表达与AML患者年龄、性别以及初诊白细胞数等临床特征无关;Wnt3低表达组完全缓解率高于高表达组。结论Wnt3在AML发病中可能起重要作用,可作为判断AML预后的一个指标。     

JAKs家族基因在急性髓系白血病中的表达与预后的相关性分析

目的: 分析JAKs家族基因在不同时期急性髓系白血病(AML)细胞中的表达及其与预后的相关性。分析JAKs家族基因在不同时期急性髓系白血病(AML)细胞中的表达及其与预后的相关性。方法: RT-PCR法分别检测AML初治组、复发组、完全缓解组(CR组)以及正常对照组(NC组)骨髓MNC细胞中JAKs家族基因(JAK1、JAK2、JAK3和TYK2 mRNA)的表达。同时对初治组患者随访3年, 统计3年生存率。结果: 初治组和复发组AML患者JAK3和TYK2 mRNA表达水平均高于CR组和NC组(P< 0.05~P< 0.01), 4组JAK2 mRNA表达水平差异有统计学意义(P< 0.05), 而初治组和复发组以及CR组和NC组间JAKs家族基因表达水平差异无统计学意义(P>0.05);JAK1、JAK2、JAK3和TYK2阳性组和阴性组间CR率差异无统计学意义(P>0.05)。Kaplan-Meier分析显示, JAK1、JAK2、JAK3和TYK2 mRNA阳性表达组3年生存率依次为36.75%、33.12%、22.13%和19.07%, 而阴性表达者依次为46.56%、41.25%、39.55%和37.02%。COX风险回归分析显示,JAK3和TYK2 mRNA阳性表达是影响AML患者预后的独立危险因素(P< 0.05)。结论: JAKs家族基因在AML发生、发展中发挥重要作用, 尤其是JAK3和TYK2 mRNA表达阳性与CR和总体生存率关系密切, 直接影响预后。     

急性髓系白血病M2b型患者AML1与MTG8基因重排融合的研究

作者研究了４１例急性聚系白血病（ＡＭＬ）Ｍ２ｂ患者ＡＭＬ１和ＭＴＧ８基因重排融合情况。利用Ｓｏｕｒｔｅｒｎ印迷杂交技术，发现８０％（２４／３０）患者有ＡＭＬ１基因重排，７８．６％（２２／２８）患者有ＭＴＧ８重百。使用逆转录－多聚酶链反应，在３７例ＡＭＬ１－Ｍ２ｂ患者中均检出ＡＭＬ１／ＭＴＧ８融全基因。     

急性髓系白血病患者NKD1基因的表达及其临床意义

目的: 检测急性髓系白血病(acute myeloid leukemia, AML)患者裸角质膜同源蛋白(NKD1)的表达水平并分析其临床意义。方法: 应用实时定量PCR方法检测125例初诊AML患者和22例对照者骨髓单个核细胞中NKD1的转录水平。根据NKD1表达水平将AML患者分为高、低表达两组,比较两组间临床参数的异同并分析其临床意义。结果： AML患者中NKD1的表达水平较对照组明显降低(U=805, P=0.002)。NKD1高、低表达两组患者的性别、年龄、外周血白细胞计数、外周血血小板计数、骨髓原始细胞比例、FAB/WHO分型以及常见基因突变间的差异无统计学意义(P均>0.05);NKD1高表达组血红蛋白水平明显高于低表达组(U=1 339, P=0.029);NKD1高、低表达两组患者经诱导治疗后完全缓解率间的,差异无统计学意义(P>0.05);全部AML、非M3及染色体核型正常患者中,NKD1低表达组总体生存时间明显短于NKD1高表达组(P均<0.05)。结论： NKD1在AML患者中呈低表达,可作为判断AML患者预后的分子标志物。     

VNN1基因在急性髓系白血病中的表达及临床意义

目的 通过在线数据库挖掘分析VNN1基因在急性髓性白血病(acute myeloid leukemia, AML)中的表达并探讨其临床意义。方法 使用癌症基因图谱(the cancer genome atlas, TCGA)、组织特异性基因表达库(the genotype-tissue expression, GTEx)和高通量基因表达数据集(gene expression omnibus, GEO)等数据库分析VNN1基因在AML患者和正常对照组中的表达水平;通过下载TCGA、GEO数据集中AML患者的数据信息,进行VNN1基因表达水平与临床特征及总体生存期的相关性分析;利用STRING数据库分析VNN1蛋白-蛋白互作网络,并进行GO基因富集和KEGG通路富集分析,通过单样本基因集富集分析(ssGSEA)来评估VNN1与免疫细胞浸润之间的相关性。结果 与健康对照组(0.025±0.053)相比,VNN1在AML中显著高表达(3.306±1.991)(P<0.001),且其表达水平与AML患者细胞遗传学风险、FLT3突变状态、NPM1突变状态存在密切关系(P<0.05);R...     

bcl-2基因在急性髓系白血病细胞中的表达及意义

采用链霉亲和素过氧化酶免疫组织化学方法 (S -P法 )检测 30例初发成人急性髓系白血病(AML)患者的骨髓细胞bcl - 2蛋白表达 .结果 :( 1)AML患者骨髓细胞中bcl - 2蛋白阳性表达率为( 55 12± 2 3 78) % ( 19%～ 93% ) ,显著高于正常对照 (P <0 0 1) . ( 2 )AML按FAB分型各亚型间比较 :bcl- 2蛋白表达在M1,M2 型阳性率较高 ( 60 58± 19 0 5) % ;M3 型则较低 ( 2 1 50± 6 2 2 ) % ;M4 ,M5型最高( 69 64± 14 96) % . ( 3)经标准诱导治疗后 ,完全缓解 (CR)组的bcl- 2蛋白表达显著低于未缓解 (NR)组 (P <0 0 5) .提示 :bcl- 2蛋白在AML细胞中呈高表达 ,并为白血病化疗耐药的预后指标之一 .     

RIL基因甲基化水平在急性髓系白血病中的临床意义

目的 定量检测RIL基因在急性髓系白血病中甲基化水平,观察RIL基因甲基化水平与急性髓系白血病的临床关系.方法 以60例原发急性髓系白血病、11例首次化疗后未完全缓解及16例首次化疗后达完全缓解的骨髓标本为研究对象,应用焦磷酸测序法检测RIL基因启动子区甲基化水平,并以20例缺铁性贫血和巨幼细胞性贫血的骨髓标本作为对照.结果 60例原发急性髓系白血病中有50例标本RIL基因启动区高甲基化,阳性率83.3％;20例对照组中未检测出RIL基因启动区高甲基化,阳性率为0;11例首次化疗后未完全缓解标本中,7例标本RIL基因启动区高甲基化,阳性率63.6％,甲基化平均值(22.8％±8.2％),骨髓白血病细胞比例平均值(23.0±8.9)％,而初诊时11例中10例标本RIL基因启动区高甲基化,阳性率90.9％,甲基化平均值(51.2±18.3)％,骨髓白血病细胞比例平均值(65.8±13.6)％;16例首次化疗后完全缓解标本中未检测出RIL基因启动区高甲基化,阳性率0,甲基化平均值(12.6±2.3)％,骨髓原始细胞比例平均值(1.2±0.9)％,而初诊时16例中13例标本RIL基因启动区高甲基化,阳性率81.2％,甲基化平均值(45.9±23.2)％,骨髓白血病细胞比例平均值(67.7±14.3)％.结论 RIL基因启动子区异常甲基化在急性髓系白血病中普遍存在;RIL基因甲基化水平与急性髓系白血病治疗后缓解程度负相关.     

EB病毒BNLF-1基因在淋巴瘤和急性白血病的表达及临床意义

目的：研究EB病毒BNLF－1基因在淋巴瘤和急性白血病的表达及含量,探讨对该基因表达与淋巴瘤、急性白血病的发病机制与预后的关系。方法：采用Amplisensor荧光定量PCR技术,检测淋巴瘤和急性白血病患者血液或骨髓EB病毒BNLF－1基因片段,同时测定血清中EB病毒VCA－IgA抗体滴度。结果：（1）淋巴瘤BNLF－1基因表达高于急性淋巴细胞白血病（急淋）、急性非淋巴细胞白血病（急非淋）和对照组;急淋高于急非淋和对照组;淋巴瘤VCA－IgA阳性率高于急非淋和对照组;急淋高于对照组;急非淋与对照组无显著差异。（2）淋巴瘤BNLF－1基因含量高于急淋、急非淋;急淋高于急非淋。（3）T、B细胞淋巴瘤BNLF－1基因表达无显著差异。（4）淋巴瘤BNLF－1基因含量越高,生存期越短。结论;BNLF－1基因可能是EBV的致癌基因之一;其阳性率及含量的高低可作为淋巴瘤及急淋和急非淋的鉴别诊断依据之一;BNLF－1基因高表达与淋巴瘤的预后呈负相关关系。     

WT1基因在急性髓细胞白血病患者中的表达及其意义

目的探讨WT1基因在急性髓细胞白血病(AML)患者中的表达及其与临床治疗和预后的关系.方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法,检测59例AML患者WT1基因的表达.结果 AML患者WT1基因的表达阳性率初发者(73.2%)与复发患者(75.0%)无差异,但均高于缓解患者(10.0%).WT1基因表达阳性患者的首次化疗缓解率(45%)低于WT1基因表达阴性患者(78%);首次化疗缓解率WT1基因相对表达量≥1的患者(22.2%)低于表达量＜1的患者(57.1%).结论 WT1基因可能是AML患者的癌基因,与疾病的预后有一定关系,动态监测WTl基因的表达有助于临床判断预后和疗效.     

正常核型急性髓系白血病患者融合基因的检测

目的探讨急性髓系白血病（AML）患者染色体畸变所形成的易位相关融合基因的临床和实验的关系。方法采用多重巢式RT—PCR方法和染色体核型分析技术对60例AML患者的融合基因进行分析。结果18例（30％）正常核型的AML患者分别检测出有PML／RARα、AML1／ETO、TLS／ERG、CBFβ／MYH11和MLL／AF9等5种融合基因的存在。结论多重巢式RT—PCR技术可用于白血病患者初诊时染色体畸变的筛选,可在核型正常的AML患者中检出隐匿的染色体易位,对AML的诊断分型具有重要帮助,进一步指导临床个体化治疗。