S-腺苷蛋氨酸对大鼠肝缺血再灌注损伤后白蛋白和前清蛋白的影响

目的：观察S-腺苷蛋氨酸（思美泰）对SD大鼠肝缺血再灌注损伤后白蛋白和前清蛋白的影响。方法：将72只SD大鼠随机分为3组：假手术组（SHAM组）、缺血再灌注对照组（IR组）、缺血再灌注腺苷蛋氨酸干预组（SAM组）,每组24只。1）SHAM组打开腹腔,游离肝十二指肠韧带,不阻断肝脏血供,20 min后再关腹。2）IR组和SAM组开腹后游离肝十二指肠韧带,用无创微血管夹夹闭肝蒂,持续20min后松开血管夹然后关腹。Sham组、IR组术后均予生理盐水1 mL（/kg.d）腹腔注射,SAM组予思美泰100 mL（/kg.d）腹腔注射。3）3组分别于术后第1、4、7、10天处死6只大鼠,测定血清前清蛋白和白蛋白的水平变化,同时取肝左叶部分组织行电镜观察。结果：IR组与SAM组血清白蛋白术后第1、4、7、10无差别（P〉0.05）;IR组与SAM组之间血清前清蛋白水平比较,术后第1天无差别（P〉0.05）,而术后第4、7、10天SAM组的血清前清蛋白水平高于IR组的水平（P〈0.01）。电镜显示术后第4、7、10天SAM组肝细胞内质网和线粒体数量明显多于明显于IR组。结论：腺苷蛋氨酸治疗能够提高血清前清蛋白水平,减轻肝细胞病理损害。     

S-腺苷蛋氨酸对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用

目的：观察S-腺苷蛋氨酸（思美泰）对SD大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用。方法：将72只SD大鼠随机均分为3组：锻手术组、肝缺血再灌注（IR组）、肝缺血再灌注加S-腺苷蛋氨酸干预组（SAM组）,每组24只。假手术组暴露肝门并游离十二指肠韧带,20min后关腹。IR组和SAM组均以肝脏缺皿20min后再灌注的方式造模。SAM组于术后1h腹腔注射思美泰100mg·kg。·d^-1,假手术组和IR组予以等体积生理盐水。各组分别于术后第1、4、7、10天各处死6只大鼠,测定其血清ALT、AST、总胆红素（TB）含量,同B寸取肝左叶部分组织进行肝脏病理组织学观察。结果：SAM组各个时相点血清ALT、AST、TB水平均明显低于IR组,差异有统计学意义（P〈0．01）,SAM组肝组织病理学损害明显轻于IR组（P〈0．01）。结论：S-腺苷蛋氨酸能够明显刚氐转氨酶、TB,减轻肝病理损伤,保护肝功能。     

S-腺苷蛋氨酸对肝脏缺血再灌注损伤大鼠炎症因子的影响

目的：观察S-腺苷蛋氨酸对SD大鼠肝脏缺血再灌注损伤后HIRI炎症因子的影响。方法：将72只SD大鼠随机分为3组：假手术组（Sham组）、缺血再灌注对照组（IR组）、缺血再灌注腺苷蛋氨酸干预组（SAM组）,每组24只。Sham组打开腹腔,游离肝十二指肠韧带,不阻断肝脏血供,20 min后再关腹。IR组和SAM组开腹后游离肝十二指肠韧带,用无创微血管夹夹闭肝蒂,持续20 min后松开血管夹然后关腹。Sham组、IR组术后均予生理盐水1 mL（/kg.d）腹腔注射,SAM组予S-腺苷蛋氨酸100 mg（/kg.d）腹腔注射。3组分别于术后第1、4、7、10天各处死6只大鼠,测定血清和肝组织肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）含量变化,并取肝左叶部分组织行病理组织学观察。结果：SAM组各个时间点血清和肝组织的TNF-α、IL-1β、IL-6水平均明显低于IR组,差别有统计学意义（P〈0.001）;SAM组炎症细胞浸润明显少于IR组。结论：S-腺苷蛋氨酸能够降低HIRI时血清与组织炎症因子水平,减少肝组织炎症细胞浸润,保护肝脏组织。     

S-腺苷蛋氨酸对大鼠缺血再灌注肝脏能量代谢的影响

目的研究S-腺苷蛋氨酸(SAM)预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤线粒体功能的影响。方法54只大鼠按随机数字表法随机均分为对照组、缺血再灌注组(I/R组)和SAM组,SAM组大鼠肝脏在缺血前2h行腹腔注射SAM预处理。3组动物在阻断肝门30min后(对照组仅做分离,不阻断肝门)复流,并于再灌注后0、1和6h抽取下腔静脉血检测ALT及AST,切取肝组织检测线粒体SOD、MDA、ATP及EC,并制备病理切片在电镜下观察线粒体的超微结构。结果再灌注后0、1及6h,I/R组ALT、AST和MDA明显高于对照组(P<0.01),SOD(除0h外)、ATP及EC明显低于对照组(P<0.01);SAM组ALT、AST及MDA(除0h外)明显低于I/R组(P<0.01),SOD(除0h外)、ATP及EC明显高于I/R组(P<0.05,P<0.01)。超微结构观察,I/R组线粒体较对照组有明显的损伤,线粒体数量减少,肿胀明显,嵴模糊不清,基质密度低;而SAM组与I/R组相比损伤程度明显减轻。结论SAM能抑制线粒体脂质过氧化反应,提高ATP的产生,最终提高线粒体的能量代谢水平,有效地减轻肝脏的缺血再灌注损伤。     

S-腺苷蛋氨酸对大鼠缺血再灌注肝脏线粒体的保护作用

肝移植手术过程中移植肝不可避免地要经历缺血再灌注损伤阶段。S腺苷蛋氨酸（SAM）为甲基供体和生理性巯基化合物的前体，参与体内许多重要的氧化还原反应。我们利用大鼠肝脏缺血再灌注模型，以线粒体为研究对象。旨在探索SAM预处理对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。     

肝移植术中应用S-腺苷-L-蛋氨酸对供肝热缺血损伤的影响

目的探讨术中S-腺苷-L-蛋氨酸（SAMe）加入UW液和血浆冲洗液对热缺血损伤供肝及其恢复的影响。方法建立10min热缺血大鼠肝移植模型，分为A组：UW液灌注＋乳酸钠林格氏液冲洗、B组：UW液灌注＋血浆冲洗、C组：SAMe加入UW液灌注＋血浆冲洗和D组：UW液灌注＋SAMe加入血浆冲洗4组，观察肝组织组织病理学变化和电子显微镜下超微结构变化，并检测血清AST和透明质酸。结果C组和D组术后24h血清AST均低于B组（P〈0．05）。A组术后3h和24h血清HA高于B组（P〈0．05），B组复流后3h及24h血清HA均高于C组和D组（P〈0．05）。组织病理学表现B组复流后3h和24h肝细胞损伤和微循环紊乱较C组和D组明显；超微结构表现，A组复流后3h线粒体肿胀，肝窦内皮细胞肿胀，细胞核不规则，可见内皮细胞凋亡，大部分区域肝窦状隙明显狭窄，内皮层结构模糊，红细胞淤积，受压变形，白细胞附壁，可见内皮层完整性破坏；复流后24h，可见线粒体嵴断裂，核融解。B组内皮细胞损伤较A组轻，C组和D组超微结构表现微循环紊乱和肝细胞损伤表现较B组轻。结论供肝切取术中UW液中加入SAMe灌注保存，血浆冲洗液中加入SAMe可改善热缺血供肝微循环，减轻缺血再灌注损伤，并减轻肝细胞热缺血损伤，有利于10min热缺血供肝功能的恢复。     

瑞芬太尼对肝硬化大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨瑞芬太尼对肝硬化大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响.方法 成年健康雄性SD大鼠30只,体重260～300 g,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=10):肝硬化组(C组)、肝硬化+肝缺血再灌注组(I/R组)和瑞芬太尼组(R组).C组、I/R组和R组采用四因素综合法制备大鼠肝硬化模型,I/R组和R组在肝硬化模型制备成功后1周制备大鼠70％肝脏缺血再灌注模型,R组于缺血前10 min开始静脉输注瑞芬太尼1μg·kg-1·min-至再灌注结束.于再灌注4h时取静脉血样和肝组织,测定血清ALT和AST活性、肝细胞Bcl-2和Bax表达及肝细胞凋亡情况,计算细胞凋亡指数,光镜下观察肝组织病理学结果.结果 与C组比较,I/R组血清ALT和AST的活性升高,肝细胞Bcl-2表达下调,Bax表达上调,细胞凋亡指数升高(P＜0.05);与I/R组比较,R组血清ALT和AST的活性降低,肝细胞Bcl-2表达上调,Bax表达下调,细胞凋亡指数降低(P＜0.05).R组肝组织病理学损伤轻于I/R组.结论 瑞芬太尼可减轻肝硬化大鼠肝脏缺血再灌注损伤,其机制与平衡肝细胞Bcl-2与Bax表达而抑制肝细胞凋亡有关.     

再灌注初期控制性降压对肝叶切除术病人肝缺血再灌注损伤的影响

目的 评价再灌注初期控制性降压对肝叶切除术病人肝缺血再灌注损伤的影响.方法 择期行肝叶切除术病人40例,性别不限,年龄30～60岁,体重40～70kg,ASA分级Ⅱ或Ⅲ级,将病人按分层随机方法分为2组(n=20),对照组(C组)开放肝门后10 min期间维持MAP 75～100mm Hg,控制性降压组(H组)于开放肝门前2 min开始静脉输注硝酸甘油3～6μg·kg-1·min-1实施控制性降压,再灌注10 min期间维持MAP 60～70 mm Hg.分别于缺血前(基础状态)、缺血15 min和再灌注25min时采集静脉血样,测定血浆内皮素(ET)、一氧化氮(NO)、TNF-α和IL-1的浓度.结果 与基础值比较,两组缺血15 min和再灌注25min时血浆ET、TNF-α和IL-1的浓度升高,血浆N0浓度降低(P＜0.05);与C组比较,H组再灌注25min时血浆ET、TNF-α和IL-1的浓度降低,血浆NO浓度升高(P＜0.05).结论 再灌注初期控制性降压10 min可减轻肝叶切除术病人肝缺血再灌注损伤,其机制与调节肝窦内皮细胞ET和NO的平衡及抑制炎性反应有关.

Abstract：

Objective To evaluate the effect of controlled hypotension at the beginning of reperfusion on ischemia-reperfusion (I/R) injury of the liver in patients undergoing hepatectomy. Methods Forty ASA Ⅱ or Ⅲ patients aged 30-60 yr weighing 40-70 kg undergoing elective partial hepatectomy for liver cancer were randomly divided into 2 groups ( n = 20 each): group C normal BP and group H controlled hypotension. Hepatic portal was occluded during operation. In group C normal BP was maintained during reperfusion while in group H controlled hypotension (MAP was maintained at 60-70 mm Hg) was performed for 10 min since the beginning of reperfusion.Venous blood samples were taken before hepatic ischemia (T0 ,baseline) and at 15 min of ischemia (T1) and 25 min of reperfnsion (T2 ) for determination of plasma endothelin (ET), nitric oxide(NO), TNF-α and IL-1 concentrations. Results I/R of the liver led to significant increase in plasma ET, TNF-α and IL-1 concentrations and decrease in plasma NO concentration at T1,2 as compared with the baseline values at T0 in both groups. Plasma ET,TNF-α and IL- 1 concentrations were significantly lower while plasma NO concentration was significantly higher at T2 in group H than in group C. Conclusion Ten minutes controlled hypotension in the initial stage of reperfusion can attenuate I/R-induced injury to the liver in patients undergoing hepatectomy by balancing ET with NO and inhibiting inflammation response.     

亚甲蓝对兔肝缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨亚甲蓝对兔肝缺血再灌注损伤的影响.方法 健康成年新西兰大白兔24只,雌雄不拘,体重2.0～2.3 kg,随机分为3组(n=8):假手术组(S组)、肝缺血再灌注组(I/R组)和亚甲蓝组(MB组).I/R组及MB组采用夹闭肝左外叶、中叶、右中叶及方形叶肝动脉分支40min再灌注60 min的方法制备肝缺血再灌注模型,S组仅游离相应血管.MB组于再灌注前20 min经耳缘静脉注射亚甲蓝5 mg/kg(用生理盐水稀释至5 ml),S组及I/R组给予等容量生理盐水.于缺血前即刻(T1)、缺血20 min(T2)、加min(T3)、再灌注1 min(T4)、再灌注5 min(T5)、30 min(T6)、60 min(T7)时记录MAP和HR.于T1,5-7时取股动脉血样1 ml,测定血清TNF-α及IL-6的浓度.分别于T1,6,7时取股动脉血样1.5 ml,测定血浆ALT及AST的活性.于T7时测定肝左叶组织SOD活性及MDA含量,光镜下观察肝组织病理学结果.结果 与S组比较,I/R组T4-7,时MAP降低,T7时HR降低,肝组织SOD活性降低,MDA含量升高,I/R组及MB组T3-5时血清TNF-α和IL-6浓度升高,T6,7时血浆ALT和AST活性升高(P<0.05或0.01);与I/R组比较,MB组T4-7时MAP升高,肝组织SOD活性升高,MDA含量降低,T3-5时血清TNF-α和IL-6浓度降低,T6,7时血浆ALT和AST活性降低(P<0.05或0.01).MB组肝组织损伤较I/R组减轻.结论 亚甲蓝可维持血液动力学稳定,减轻兔肝缺血再灌注损伤.     

热休克蛋白与肝缺血再灌注损伤

目的 了解热休克蛋白在肝缺血再灌注损伤过程中所处的位置,作用及其要关机理。方法 通过复习文献对热休克蛋白在肝再灌注中的作用加以综述。结果 热休克蛋白是细胞受应激原刺激后诱导产笺有利于增强机体抵御恶劣环境的一组应激蛋白;肝缺血再灌注可忸生成热休克蛋白,并使之随肝损伤的加重而增多,对肝缺血再灌注所致的损伤起到保护作用。结论 热休克蛋白具有保护缺血肝脏,减轻再灌注损害的作用,还可以作为监测指标,更好地估     

缺血预处理对大鼠缺血再灌注肝组织NF-κB表达、炎症及氧化应激反应的影响

目的：探讨缺血预处理（IP）减轻大鼠肝缺血再灌注（I/R）损伤的作用及机制。
　　方法：将15只雄性SD大鼠随机均分为假手术组、I/R组、IP+I/R组,采用Pringle法制作肝I/R模型（缺血30min+再灌注3h）,IP采用I/R前肝缺血10min+再灌注10min诱导。各组大鼠于再灌注3h后处死取材,行肝组织病理学、血请谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）检测,同时检测肝组织NF-κB蛋白的表达,以及炎性细胞因子IL-1β、TNF-α与氧化应激指标丙二醛（MDA）、髓过氧化物酶（MPO）水平。
　　结果：除假手术组外,I/R组与IP+I/R组大鼠肝组织均出现肝损伤是病理学改变,IP+I/R组的损伤程度明显轻于I/R组;与假手术组比较,I/R组与IP+I/R组大鼠血清AST、ALT水平明显升高,肝组织NF-κB蛋白表达、IL-1β与TNF-α水平、MDA与MPO浓度均明显升高（均P<0.05）,但IP+I/R组的各指标的升高幅度均明显小于I/R组（均P<0.05）。
　　结论：IP减轻大鼠肝I/R损伤的作用与抑制NF-κB活性,从而减轻炎症与氧化应激反应有关。     

三七总皂甙对大鼠移植肝缺血再灌注损伤的保护作用

摘要：目的:探讨三七总皂甙预处理对大鼠移植肝缺血再灌注损伤的保护作用。方法:建立大鼠原位肝移植模型，然后分为三七预处理组（P组）、对照组（N组）和假手术组（S组）3组，取血检查ALT，AST；用免疫组化法检测caspase-3和TNF-α的表达，TUNEL法检测肝细胞凋亡，行肝组织病理检查。结果:鼠肝移植模型N组的血ALT，AST数值、肝细胞中caspase-3和TNF-α的表达及肝细胞的凋亡均明显高于P组，差异均有显著意义（P<0.05）。结论:肝细胞凋亡加重移植肝缺血再灌注损伤，三七总皂甙预处理对大鼠肝移植缺血再灌注损伤有保护作用。     

内质网应激分子伴侣GRP78在大鼠缺血再灌注损伤肝脏中的表达

目的:观察内质网应激相关分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在大鼠缺血再灌注损伤肝脏组织中的表达水平.方法:将24只健康雄性SD大鼠随机均分为假手术组,单纯肝缺血组(肝缺血30 min+再灌注0h),再灌注6h组(肝缺血30 min+再灌注6h)和再灌注12h组(肝缺血30 min+再灌注12h).分别检测各组血清丙氨酸转氨酶(ALT)和门冬氨酸转氨酶(AST)水平;肝组织病理学、凋亡情况及GRP78 mRNA表达水平.结果:与对照组比较,各实验组大鼠肝缺血后出现明显的肝组织损伤,且随着再灌注时间的延长损伤加重,表现为血清ALT和AST水平升高,明显的肝组织病理学改变,肝细胞凋亡率增加,各组间计量指标的差异均有统计学意义(均P＜0.05).大鼠肝组织GRP78 mRNA变化趋势与上述指标一致,缺血后表达明显上调,且随着再灌注时间延长而逐渐升高,各组间差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论:缺血再灌注损伤肝脏组织中GRP78表达上调,但其具体作用还有待于探明.     

异甘草酸镁联合维拉帕米对大鼠肝切除肝缺血再灌注损伤的作用研究

目的 研究异甘草酸镁(magnesium isoglycyrrhizinate,MgIG)联合维拉帕米(verapam-il,异搏定)对肝切除肝缺血再灌注损伤的作用.方法 雄性SD大鼠随机分为假手术组(A组)、50％肝切除肝缺血再灌注损伤组(B组)、50％肝切除肝缺血再灌注损伤+ MgIG治疗组(C组)、50％肝切除肝缺血再灌注损伤+ verapamil治疗组(D组)、50％肝切除肝缺血再灌注损伤+MgIG联合verapamil治疗组(E组).观察各组大鼠肝脏功能、形态学、超氧化物歧化酶(SOD)活性及FasL的表达情况.结果 与B组比较,E组病理改变明显减轻,各时间点血清丙氨酸转氨酶(ALT)水平显著下调(P＜0.05),肝组织SOD活性明显增强(P＜0.05),FasL蛋白表达明显下调(P＜0.05).结论 异甘草酸镁联合维拉帕米能有效减轻肝切除肝缺血再灌注损伤.其对肝细胞的保护作用可能是通过抑制Fas/FasL系统介导的凋亡反应,减轻肝脏过氧化损伤而实现.     

Thymoquinone protects end organs from abdominal aorta ischemia/reperfusion injury in a rat model

Introduction

Previous studies have demonstrated that thymoquinone has protective effects against ischemia reperfusion injury to various organs like lungs, kidneys and liver in different experimental models.

Objective

We aimed to determine whether thymoquinone has favorable effects on lung, renal, heart tissues and oxidative stress in abdominal aorta ischemia-reperfusion injury.

Methods

Thirty rats were divided into three groups as sham (n=10), control (n=10) and thymoquinone (TQ) treatment group (n=10). Control and TQ-treatment groups underwent abdominal aorta ischemia for 45 minutes followed by a 120-min period of reperfusion. In the TQ-treatment group, thymoquinone was given 5 minutes. before reperfusion at a dose of 20 mg/kg via an intraperitoneal route. Total antioxidant capacity, total oxidative status (TOS), and oxidative stress index (OSI) in blood serum were measured and lung, kidney, and heart tissue histopathology were evaluated with light microscopy.

Results

Total oxidative status and oxidative stress index activity in blood samples were statistically higher in the control group compared to the sham and TQ-treatment groups (P<0.001 for TOS and OSI). Control group injury scores were statistically higher compared to sham and TQ-treatment groups (P<0.001 for all comparisons).

Conclusion

Thymoquinone administered intraperitoneally was effective in reducing oxidative stress and histopathologic injury in an acute abdominal aorta ischemia-reperfusion rat model.     

治疗性高碳酸血症对大鼠移植肝脏缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨治疗性高碳酸血症对大鼠移植肝脏缺血再灌注损伤的影响.方法 清洁级雄性Wistar大鼠32只,6周龄,体重220～280 g,采用完全随机设计的方法两两配对实施肝脏原位移植16只.采用随机数字表法,将受体鼠随机分为2组(n=8):肝移植组(LT组)和治疗性高碳酸血症组(TH组).LT组再灌注即刻吸入50％ O2-50％N2混合气体2 h;TH组再灌注即刻吸入O2-N2-CO2混合气体lh,调节气体浓度和呼吸频率,维持FiO2 50％、PaCO2 80～ 100 mm Hg,而后继续吸入50％O2-50％N2混合气体lh.再灌注期间记录MAP、PaO2和PaCO2.再灌注2h时,取动脉血样,测定血清ALT、AST、TNF-α、IL-1和IL-6的水平;取肝组织,测定NF-κB活性,计算凋亡指数,观察肝组织病理学结果.结果 与LT组比较,TH组血清ALT、AST、TNF-α、IL-1和IL-6水平、肝组织NF-κB活性和凋亡指数降低,MAP、PaO2和PaCO2升高(P＜0.05).TH组肝组织病理学损伤较LT组减轻.结论 治疗性高碳酸血症可减轻大鼠移植肝脏缺血再灌注损伤,机制与抑制炎性反应和细胞凋亡有关.